NO如何翻越仿制藥研發(fā)的另一座大山有關(guān)物質(zhì)部分

本人工作經(jīng)歷與行業(yè)成長史的融合★

1990年~1998年

本科（5年）+碩士研究生

★

1998年~至今在上海市藥品檢驗(yàn)所工作至今

經(jīng)歷了“1998年~2002年強(qiáng)仿期”和“2002~2006仿制藥瘋狂期”

十分了解行業(yè)現(xiàn)狀……

在2003年赴日本進(jìn)修前，對國內(nèi)仿制藥研發(fā)中出現(xiàn)的種種亂象疑惑不已，對其中的核心技術(shù)要素找不到科學(xué)合理的答案。

帶著太多的疑問踏上了征途……★

2003年8月~2004年2月承蒙單位領(lǐng)導(dǎo)厚愛、公派赴日本國立醫(yī)藥品食品衛(wèi)生研究所藥品部（即國家藥品檢驗(yàn)所）進(jìn)修，主要收獲如下：

(1)通過翻閱該國仿制藥與創(chuàng)新藥申報(bào)資料，并在老師指導(dǎo)下，掌握了技術(shù)審評要點(diǎn)與審評“門檻”，知曉了我國仿制藥審評中存在的一些技術(shù)缺失……

（引申至技術(shù)門檻與批準(zhǔn)數(shù)量的關(guān)系）

★

如口服固體制劑仿制藥研發(fā)要求★

★

連續(xù)三批、每批10萬片。

★

批批樣品多條溶出曲線均與原研品一致

（再輔以有關(guān)物質(zhì)的“錦上添花”）

★

今后市場抽查只抽“多條溶出曲線”(2)掌握了藥物各劑型關(guān)鍵評價(jià)指標(biāo)與檢測方法，即藥品質(zhì)量不僅可以生產(chǎn)出來，也可以檢驗(yàn)出來。關(guān)鍵就看設(shè)定的檢測法/檢測指標(biāo)能否“一針見血、切中要害”，這也是我們藥檢人員工作中應(yīng)不懈追求的挑戰(zhàn)！

從而指導(dǎo)我們?nèi)绾胃茖W(xué)有效地開展工作

（口服固體制劑關(guān)鍵性評價(jià)指標(biāo)——多條溶出曲線）

★

片劑/硬膠囊

：多條溶出曲線/釋放曲線、崩解時限（如需要）、有關(guān)物質(zhì)、含量均勻度、硬度/脆碎度。

★

注射用粉末：

(1)表面層次指標(biāo)：有關(guān)物質(zhì)、溶液顏色、溶液澄清度、水分、pH值、無菌、熱原/內(nèi)毒素和不溶性微粒等。

(2)深層次指標(biāo)：粒度分布、粒子形狀、晶型、晶格能、比表面能、分散性、流變學(xué)特性等→復(fù)溶/溶解時間列舉各劑型關(guān)鍵性評價(jià)指標(biāo)(3)其時恰逢該國《藥品品質(zhì)再評價(jià)工程》如火如荼開展，師從該項(xiàng)工程技術(shù)負(fù)責(zé)人，全面系統(tǒng)地學(xué)習(xí)了溶出度技術(shù)理念與應(yīng)用。

該國彼時情況與我國現(xiàn)今極為相似，日本采用“體外多條溶出曲線對已上市口服固體制劑進(jìn)行了與原研品一致性的再評價(jià)工作”。

（該國注射劑仿制藥很少，無必要進(jìn)行）。回國后所做的主要工作：一、撰寫了多篇藥品質(zhì)量評價(jià)文章（主要為溶出度

文章），在國內(nèi)率先提出“采用體外多條溶出

曲線進(jìn)行口服固體制劑研發(fā)與品質(zhì)評價(jià)”的

理念和觀點(diǎn)。

二、2009年伊始，在國內(nèi)知名藥學(xué)網(wǎng)站——丁香園

開辦了“溶出度研究”專欄；其上文章迄今為止

已成為國內(nèi)做口服固體制劑仿制藥研發(fā)的《必

讀手冊》。三、2009年5月起，擔(dān)任國家食品藥品監(jiān)督管理局

市場監(jiān)督辦公室顧問，在“全國評價(jià)性抽驗(yàn)

工作”中全面引入了體外多條溶出曲線這一檢

測手段，收到顯著效果。

四、2010年，為國家藥品審評中心翻譯了《日本

橙皮書——

近700個品種的溶出曲線數(shù)據(jù)庫》。

五、2012年6月起，作為專家組成員參與到國家仿

制藥一致性評價(jià)工作中。負(fù)責(zé)撰寫《如何測得

原研品多條特征溶出曲線指導(dǎo)原則》和《如何比

較仿制制劑與原研制劑體外溶出曲線指導(dǎo)原則》

以及各品種具體測定法。本人體會●

工作中一定要注重思考，帶著問題去學(xué)習(xí)、有的放矢地去攻讀，多查文獻(xiàn)、多領(lǐng)會，日積月累、潛移默化之中就會水到渠成、瓜熟蒂落！

