2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是（）A.黑曲霉可以用于醬油、檸檬酸、凝乳酶的工業(yè)生產(chǎn)B.接種是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)C.用于發(fā)酵工程的菌種，可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)基因工程育種或單倍體育種獲得D.可以通過(guò)蒸餾、萃取等方法對(duì)單細(xì)胞蛋白進(jìn)行分離、提純2、下列關(guān)于生物技術(shù)安全性的說(shuō)法中，正確的是（）A.基因身份證是指只能夠提供個(gè)人某些基因資訊的證件B.設(shè)計(jì)試管嬰兒引發(fā)的主要問(wèn)題是植入前遺傳學(xué)的診斷技術(shù)問(wèn)題C.擁有生物武器是一個(gè)國(guó)家綜合實(shí)力的象征，我國(guó)應(yīng)加強(qiáng)研究和制造D.生物的安全問(wèn)題主要包括食物安全、環(huán)境安全和基因安全三個(gè)方面3、生物技術(shù)正越來(lái)越多的影響普通人的生活，下列人們對(duì)生物技術(shù)應(yīng)用相關(guān)的認(rèn)識(shí)中，正確的是（）A.應(yīng)用試管動(dòng)物技術(shù)產(chǎn)下新個(gè)體的過(guò)程屬于無(wú)性生殖B.我國(guó)政府禁止一切形式的生殖性人克隆實(shí)驗(yàn)C.食用轉(zhuǎn)基因食品會(huì)導(dǎo)致外源基因整合入人的基因組D.接種流感疫苗對(duì)預(yù)防變異的流感病毒感染一定無(wú)效4、關(guān)于纖維素酶的敘述中，正確的是（）A.牛、羊等草食動(dòng)物可以合成纖維素酶，從而利用纖維素B.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖異構(gòu)酶三種組分C.纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖，為微生物提供碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)D.分解纖維素的細(xì)菌、真菌、放線(xiàn)菌，都是通過(guò)產(chǎn)生纖維素酶來(lái)分解纖維素的5、某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列關(guān)于土壤中分解尿素細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)的敘述，正確的是（）A.分解尿素的細(xì)菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B.倒平板時(shí)應(yīng)將打開(kāi)的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D.若實(shí)驗(yàn)組菌落平均數(shù)為57個(gè)/平板，空白對(duì)照平板上有3個(gè)菌落，則本組菌落數(shù)的平均值為54個(gè)/平板6、北魏時(shí)期的名著《齊民要術(shù)》中總結(jié)了中國(guó)古代許多釀酒技術(shù)的原理和技術(shù)路線(xiàn)，例如用酒曲釀酒時(shí)不同季節(jié)對(duì)浸曲之水的處理不同，冬天的水可以直接浸曲，春天后則需先將水煮沸后再浸曲；酸漿法處理使釀酒容器中先呈現(xiàn)出酸性環(huán)境后再釀酒：釀酒要先晾堂（在糧食中加入酒曲后鋪撒在地面上）再密封到酒窖中。這些原理和技術(shù)對(duì)現(xiàn)代釀酒技術(shù)的發(fā)展仍然具有重要的指導(dǎo)意義。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.水煮沸后可直接用于浸曲以提高釀酒效率B.酸漿法利用了較低pH適宜酵母菌的生長(zhǎng)而抑制其他雜菌生長(zhǎng)的原理C.晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖D.密封可以使酵母菌產(chǎn)生酒精的同時(shí)避免醋酸的產(chǎn)生7、下列有關(guān)利用葡萄酸制果酒過(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.適當(dāng)增加酵母菌的接種量，可以縮短發(fā)酵的時(shí)間B.酒精積累是導(dǎo)致發(fā)酵液中細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一C.果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋D.葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響果酒的品質(zhì)8、下列關(guān)于植物細(xì)胞工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.以根尖分生區(qū)為材料通過(guò)植物組織培養(yǎng)可獲得抗毒新品種B.通過(guò)花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株，可明顯縮短育種年限C.愈傷組織的分裂能力強(qiáng)，更容易受到誘變因素的影響而產(chǎn)生突變D.細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)可提高單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的次生代謝產(chǎn)物的含量9、人的血清白蛋白（HAS）在臨床上需求量很大，通常從血液中提取，成本較高。如果將人的血清白蛋白基因?qū)肽膛＜?xì)胞中，利用奶牛乳汁來(lái)生產(chǎn)血清白蛋白，能夠極大地降低成本，且安全高效。下圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)HAS的過(guò)程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.①進(jìn)入③之前，必須構(gòu)建基因表達(dá)載體，⑥進(jìn)入⑦之前，必須取滋養(yǎng)層做性別鑒定B.在⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚C.該過(guò)程綜合利用了核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等工程技術(shù)D.血清蛋白基因只在牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)與特定的啟動(dòng)子有關(guān)評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)10、有關(guān)質(zhì)粒的敘述，下述說(shuō)法不正確的為（）A.質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞不可缺少的遺傳物質(zhì)B.質(zhì)?？捎糜诨虻臄U(kuò)增和蛋白質(zhì)的表達(dá)C.每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞都都含有一個(gè)質(zhì)粒D.質(zhì)粒都由4種脫氧核糖核苷酸脫水縮合而成11、PCR可以特異性地快速擴(kuò)增目的基因，成功的擴(kuò)增應(yīng)該產(chǎn)生與目的基因大小一致的擴(kuò)增產(chǎn)物，不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鲿?huì)導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物或出現(xiàn)非目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物。下列說(shuō)法正確的是（）A.若PCR反應(yīng)緩沖溶液中未加入Mg2+，則結(jié)果可能不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物B.若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白，則結(jié)果可能不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物C.若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，則結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物D.若引物間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，則結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物12、常見(jiàn)的輔助生殖技術(shù)有兩種：一種叫做人工授精，即通過(guò)人工的方法，把精液或者精子送到雌性的生殖道，達(dá)到增加懷孕幾率的目的；第二種輔助生殖技術(shù)就是試管動(dòng)物，主要涉及體外受精、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。下列敘述正確的是（）A.人工授精后形成的早期胚胎立即與母體子宮建立聯(lián)系B.輔助生殖技術(shù)不一定會(huì)用到胚胎移植C.與克隆動(dòng)物不同，試管動(dòng)物的培育屬于有性生殖D.人工授精和試管動(dòng)物技術(shù)都要注意受體的生殖周期13、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量。科研人員進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源14、甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病菌。研究者發(fā)現(xiàn)抗甲基因、抗乙基因可分別表達(dá)合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)抑制甲、乙的細(xì)胞增殖，并獲得了抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種。以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤是（）A.分別導(dǎo)入不同受體細(xì)胞的抗甲、抗乙基因都能有效能編碼相應(yīng)的蛋白質(zhì)B.培育該植物新品種的過(guò)程利用了基因工程、雜交育種和單倍體育種技術(shù)C.該新品種的培育利用了基因重組、基因突變、染色體變異等生物學(xué)原理D.培育出的該植物新品種植株是四倍體，和原植物存在著明顯的生殖隔離評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________16、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。17、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲(chǔ)。18、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。19、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。20、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。22、應(yīng)用分析與比較的方法，對(duì)生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________23、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共12分)24、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯(cuò)誤25、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共18分)26、最新調(diào)查顯示手機(jī)每平方厘米就駐扎了12萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；這個(gè)數(shù)字足以令馬桶坐墊上的細(xì)菌隊(duì)伍汗顏。某生物興趣小組的同學(xué)，利用手機(jī)表面的細(xì)菌進(jìn)行了相關(guān)的培養(yǎng)研究。

