2025年外研銜接版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研銜接版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷740考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列有關(guān)利用酵母菌生產(chǎn)食品的敘述，正確的是（）A.果酒制作過程中產(chǎn)生的CO2來自線粒體基質(zhì)B.酵母菌在有氧條件下會將酒精氧化成果醋C.酵母菌在有氧條件下可將豆腐發(fā)酵成腐乳D.酵母菌在無氧條件下可制作泡菜2、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進甲牛多排卵，然后把卵子在體外與人工采集的乙牛的精子進行受精，在特定培養(yǎng)基中培育成胚胎，再把胚胎送入經(jīng)過激素處理的丙牛的子宮內(nèi)，孕育成試管牛。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.精、卵結(jié)合前都需進行培養(yǎng)B.“促進甲牛多排卵”的激素是孕激素C.甲牛、乙牛對試管牛核遺傳物質(zhì)的貢獻相同D.該技術(shù)可應(yīng)用于加快優(yōu)良種畜的繁殖3、土壤農(nóng)桿菌含有一個大型的Ti質(zhì)粒，在侵染植物細胞的過程中，其中的T-DNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。若想用基因工程手段獲取抗旱植株，以下分析不合理的是（）A.若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復制起始點和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞B.將重組Ti質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌中時，可以用鈣離子處理細菌C.用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞后，可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到具有抗旱基因的植物D.若能在植物細胞中檢測到抗旱基因，則說明該基因工程項目獲得成功4、隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，“基因污染”應(yīng)運而生，關(guān)于基因污染的說法不正確的是A.轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫B.基因污染是一種不可以擴散的污染C.雜草、害蟲從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性D.轉(zhuǎn)基因生物有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存5、下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.動物細胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，充足的營養(yǎng)，適宜的溫度和pH等條件B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶處理，使細胞從瓶壁上脫離，制成細胞懸液D.干細胞只存在于早期胚胎中6、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細胞壁碎片上，靜置一段時間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（）

A.提取DNA時可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點，而有限制酶III的切割位點7、下列關(guān)于PCR過程的敘述，正確的是（）A.在高溫條件下，DNA的磷酸二酯鍵斷裂形成2條DNA單鏈B.解旋后，2條單鏈上和引物結(jié)合的部分的堿基序列相同C.在DNA聚合酶的作用下，2條單鏈和各自的子鏈螺旋形成2個新的DNAD.通過控制PCR儀的溫度，可重復循環(huán)多次PCR，使DNA數(shù)量呈指數(shù)式增長8、T4溶菌酶來源于T4噬菌體，是重要的工業(yè)用酶?？茖W家通過一定技術(shù)使T4溶菌酶的第3位異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼幔ó惲涟彼岬拿艽a子是AUU、AUC、AUA，半胱氨酸的密碼子是UGU、UGC），于是在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成一個二硫鍵，從而使T4溶菌酶的耐熱性得到了提高。下列敘述錯誤的是（）A.對T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程的范疇B.上述改造通過至少替換T4溶菌酶DNA上的2個堿基對實現(xiàn)C.參與新的T4溶菌酶合成的tRNA種類會發(fā)生改變D.改造后的T4溶菌酶中的二硫鍵的作用類似于DNA中的氫鍵評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、營養(yǎng)缺陷性菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長因子的能力；只能在補充了相應(yīng)的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個培養(yǎng)皿都可能存在營養(yǎng)缺陷型10、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的正確觀點是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計試管嬰兒B.基于科學和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交11、土壤被稱為“微生物的天然培養(yǎng)基”?？茖W工作者要從土壤中分離或鑒定需要的微生物，需要配制選擇培養(yǎng)基，再通過接種、培養(yǎng)、純化、篩選等技術(shù)獲得微生物。下列關(guān)于培養(yǎng)基對微生物的分離或鑒定的敘述，正確的是（）A.從土壤中分離出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培養(yǎng)基，在滅菌后將培養(yǎng)基調(diào)至酸性B.從土壤中分離出纖維素的分解菌，需要配制含纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基且加剛果紅C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，采用稀釋涂布平板法可分離出分解尿素的分解菌D.從土壤中分離固氮微生物需要配制不含氮源的培養(yǎng)基，且培養(yǎng)條件要適宜12、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種13、某女子的線粒體存在遺傳缺陷，研究人員取其卵細胞的細胞核，注入捐獻者的去核卵細胞中，經(jīng)體外培養(yǎng)、體外受精和早期壓胎培養(yǎng)，將早期胚胎移入該女子的子宮內(nèi)并發(fā)育成胎兒，該嬰兒稱為“三體嬰兒”。下列說法錯誤的是（）A.“三體嬰兒”同時含有父親、母親及卵細胞捐獻者的部分基因B.該技術(shù)能避免“三體嬰兒”攜帶父親和母親染色體上的致病基因C.在體外受精前，完成核移植的卵細胞需處于MⅡ期D.在體外受精前，可根據(jù)該夫妻的意愿選擇X精子或Y精子14、在中國的傳說中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時發(fā)酵過頭，直至第21天開缸時，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細胞的線粒體中產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴或發(fā)酵裝置沒有清洗干凈D.釀酒時糖類未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多15、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥是一種單基因遺傳病；下圖為該病的某家系圖，這對夫婦為了避免再次妊娠患兒，胚胎植入前進行了遺傳學檢測（PGD），檢測結(jié)果如下表，以下敘述正確的是（）