●

思維要開放、活躍，不要固步自封、按部就班，因循守舊。

●

研發(fā)人員的思路與方向極為重要。大量的交流令我深感：由于方向性錯誤、固有概念性錯誤、固有思維的局限，導(dǎo)致許多人力、物力、財(cái)力與時間的浪費(fèi)！★

法國人樂了，因?yàn)橹袊说椒▏糜?，基本不看名勝?/p>

跡，一味購買奢侈品，讓法國人賺得盆滿缽滿；★英國人樂了，因中國藥品研發(fā)人員爭前恐后去該國藥典

會購買雜質(zhì)對照品，雖價(jià)格遠(yuǎn)高黃金，但仍樂此不疲；★美國人也樂了，因?yàn)橹袊幤费邪l(fā)人員為研究雜質(zhì)，花

費(fèi)幾十萬、甚至數(shù)百萬去購買一臺美國造分析儀器，讓

他們移花接木地發(fā)大財(cái)~★而國人仍在苦悶中：為什么拿出愚公移山的精神與雜質(zhì)

死磕，結(jié)果研制出來的部分仿制藥對于部分患者的臨床

療效還是與原研藥有差距，無法獲得醫(yī)生與患者認(rèn)可？有這樣一個段子——從宏觀講述雜質(zhì)對于臨床的意義●口服固體制劑僅是“錦上添花”：若主成分尚未吸收，遑論那0.5%雜質(zhì)；解決主要矛盾后再來研究雜質(zhì)。故“雜質(zhì)不是高科技，生物利用度才是高科技”。從宏觀講述雜質(zhì)對于臨床的意義●注射劑不良反應(yīng)與雜質(zhì)基本無關(guān)（有點(diǎn)兒“顛覆”，呵呵~~，詳細(xì)講述……）世界衛(wèi)生組織N年前就已指出“能吃藥不打針，能打針不輸液”的用藥原則，蓋因“是藥三分毒”，藥物（系指主成分）是把“雙刃劍”，即有七分優(yōu)點(diǎn)、三分缺點(diǎn)，……2012年本人看到媒體報(bào)道：

挪威人?，敗じ窭锷凇吨袊請?bào)》撰文，

講述自己在中國的經(jīng)歷：我生病了，被人帶到醫(yī)院以便打點(diǎn)滴。打點(diǎn)滴？在挪威，只有快要死去的病人才打點(diǎn)滴；而在中國，得個感冒都要打點(diǎn)滴，還不止1瓶液體，而是5瓶以上。MyGod!部分媒體報(bào)道（詳見所附資料……）1、過度醫(yī)療探因：患者熱衷輸液醫(yī)院搞創(chuàng)收（來自2014年01月09日17:29央視新聞）2、靜脈點(diǎn)滴大國之殤：高利潤與高風(fēng)險(xiǎn)（來自21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道2013-09-06）

對看起來與藥物有關(guān)的較常見不良事件，以下因素與這些事件關(guān)系較為密切：★劑量★劑量（mg/kg或mg/m2）★

給藥方案★療程；★

總劑量★

其他基礎(chǔ)特征，如腎功能狀態(tài)★人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征，例如，年齡，性別，種族；★伴隨用藥★

藥物濃度（如提供了數(shù)據(jù)）（基本與主成分和個人體質(zhì)差異相關(guān)，與雜質(zhì)無關(guān)!）導(dǎo)致藥物不良反應(yīng)發(fā)生的因素——摘自ICH通用技術(shù)文件M4E(R1)：療效（模塊2-臨床回顧和臨床概述；模塊5-臨床研究報(bào)告）★開展合理用藥主題宣傳教育活動十分重要、十分緊迫。★藥品是一把雙刃劍，藥物用得合理，可以防治疾??；反之，不但不能治病，還會影響身體健康。輕則可能增加病人痛苦、提高醫(yī)療費(fèi)用，重則可能使病人致殘甚至死亡。★同時，公布了《用藥十大原則》，其中第二條為：用藥要遵循能不用就不用，能少用就不多用；能口服不肌注，能肌注不輸液的原則。2013年12月10日，國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會在舉行的例行新聞發(fā)布會上說到：(1)想必還是相當(dāng)一部分同仁未能洞察本行業(yè)作為高科技行業(yè)的核心之處，以為雜質(zhì)是高科技！以為“強(qiáng)破壞試驗(yàn)”是高科技！本人臆斷產(chǎn)生以上現(xiàn)象的原因——(2)未能從制藥產(chǎn)業(yè)鏈全局和高度理解專業(yè)問題：藥化→藥分→工業(yè)藥劑學(xué)→藥分→生物藥劑學(xué)→藥理/藥物代謝→對廣大患者的臨床有效性（這才是重點(diǎn)、也是終點(diǎn)）。僅片面強(qiáng)調(diào)其中某一環(huán)節(jié)的技術(shù)要素，如此就會造成以偏概全的專業(yè)思維，最終“用大炮打蚊子”，并將“技術(shù)做成了藝術(shù)”！本人臆斷產(chǎn)生以上現(xiàn)象的原因——(3)因2006~2007年間注射劑藥害事件，不知從何時開始被認(rèn)為是雜質(zhì)所為，從此拉開了對雜質(zhì)深入研究的大幕！本人臆斷產(chǎn)生以上現(xiàn)象的原因——★已基本呈現(xiàn)“劍走偏鋒、誤入歧途”之狀態(tài)，甚至“上天入地、走火入魔”的窘境！★具體試驗(yàn)時，已陷“刻舟求劍、緣木求魚”的學(xué)術(shù)思維窠臼，落入極度疑神疑鬼、謹(jǐn)小慎微的研發(fā)思維桎梏。

