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文檔簡介

主干知識排查一、植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性,要經(jīng)過脫分化和再分化兩個階段。2.植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。3.植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素,它們的濃度、比例等都會影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。4.在植物組織培養(yǎng)的過程中,光照條件的控制:脫分化過程中一般不需要光照,再分化過程中需要給予適當(dāng)時間和強度的光照。5.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。6.用纖維素酶和果膠酶去除植物的細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的物理法包括電融合法、離心法等;化學(xué)法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁,是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。7.植物的快速繁殖技術(shù)不僅可以高效、快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖,還可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性。8.單倍體育種先通過花藥(或花粉)培養(yǎng)獲得單倍體植株,然后經(jīng)過誘導(dǎo)染色體加倍,當(dāng)年便可獲得穩(wěn)定遺傳的優(yōu)良品種,極大地縮短了育種年限。9.在植物的組織培養(yǎng)過程中,由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài),因此它們?nèi)菀资艿脚囵B(yǎng)條件和誘變因素的影響而產(chǎn)生突變。從產(chǎn)生突變的個體中可以篩選出對人們有用的突變體,進而培育成新品種。10.植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團進行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)。11.次生代謝不是(填“是”或“不是”)生物生長所必需的,一般在特定的組織或器官中,并在一定的環(huán)境和時間條件下才進行。12.次生代謝物是一類小分子有機化合物(如酚類、萜類和含氮化合物等),在植物抗病、抗蟲等方面發(fā)揮作用,也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。二、動物細(xì)胞工程1.動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞核移植等,其中動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:營養(yǎng);無菌、無毒的環(huán)境;適宜的溫度、pH和滲透壓;適宜的氣體環(huán)境。3.在體外培養(yǎng)動物細(xì)胞時,需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作。需要定期更換培養(yǎng)液,目的是清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害。4.人們通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng),即動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。5.在進行傳代培養(yǎng)時,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集;貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理,使之分散成單個細(xì)胞,然后再用離心法收集。之后,將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,分瓶培養(yǎng)。6.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中,包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。7.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中,具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞,并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。8.成體干細(xì)胞是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞,包括骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞和睪丸中的精原干細(xì)胞等。成體干細(xì)胞的特點:具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個體的能力。9.科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞,包括借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的,后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。10.動物細(xì)胞融合技術(shù)就是使兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的技術(shù)。11.誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。12.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。目前,這一技術(shù)已經(jīng)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段,特別是利用動物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù),為制造單克隆抗體開辟了新途徑。13.經(jīng)過多次篩選獲得的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞可以在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。最終從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。14.動物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。15.動物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理:動物細(xì)胞核的全能性。16.動物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,其中后者的難度明顯高于前者,原因是動物胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對容易,動物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難。17.在動物體細(xì)胞核移植中,非人靈長類動物的體細(xì)胞核移植非常困難。主要原因一方面是供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài),這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低;另一方面是對非人靈長類動物胚胎進行操作的技術(shù)尚不完善。18.激活重構(gòu)胚常用的方法有電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等。三、胚胎工程1.受精是精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過程,包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段。在自然條件下,哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。2.使精子獲能的方法有直接利用雌性動物的生殖道使精子獲能;將精子培養(yǎng)在人工配制的獲能液中使其獲能等。獲能液的成分因動物種類不同而有所差異,常見的有效成分有肝素、Ca2+載體等。3.動物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是初級卵母細(xì)胞;有的可能是次級卵母細(xì)胞。但它們都要在輸卵管內(nèi)進一步成熟,到MⅡ期時,才具備與精子受精的能力。4.在實際胚胎工程操作中,常以觀察到兩個極體或雌、雄原核作為受精的標(biāo)志。5.受精卵早期分裂時,胚胎中有機物的總量不斷減少,有機物的種類增加。6.受精卵早期分裂時,胚胎中DNA總量逐漸增多,每個細(xì)胞中核DNA含量保持相對穩(wěn)定。7.細(xì)胞開始出現(xiàn)分化的胚胎發(fā)育時期是囊胚期。內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤。8.囊胚進一步擴大,透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來,這一過程叫作孵化。如果不能正常孵化,胚胎就無法繼續(xù)發(fā)育。9.胚胎移植是指將通過體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。10.胚胎移植前,首先要對供體、受體進行選擇,并用激素對供體、受體進行同期發(fā)情處理。