（1）為研究手機(jī)表面微生物的種類(lèi)；用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌的純化和分離。下面的四種菌落分布情況中，哪些選項(xiàng)是通過(guò)稀釋涂布平板法得到的_____

（2）研究小組用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油對(duì)手機(jī)表面細(xì)菌的抑制情況。該方法的操作步驟如下：首先制備牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器將5種細(xì)菌分別接種到5個(gè)平板上，得到細(xì)菌平板。然后制備直徑為5mm的濾紙圓片，采用_____滅菌法處理，將滅菌的濾紙片部分放入適宜濃度的玫瑰精油中，對(duì)照組放入_____中，浸泡10min，后將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面。最后將平板放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(shí)。通過(guò)測(cè)量_____來(lái)檢測(cè)玫瑰精油對(duì)5種細(xì)菌的抑制效果。27、使用日益廣泛的手機(jī)；在方便人們通訊聯(lián)絡(luò)的同時(shí)也成為細(xì)菌等病原體傳播的途徑。為了解手機(jī)上細(xì)菌的情況，某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

(1)取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后，對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是_______。

(2)A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)，說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌有____種。若要使菌落能在A平板上生長(zhǎng)，下列培養(yǎng)基組分中最合理的是_____(選填“甲、乙、丙”)，原因是_____?？刹扇___________來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格。培養(yǎng)基編號(hào)培養(yǎng)基組分甲蔗糖、NaC1、瓊脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初篩后將平板B的菌落通過(guò)“影印”方法接種到C培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使C培養(yǎng)基對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)相同菌落。然后用伊紅-美藍(lán)染液對(duì)C進(jìn)行染色，根據(jù)染色后D中出現(xiàn)的結(jié)果，可判斷平板B中______(選填圖中數(shù)字)是大腸桿菌的菌落。

(4)某同學(xué)采用平板劃線(xiàn)法進(jìn)一步純化大腸桿菌，接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線(xiàn)區(qū)不間斷長(zhǎng)滿(mǎn)菌落，第二劃線(xiàn)區(qū)上幾乎無(wú)菌落，產(chǎn)生此情況的可能原因____________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)28、我國(guó)已出臺(tái)鼓勵(lì)農(nóng)作物秸稈還田的政策；但是秸稈腐化時(shí)間長(zhǎng)；易發(fā)病蟲(chóng)害等問(wèn)題限制其推廣。某研究小組進(jìn)行了利用玉米秸稈發(fā)酵制備微生物菌肥的系列實(shí)驗(yàn)。

（1）從植物根際土壤中篩選出具有高效固氮、釋放不溶性無(wú)機(jī)磷和水解有機(jī)磷能力的三種菌株N3、Y1、W3；需選用的培養(yǎng)基分別為下表中的_______。

。類(lèi)型組成甲葡萄糖、NaCl、MgSO4、CaSO4、CaCO3、KH2PO4，pH7．0乙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、植酸鈣，pH7．0丙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、Ca3(PO4)2，pH7．0注：植酸鈣分子式為C6H6Ca6O24P6；可溶于水，微溶于丙酮或乙醇。

（2）將粉碎后的玉米秸稈進(jìn)行_______滅菌，冷卻后接種一定濃度的里氏木霉菌懸液。發(fā)酵一定時(shí)間后，再接種等量的N3、Y1、W3菌懸液。繼續(xù)發(fā)酵一定時(shí)間后；稱(chēng)取10g固態(tài)發(fā)酵物，梯度稀釋后，用_______法統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)。推測(cè)加入里氏木霉菌懸液的用途是：_______。

（3）分別在不同的_______；_______、接種量和發(fā)酵時(shí)間等條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；最終確定最佳發(fā)酵條件后就可以進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。

（4）用發(fā)酵得到的復(fù)合微生物菌肥進(jìn)行煙草幼苗盆栽實(shí)驗(yàn)；測(cè)得栽培40天時(shí)葉片的凈光合速率如下表所示?？傻贸龅慕Y(jié)論是：_______。

。盆栽基質(zhì)土肥比例凈光合速率（μmol·m-2·s-1）珍珠巖57g泥炭土150g0．5珍珠巖57g泥炭土145g、菌肥5g2．6珍珠巖57g泥炭土140g、菌肥10g4．0珍珠巖57g泥炭土120g、菌肥30g2．1（5）將玉米秸稈發(fā)酵制備的微生物菌肥用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，其優(yōu)越性是：_______。（寫(xiě)出2點(diǎn)即可）29、胚胎干細(xì)胞。

（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于______中分離出來(lái)。

（2）具有_____的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為_(kāi)_____小，_____大，______明顯；在功能上，具有______，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以______而不發(fā)生______，可進(jìn)行______保存，也可進(jìn)行______。30、大麗輪枝菌（一種絲狀真菌）是引起棉花黃萎病的主要病原菌；因此對(duì)其研究至關(guān)重要。為觀察大麗輪枝菌對(duì)棉花根的侵染路徑，研究人員通過(guò)基因工程培育出了表達(dá)綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株。以下是其主要過(guò)程，分析回答：