想為行業(yè)發(fā)展正本清源、想為眾人工作撥云見日

（便于2013年12月15日在丁香園-分析技術(shù)版開辦了“雜質(zhì)研究專欄”）

遺憾的是：目前國內(nèi)雜質(zhì)研究現(xiàn)狀我們已經(jīng)走得太遠(yuǎn)，以至于忘記了為什么而出發(fā)。

——黎巴嫩著名詩人紀(jì)伯倫（1883～1931）工作感悟令人欣慰的是——2013年5月，國家藥典委員會網(wǎng)站發(fā)布了“國家藥品標(biāo)準(zhǔn)工作研討會議紀(jì)要”。其中明確提出：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵在于臨床，標(biāo)準(zhǔn)的提高不是一味追求某個單一雜質(zhì)控制；過去我們忽略了臨床藥學(xué)評價(jià)，今后要加強(qiáng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高與臨床用藥的有機(jī)結(jié)合。標(biāo)準(zhǔn)的制/修訂還應(yīng)考慮社會和經(jīng)濟(jì)因素，應(yīng)科學(xué)合理、不宜過度追求高指標(biāo)，科學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)不一定都是高精尖的，還應(yīng)當(dāng)從藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)角度予以客觀考慮……。這是官方首次旗幟鮮明地闡述出雜質(zhì)研究的適度性，不禁令人拍手叫好，因許多有識之士早已翹首以盼、望眼欲穿。更令人欣慰的現(xiàn)象（詳見所附資料……）1、2014年3月，中國醫(yī)科大學(xué)航空總醫(yī)院在北京各大醫(yī)院中率先取消了普通門診輸液，劍指過度輸液現(xiàn)象。2、2014年8月，安徽省衛(wèi)計(jì)委下發(fā)了《關(guān)于加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)靜脈輸液管理的通知》文件。指出：充分認(rèn)識加強(qiáng)靜脈輸液管理的重要意義、嚴(yán)格掌握靜脈輸液使用指征、盡可能減少不必要靜脈輸液、定期開展靜脈輸液處方點(diǎn)評、進(jìn)一步加強(qiáng)靜脈輸液管理監(jiān)督檢查、廣泛開展科學(xué)規(guī)范進(jìn)行靜脈輸液的宣傳。3、為大醫(yī)院取消門診輸液叫好?。ā吨袊t(yī)藥報(bào)》2014年7月25日報(bào)道）發(fā)達(dá)國家向非發(fā)達(dá)國家“發(fā)射的三枚煙霧彈”●一枚是有關(guān)物質(zhì)：目的為引入歧途。●另一枚是溶出度：往往韜光養(yǎng)晦、瞞天過海。因?yàn)檫@是最為核心的評價(jià)法：不會評價(jià)，就不知做出來的“饅頭是死面疙瘩還是五星級饅頭”；只有會科學(xué)客觀地評價(jià)，才能做出與原研制劑一致的高品質(zhì)仿制藥來，即通常所講的“標(biāo)準(zhǔn)就是生產(chǎn)力”！●潛在雜質(zhì)/基因毒性雜質(zhì)：我們研究時一定要把握好“度”，不要陷入疑神疑鬼、無窮無盡境地中！本行業(yè)的“四高性”（高利潤、高附加值、高科技、高端制造業(yè)）決定了：★全世界都公開的就一定不是高科技，看不著的才是高科技?！锼?，很多品種的各國藥典、進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等收載的檢測法要么是“煙霧彈（有關(guān)物質(zhì)）”、要么就是“韜光養(yǎng)晦、瞞天過海（溶出度試驗(yàn)）”（詳細(xì)講述，并列舉品種案例）★因此，我們決不能囿于其中便沾沾自喜、夜郎自大，一定要獲取數(shù)批原研制劑樣品，隨后深度剖析與解讀其關(guān)鍵指標(biāo)，如此才能科學(xué)合理地指導(dǎo)自我仿制藥的研發(fā)與品質(zhì)評價(jià)。(1)針對共有降解雜質(zhì)：仿制制劑降解速度不大于原研制劑；由此，效期才能不短于原研制劑。(2)針對共有的不增加雜質(zhì)：★當(dāng)原研制劑中的該雜質(zhì)含量大于制劑鑒定限時，仿制制劑含量不大于原研制劑即可；★當(dāng)原研制劑中的該雜質(zhì)含量小于制劑鑒定限時，仿制制劑可大于原研制劑，但必須仍小于制劑鑒定限。(3)針對仿制品中特有雜質(zhì)：不過制劑鑒定限即可。對仿制藥的雜質(zhì)要求——要做到宏觀與微觀結(jié)合，理論與實(shí)踐齊飛，才能使研發(fā)工作事半功倍、一針見血。即：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制訂有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)的原則★