供體、受體選擇的標(biāo)準(zhǔn):供體是遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強的個體,受體是有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的個體。11.胚胎分割一般選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。12.對囊胚階段的胚胎進行分割時,最關(guān)鍵的是要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割,做DNA性別鑒定一般取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞。1.細(xì)胞全能性:細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。2.體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因:細(xì)胞中基因的表達(dá)具有選擇性。3.選用菊花的外植體時,一般選用形成層細(xì)胞或組織塊,原因是形成層細(xì)胞或組織塊由于分裂旺盛,全能性高,容易誘導(dǎo)形成愈傷組織,其他部分如葉、花全能性低,不易培養(yǎng)成小植株。4.脫分化:已經(jīng)分化的細(xì)胞,經(jīng)過誘導(dǎo),失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。5.植物組織培養(yǎng)中的脫分化階段,培養(yǎng)的組織細(xì)胞是異養(yǎng)型(填“自養(yǎng)型”或“異養(yǎng)型”),原因是此時細(xì)胞沒有葉綠體,并且該階段一般要避光培養(yǎng),細(xì)胞無法進行光合作用制造有機物。6.若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出馬鈴薯—草莓雜種植株以提高土地的利用率,不能把兩物種細(xì)胞直接融合,理由是植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁,阻礙了細(xì)胞間的雜交(融合)。7.與雜交育種相比,植物體細(xì)胞雜交的優(yōu)勢:打破了生殖隔離,實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種。8.利用快速繁殖技術(shù)可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性,原因是快速繁殖技術(shù)實際上是一種無性繁殖,繁殖過程中細(xì)胞的分裂方式是有絲分裂,親、子代細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)相同。9.一般選取植物根尖或莖尖的分生區(qū)作為外植體,優(yōu)點是細(xì)胞分化程度低(或分裂能力強),容易誘導(dǎo)形成愈傷組織;莖尖中的病毒極少,甚至無病毒,能得到脫毒苗(答出兩點)。10.由于大多數(shù)單倍體植株的細(xì)胞中只含有一套染色體,染色體加倍后得到的植株的隱性性狀容易顯現(xiàn),因此單倍體育種能為體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變提供理想材料。11.黃酮類化合物是廣泛分布于植物體內(nèi)的次生代謝物。某同學(xué)認(rèn)為利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)獲得黃酮類化合物主要是利用促進細(xì)胞生長的培養(yǎng)條件,來提高單個細(xì)胞中黃酮類化合物的含量,你認(rèn)為該同學(xué)的觀點不正確(填“正確”或“不正確”),理由是:植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低,利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)獲得黃酮類化合物主要是通過增加細(xì)胞數(shù)量從而增加黃酮類化合物的含量。12.動物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加血清的原因:血清中含有尚未全部研究清楚的細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)。13.動物細(xì)胞培養(yǎng)時所需的氣體環(huán)境是95%空氣和5%CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。14.細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上的現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。貼壁細(xì)胞在生長增殖時,會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象,即當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時,細(xì)胞通常會停止分裂增殖。15.動物細(xì)胞的整個培養(yǎng)過程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶,第一次使用的目的是使組織分散成單個細(xì)胞;貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)時使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,分散成單個細(xì)胞,便于分瓶培養(yǎng)。16.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞是通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,所獲得的類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,簡稱iPS細(xì)胞。優(yōu)點是不涉及倫理問題,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。17.滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。18.單克隆抗體制備過程中,首先給小鼠注射特定抗原的目的是誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌特定抗體的B淋巴細(xì)胞。19.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)融合后,培養(yǎng)基中共出現(xiàn)5種細(xì)胞。若只考慮細(xì)胞兩兩融合,理論上培養(yǎng)基中融合的細(xì)胞有3種。體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是細(xì)胞融合是隨機的,且融合率達(dá)不到100%。20.單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選:第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞,方法是用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選;第二次篩選的目的是篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,方法是抗體檢測,其原理是抗原—抗體的特異性結(jié)合。21.雜交瘤細(xì)胞的特點是既能大量增殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。22.單克隆抗體的優(yōu)點是能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。23.ADC在臨床應(yīng)用上的優(yōu)勢是能夠協(xié)同發(fā)揮抗體特異性識別的靶向作用和細(xì)胞毒素對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用,因此它在臨床上具有靶點清楚、毒副作用小等優(yōu)點。24.動物細(xì)胞核移植技術(shù)中,選擇MⅡ期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因:MⅡ期卵母細(xì)胞具備受精能力,細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。25.核移植技術(shù)中必須先去除受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是保證核移植動物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞。26.通過體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動物,不是對體細(xì)胞供體動物進行100%的復(fù)制,原因是克隆動物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核,其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA來自受體卵母細(xì)胞。此外,動物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系。27.胚胎工程是指對生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進行多種顯微操作和處理,然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。28.受精過程中,阻止多精入卵有兩道屏障:第一道屏障是透明帶發(fā)生生理反應(yīng),第二道屏障是卵細(xì)胞膜發(fā)生生理反應(yīng)。其意義是防止多個精子進入卵子,導(dǎo)致胚胎染色體數(shù)目變異,從而引起發(fā)育異常等現(xiàn)象。29.采

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