（1）據(jù)圖分析，過(guò)程①表示利用______________技術(shù)獲取和擴(kuò)增兩端含有酶切位點(diǎn)的綠色熒光蛋白基因（sGFP），為保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在目的基因兩端添加______________限制酶的識(shí)別序列。

（2）過(guò)程②表示基因工程的第二個(gè)步驟：______________。首先需要利用上述兩種限制酶對(duì)sGFP片段和質(zhì)粒進(jìn)行剪切，圖中質(zhì)粒大片段的左端產(chǎn)生的黏性末端為_(kāi)_____________。然后利用______________進(jìn)行重組質(zhì)粒的連接。

（3）此研究中利用______________法將sGPP導(dǎo)入大麗輪枝菌。為了獲得所需的農(nóng)桿菌，可用______________處理農(nóng)桿菌，然后將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中，接著在含有_______________的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，利用______________法進(jìn)行接種；培養(yǎng)后獲得菌落。

（4）選擇不同的農(nóng)桿菌菌落，分別提取細(xì)菌質(zhì)粒DNA，并用上述限制酶完全酶切后電泳，結(jié)果如下，請(qǐng)判斷______________泳道為重組質(zhì)粒的酶切結(jié)果，判斷依據(jù)是______________。

（5）在獲得高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因大麗輪枝菌后，將其接種到棉花根部，通過(guò)持續(xù)觀察______________以確定其對(duì)棉花根部的侵染路徑，為棉花黃萎病的治療提供依據(jù)。31、水稻穗粒數(shù)可影水稻產(chǎn)量。研究者篩選到一株穗粒數(shù)異常突變體；并進(jìn)行了相關(guān)研究。

（1）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA序列，可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的___________中；導(dǎo)致被插入的基因功能喪失。研究者用此方法構(gòu)建水稻突變體庫(kù)，并從中篩選到穗粒數(shù)異常突變體。

（2）研究者分別用EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶處理突變體的總DNA；用HindⅢ處理野生型的總DNA，處理后進(jìn)行電泳，使長(zhǎng)短不同的DNA片段分離。電泳后的DNA與DNA分子探針（含放射性同位素標(biāo)記的T-DNA片段）進(jìn)行雜交，得到下圖所示放射性檢測(cè)結(jié)果。

（注：T-DNA上沒(méi)有EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶的酶切位點(diǎn)）

根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，可分析得到___________

A．突變體雜交帶的位置不同；是由于不同限制酶切割后含T-DNA的片段長(zhǎng)度不同。

B．結(jié)果表明野生型水稻DNA中不存在HindⅢ的酶切位點(diǎn)；突變體水稻細(xì)胞中有農(nóng)桿菌。

C．突變體均出現(xiàn)雜交帶；野生型無(wú)條帶，表明T-DNA已成功轉(zhuǎn)移到水稻DNA中。

D．突變體最可能為T(mén)-DNA單個(gè)位點(diǎn)插入；因?yàn)椴煌拗泼柑幚矶贾坏玫揭粭l雜交帶。

（3）研究者用某種限制酶處理突變體的DNA（如下圖所示），用___________將兩端的黏性末端連接成環(huán)，以此為模板，再利用圖中的引物___________組合進(jìn)行PCR；擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列。經(jīng)過(guò)與野生型水稻基因組序列比對(duì)，確定T-DNA插入了2號(hào)染色體上的B基因中。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，該突變體產(chǎn)量明顯低于野生型，據(jù)此推測(cè)B基因可能___________（填“促進(jìn)”或“抑制”）水稻穗粒的形成。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配置、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；黑曲霉廣泛分布于世界各地的糧食、植物性產(chǎn)品和土壤中；是重要的發(fā)酵工業(yè)菌種，黑曲霉可以用于醬油、檸檬酸、凝乳酶的工業(yè)生產(chǎn)，A正確；

B；發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)；B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵工程的優(yōu)良性狀的菌種可以從自然界中篩選出來(lái)；也可以通過(guò)誘變育種和基因工程育種獲得，C錯(cuò)誤；

