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4.4.4碳水化合物代謝實(shí)驗(yàn)-VP實(shí)驗(yàn)CARBOHYDRATEMETABOLISMTEST-VPTEST董慧一、原理某些細(xì)菌(如產(chǎn)氣腸桿菌)含丙酮酸脫羧酶,可使分解葡萄糖產(chǎn)生的丙酮酸進(jìn)一步脫羧生成中性的乙酰甲基甲醇,后者在堿性環(huán)境下被氧化成為二乙酰,二乙酰與培養(yǎng)基內(nèi)精氨酸所含胍基發(fā)生反應(yīng),生成紅色化合物(陽(yáng)性)。若培養(yǎng)基中胍基含量少,可加入少量含胍基的化合物如肌酸或肌酐等,以加速其反應(yīng)。葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰紅色(+)OH-胍基化合物充分搖動(dòng)二、實(shí)驗(yàn)方法將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中,35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)后,于2ml培養(yǎng)物中加人VP試劑甲液1ml和乙液0.4ml,充分搖動(dòng)試管,室溫下靜置5~30min,觀察結(jié)果。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)紅色反應(yīng)為陽(yáng)性,若無(wú)紅色出現(xiàn),且置35℃孵育4h后仍無(wú)紅色出現(xiàn)者為陰性。本試驗(yàn)大腸埃希菌為陰性、產(chǎn)氣腸桿菌為陽(yáng)性。-+四、應(yīng)用VP實(shí)驗(yàn)主要用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒別。該實(shí)驗(yàn)可與甲基紅實(shí)驗(yàn)聯(lián)合使用,甲基紅實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性的細(xì)菌,VP實(shí)驗(yàn)通常陰性。感謝觀看
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