2025年統(tǒng)編版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年統(tǒng)編版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、黑茶是利用微生物的酶促進(jìn)茶多酚氧化的發(fā)酵茶。研究人員對(duì)黑茶中的微生物進(jìn)行了分離和鑒定；過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.向樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B.可根據(jù)菌落特征對(duì)菌種進(jìn)行初步鑒定C.可通過(guò)平板劃線法對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)D.常溫下可用斜面培養(yǎng)基長(zhǎng)期保存菌種2、圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖；圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ；BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRⅠB.如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有1個(gè)C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理D.一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)3、下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述中，正確的是（）A.愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中要注意保持材料用具等無(wú)菌D.同一株綠色開(kāi)花植株不同部位的細(xì)胞得到的組培苗基因型一定相同4、下列有關(guān)倒平板的操作，正確的是（）A.接種后的平板需倒置放置于超凈工作臺(tái)中培養(yǎng)B.已滅菌的培養(yǎng)基冷卻到大約60℃時(shí)可倒平板C.倒平板后，可用劃線法和稀釋涂布法接種，獲得單菌落后進(jìn)行計(jì)數(shù)D.培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后，使培養(yǎng)皿傾斜放置，以使培養(yǎng)基凝固后形成斜面5、下列關(guān)于生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.基因“身份證”記錄了個(gè)人全部的基因信息B.生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑等C.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的基因多樣性D.反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒6、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述，正確的是（）A.對(duì)轉(zhuǎn)基因食品應(yīng)持有客觀科學(xué)的態(tài)度B.轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物，一定不會(huì)破壞生態(tài)平衡C.微生物的基因轉(zhuǎn)入植物后一定不能表達(dá)D.如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界，則一定不存在安全性問(wèn)題評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、如圖為體細(xì)胞核移植過(guò)程流程圖；下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核B.核移植的供體細(xì)胞一般都選傳代10~50代左右的細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中使用的去核方法只有顯微操作法D.上述過(guò)程能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性8、基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA；限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正確的是（）

A.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA9、下圖是胚胎干細(xì)胞潛能示意圖,相關(guān)敘述正確的是()

A.由細(xì)胞形態(tài)判斷,4種細(xì)胞中細(xì)胞②最可能連續(xù)分裂B.胚胎干細(xì)胞能分化為各種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)C.分化得到的各種細(xì)胞,功能不同的主要差異是特定蛋白不同D.定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官,進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)10、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定11、讓羊產(chǎn)牛奶，科學(xué)家對(duì)此做了相關(guān)的構(gòu)想，過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法不正確的是（）

A.圖中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物體細(xì)胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等B.進(jìn)行G操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚或原腸胚C.若研究發(fā)現(xiàn)羊N細(xì)胞中線粒體基因的表達(dá)產(chǎn)物豐富，故它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會(huì)有這一優(yōu)良性狀D.通過(guò)上述技術(shù)得到小羊a和b的過(guò)程為有性生殖12、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個(gè)體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植13、甲圖為牛胚胎移植示意圖，乙圖為胚胎發(fā)育某時(shí)期示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.甲圖中沖卵的目的是獲取受精卵B.對(duì)供體母牛和受體母牛注射性激素，進(jìn)行同期發(fā)情處理C.性別鑒定時(shí)需將圖乙②處細(xì)胞做染色體分析D.受精卵形成乙的過(guò)程中進(jìn)行卵裂，每個(gè)細(xì)胞的體積變小14、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源15、2019年，中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________17、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。18、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就______，稱為_(kāi)_____。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面______時(shí)，細(xì)胞就會(huì)_____，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)_____。19、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________20、近年來(lái)，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過(guò)與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題嗎？_____。21、不同國(guó)家的政府對(duì)待生殖性克隆人的態(tài)度是不同的?我們認(rèn)同我國(guó)政府對(duì)待生殖性克隆人研究的態(tài)度嗎？為什么？_____。22、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：_____、_____、_____、_____等。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共14分)23、通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動(dòng)物，該技術(shù)的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤24、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)25、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_____________________。26、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。27、干燥綜合征（SS）是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過(guò)程?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共30分)28、酸湯魚是貴州凱里傳統(tǒng)名菜之一；這道美味可口的名菜制作秘訣主要在于酸湯原料的添加比例和發(fā)酵工藝上。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

（1）凱里酸湯里主要的微生物是乳酸菌，其新陳代謝方式為_(kāi)_______。培養(yǎng)乳酸菌一段時(shí)間后，培養(yǎng)基中的pH會(huì)下降，原因是__________________。