D；單細(xì)胞蛋白是微生物菌體；可采用沉淀、過(guò)濾等方法分離，而代謝產(chǎn)物則采用蒸餾、萃取、離子交換等方法，D錯(cuò)誤。

故選A。2、A【分析】轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；基因身份證即記錄有個(gè)人某些基因資訊的“身份證”；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒所引發(fā)的主要問(wèn)題是不適合的胚胎的處理問(wèn)題；B錯(cuò)誤；

C；生物武器的生產(chǎn)、儲(chǔ)運(yùn)和使用都將對(duì)受害國(guó)的民眾以及世界上愛(ài)好和平的人們?cè)斐蓸O度恐慌和危害；我們應(yīng)堅(jiān)決禁止生物武器，C錯(cuò)誤；

D；轉(zhuǎn)基因生物的安全問(wèn)題包括三個(gè)方面：生物安全、食物安全和環(huán)境安全；D錯(cuò)誤。

故選A。3、B【分析】【分析】

1；試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；

B；我國(guó)禁止生殖性人克隆實(shí)驗(yàn)；允許治療性克隆研究，B正確；

C；用轉(zhuǎn)基因食品不會(huì)導(dǎo)致外源基因轉(zhuǎn)入人體細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；變異的流感病毒不是新病毒；接種流感疫苗對(duì)預(yù)防變異的流感病毒感染有一定效果，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶三種組分。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖；第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

【詳解】

A；牛、羊等草食動(dòng)物不能合成纖維素酶；它們之所以能利用纖維素是因?yàn)樗鼈兊牧鑫钢杏性S多微生物可分泌纖維素酶，A錯(cuò)誤；

B、纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種組分；B錯(cuò)誤；C；纖維素被纖維素酶分解后的產(chǎn)物是葡萄糖，葡萄糖不能提供氮源，C錯(cuò)誤；

D；能分解纖維素的微生物都能產(chǎn)生纖維素酶；它們通過(guò)纖維素酶來(lái)分解纖維素，D正確。

故選D。5、C【分析】【分析】

1；培養(yǎng)微生物時(shí)；培養(yǎng)基中需要加入碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水，還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求等。

2；能夠分解利用尿素的細(xì)菌；其細(xì)胞內(nèi)含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進(jìn)一步利用，只含有尿素作為N源的培養(yǎng)基對(duì)微生物具有選擇作用。

【詳解】

A、分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型，不能以CO2作為碳源；A錯(cuò)誤；

B；倒平板時(shí)；不能將打開(kāi)的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免微生物污染，正確的做法是：用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯(cuò)誤；

C、無(wú)機(jī)鹽可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定，所以培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定；C正確；

D；在完全正確的操作情況下；空白對(duì)照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落。若空白對(duì)照組出現(xiàn)菌落，說(shuō)明操作過(guò)程中存在微生物污染，屬于實(shí)驗(yàn)失誤，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用，D錯(cuò)誤。

故選C。6、A【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。醋酸菌是種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

【詳解】

A；水煮沸后直接用于浸曲；會(huì)使酵母菌失活，A錯(cuò)誤；

B；在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中；酵母菌能大量繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制，B正確；

C、晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖；C正確；

D；酒精發(fā)酵實(shí)際上利用酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的過(guò)程；而醋酸菌是需氧菌，無(wú)氧環(huán)境下不能生存，D正確。

故選A。7、C【分析】【分析】

制作果酒利用的微生物是酵母菌；它的異化作用類(lèi)型是兼性厭氧型；制作果醋利用的微生物是醋酸菌，它的異化作用類(lèi)型是需氧型。

果酒制作的原理：在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。方程式:C?H??O?2C?H?OH+2CO?

醋酸菌在30-35℃有氧條件下糖源充足時(shí)；將葡萄糖分解成醋酸；糖源缺乏時(shí)，將乙醇變成乙醛再變成醋酸。

【詳解】

A；若適當(dāng)增加酵母菌的接種量；則可以縮短發(fā)酵的時(shí)間，A正確；

B；酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；酒精具殺菌作用，發(fā)酵液中酒精積累是細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一，B正確；

C；醋酸菌是需氧菌；且果醋發(fā)酵溫度高于果酒發(fā)酵溫度，因此果酒制成后需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高并且通入氧氣的環(huán)境中才可制作果醋，C錯(cuò)誤；