闡述原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中必須擬定有關(guān)物質(zhì)的原理

★

闡述制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中可不擬定有關(guān)物質(zhì)的情形

當(dāng)原料藥→0天制劑→至效期，兩個環(huán)節(jié)有關(guān)物質(zhì)皆未變化，則可不擬定。因制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅關(guān)注降解雜質(zhì)。詳細(xì)講述應(yīng)用至復(fù)方制劑的研究與標(biāo)準(zhǔn)制訂。

▲但注射劑必須擬定。（因前幾年的“藥害事件”）。雜質(zhì)譜研究思路●采用逆向工程法：

1、原研制劑雜質(zhì)譜（這是起點(diǎn)）→

2、仿制原料藥雜質(zhì)譜→

3、仿制制劑雜質(zhì)譜。

●切記與原研原料藥雜質(zhì)譜無關(guān)！

所以，絕無必要研究國外藥典原料藥項(xiàng)下的所有雜質(zhì)。六類仿制藥的研發(fā)——

“解讀”既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)……(1)查詢所有制劑與原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。（著重看制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅是參考）

(2)進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)現(xiàn)今皆為代號；不要想獲得雜質(zhì)對照品、且無需獲得。

(3)根據(jù)剖析結(jié)果購買雜質(zhì)對照品。絕非將國外藥典中的所有雜質(zhì)對照品皆購買來，此乃“勞民傷財(cái)”之舉!!!

(4)也絕非將自我仿制品中的雜質(zhì)都做到0.1%以下，此乃“自斷后路”!色譜條件的建立(1)用既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中羅列的所有已知雜質(zhì)來驗(yàn)證既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)色譜條件的系統(tǒng)適用性（毫無必要！可采用）

★

直接沿用既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)色譜條件★

對既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的色譜條件進(jìn)行微調(diào)，通常是減少流動相中有機(jī)相比例或延長梯度洗脫時間，使所有色譜峰保留時間延長。（微調(diào)辦法詳見后）★

僅采用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中與主成分最難分離的那1~2個雜質(zhì)驗(yàn)證分離度，雜質(zhì)峰間無需強(qiáng)求。因?yàn)椤ㄒ陨先ㄗ们檫x用其一）★色譜條件微調(diào)辦法：

(1)盡可能使用25cm長色譜柱。

(2)適當(dāng)減少有機(jī)相比例。

(3)主成分出峰時間至少15min以后（流速1.0ml/min）(4)梯度洗脫可適當(dāng)延長時間或增大比例。

隨后，用以上建立的色譜條件用于驗(yàn)證仿制原料藥中目標(biāo)雜質(zhì)的分離。（主要是仿制原料藥的起始物和各中間體、精制前的粗品、或是針對性雜質(zhì)的分離效能）研發(fā)時勿苛求完美！●請不要對潛在雜質(zhì)疑神疑鬼、患得患失。從規(guī)?；a(chǎn)的三批樣品測定結(jié)果入手分析雜質(zhì)來源即可。若“正向分析——研究潛在雜質(zhì)”，就會陷入永無止境的境地中?！襁€有我們應(yīng)充分認(rèn)知：任何檢測法都不是萬能的，即便有“漏檢雜質(zhì)”，這些雜質(zhì)含量也一定在制劑鑒定限以下，不會給臨床帶來任何安全性問題；倘若較大，自會在穩(wěn)定性考核（加速和長期）試驗(yàn)中“主成分含量下降量與總雜質(zhì)增加量間相輔相成性”上體現(xiàn)出來，此時再著手亦不遲，(1)測定原研制劑雜質(zhì)譜（無需測定原研原料藥）第一法：取1批原研制劑，進(jìn)行加速試驗(yàn)6個月，厘清雜質(zhì)分類。第二法：獲取不同時間段的貨架期樣品予以測定，厘清雜質(zhì)分類。（知己知彼、百戰(zhàn)不殆?。?2)測定仿制原料藥雜質(zhì)譜通過加速試驗(yàn)6個月。(3)測定仿制制劑雜質(zhì)譜

通過原料藥制成0天制劑和0天制劑進(jìn)行加速試驗(yàn)6個月?！半s質(zhì)譜”研究對象——(1)無需驗(yàn)證既有質(zhì)量保準(zhǔn)中羅列的所有雜質(zhì)與主成分的系統(tǒng)適用性，因這些標(biāo)準(zhǔn)的耐受性均十分良好。(2)

也無需針對潛在雜質(zhì)，對仿制原料藥開展“無窮無盡”研究。(3)