（2）為了縮短制作酸湯的時(shí)間，當(dāng)?shù)厝藗儠?huì)在冷卻后的鹽水中加入少量的陳酸湯，目的是___________。

（3）某課題小組對(duì)某品牌的酸湯進(jìn)行檢驗(yàn)，判斷其是否合格，需要檢測(cè)酸湯中______的含量，測(cè)定的原理是:在________的條件下，該物質(zhì)與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生正氮化反應(yīng)后，與N-l-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合生成__________色染料。

（4）亞硝酸鹽對(duì)人體有害是因?yàn)槠湓谔囟ǖ臈l件下會(huì)部分轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)_______。29、胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝；引起昆蟲死亡，但對(duì)人體無(wú)害?？茖W(xué)家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因（Pin－Ⅱ）通過(guò)農(nóng)桿菌導(dǎo)入楊樹(shù)細(xì)胞，培育成了抗蟲楊樹(shù)。

注：左圖表示含目的基因的DNA分子，下圖表示質(zhì)粒，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因；復(fù)制原點(diǎn)是質(zhì)粒DNA復(fù)制的起點(diǎn)。箭頭表示識(shí)別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點(diǎn)。

回答下列問(wèn)題：

(1)要獲得大量的目的基因，通常采用PCR擴(kuò)增技術(shù)，在PCR擴(kuò)增儀中已加入了一定的緩沖溶液、含目的基因的DNA分子、Mg2＋，還需要加入的物質(zhì)有_________。通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增Pin－Ⅱ基因片段，反應(yīng)過(guò)程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對(duì)、72℃延伸三個(gè)步驟，經(jīng)過(guò)多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個(gè)因素，這兩個(gè)因素是________和________。

(2)圖中的質(zhì)粒在基因工程操作中通常用作載體，能在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在，除含有Ampr，Neor和多個(gè)限制酶切位點(diǎn)外，質(zhì)粒還具有的主要特點(diǎn)是________。

(3)依據(jù)圖中信息，寫出高效構(gòu)建含Pin－Ⅱ基因片段的重組質(zhì)粒的簡(jiǎn)要操作方法：_________。

(4)用轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)葉片喂養(yǎng)某種楊樹(shù)害蟲，發(fā)現(xiàn)害蟲死亡率顯著增加，與非轉(zhuǎn)基因的楊樹(shù)細(xì)胞相比較，此轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)的葉片細(xì)胞中，可以檢測(cè)到的物質(zhì)有_____、____、____。（寫3項(xiàng)）30、糖尿病是一種常見(jiàn)?。黄浒l(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)，治療糖尿病少不了胰島素。如圖表示運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的幾條途徑。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)科研人員用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞A中，細(xì)胞A應(yīng)該是：_______。

(2)科研人員用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)胰島素基因是否整合到轉(zhuǎn)基因母羊的DNA上，以_______為探針，使探針與羊基因組的DNA雜交，如果顯示出_______；則表明胰島素基因已插入染色體DNA中。

(3)受體細(xì)胞B應(yīng)該是萵苣的_______(填“體細(xì)胞”“卵細(xì)胞”或“受精卵)，過(guò)程②常用的方法是：_______。導(dǎo)入該細(xì)胞后，需對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，經(jīng)_______過(guò)程形成愈傷組織。

(4)若該轉(zhuǎn)基因“胰島素羊”乳汁中檢測(cè)到胰島素，該胰島素與轉(zhuǎn)基因“胰島素細(xì)菌”產(chǎn)生的胰島素相比，不同之處是后者產(chǎn)生的胰島素_______（填“有”或“無(wú)”）生物活性。其原因是：_______。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法。

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；向樣品中加入無(wú)菌水制成樣品懸液；A錯(cuò)誤；

B；可根據(jù)菌落特征對(duì)菌種進(jìn)行初步鑒定；B正確；

C；可通過(guò)稀釋涂布平板法對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)；C錯(cuò)誤；

D；常溫下可用斜面培養(yǎng)基臨時(shí)保存菌種；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【詳解】

目的基因兩側(cè)都有，且質(zhì)粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，可選EcoRⅠ，A正確；如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有2個(gè)，B錯(cuò)誤；為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理，C正確；一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，產(chǎn)生兩個(gè)黏性末端，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，D正確。3、C【分析】【詳解】