D；葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響酵母菌的發(fā)酵過(guò)程；進(jìn)而影響果酒品質(zhì)，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖；作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；以根尖分生區(qū)為材料通過(guò)組織培養(yǎng)可以獲得的脫毒苗；但不是新品種，A錯(cuò)誤；

B；單倍體育種包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素加倍兩個(gè)步驟；對(duì)于二倍體生物而言，經(jīng)該方法得到的都是純合子，能明顯縮短育種時(shí)間，B錯(cuò)誤；

C；在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；愈傷組織的分裂能力強(qiáng)，處于分裂狀態(tài)，因此它們?nèi)菀资艿脚囵B(yǎng)條件和誘變因素的影響而產(chǎn)生突變，C正確；

D；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；可以通過(guò)培養(yǎng)更多的細(xì)胞從而提高次生代謝物的產(chǎn)量，但不可以提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，D錯(cuò)誤。

故選C。9、A【分析】【分析】

分析題圖：①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)；將目的基因（血清白蛋白基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程；④是重組細(xì)胞；⑤是早期胚胎；⑤～⑥采用了胚胎分割技術(shù)，對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；⑥～⑦表示胚胎移植過(guò)程；⑧是轉(zhuǎn)基因生物（乳腺生物反應(yīng)器）。

【詳解】

A；在⑤的囊胚階段DNA分析；進(jìn)行性別鑒定，取樣部位為滋養(yǎng)層細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚；B正確；

C；以上過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)中；屬于細(xì)胞工程的有核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；屬于胚胎工程的是早期胚胎培養(yǎng)、胚胎分割、胚胎移植，C正確；

D；啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)；用于驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，血清白蛋白基因只在奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)與是否有啟動(dòng)子有關(guān)，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組，D正確。

故選A。二、多選題(共5題，共10分)10、A:C【分析】【分析】

質(zhì)粒是細(xì)胞染色體外能夠復(fù)制得很小的環(huán)狀DNA分子。廣義上說(shuō)幾乎所有的細(xì)胞都有質(zhì)粒(比如線(xiàn)粒體DNA)；狹義上指存在于許多細(xì)菌酵母菌；放線(xiàn)菌等生物中的質(zhì)粒。質(zhì)粒與染色體DNA一樣都是雙鏈DNA分子，質(zhì)粒亦可攜帶遺傳信息，質(zhì)粒上面一般含有幾個(gè)到幾百個(gè)基因，控制著細(xì)菌的抗藥性、固.氮、抗生素生成等性狀。然而質(zhì)粒也有一些與染色體DNA不同的特性。

質(zhì)粒具有以下特點(diǎn)；質(zhì)?？梢元?dú)立復(fù)制；質(zhì)粒很小細(xì)菌質(zhì)粒的分子量乙般較小，約為細(xì)菌DNA的0.5%~3%；質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒(méi)有決定性作用。

【詳解】

A；細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是DNA；質(zhì)粒是某些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中小型的環(huán)狀DNA，質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒(méi)有決定性作用，因此，質(zhì)粒不是細(xì)菌細(xì)胞不可缺少的遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；質(zhì)?？梢元?dú)立復(fù)制；因此，目的基因與質(zhì)粒連接后形成重組質(zhì)粒之后，目的基因可隨著質(zhì)粒DNA的復(fù)制而復(fù)制，質(zhì)粒上有基因存在，如質(zhì)粒上有抗性基因的存在，因此質(zhì)粒還可控制蛋白質(zhì)的表達(dá)，B正確；

C；細(xì)菌細(xì)胞不都含有質(zhì)粒；且每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞不都含有一個(gè)質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；

D；質(zhì)粒是小型的環(huán)狀DNA分子；因此，是由4種脫氧核糖核苷酸脫水縮合而成的，D正確。

故選AC。

【點(diǎn)睛】11、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制。

（2）過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃；引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

【詳解】

A、Mg2+離子濃度對(duì)PCR擴(kuò)增效率影響很大；濃度過(guò)高可降低PCR擴(kuò)增的特異性，濃度過(guò)低則影響PCR擴(kuò)增產(chǎn)量甚至使PCR擴(kuò)增失敗而不出擴(kuò)增條帶，A正確；

B；若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白；則可能會(huì)抑制PCR反應(yīng)中的延伸步驟，導(dǎo)致結(jié)果不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，B正確；

C；若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)；則會(huì)使引物與模板結(jié)合位置錯(cuò)誤，導(dǎo)致擴(kuò)增片段錯(cuò)誤出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物，C正確；

D；若引物間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)；則結(jié)果可能不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物或產(chǎn)物減少，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、B:C:D【分析】【分析】

胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富；目前在醫(yī)學(xué)和生產(chǎn)上應(yīng)用較多的是體外受精；胚胎移植和胚胎分割等，借助這些技術(shù)，可以進(jìn)一步挖掘動(dòng)物的繁殖潛力。哺乳動(dòng)物的體外受精技術(shù)主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等步驟。采集到的卵母細(xì)胞和精子，要分別在體外進(jìn)行成熟培養(yǎng)和獲能處理，然后才能用于體外受精。

【詳解】

A；人工授精后形成的早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)并未與母體子宮建立組織上的聯(lián)系；A錯(cuò)誤；

B；如果是人工授精的方式進(jìn)行輔助生殖技術(shù)；就不需要胚胎移植，B正確；

C；克隆技術(shù)屬于無(wú)性繁殖；試管動(dòng)物的培育涉及精卵結(jié)合，屬于有性生殖，C正確；

D；受體的生殖周期將影響人工授精和試管動(dòng)物技術(shù)的成功率；故人工授精和試管動(dòng)物技術(shù)都要注意受體的生殖周期，D正確。

故選BCD。13、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法。

（1）平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)?，D正確。

故選ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

1；單倍體：體細(xì)胞中具有本物種配子染色體數(shù)的個(gè)體；個(gè)體發(fā)育的起點(diǎn)是配子。獲取方法是花藥離體培養(yǎng)。單倍體育種的方法：花藥離體培養(yǎng)和用秋水仙素處理幼苗。

2；基因工程的步驟：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞不一定能表達(dá)；A錯(cuò)誤；

B；該品種的培育利用了基因工程、雜交育種、單倍體育種技術(shù)；B正確；

C；該品種的培育涉及基因工程、雜交育種、單倍體育種等操作；培育過(guò)程利用了基因重組、染色體變異等原理，沒(méi)有利用基因突變，C錯(cuò)誤；

D；該新品種依然是二倍體；沒(méi)有證據(jù)表明其是一個(gè)新物種，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快揮發(fā)16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無(wú)機(jī)鹽17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2018、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。22、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類(lèi)個(gè)體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類(lèi)個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共12分)24、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細(xì)胞后；接著對(duì)其進(jìn)行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，獲得去核的卵母細(xì)胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細(xì)胞。

故該表述錯(cuò)誤。25、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共18分)26、略

【分析】【分析】

1；微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)溶化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板、劃線(xiàn)接種、在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分；微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)適量稀釋后，均勻涂布在固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2；常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有水；碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽；在除上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

（2）制備固體培養(yǎng)基的基本步驟有：計(jì)算→稱(chēng)量→溶化→滅菌→倒平板。等平板冷卻凝固后；應(yīng)將平板倒置，這樣做的目的是，防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面對(duì)培養(yǎng)基造成污染，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快的揮發(fā)。

（3）由圖和分析可知；A；B、C為通過(guò)稀釋涂布平板法得到的菌落（菌落分布較均勻），D為通過(guò)平板劃線(xiàn)法得到的菌落（菌落分布在線(xiàn)條上）。

故選ABC。

（4）為保持濾紙的干燥；滅菌時(shí)應(yīng)用干熱滅菌法，不宜采用高壓蒸汽滅菌法。將滅菌的濾紙片分別放入適宜濃度的玫瑰精油和無(wú)菌水中（對(duì)照）浸泡10min，再將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面，最后將平板放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)48h。通過(guò)測(cè)量透明圈直徑(抑菌圈直徑)可判斷玫瑰精油對(duì)5種供試細(xì)菌的抑制效果，抑菌圈越大，說(shuō)明抑制作用越強(qiáng)。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的培養(yǎng)、篩選、瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油的抑菌情況等知識(shí)，要求識(shí)記培養(yǎng)基的成分、篩選方法，熟練掌握實(shí)驗(yàn)步驟。【解析】ABC干熱無(wú)菌水透明圈的直徑（大?。?7、略

【分析】【分析】

1、微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇送?，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