。胚胎編號PGD檢測結(jié)果EA1攜帶母源致病基因EA2無致病基因EA3攜帶母源致病基因EA4攜帶母源致病基因EA5攜帶父源致病基因EA6致病基因純合EA7單細胞擴增失敗A.檢測時應(yīng)選擇滋養(yǎng)層的少許細胞進行檢測B.該過程中未用到核移植技術(shù)C.該技術(shù)可能會引發(fā)一定的倫理爭議D.EA1～EA5均可以作為植入的胚胎16、發(fā)酵工程與農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及其他工業(yè)生產(chǎn)有著密切的聯(lián)系。下列對發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在后發(fā)酵階段完成B.食品添加劑雖能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)，但會降低食品的營養(yǎng)C.將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗D.利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋病是生物防治的有效手段評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實驗室，走進人們的生產(chǎn)和生活。請回答下面有關(guān)酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。18、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應(yīng)中，細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。19、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。20、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。21、我國政府同樣禁止進行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()22、應(yīng)用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共4題，共8分)23、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤24、制備單克隆抗體時，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯誤25、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤26、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共20分)27、（1）國家生活飲用水衛(wèi)生標準中規(guī)定細菌學指標的限值：細菌總數(shù)為100CFU/mL（說明：CFU為菌落形成單位）。興趣小組同學通過濾膜法對某小區(qū)自供水設(shè)備的蓄水池進行細菌總數(shù)測定，將10mL的水樣進行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)時應(yīng)將平板倒置，其原因是___________________。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供________和_______外，還能提供磷酸鹽和________。在培養(yǎng)過程中，不同時間所觀察到的平板上菌落特征的差異有___________（至少寫出兩點）。

（3）上述檢測過程在37℃條件下經(jīng)24h培養(yǎng)后；測得如下結(jié)果：

。平板l平板2平板3細菌總數(shù)（CFU/mL）413538據(jù)上表結(jié)果判斷，所取水樣測定結(jié)果是_________________。28、人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大；通常從人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重，如果應(yīng)用基因工程等技術(shù)，將人的血消白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細胞中，那么利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過程如下：

I．采用良種供體奶牛的卵母細胞和精子；通過體外受精，形成受精卵；

II．將人血消白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ芫?；形成重組細胞；

III．電脈沖刺激重組細胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中；最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

請回答下列問題：

（1）實驗步驟Ⅰ中，受精時，防止多精入卵的生理反應(yīng)包括____________________。

（2）實驗步驟Ⅱ中，需先構(gòu)建基因表達載體，將HSA基因與__________等調(diào)控組件重組在一起；再導入奶牛受精卵。

（3）實驗步驟Ⅲ中，進行動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加__________。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（4）實驗步驟Ⅳ中，應(yīng)選擇性別為__________的奶牛胚胎進行移植；對早期胚胎（如囊胚）進行性別鑒定的常用方法是____________________。移植前還需要檢測目的基因是否成功導入受精卵，檢測方法是采用__________技術(shù)。29、隨著游泳運動的普及；游泳池水質(zhì)安全問題越來越受到人們的重視。在游泳池池水凈化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物進行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，但游離性余氯含量過高會影響人體健康。國家標準規(guī)定的人工游泳池水質(zhì)指標衛(wèi)生標準包括游離性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成單位不得超過200個/mL等指標。研究人員對某地學校、酒店、健身會所、社區(qū)等場所游泳池水進行抽樣監(jiān)測，其中，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測的實驗步驟如下：