愈傷組織是一團(tuán)大而無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，A錯(cuò)誤；二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到是單倍體，高度不孕，不能產(chǎn)生后代，B錯(cuò)誤；植物組織培養(yǎng)過(guò)程中要注意保持材料用具等無(wú)菌，C正確；同一株綠色開(kāi)花植株不同部位的細(xì)胞得到的組培苗基因型不一定相同，如根尖細(xì)胞組織培養(yǎng)得到的植株基因型與花藥離體培養(yǎng)獲得的植株基因型不同，D錯(cuò)誤。4、B【分析】【分析】

倒平板操作的步驟：將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上；右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過(guò)火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下；皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。

【詳解】

A；接種后的平板需倒置放置于恒溫箱中；A錯(cuò)誤；

B；已滅菌的培養(yǎng)基冷卻到大約50℃～60℃時(shí)可倒平板；B正確；

C；倒平板后；可用劃線法和稀釋涂布法接種，但只有稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D；培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后；將培養(yǎng)皿平放在水平位置上，并輕輕晃動(dòng)，待凝固后形成平板，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、A【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

2；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

A；把個(gè)人的致病基因和易感基因檢測(cè)出來(lái)；記錄在磁卡上，做成個(gè)人基因身份證，因此基因身份證只含有人的部分基因信息，A錯(cuò)誤；

B；生物武器包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等，B正確；

C；種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因隨花粉擴(kuò)散到其它種群而影響野生植物的基因多樣性；C正確；

D；試管嬰兒可以設(shè)計(jì)嬰兒的性別；反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，D正確。

故選A。6、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；對(duì)轉(zhuǎn)基因食品不能主觀臆斷；應(yīng)持有客觀科學(xué)的態(tài)度，A正確；

B；轉(zhuǎn)抗蟲基因植物；可能會(huì)擴(kuò)散到種植區(qū)外變成野生種類，或者進(jìn)入新的生態(tài)區(qū)域，進(jìn)而破壞生態(tài)平衡，B錯(cuò)誤；

C；由于密碼子的通用性；微生物的基因轉(zhuǎn)入植物后也可能會(huì)表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界；也會(huì)存在潛在的安全性問(wèn)題，如可能會(huì)造成基因污染，D錯(cuò)誤。

故選A。二、多選題(共9題，共18分)7、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖為動(dòng)物體細(xì)胞核移植過(guò)程和胚胎移植過(guò)程。動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。

【詳解】

A；生物的性狀主要受核基因控制；去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核，A正確；

B；核移植時(shí)做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)細(xì)胞；原因是細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法；也可采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法，C錯(cuò)誤；

D；核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；D正確。

故選BC。8、A:B:C【分析】【分析】

一種限制酶只能識(shí)別一種核苷酸序列且在特定的位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，A正確；

B；由于Sau3AI的切割位點(diǎn)在EcoRI的左側(cè)；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA；其上只含有一個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，因此用EcoRI切割后，該環(huán)狀DNA分子變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，C正確；

D；從圖甲看出；用EcoRI切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoRI切口對(duì)接時(shí)，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABC。9、A:B:C:D【分析】【分析】

干細(xì)胞：在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中；通常把那些具有自我復(fù)制能力，并能在一定條件下分化形成一種以上類型的細(xì)胞的多潛能細(xì)胞稱為干細(xì)胞。

（1）全能干細(xì)胞：如胚胎干細(xì)胞；

（2）多能干細(xì)胞：如造血干細(xì)胞；

（3）專能干細(xì)胞：如骨髓瘤細(xì)胞；皮膚生發(fā)層干細(xì)胞。

【詳解】

A；由細(xì)胞形態(tài)判斷；①為精細(xì)胞，③為肌肉細(xì)胞，④為神經(jīng)細(xì)胞，這3種細(xì)胞都是高度分化的細(xì)胞，所以推測(cè)圖示4種細(xì)胞中細(xì)胞②分化程度最低，最可能連續(xù)分裂，A正確；

B；胚胎干細(xì)胞分化為各種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；B正確；

C；分化得到的各種細(xì)胞；功能不同的主要差異是特定蛋白不同，C正確；

D；定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官；進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】10、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式屬于無(wú)性生殖，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)；B正確；

C；受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；C錯(cuò)誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定；將來(lái)可以發(fā)育成胎膜和胎盤，D錯(cuò)誤。

故選ACD。11、B:C:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過(guò)胚胎移植獲得小羊ab。

【詳解】

A、圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過(guò)胚胎移植獲得小羊ab；故圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物體細(xì)胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等，A正確；

B；進(jìn)行G操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚；因囊胚期細(xì)胞未分化，而原腸胚已經(jīng)分化，不能進(jìn)行胚胎分割，B錯(cuò)誤；