(1)

取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后；對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)

A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)；說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌種類(lèi)較多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)是氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)基乙含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果；培養(yǎng)基甲不含蛋白胨（氮源），菌落無(wú)法在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；培養(yǎng)基丙不含凝固劑（瓊脂），無(wú)法形成固體培養(yǎng)基，無(wú)法在培養(yǎng)基表面形成菌落。檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格，可將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)

伊紅為酸性染料；美藍(lán)為堿性染料。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。由圖可知3號(hào)菌落為大腸桿菌菌落。

(4)

采用平板劃線(xiàn)法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后；發(fā)現(xiàn)第一劃線(xiàn)區(qū)域上都不間斷長(zhǎng)滿(mǎn)菌落，第二劃線(xiàn)區(qū)域幾乎無(wú)菌落，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線(xiàn)或未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線(xiàn)。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記微生物接種的方法、菌落計(jì)數(shù)、以及菌種保存等知識(shí)，意在考查考生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握和靈活運(yùn)用基礎(chǔ)知識(shí)的能力?！窘馕觥?1)將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞；進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)多乙培養(yǎng)基乙含有碳源；氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)3

(4)第一次劃線(xiàn)后接種環(huán)灼燒后沒(méi)有冷卻；未從第一次劃線(xiàn)區(qū)開(kāi)始劃線(xiàn)六、綜合題(共4題，共36分)28、略

【分析】【分析】

在微生物培養(yǎng)中；各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

【詳解】

（1）固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)?，因此菌株N3的培養(yǎng)基中不需要氮源，N3對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基甲；水解有機(jī)磷的菌株W3，在培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)磷（植酸鈣），故W3對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基乙；丙培養(yǎng)基中有Ca3(PO4)2，對(duì)應(yīng)釋放不溶性無(wú)機(jī)磷的Y1。

（2）粉碎后的玉米秸稈滅菌采用高壓蒸汽滅菌法；要統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)；用稀釋涂布平板法；推測(cè)在粉碎的秸稈溶液中加入里氏木霉菌懸液的用途是，初步分解玉米秸稈中的物質(zhì)，使其容易被目的菌吸收利用。

（3）分別在不同的溫度和pH；接種量和發(fā)酵時(shí)間等條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；最終確定最佳發(fā)酵條件后就可以進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。

（4）從表格數(shù)據(jù)可以看出；加了菌肥后，凈光合速率都比對(duì)照組要高，故可以得出結(jié)論：復(fù)合微生物菌肥能促進(jìn)煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)。

（5）將玉米秸稈發(fā)酵制備的微生物菌肥用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)；其優(yōu)越性是：降低或替代化學(xué)肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導(dǎo)致的病蟲(chóng)害。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)和篩選的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分等，能挖掘題干信息，分析題干情境準(zhǔn)確作答?！窘馕觥考?、丙、乙高壓蒸汽涂布平板初步分解玉米秸稈中的物質(zhì)，使其容易被目的菌吸收利用溫度pH復(fù)合微生物菌肥能促進(jìn)煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)降低或替代化學(xué)肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導(dǎo)致的病蟲(chóng)害29、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】（1）早期胚胎或從原始性腺。

（2）胚胎細(xì)胞體積細(xì)胞核核仁發(fā)育的全能性增殖分化冷凍遺傳改造30、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）結(jié)合圖示可知；過(guò)程①表示利用PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增兩端含有酶切位點(diǎn)的綠色熒光蛋白基因的過(guò)程，為保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中并且準(zhǔn)確連接，由于目的基因需要連接在啟動(dòng)子和終止子之間，還需要在目的基因兩端添加限制酶HindⅢ和BamHⅠ的識(shí)別序列，因?yàn)槭褂貌煌N限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，可以產(chǎn)生不同的黏性末端，防止目的基因和載體反向連接，自身環(huán)化。

（2）過(guò)程②為目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建；是基因工程的核心步驟。該構(gòu)成中首先需要利用上述兩種限制酶對(duì)sGFP片段和質(zhì)粒進(jìn)行剪切，圖中質(zhì)粒大片段的左端的限制酶是HindⅢ，根據(jù)HindⅢ識(shí)別的堿基序列可知，圖中質(zhì)粒大片段的左端的黏性末端堿