①采樣瓶的預處理：在采樣瓶中加入適量的Na2S2O3溶液后對采樣瓶進行滅菌處理。

②采樣：在客流高峰時段進行采樣。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接種：用滅菌吸管吸取水樣1mL；注入滅菌培養(yǎng)皿中。將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿15mL。立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。平行重復若干實驗組。

④計數(shù)：待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿；置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落數(shù)，并求平均值。

回答下列問題：

(1)檢測游泳池活細菌總數(shù)時，不宜用細菌計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯。據(jù)此分析步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液，對檢測的意義是_____________。

(3)步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在____________附近進行。為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置____________個實驗組。步驟③中還應(yīng)增加對照組，下列不宜作為對照組的是______________。

a．15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

b．1m無菌水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

c．1mL蒸餾水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

(4)步驟④中，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為_____________。若觀察到培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿中的菌落連成一片，則該培養(yǎng)皿不宜計數(shù)。出現(xiàn)成片的菌落的原因可能步驟③中_____________操作不妥當造成的。

(5)不同季度微生物檢測結(jié)果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．氣溫升高b．客流量增加。

c．檢測的場館數(shù)多d．泳池氯化時間過長。季度檢測場館數(shù)合格場館數(shù)合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理。下列屬于提升游泳池水質(zhì)安全性的合理建議有____________。

a．強制要求個人淋浴后入池b．增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次。

c．游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置d．每日在臨近開館前氯化消毒30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)31、常用的剛果紅染色法有兩種；一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。

方法一在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1mg/mL的CR溶液，10～15min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為1mol/L的___________，15min后倒掉NaCl溶液，此時，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)_________________。

方法二配制質(zhì)量濃度為10mg/mL的CR溶液，_____________后，按照每200mL培養(yǎng)基加入1mL的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出菌落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈。32、試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)發(fā)展到第三代。與第一代；第二代試管嬰兒相比；第三代試管嬰兒站在基因遺傳學的角度使試管嬰兒技術(shù)有了新的突破。一對患有遺傳性多囊腎病的夫妻在某市醫(yī)院順利產(chǎn)下一名健康男嬰，這是該市首例胚胎植入前遺傳學診斷阻斷遺傳性成人型多囊腎的試管嬰兒。第三代試管嬰兒流程如圖所示，回答下列問題：

(1)為了獲得多個卵母細胞，需對母體注射激素，以達到超數(shù)排卵的目的。受精時卵母細胞為防止多精入卵的兩道屏障是______。對于質(zhì)量比較差的精子需要通過_______技術(shù)將精子直接注入卵母細胞中。

(2)培養(yǎng)受精卵細胞時，需在培養(yǎng)液中加入_________等天然成分，同時需提供5%的CO2氣體的目的是_______。

(3)早期胚胎需要培養(yǎng)至______期才能移植入母體的子宮。

(4)試管嬰兒技術(shù)與體細胞核移植技術(shù)所依據(jù)的生物學原理是否相同，并請說明原因。_________33、某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導致相應(yīng)的基因失活（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后；與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因；含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有______________（答出兩點即可）。

而作為基因表達載體；除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。

（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的，其原因是______________；并且______________和______________的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是_____________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有_____________的固體培養(yǎng)基。

（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復制所需的原料來自于_____________參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、C【分析】【分析】

酵母菌為真核生物；是一種兼性厭氧生物，在有氧條件下可以進行有氧呼吸，無氧條件下可以進行無氧呼吸。

【詳解】

A、果酒制作利用的是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，該過程中產(chǎn)生的CO2來自細胞質(zhì)基質(zhì)；A錯誤；

B；在有氧的條件下可將乙醇氧化成醋酸的是醋酸菌；B錯誤；

C；酵母菌在有氧條件下可將豆腐發(fā)酵成腐乳；C正確；

D；在無氧條件下制作泡菜；選用乳酸菌，D錯誤。

故選C。2、B【分析】【分析】

1；試管牛培育受精前的準備階段：準備階段1——精子獲能：剛剛排出的精子；不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；準備階段2——卵子的準備：動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內(nèi)進一步成熟，達到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力。