更無需針對強(qiáng)破壞試驗(yàn)/影響因素試驗(yàn)產(chǎn)生的雜質(zhì)，開展深入研究。(4)

總之，雜質(zhì)研究勿苛求完美。即便有漏檢，也基本均在制劑鑒定限以下，不會給臨床帶來任何安全性問題。(5)

核心：加速試驗(yàn)與長期試驗(yàn)中的主成分含量下降量應(yīng)與總雜質(zhì)增加量相輔相成。若非、說明有漏檢，開展深入研究。小結(jié)：

用既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的色譜條件來驗(yàn)證仿制原料藥中的合成起始物、中間體、降解產(chǎn)物等與主成分的分離度。若分離效果不佳，適當(dāng)減小流動相中有機(jī)相比例，以增強(qiáng)彼此分離效能。原研制劑“雜質(zhì)譜”測定結(jié)果ABCD★雜質(zhì)A不斷增加：0.15%→0.50%（限度0.7%）

★雜質(zhì)B不斷增加：0.20%→0.68%（限度1.0%）

★雜質(zhì)C不增加：始終保持在0.43%→0.45%

★雜質(zhì)D不增加：始終保持在0.06%→0.07%仿制原料藥和仿制制劑“雜質(zhì)譜”測定結(jié)果★雜質(zhì)A不斷增加：0.12%→0.48%（限度0.7%）

★雜質(zhì)B不斷增加：0.18%→0.66%（限度1.0%）

★雜質(zhì)C不增加：始終保持在0.41%→0.43%

★雜質(zhì)D不增加：未檢出?！镫s質(zhì)E不增加：著重講述……。

★雜質(zhì)F增加：著重講述……。

ICH對制劑中雜質(zhì)研究的報(bào)告限要求報(bào)告限就是最小峰面積的設(shè)定：即小于該限度的雜質(zhì)，沒有任何研究價(jià)值，所以無需積分。

這是雜質(zhì)研究的“度-1”！主成分每日攝入量報(bào)告限(%)＞1g0.05%≤1g0.1%

ICH對制劑中雜質(zhì)研究的鑒定限要求解讀：小于該限度值的雜質(zhì)無需鑒定結(jié)構(gòu)，因含量介于報(bào)告限~鑒定限的雜質(zhì)對于臨床而言不會帶來任何安全性問題，故無需再做深入研究。

●這是雜質(zhì)研究的“度-2”

●主成分每日攝入量鑒定限＞2g0.1%或2mg/日（取低者）100mg~2g0.2%或2mg/日（取低者）10mg~100mg0.2%或2mg/日（取低者）1~10mg0.5%或20μg/日（取低者）＜1mg1.0%或5μg/日（取低者）

ICH對制劑中雜質(zhì)研究的限度要求解讀：超過該限度值的雜質(zhì)必須對其進(jìn)行毒理研究，以確定此種給藥途徑時該雜質(zhì)對于臨床的限度值。對于仿制藥研發(fā)，與原研制劑共有的降解雜質(zhì)限度借鑒既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)即可。主成分每日攝入量界定限(%)＞2g0.15%100mg~2g0.2%或3mg/日（取低者）10mg~100mg0.5%或200μg/日（取低者）1~10mg1.0%或50μg/日（取低者）＜1mg1.0%或50μg/日（取低者）

ICH對原料藥中雜質(zhì)研究的限度要求每日主成分最大劑量報(bào)告閾值鑒定閾值界定閾值≤2g/天0.05％0.10％或1.0mg/天（取低者）0.15％或1.0mg/天（取低者）＞2/天0.03％0.05％0.05％引申至：極小規(guī)格制劑→雜質(zhì)絕對值含量已至極微量級；無論何種給藥途徑，這些雜質(zhì)的存在均不會帶來任何安全性問題，故無需研究，包括殘留溶劑、熾灼殘?jiān)纫幌盗须s質(zhì)。（要有“有所為有所不為”的思想意識！）首先檢測：原研制劑雜質(zhì)譜(1)測定原研制劑“雜質(zhì)譜”。核心：

★積分限度0.05%。（詳細(xì)闡述……）

★小數(shù)點(diǎn)后2位即可，切不可多，如0.25%、0.08%

(2)取原研制劑的最新批號，分別進(jìn)行長期試驗(yàn)和加速試驗(yàn)6個月。（3個月時便可初見端倪）

(3)測定技巧：最終一并進(jìn)行（樣品置于冰箱冷藏）。

(4)順便采用DAD檢測器測定一下主成分純度。

(5)切記：僅是借用既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)“液相色譜條件”和“降解雜質(zhì)限度值”。至于雜質(zhì)數(shù)量、種類等僅是參考！對仿制制劑與仿制原料藥的要求★