C；通過(guò)圖解分析可知；小羊只獲得了羊N的細(xì)胞核，其細(xì)胞質(zhì)中的基因不會(huì)遺傳給小羊，C錯(cuò)誤；

D；上述核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物；屬于無(wú)性生殖，D錯(cuò)誤。

故選BCD。12、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個(gè)體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動(dòng)物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。13、A:B:C【分析】【分析】

分析甲圖：甲圖為牛胚胎移植示意圖；胚胎移植的具體過(guò)程為：對(duì)供；受體的選擇和處理；配種或人工授精；對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存；胚胎進(jìn)行移植；移植后的檢查；對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。分析乙圖：①是滋養(yǎng)層；②是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；③是囊胚腔。

【詳解】

A；沖卵是指把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)；甲圖中沖卵的目的是獲取早期胚胎，A錯(cuò)誤；

B；為使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)；通常需要注射孕激素等激素使其同期發(fā)情，B錯(cuò)誤；

C；進(jìn)行性別鑒定需要取囊胚的①滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析；C錯(cuò)誤；

D；受精卵形成乙囊胚的過(guò)程中進(jìn)行卵裂；每個(gè)細(xì)胞的體積變小，細(xì)胞總體積不變或略有減少，D正確。

故選ABC。14、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)猓珼正確。

故選ACD。15、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)（屬于無(wú)性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯(cuò)誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共7題，共14分)16、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細(xì)胞的接觸抑制。19、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒?huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。20、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過(guò)的與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題有：

①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國(guó)家保護(hù)動(dòng)物以及植物；我們可運(yùn)用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。【解析】有，比如：①瀕臨滅絕動(dòng)物的克??；②農(nóng)業(yè)克隆：應(yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。21、略

【分析】【詳解】

對(duì)待生殖性克隆人的研究，我國(guó)政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。因?yàn)樯承钥寺。ㄒ簿褪强寺∪耍`反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴(yán)，會(huì)引起嚴(yán)重的道德、倫理、社會(huì)和法律問(wèn)題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對(duì)不可以應(yīng)用于人類本身。【解析】認(rèn)同。因?yàn)樯承钥寺。ㄒ簿褪强寺∪耍`反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴(yán)，會(huì)引起嚴(yán)重的道德、倫理、社會(huì)和法律問(wèn)題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對(duì)不可以應(yīng)用于人類本身。22、略

【分析】略【解析】營(yíng)養(yǎng)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境四、判斷題(共2題，共14分)23、B【分析】【詳解】

目前；用體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的成功率還很低。

故錯(cuò)誤。24、A【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)，故該表述正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共18分)25、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細(xì)胞為背景；考查了動(dòng)物細(xì)胞融合；細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價(jià)大于16000，所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知，血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí)，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。

（2）B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí)；可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞之間的融合，骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。

（3）由于核膜也具有流動(dòng)性；故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體，骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞；不能無(wú)限增殖，所以多次培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?！窘馕觥?YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖26、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變，說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過(guò)①過(guò)程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開(kāi)始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共3題，共30分)28、略

【分析】【分析】

泡菜制作的原理是乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸；由于泡菜制作過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，人體攝入過(guò)多的亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定的條件下轉(zhuǎn)化成亞硝胺，亞硝胺會(huì)危害人體健康，因此泡菜制作過(guò)程中要對(duì)亞硝酸鹽含量用比色法進(jìn)行檢測(cè)，把握最佳取食時(shí)機(jī)。本題中凱里酸湯制作的原理是利用乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸制成的，與泡菜制作原理相似。

（1）

乳酸菌的新陳代謝方式是異養(yǎng)厭氧型；乳酸菌無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸；乳酸進(jìn)入了培養(yǎng)基會(huì)使培養(yǎng)液的pH降低，故培養(yǎng)乳酸菌一段時(shí)間后，培養(yǎng)基中的pH會(huì)下降。

（2）

陳酸湯中含有乳酸菌；在冷卻后的鹽水中加入少量的陳酸湯，目的是接種乳酸菌，縮短制作酸湯的時(shí)間。

（3）

判斷酸湯是否合格；需要檢測(cè)酸湯中的亞硝酸鹽的含量，測(cè)定的原理是：在鹽酸酸化的條件下，該物質(zhì)與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N?1?萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合生成玫瑰紅色染料。

（4）

亞硝酸鹽對(duì)人體有害是因?yàn)槠湓谔囟ǖ臈l件下會(huì)部分轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)