2；用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子直接與獲能的精子體外受精。

3；胚胎移植的意義：（1）加速育種工作和品種改良；（2）大量節(jié)省購買種畜的費用；（3）一胎多產(chǎn)；（4）保存品種資源和瀕危物種；（5）可充分發(fā)揮優(yōu)秀個體的繁殖潛力。

【詳解】

A；精卵結(jié)合前都需進行培養(yǎng)；精子必需經(jīng)過獲能處理，卵細胞必需發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期，才具備受精能力，A正確；

B；用促性腺激素會促使雌性個體超數(shù)排卵；B錯誤；

C；兩性配子結(jié)合為有性生殖；細胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術(shù)可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數(shù)量，D正確。

故選B。3、D【分析】【分析】

農(nóng)桿菌的特點是易感染雙子葉植物和裸子植物；對單子葉植物沒有感染力。農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化過程：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA→農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能從題文提取有效信息，并結(jié)合所學知識，對生物學問題作出準確判斷的能力。

【詳解】

A；土壤農(nóng)桿菌含有一個大型的Ti質(zhì)粒；在侵染植物細胞的過程中，其中的T-DNA片段可轉(zhuǎn)入植物的基因組，所以若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體時，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復制起始點和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞，A正確；

B、將目的基因?qū)爰毦鷷r，需要用Ca2+處理細菌；使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)，B正確；

C；用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細胞；使其具有抗旱基因，然后再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細胞培養(yǎng)成具有抗旱基因的植物，C正確；

D；能夠在植物細胞中檢測到抗旱目的基因；只能說明目的基因?qū)氤晒?，不能說明該基因成功表達，即不能說明該基因工程項目獲得成功，D錯誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因作物的花粉能夠散落到它的近親作物上；導致轉(zhuǎn)基因擴散，從而污染生物基因庫，A正確；

B；基因污染可以隨著轉(zhuǎn)基因生物的花粉傳播而擴散；是一種可以擴散的污染，B錯誤；

C；雜草、害蟲可以與它的感染轉(zhuǎn)基因的近親雜交；進而從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因生物獲得的某些特殊性狀；增強了它們在該地區(qū)生存條件下的競爭能力，有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，D正確。

故選B。

【點睛】5、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；培養(yǎng)動物細胞需要充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH、無菌、無毒的環(huán)境和一定的氣體環(huán)境等條件；A正確；

B；動物細胞培養(yǎng)時；先用胰蛋白酶處理組織使其分散成單個細胞，B正確；

C；細胞存在接觸抑制；因此在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液進行傳代培養(yǎng)，C正確；

D；根據(jù)干細胞所處的發(fā)育階段分為胚胎干細胞和成體干細胞；胚胎干細胞是哺乳動物或人早期胚胎中的細胞，成體干細胞存在于機體的各種組織器官中，D錯誤。

故選D。6、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，B正確；

C；DNA帶負電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，C正確；

D；因為質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，D錯誤。

故選D。7、D【分析】【分析】

PCR技術(shù)的條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；在高溫條件下；DNA的之間的氫鍵斷裂形成2條DNA單鏈，A錯誤；

B；解旋后；2條單鏈上和引物結(jié)合的部分的堿基序不同，因為PCR技術(shù)中需要兩種引物，B錯誤；

C；在耐高溫的DNA聚合酶的作用下；以2條單鏈分別為模板在引物的3’端延伸形成各自的子鏈，C錯誤；

D；PCR技術(shù)中一次循環(huán)需要的步驟為高溫變性、低溫復性、中溫延伸；可見通過控制PCR儀的溫度，可重復循環(huán)多次PCR，使DNA數(shù)量呈指數(shù)式增長，D正確。

故選D。8、C【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

A；對蛋白質(zhì)分子的設(shè)計和改造是通過蛋白質(zhì)工程來實現(xiàn)的；故對T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程的范疇，A正確；

B；根據(jù)題意；要將T4溶菌酶的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，只改變一個氨基酸，發(fā)生的是堿基的替換；兩種氨基酸最接近的密碼子是AUU和UGU，或AUC和UGC，仍然相差兩個堿基，由于DNA是雙鏈結(jié)構(gòu)，故對應(yīng)的DNA上的堿基至少要替換2個堿基對，B正確；

