(高清版)DB21∕T 2433-2015 樹莓組培育苗技術(shù)規(guī)程　

遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I Ⅲ 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語與定義 14材料的選擇 24.1選擇的部位 24.2取材季節(jié)的選擇 24.3器官發(fā)育年齡的選擇 2 25消毒滅菌 25.1外植體消毒滅菌 25.2培養(yǎng)基高壓滅菌 25.3接種器具滅菌 26初代培養(yǎng) 36.1培養(yǎng)基配制 36.2培養(yǎng)環(huán)境條件 36.3培養(yǎng)方法 37繼代培養(yǎng) 37.1培養(yǎng)基配制 37.2培養(yǎng)環(huán)境條件 37.3培養(yǎng)方法 37.4增殖速率的計算 37.3.1按理論計算 37.3.2實際計算 38生根培養(yǎng) 48.1培養(yǎng)基配制 48.2培養(yǎng)室環(huán)境條件 48.3培養(yǎng)方法 48.4根的生長 49組培苗的移栽 4 49.2移苗的方法 49.2.1清除培養(yǎng)基 49.2.2苗床準(zhǔn)備 49.2.3移栽后的管理 49.2.3.1移植后10d之內(nèi) 59.2.3.2移栽后10~19d 59.2.3.3生長2030d 510技術(shù)檔案 5附錄A(規(guī)范性附錄)樹莓組培苗木質(zhì)量分級 6附錄B(資料性附錄)樹莓組培苗移栽病蟲害防治藥劑用量 7附錄C(資料性附錄)組培室的構(gòu)成及基本設(shè)備 8本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)BT1.1-2本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄，附錄BC為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省林業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：阜新市林業(yè)種苗管理站、阜蒙縣林業(yè)科技示范中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張秀艷、齊金海、丁立娜、曹穎、武春艷、李錢、于丹、楊樹勇、丁瑞軍、田明芳、趙方明、張志會、劉金城、宋春穎、付玉、李暢、霍旺、柳士東、王國興、舒紅、胡玉珠、楊志勇、李亞輝、陳寶財、張瑩、龍忠勤、姬東、扈延伍、董芷維、齊金艷、李寧、賈斌英、柴旭光、楊愛風(fēng)。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了樹莓(RubuscorchorifoliusL.f.)組織培養(yǎng)育苗過程中材料的選擇、消毒滅菌、初代2規(guī)范性引用文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。BT6DI育苗技術(shù)規(guī)程3術(shù)語與定義樹莓RubuscorchorifoliusLf.根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官(如根、莖、葉、莖織(如形成層、表皮、皮層、髓部細(xì)胞、胚乳等)或細(xì)胞(如大孢子、小孢子、體細(xì)胞等)以及原生質(zhì)植物組織培養(yǎng)所利用植物體離體的器官(如根、莖、葉、莖尖、花、果實等)組織(如形成層、表2皮、皮層、髓部細(xì)胞、胚乳等)或細(xì)胞(如大孢子、小孢子、體細(xì)胞等)以及原生質(zhì)體，稱為外植體。初代培養(yǎng)Primaryculture生根培養(yǎng)Rootingculture42取材季節(jié)的選擇43器官發(fā)育年齡的選擇44取材的大小52培養(yǎng)基高壓滅菌53接種器具滅菌3剪子、鑷子、50h燒杯(處理外植體使用)用牛皮紙包裝，做到無漏洞，捆綁好，用高壓滅菌鍋62培養(yǎng)環(huán)境條件在無菌的環(huán)境下，培養(yǎng)室溫度23C~5C,濕度20%30%光照強度20x~20x整齊擺放在培養(yǎng)架(五層，每層間隔45m透光)上，培養(yǎng)室技術(shù)要求參照附錄C片，采用75酒精消毒30s~4GsOP汞水溶液消毒處理3in~4in再用無菌水洗滌5次。然后7.2培養(yǎng)環(huán)境條件在無菌的環(huán)境下，培養(yǎng)室溫度23C~5C,濕度20%30%光照強度20x~20x整齊擺放在培養(yǎng)架(五層，每層間隔45m透光)上，培養(yǎng)室技術(shù)要求參照附錄C7.3培養(yǎng)方法7.4增殖速率的計算年內(nèi)能繁殖試管苗的數(shù)量，可用式(1)計算y=mx"………………………48生根培養(yǎng)82培養(yǎng)室環(huán)境條件培養(yǎng)室溫度18C~5C,濕度20%30%光照強度20x~20x培養(yǎng)室技術(shù)要求參照附錄C~~92移苗的方法起污染和霉?fàn)€。最后蘸10D倍～2倍海藻素類(促進(jìn)生根)溶液后移栽。59.2.3.2移栽后10d~19d6附錄A(規(guī)范性附錄)樹種名稱苗木種類苗齡級苗百分率適用范圍根系苗高根系長度(條)根團(tuán)(條)根團(tuán)樹莓組培苗5旺盛的生命力北至黑龍江、內(nèi)蒙；南至廣東、云南等省份7(資料性附錄)防治病害、蟲害種類一多抗霉素阿維菌素油8附錄C(資料性附錄)組培室的構(gòu)成及基本設(shè)備組培實驗室一般應(yīng)包括更衣室、洗瓶室、配置室、配藥室、滅菌室、接種室、培養(yǎng)室、馴化棚室等。結(jié)合具體情況，可以合并部分分室。C1洗瓶室用于玻璃器皿和實驗用具的洗滌、干燥和貯存；培養(yǎng)材料的預(yù)處理與清洗；組培苗的出瓶、清洗和整理等。要求房間寬敞明亮，方便多人同時工作，有電源、水源，上下水通暢；地面耐濕、防滑、排水設(shè)備及用具：工作臺、烘箱、晾干架、周轉(zhuǎn)筐、各種規(guī)格的毛刷、藥品柜等。C2培養(yǎng)基配置室用于培養(yǎng)基的配置、植物材料的預(yù)處理。要求房間寬敞明亮、通風(fēng)干燥，方便多人同時工作，有電源、水源，上下水通暢。設(shè)備及用具：電子分析天平、托盤天平、電子天平、磁力攪拌器、蒸餾水器、酸度計、恒溫水浴振蕩器、微波爐、冰箱、展示柜、移液管、培養(yǎng)瓶、試劑瓶、燒杯、量筒、容量瓶、培養(yǎng)皿、玻璃棒、記號筆、封口膜、瓶蓋、周轉(zhuǎn)筐、紗布、小推車等。C3滅菌室用于培養(yǎng)基、器皿、工具和其他物品的消毒滅菌。要求安全、通風(fēng)、明亮；墻面和地面防潮、耐高溫。水源、電源加熱；上下水通暢；設(shè)備及用具：壓力滅菌鍋、周轉(zhuǎn)筐、換氣扇、小推車等。C4接種室進(jìn)行植物材料的接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移等無菌操作，即無菌操作室。要求空間宜小不宜大，密閉、干爽安靜、清潔明亮、不易積塵。門窗密閉性好、吊裝紫外光燈，保持環(huán)境無菌或低密度有菌狀態(tài)；安置空調(diào)機(jī)；人流與物流分開。設(shè)備及用具：超凈工作臺、空調(diào)機(jī)、接種器械滅菌器、紫外光燈、酒精燈、廣口瓶、三角瓶、接種工具、手持噴霧器、工作臺、污物桶等。C5培養(yǎng)室用于培養(yǎng)離體材料。要求面積不宜過大，10-20m,培養(yǎng)室外有緩沖間或走廊；能夠控制光照和溫