針對共有的不增加雜質(zhì)（如雜質(zhì)C

）

(1)原研制劑中該雜質(zhì)含量超過制劑鑒定限（如0.2%）仿制品中可存在，含量不超出原研制劑即可；且6個月穩(wěn)定性考核結(jié)果、含量無變化。

(2)原研制劑中該雜質(zhì)含量小于制劑鑒定限（0.2%）

仿制品中可存在，含量也可超過原研制劑，但也必須不超過制劑鑒定限即可。

結(jié)論：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無需單獨(dú)控制，籠統(tǒng)要求即可。對仿制制劑與仿制原料藥的要求★

針對原研制劑中特有的未知雜質(zhì)，含量在0.05%~鑒定限（0.2%）間（如雜質(zhì)D）

仿制品中無，故無需研究。

引申至：國外藥典原料藥項(xiàng)下的眾多雜質(zhì)、進(jìn)口某制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中收載的眾多雜質(zhì)，只要是原研制劑特有的，皆無需研究！對仿制制劑與仿制原料藥的要求★

針對原研制劑中不斷增加的雜質(zhì)（如雜質(zhì)A和B）

(1)借鑒既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)限度值（因?yàn)楣灿薪到怆s質(zhì)）。

(2)通過液質(zhì)聯(lián)用探明結(jié)構(gòu)式，購買來對照品/或自我合成（此時需驗(yàn)證結(jié)構(gòu)式），驗(yàn)證校正因子。

(3)只要仿制制劑未超出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所規(guī)定限度值，即便超出原研制劑量亦可（通過縮短有效期）。但現(xiàn)今仿制品效期不允許短于原研品，故該雜質(zhì)降解速度不能快于原研品，效期也不能短于原研制劑了。對仿制品中報(bào)告限以上的特有雜質(zhì)如何控制★

針對原研制劑中不存在、仿制品中特有的雜質(zhì)

(1)

如雜質(zhì)E，為原料藥合成中間體雜質(zhì)。厘清來源于結(jié)構(gòu)式，最低要求：含量不得過制劑鑒定限（即籠統(tǒng)法測定不過0.20%），且加速試驗(yàn)不增加。強(qiáng)烈建議：不要因雜質(zhì)量大于鑒定限就去進(jìn)行毒理研究、推算限度，證明自身產(chǎn)品雜質(zhì)量小于該限度的“鉆牛角尖”作法！將此類雜質(zhì)做到制劑鑒定限以下是評價(jià)合成人員技術(shù)水平的核心考核指標(biāo)！結(jié)論：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無需單獨(dú)控制，籠統(tǒng)要求即可。(2)如雜質(zhì)F，為仿制制劑中新增降解雜質(zhì)。原料藥中不存在、0個月制劑中也不存在，但加速試驗(yàn)開始后出現(xiàn)。別怕：只要效期內(nèi)含量不過制劑鑒定限(如0.2%)即可。結(jié)論：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無需單獨(dú)控制，籠統(tǒng)要求即可。源自：我國藥審中心2006年12月11日的一篇電子刊物：從ICH的指導(dǎo)原則談非特定雜質(zhì)的控制（作者：黃曉龍）——根據(jù)以上規(guī)定可以引申出：在仿制藥研發(fā)或改劑型藥品以及藥品上市后變更等的研究中，即使出現(xiàn)了新雜質(zhì)，只要新雜質(zhì)含量低于表1（原料藥）或表2（制劑）中的鑒定限度，就可以認(rèn)可這些新雜質(zhì)的安全性。（其實(shí)ICH指導(dǎo)原則中早已闡明~）《定風(fēng)波》——蘇軾序：三月七日，沙湖道中遇雨。雨具先去，同行皆狼狽，余獨(dú)不覺，已而遂晴，故作此.☆莫聽穿林打葉聲，何妨吟嘯且徐行。竹杖芒鞋輕勝馬，誰怕？一蓑煙雨任平生。

☆料峭春風(fēng)吹酒醒，微冷，山頭斜照卻相迎?；厥紫騺硎捝?，歸去，也無風(fēng)雨也無晴。

ICH

Q3B文件：新藥制劑中的雜質(zhì)（實(shí)戰(zhàn)案例）1、每日主成分最高攝入量50mg。2、“原始測定結(jié)果”系指歸一化法或自身對照法結(jié)果。3、

0.2143%未過0.2%，故無需引入校正因子精確計(jì)算含量，也無需再做任何研究。4、0.349測定值過0.2%，故需引入校正因子精確計(jì)算含量，結(jié)果為0.3%，此時也僅需鑒定結(jié)構(gòu)式，無需進(jìn)行該雜質(zhì)的毒理研究。5、0.550%測定值經(jīng)精確計(jì)算后已過界定限，故需進(jìn)行毒理研究。原始測定結(jié)果(%)2報(bào)告結(jié)果(％)（報(bào)告值0.1%1）判斷是否鑒定（鑒定閾0.2%1）是否界定（界定值0.5%1)0.04不報(bào)告否否0.21430.23否否0.3490.34是否0.5500.65是是近來“極為時髦”的基因毒性雜質(zhì)研究：歐盟：高于鑒定限雜質(zhì)才要研究以排除基因毒性風(fēng)險(xiǎn)；美國：高于界定限雜質(zhì)才要研究以排除基因毒性風(fēng)險(xiǎn)；日本：口服的、沒則多疑神疑鬼的雜質(zhì)；中國：高于報(bào)告限雜質(zhì)就要排除基因毒性風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)答方案：原料藥鑒定限(0.10%)以上的雜質(zhì)才需厘清來源與結(jié)構(gòu)式。如具備文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)構(gòu)式（非一般性雜質(zhì)）再深入，否則無需。A為烷烴基、芳香基或H；X為鹵素，包括F、Cl、Br、I；EGW為吸電子取代基，如氰基、羰基或酯基等雜質(zhì)校正因子的測定（主要針對降解雜質(zhì)）如文獻(xiàn)報(bào)道值已翔實(shí)確鑿，則可直接采用；采用液質(zhì)聯(lián)用儀或其他檢測手段，甄別出降解雜質(zhì)結(jié)構(gòu)式，隨后從國外藥典會或某實(shí)驗(yàn)室購買來（必須有純度值），測得該雜質(zhì)校正因子?；蛲ㄟ^自我合成制備→結(jié)構(gòu)式確認(rèn)→獲得純度值→測得校正因子（單點(diǎn)法即可、不是高科技）。需提醒的是：無論何種途徑獲得的雜質(zhì)對照品，純度值無需很高，只要該值準(zhǔn)確、誤差范圍以內(nèi)即可。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定法：雜質(zhì)定量法★

雖雜質(zhì)對照品法最為準(zhǔn)確，但對照品的獲得與驗(yàn)證令人發(fā)憷?。ㄗ孕凶们槎▕Z……）

樂于采用“相對保留時間-校正因子結(jié)合法”。

(1)雜質(zhì)對照品僅用于研究時驗(yàn)證校正因子（如何驗(yàn)證）和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用（講述如何配制該溶液）。如通過文獻(xiàn)可獲得校正因子，可無需購買雜質(zhì)對照品。

(2)為確保相對保留時間的準(zhǔn)確性，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中必須指明色譜柱型號與具體參數(shù)。（不要認(rèn)為此種方式會被看作方法耐受性不佳。耐受性與固定色譜柱無關(guān)！）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定法★質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)盡可能擬定系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：

(1)采用雜質(zhì)對照品

(2)采用強(qiáng)破壞試驗(yàn)法

(3)采用最難分離的雜質(zhì)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用強(qiáng)破壞試驗(yàn)法驗(yàn)證系統(tǒng)適用性的典型圖譜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定法★

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中如何制訂雜質(zhì)與限度

絕無必要照搬照抄既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)！總之：應(yīng)既有已知雜質(zhì)的針對性測定，也有未知雜質(zhì)的籠統(tǒng)性測定。如：★雜質(zhì)A不得過0.7%（借鑒既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）、★雜質(zhì)B不得過1.0%（借鑒既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）、★其他最大未知雜質(zhì)不得過0.5%（根據(jù)原研制劑測定結(jié)果擬定）、★其次未知雜質(zhì)不得過0.1%~0.2%（根據(jù)ICH對制劑未知雜質(zhì)鑒定限的要求）、★總雜質(zhì)不得過1.5%（借鑒既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）。舉例：鹽酸普拉克索片（規(guī)格0.25mg）的仿制進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：梯度洗脫、3個波長、12個代號雜質(zhì)（且分別有校正因子、相對保留時間等。完全是“煙霧彈”）。

研發(fā)的最高境界“有所為有所不不為”！舉例：復(fù)方制劑有關(guān)物質(zhì)研究思路第一步：查詢每一個主成分單方制劑國內(nèi)外質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，觀測是否有目標(biāo)降解雜質(zhì)。（應(yīng)可尋找到……）

第二步：通過雜質(zhì)譜比較研究，對未變化/增加的雜質(zhì)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中不予擬定（原研制劑一定要平行做穩(wěn)定性考核試驗(yàn)）。

第三步：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅擬定降解雜質(zhì)，既可擬定采用雜質(zhì)對照品法、也可擬定采用“相對保留時間-校正因子結(jié)合法”（推薦前者）。

第四步：不建議采用籠統(tǒng)法測定未知雜質(zhì)。三類仿制藥的研發(fā)——無既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(1)查詢文獻(xiàn)，建立色譜條件；同時采用原料藥合成的中間體驗(yàn)證色譜條件的系統(tǒng)適用性。

(2)購買1批原研制劑（如購買不來、研發(fā)休眠）

(3)進(jìn)行原研品6個月的加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)。

(4)解讀原研品，獲得“雜質(zhì)譜”。

(5)回到上述思路：其中降解雜質(zhì)的限度設(shè)定是難點(diǎn)：

★查詢文獻(xiàn)★依據(jù)臨近效期的原研制劑雜質(zhì)量來推定★進(jìn)行加速試驗(yàn)★迫不得已采用雜質(zhì)的毒理試驗(yàn)。強(qiáng)破壞試驗(yàn)的意義★