C；改造前組成T4溶菌酶的氨基酸中就含有半胱氨酸；改造后組成T4溶菌酶的氨基酸中也可能仍含有異亮氨酸，因此參與其合成的tRNA種類可能不變，C錯誤；

D；改造后的T4溶菌酶多了一個二硫鍵；二硫鍵使T4溶菌酶的耐熱性提高；DNA分子中氫鍵越多，熱穩(wěn)定性越強，二者作用類似，D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)9、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過足夠稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養(yǎng)皿的菌落均勻分布；接種方法應(yīng)為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿菌株是某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是加入了同種營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯誤。

故選AC。10、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

我國反對以克隆人為目的任何實驗和舉動；主要是基于以下四方面的倫理考慮：

1；克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)；

2；克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律；

3；克隆人將擾亂社會家庭的正常倫理定位；

4；克隆人的安全性在倫理上也難以確認。

【詳解】

A；設(shè)計試管嬰兒性別會引起性別比例失調(diào)；違背倫理道德，我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A錯誤；

B；基于科學和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗；但不反對治療性克隆，C正確；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯誤。

故選BC。11、B:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長；而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能。

【詳解】

A；青霉素能殺死細菌；對真菌無影響，因此，從土壤中分離出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培養(yǎng)基，且調(diào)試pH需要在滅菌前，A錯誤；

B；纖維素分解菌含纖維素水解酶能利用纖維素；其他微生物不能利用纖維素，剛果紅和纖維素形成紅色復合物，纖維素被分解后出現(xiàn)透明圈，所以能分離和篩選纖維素的分解菌，B正確；

C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再轉(zhuǎn)化NO3-、NH4+被植物利用；其他微生物細胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上不能生長，C正確；

D、固氮菌能利用空氣中N2；其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培養(yǎng)基進行篩選，且培養(yǎng)條件要適宜，D正確。

故選BCD。12、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無菌水，B錯誤；

C；由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。13、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中；使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。原理是動物細胞核具有全能性，克隆動物的遺傳物質(zhì)來自雙親，其核遺傳物質(zhì)來自供核生物，而細胞質(zhì)基因來自提供細胞質(zhì)的生物。

【詳解】

A；三親嬰兒“的細胞核基因一半來自母親；一半來自父親，線粒體基因來自于卵母細胞捐獻者，所以“三親嬰兒”同時擁有自己父親、母親及卵母細胞捐獻者的部分基因，A正確；

B；該技術(shù)能避免“三體嬰兒”攜帶母親細胞質(zhì)中的致病基因；B錯誤；

C；若進行體外受精；應(yīng)使用培養(yǎng)到MⅡ中期的卵母細胞，該時期的細胞才具備完成受精的能力，C正確；

D；國家不能篩選胎兒的性別；則不能選擇X精子或Y精子，D錯誤。

故選BD。14、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物；在酵母菌細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測酒精的產(chǎn)生，B錯誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴，發(fā)酵裝置沒有清洗干凈，導致醋酸菌混入發(fā)酵液中，C正確；

D；在釀酒的過程中；糖類即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過程也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對發(fā)酵起抑制作用，導致酵母菌發(fā)酵停止，D正確；

故選ACD。15、A:B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎植入前遺傳學診斷通常是從體外授精后6～10個細胞階段的胚胎活檢；1～2個細胞進行DNA的分析，將無遺傳病的胚胎植入子宮，從而防止有遺傳病的患兒出生或孕育中發(fā)現(xiàn)問題后，面臨終止妊娠的痛苦。

2；為行PGD而對配子或胚胎進行的操作；在心理和倫理上可能很難被一些患者接受。

【詳解】

A；內(nèi)細胞團的細胞將來發(fā)育成胎兒的各種組織。滋養(yǎng)層細胞；它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤。所以做基因診斷時，通常取少量滋養(yǎng)層細胞診斷是否患有遺傳病，A正確；

B；動物細胞核移植是將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成一個新的個體；該過程中未用到核移植技術(shù)，B正確；

C；該技術(shù)在胚胎移植前進行了遺傳學診斷；若該技術(shù)運用不當，如被用于性別鑒定等，可能會引發(fā)一定的倫理爭議，C正確；

D；分析遺傳系譜圖；該病為常染色體隱性遺傳病，雙親均為雜合子，EA1、EA3、EA4、EA5均為雜合子，EA2是顯性純合，EA1～EA5不患病均可作為植入的胚胎，D正確。

故選ABCD。

【點睛】16、C:D【分析】【分析】

發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：選育菌種：性狀優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選出來；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得。發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵：這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量；產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。分離、提純產(chǎn)物：如果是發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取恰當?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品。

