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第3節(jié)DNA的復(fù)制一、對(duì)DNA分子復(fù)制的推測(cè)半保留復(fù)制
全保留復(fù)制高密度帶中密度帶低密度帶15N14N15N15N14N14NDNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)密度梯度離心法二、DNA半保留復(fù)制的證據(jù):15N/14N15N/14N14N/14N親代DNA分子
子一代DNA分子(DNA復(fù)制一次)
子二代DNA分子(DNA復(fù)制兩次)DNA復(fù)制計(jì)算1、一個(gè)DNA連續(xù)復(fù)制n次后,共有DNA()個(gè);脫氧核苷酸鏈()條,其中母鏈()條,子鏈()條;含母鏈的DNA()個(gè),只含子鏈的DNA()個(gè)。2、具有100個(gè)堿基對(duì)的1個(gè)DNA分子區(qū)段,內(nèi)含40個(gè)胸腺嘧啶,如果連續(xù)復(fù)制3次,則需游離的胞嘧啶脫氧核苷酸()A.60個(gè)
B.180個(gè)
C.280個(gè)
D.420個(gè)
D解旋:在ATP的驅(qū)動(dòng)下,解旋酶將DNA部分雙螺旋的兩條鏈解開。CGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATACGTATACGGCTAGCCGTA3'5'CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ATP解旋酶二、DNA復(fù)制的過(guò)程合成子鏈:4種脫氧核苷酸按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與兩條母鏈的堿基配對(duì)。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT形成氫鍵二、DNA復(fù)制的過(guò)程在DNA聚合酶的催化下從子鏈的5'端把子鏈的脫氧核苷酸聚合成脫氧核苷酸鏈。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTTACGCAAGCTAGTCATTA5'3'TATGCATGATCGAGCTT5'3'ATPATP
合成方向:子鏈的5'端→3'端形成磷酸二酯鍵二、DNA復(fù)制的過(guò)程形成子代DNA分子:每條新鏈與其對(duì)應(yīng)的模板鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATAA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT5'3'TAGCCGTATAGCCGATAT3'5'TTACGCGTATATATA5'3'二、DNA復(fù)制的過(guò)程1.概念:3.時(shí)間:4.場(chǎng)所:真核生物:細(xì)胞核(主要場(chǎng)所),葉綠體,線粒體;原核生物:細(xì)胞質(zhì)。三、DNA分子的復(fù)制細(xì)胞有絲分裂的間期;減數(shù)第一次分裂的間期。
是指以親代DNA為模板,合成子代DNA的過(guò)程(1DNA→2DNA)。2.特點(diǎn):半保留復(fù)制;邊解旋邊復(fù)制
①模板:親代DNA的兩條母鏈;②原料:游離的4種脫氧核苷酸:③能量:ATP(來(lái)自細(xì)胞呼吸作用);④酶:DNA解旋酶(作用于氫鍵),DNA聚合酶(形成磷酸二酯鍵)三、DNA分子的復(fù)制5.條件1.同位素標(biāo)記法在高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用(1)探究光合作用中元素(原子)的轉(zhuǎn)移①美國(guó)科學(xué)家魯賓和卡門用18O分別標(biāo)記H2O和CO2證明光合作用釋放的氧氣全部來(lái)自水。②卡爾文等用14C標(biāo)記的CO2供小球藻進(jìn)行光合作用,追蹤檢測(cè)其放射性,探明了CO2中的碳在光合作用中轉(zhuǎn)化成有機(jī)物中碳的途徑。(2)證明DNA是遺傳物質(zhì)赫爾希和蔡斯分別用放射性同位素標(biāo)記蛋白質(zhì)和DNA的特征元素,即用32P標(biāo)記噬菌體的DNA,用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì),證明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)。題型特供:同位素標(biāo)記法(3)研究分泌蛋白的合成和運(yùn)輸用3H標(biāo)記亮氨酸,研究分泌蛋白在細(xì)胞中的合成、運(yùn)輸與分泌途徑,證明分泌蛋白在附著于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中合成之后,按照內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→細(xì)胞膜的方向運(yùn)輸,從而證明了細(xì)胞內(nèi)的各種生物膜在功能上是緊密聯(lián)系的。(4)證明DNA分子進(jìn)行半保留復(fù)制用含有15N標(biāo)記的NH4Cl培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌,讓大腸桿菌繁殖幾代,再將大腸桿菌轉(zhuǎn)移到14N的普通培養(yǎng)液中培養(yǎng),然后在不同時(shí)刻收集大腸桿菌并提取DNA,再通過(guò)密度梯度離心來(lái)區(qū)別親代與子代DNA,從而證明DNA的復(fù)制是以半保留的方式進(jìn)行的。(5)研究生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸證明植物生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸時(shí),用同位素14C標(biāo)記莖形態(tài)學(xué)上端的生長(zhǎng)素(吲哚乙酸),可在莖的形態(tài)學(xué)下端檢測(cè)到放射性同位素14C,而標(biāo)記莖形態(tài)學(xué)下端的生長(zhǎng)素,在莖的形態(tài)學(xué)上端檢測(cè)不到放射性同位素14C,說(shuō)明植物生長(zhǎng)素只能從形態(tài)學(xué)上端運(yùn)輸?shù)叫螒B(tài)學(xué)下端。2.與熒光標(biāo)記法的區(qū)別(1)常用的熒光蛋白有綠色和紅色兩種①綠色熒光蛋白(GFP)常用的是來(lái)源于發(fā)光水母的一種功能獨(dú)特的蛋白質(zhì),藍(lán)光或近紫外光照射,發(fā)射綠色熒光。②紅色熒光蛋白來(lái)源于珊瑚蟲,是一種與綠色熒光蛋白同源的
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