研究主成分的雜質(zhì)譜、降解途徑和幫助建立有關(guān)物質(zhì)測定法。

★

可知曉主成分易受何條件影響，從而來指導(dǎo)處方開發(fā)與工藝設(shè)計(jì)，預(yù)防雜質(zhì)生成。如易受熱降解，則濕法制粒應(yīng)被排除，而采用干法制粒。（這才是該試驗(yàn)的最大用處）

★

雜質(zhì)產(chǎn)生5~15%最佳。強(qiáng)破壞試驗(yàn)的深度剖析★

對該理念產(chǎn)生的歷史背景……

★

試驗(yàn)結(jié)論：基本上沒有推翻既有色譜條件，實(shí)際是……

★

破壞方法：沒有統(tǒng)一規(guī)定、自己看著辦……

★

一定要賦予二極管陣列檢測器檢測主峰純度的測定……

★

如何應(yīng)答“物料平衡/質(zhì)量守恒”要求。（該試驗(yàn)理念與14號資料穩(wěn)定性考核中的“含量與有關(guān)物質(zhì)變化應(yīng)相輔相成”理念是不一致的，所以不應(yīng)強(qiáng)求）摘自“有關(guān)物質(zhì)的研究與新藥注冊”一文——CDE陳震老師發(fā)表于《中國醫(yī)藥工業(yè)雜志2010,11期》

在破壞試驗(yàn)中應(yīng)關(guān)注物料平衡情況，但是由于降解產(chǎn)物和主藥的響應(yīng)可能存在差異或降解產(chǎn)物無法被檢出、降解產(chǎn)物可能進(jìn)一步降解以及存在多條降解途徑等因素，物料不平衡的現(xiàn)象還是較為常見的。穩(wěn)定性試驗(yàn)中：含量與有關(guān)物質(zhì)的相輔相成性(1)有關(guān)物質(zhì)與含量間。

(2)各時間點(diǎn)的含量間：無變化、應(yīng)在±2.0%。

(3)各時間點(diǎn)的雜質(zhì)間：無變化、應(yīng)在±0.03%。

(4)令人哭笑不得的案例。

試驗(yàn)中的細(xì)節(jié)與技巧——★

引申至自身對照法與歸一化法的“互換妙用”：

絕對的“藝高人膽大”?。ㄔ敱M講述……）

★

申報(bào)資料中所附色譜圖

有關(guān)物質(zhì)研究的代表性圖譜均應(yīng)附上，尤方法探索過程、方法學(xué)驗(yàn)證、典型樣品測定、穩(wěn)定性考核等圖譜；至于非有關(guān)物質(zhì)圖譜，由于僅關(guān)注主成分峰，故象征性地附幾張典型圖譜應(yīng)可。

★

申報(bào)資料中所附色譜圖標(biāo)識要做到美觀大方、一目了然。試驗(yàn)中的細(xì)節(jié)與技巧——

溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)的判定不能單從主成分入手！還要注意所有組分的百分比變化，絕對值變化！雜質(zhì)-1（為已知雜質(zhì)）青蒿琥酯雜質(zhì)-2雜質(zhì)-3新雜質(zhì)時間(h)峰面積百分比峰面積百分比峰面積百分比峰面積百分比均未檢出0148110.14%1036960099.26%575110.55%50320.05%0.5360280.35%1014652598.89%557860.54%223310.22%1595200.57%1038238898.58%580980.55%317170.30%1.5689800.66%1034454198.45%595210.57%338980.32%2789480.75%1036038698.33%591720.56%380650.36%3917080.86%1043288898.16%591850.56%4500020.42%RSD0.96％★

液相使用技巧……

(1)必須保證空白溶劑色譜圖測定理想！

(2)梯度洗脫注意事項(xiàng)（流動相組成與洗脫設(shè)定）

(3)安裝色譜柱的技巧與清洗色譜柱法則。

★

最低檢出限、最低定量限做完之后有何用？引申至“畫龍點(diǎn)睛之筆”（相當(dāng)于供試品溶液的……）方法學(xué)驗(yàn)證的核心與實(shí)質(zhì)是什么——方法學(xué)驗(yàn)證分為兩部分：確定試驗(yàn)各參數(shù)的思考過程與試驗(yàn)結(jié)果，即測定法各參數(shù)是如何確定的？資料中應(yīng)逐一詳盡說明。這才是分析技術(shù)的體現(xiàn)！

確定后的方法學(xué)驗(yàn)證，這幾乎沒有不好的，這不是高科技，都是走形式~摘自“有關(guān)物質(zhì)的研究與新藥注冊”一文——CDE陳震老師發(fā)表于《中國醫(yī)藥工業(yè)雜志2010,41(11)》

分析方法的建立包括分離檢測條件的篩選和優(yōu)化、方法的驗(yàn)證兩個方面的研究工作。需要注意的是，方法驗(yàn)證工作是在檢查方法確定后開展的，其目的是證明采用的方法適用于相應(yīng)檢測要求，檢查方