【詳解】

A；啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成；因此啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在主發(fā)酵階段完成，A錯誤；

B；食品添加劑能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)；可以增加食品的營養(yǎng)，B錯誤；

C；通過基因工程技術(shù)；將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗，C正確；

D；利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋??；不會對環(huán)境造成污染，是生物防治的有效手段，D正確。

故選CD。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代21、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤。【解析】錯誤22、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術(shù)有體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應(yīng)用到的技術(shù)為干細胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復制品用于醫(yī)學研究和疾病的治療四、判斷題(共4題，共8分)23、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯誤。24、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，故正確。25、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。本說法正確。26、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，故正確。五、實驗題(共4題，共20分)27、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2；統(tǒng)計菌落數(shù)目使用的方法有顯微鏡直接計數(shù)法和活菌計數(shù)法；其中活菌計數(shù)法即稀釋涂布平板法，一般選擇菌落數(shù)目在30-300的平板進行計數(shù)。

【詳解】

（1）平板倒置后既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可防止冷凝水滴落培養(yǎng)基，造成污染，影響實驗結(jié)果。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供碳源和氮源外；還能提供磷酸鹽和維生素。區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形狀；大小、隆起程度和顏色等特征。

（3）統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的種類和數(shù)目。表格中3個平板的平均菌落數(shù)為（41+35+38）÷3=38個，低于國家標準，因此所取水樣符合飲用水標準。

【點睛】

本題考查微生物分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分，掌握微生物分離和計數(shù)的方法，屬于考綱理解層次的考查。【解析】防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基碳源氮源維生素菌落大小、形狀、隆起程度和顏色等符合飲用水的標準28、略

【分析】1；體外受精過程包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精；其中卵母細胞的采集和培養(yǎng)的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精。

（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞。

（3）第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞；叫活體采卵。

2；受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

（1）受精時；往往一個卵母細胞只能和一個精子結(jié)合，透明帶反應(yīng)是阻止多精入卵的第一道屏障，卵細胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）該實驗是利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)血清白蛋白；因此實驗步驟Ⅱ中構(gòu)建基因表達載體時，需要先將HSA基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，再導入奶牛受精卵。

（3）動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時；培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類；維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要從乳汁中提??；只有雌性奶牛才能產(chǎn)生乳汁，因此胚胎移植時，必須選取雌性奶牛的胚胎進行移植；對早期胚胎（如囊胚）進行性別鑒定的常用方法是取滋養(yǎng)層細胞進行染色體檢查或DNA分析；移植前還需要檢測目的基因是否成功導入受精卵，通常采用DNA分子雜交技術(shù)進行檢測。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握體外受精、受精過程、基因工程等知識，要求考生識記體外受精技術(shù)的過程及方法、受精作用的過程、基因工程的操作步驟及應(yīng)用，并能夠聯(lián)系實際答題。【解析】透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)乳腺蛋白基因的啟動子激素和動物血清清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害雌性取滋養(yǎng)層細胞進行染色體檢查或DNA分析DNA分子雜交29、略

【分析】【分析】

統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（1）

測定培養(yǎng)液中游泳池活細菌總數(shù)可以使用稀釋涂布平板法進行計數(shù)；而顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

（2）

氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測，步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免殘留氯殺菌。

（3）

微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意無菌操作；故步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在酒精燈火焰附近進行；為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置3個實驗組；微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意避免雜菌污染，由于蒸餾水中含有較多的雜質(zhì)和微生物，故不宜用作對照組，故選c。

（4）

步驟④中；用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；出現(xiàn)成片的菌落的原因可能是水樣與培養(yǎng)基沒有混勻，是步驟③中旋搖操作不充分造成的。

（5）

a；氣溫升高會導致微生物繁殖加快；導致合格率降低，a正確；

b、客流量增加，攜帶的微生物增多，導致合格率降低，b正確；

c；由于不同場館分別計數(shù)；故檢測的場館數(shù)多不是導致合格率降低的原因，c錯誤；

d；泳池氯化時間過長會殺滅更多的微生物；不是導致合格率降低的原因，d錯誤。

故選ab。

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理，可增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次、游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置，強制要求個人淋浴后入池不現(xiàn)實，每日在臨近開館前氯化消毒，余氯含量過高會影響人體健康，故選bc?！窘馕觥?1)顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

(2)避免余氯殺菌。

(3)酒精燈火焰3c

(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落旋搖

(5)abbc

30、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA