T-GRM 103-2024 深色有隔內(nèi)生真菌應用技術(shù)規(guī)程

ICS13.020.01CCSD00/09GRMTechnicalSpecificationforApplicationofDarkSeptateEndophytesIT/GRM103—2024前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 3.1深色有隔內(nèi)生真菌darkseptateendophytes 3.2生態(tài)修復ecologicalremediation 3.3水劑aqueousagent 3.4粉劑powder 3.5包衣種子coatingseeds 4技術(shù)要求 4.1產(chǎn)品規(guī)格 4.2技術(shù)原理 24.3施用方式 24.4施用要求 24.5生物性能 25檢驗方法 35.1植物根系發(fā)育 35.2植物光合作用 35.3植物生長能力 35.4微生物檢測 35.5土壤養(yǎng)分檢測 36安全與環(huán)保要求 37包裝、標識、運輸和貯存 37.1包裝 37.2標識 47.3運輸 47.4貯存 4T/GRM103—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。為使我國礦區(qū)生態(tài)修復菌劑的應用技術(shù)走上科學化，規(guī)范化軌道，指導礦區(qū)微生物復墾工程建設(shè)，促進礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的恢復與可持續(xù)發(fā)展，特制定《深色有隔內(nèi)生真菌應用技術(shù)規(guī)程》標準。本標準主要規(guī)定了深色有隔內(nèi)生真菌菌劑的范圍、術(shù)語和定義、技術(shù)要求、檢驗方法、安全與環(huán)保要求和包裝、標識、運輸和貯存。本文件由中關(guān)村綠色礦山產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟提出并歸口。本文件起草單位：中國礦業(yè)大學（北京）礦山生態(tài)修復研究院、西安科技大學西部礦山生態(tài)環(huán)境修復研究院、天山實驗室、北京合生元生態(tài)環(huán)境工程技術(shù)有限公司。本文件主要起草人：畢銀麗、彭蘇萍、王淑惠、解琳琳、張延旭、王坤、全文智、肖禮、武超、柯增鳴1T/GRM103—2024深色有隔內(nèi)生真菌應用技術(shù)規(guī)程本標準規(guī)定了由深色有隔內(nèi)生真菌的范圍、術(shù)語和定義、技術(shù)要求、檢驗方法、安全與環(huán)保要求和包裝、標識、運輸和貯存。本標準適用于礦山廢棄地改良、礦區(qū)復墾與生態(tài)恢復、低產(chǎn)田提質(zhì)、鹽堿地改良及其他土壤改良用途。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/Z41358-2022土壤健康綜合表征的生物測試方法GB/Z41359-2022土壤質(zhì)量呼吸曲線法測定土壤微生物區(qū)系的豐度和活性GB/T42363-2023土壤質(zhì)量土壤理化分析樣品的預處理GB/T42487-2023土壤質(zhì)量土壤硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的測定氯化鉀溶液浸提流動分析法GB/T42490-2023土壤質(zhì)量土壤與生物樣品中有機碳含量與碳同位素比值、全氮含量與氮同位素比值的測定穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜法GB36600-2018土壤環(huán)境質(zhì)量建設(shè)用地土壤污染風險管控標準（試行）GB/T40226-2021環(huán)境微生物宏基因組檢測高通量測序法GB/T41727-2022農(nóng)用微生物菌劑功能評價技術(shù)規(guī)程GB/T41728-2022微生物肥料質(zhì)量安全評價通用準則3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1深色有隔內(nèi)生真菌darkseptateendophytes一類定殖于宿主植物根表皮、皮層，甚至維管束組織細胞內(nèi)和細胞間隙，形成深色有隔菌絲和微菌核特征結(jié)構(gòu)的內(nèi)生真菌。3.2生態(tài)修復ecologicalremediation在生態(tài)學原理指導下，以生物修復為基礎(chǔ)，結(jié)合各種物理修復、化學修復以及工程技術(shù)措施，通過優(yōu)化組合，使之達到最佳效果和最低耗費的一種綜合的修復方法。3.3水劑aqueousagent深色有隔內(nèi)生真菌與培養(yǎng)液或水均勻混合在一起的懸濁液制成的一種劑型。3.4粉劑powder深色有隔內(nèi)生真菌烘干或凍干后粉碎制成的一種劑型。3.5包衣種子coatingseeds將深色有隔內(nèi)生真菌、肥料、保水劑等（或之一）按比例用粘合劑包在種子之外。4技術(shù)要求4.1產(chǎn)品規(guī)格2T/GRM103—2024該產(chǎn)品來自于深色有隔內(nèi)生真菌發(fā)酵培養(yǎng)到生長指數(shù)期獲得的液體菌劑和固體菌劑。4.2技術(shù)原理深色有隔內(nèi)生真菌具有類似于菌根的生態(tài)學功能，可以促進宿主植物礦質(zhì)營養(yǎng)的吸收，提高宿主生物脅迫和非生物脅迫抗性。深色有隔內(nèi)生真菌在世界上所有主要生物群落的大多數(shù)分類群中都能寄生于植物根部。由于深色有隔內(nèi)生真菌具有無宿主特異性、可純培養(yǎng)等特征，很容易在野外采集并分離培養(yǎng)得到應用于植物生長和環(huán)境修復。4.3施用方式4.3.1粉劑拌種將深色有隔內(nèi)生真菌粉劑和種子充分混勻，必要時將種子噴濕后混合，即拌即播，拌種后的種子當天用完，適用于條播、撒播或大面積機播。4.3.2水劑拌種深色有隔內(nèi)生真菌液體菌劑和種子充分混勻，至種子相互間不粘連為宜，拌種后的種子當天用完，適用于條播、撒播或大面積機播。4.3.3包衣種子將深色有隔內(nèi)生真菌與肥料、保水劑等不影響深色有隔內(nèi)生真菌活性的材料用粘合劑混合包裹在種子表面的種子產(chǎn)品，可直接播種。4.3.4灌根法將深色有隔內(nèi)生真菌液體菌劑或粉劑直接施于植物根部，促進植物根系發(fā)育。這種方法適用于于低產(chǎn)田提質(zhì)、灌溉條件較好的礦區(qū)。4.3.5葉面涂抹法將深色有隔內(nèi)生真菌液體菌劑用刷子，均勻涂抹在植物葉片表面，宜少量多次涂抹，有利于促進養(yǎng)分快速吸收。4.3.6與其它內(nèi)生真菌混施法將深色有隔內(nèi)生真菌與菌根真菌混拌勻后施入植物根部，為內(nèi)生真菌提供良好生存環(huán)境，便于內(nèi)生真菌與植物根系更好共生，加速生態(tài)快速穩(wěn)定建植與穩(wěn)定生長發(fā)育。4.3.7與肥料混施法將深色有隔內(nèi)生真菌與有機肥或無機肥混合后施用，利用其保水保肥特性，提高養(yǎng)分利用率和土壤結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。該方法適用于需同步提高肥力的低產(chǎn)田提質(zhì)和礦山廢棄地改良。4.4施用要求4.4.1應根據(jù)需要確定深色有隔內(nèi)生真菌的施用時期、次數(shù)及數(shù)量參考當?shù)匚锖蚱冢蓱糜谥脖环N植前的基肥，也可應用于植物生長期的追肥。根據(jù)不同適合的施用方式確定用量。4.4.2應避免在高溫或強降雨天施用4.5生物性能4.5.1促進植物根系發(fā)育深色有隔內(nèi)生真菌能夠提高植物根體積和根系活力，改善根系結(jié)構(gòu)和促進養(yǎng)分吸收。4.5.2提高植物養(yǎng)分吸收深色有隔內(nèi)生真菌可以向宿主植物提供氮、磷等養(yǎng)分，提高植物養(yǎng)分吸收能力。3T/GRM103—20244.5.3提高植物光合作用效率深色有隔內(nèi)生真菌作為葉面肥，有利于提高植物葉片蒸騰速率、凈光合速率、胞間二氧化碳濃度和氣孔導度。4.5.4提高植物水分利用效率深色有隔內(nèi)生真菌可以促進植物吸收深層土壤水分，提高水分利用效率。4.5.5改善土壤養(yǎng)分循環(huán)深色有隔內(nèi)生真菌可以提高土壤酶活性，促進土壤中營養(yǎng)元素的轉(zhuǎn)化與循環(huán)，增加土壤養(yǎng)分的有效4.5.6促進土壤微生物活性深色有隔內(nèi)生真菌能夠促進土壤中微生物群落的生長和活性，從而有助于提高土壤的生物學活性，提升土壤肥力，增加菌群的生物多樣性。5檢驗方法5.1植物根系發(fā)育埋設(shè)根管監(jiān)測植物根系發(fā)育情況，測定指標包括根直徑、根尖數(shù)、細根長。5.2植物光合作用測定植物葉綠素含量，參照GB/T41727-2022農(nóng)用微生物菌劑功能評價技術(shù)規(guī)程執(zhí)行；通過植物光合儀監(jiān)測植物光合作用參數(shù)，包括蒸騰速率、凈光合速率、胞間CO2濃度和氣孔導度。5.3植物生長能力測定植物蓋度、植株干重、根干重和根冠比，參照GB/T41727-2022農(nóng)用微生物菌劑功能評價技術(shù)規(guī)程執(zhí)行。5.4微生物檢測測定土壤有益微生物種群結(jié)構(gòu)與數(shù)量，參照GB/T40226-2021環(huán)境微生物宏基因組檢測高通量測序法的規(guī)定執(zhí)行。參照GB/Z41358-2022土壤健康綜合表征的生物測試方法、GB/Z41359-2022土壤質(zhì)量呼吸曲線法測定土壤微生物區(qū)系的豐度和活性。5.5土壤養(yǎng)分檢測參照GB/T42363-2023土壤質(zhì)量土壤理化分析樣品的預處理，GB/T42487-2023土壤質(zhì)量土壤硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的測定氯化鉀溶液浸提流動分析法和GB/T42490-2023土壤質(zhì)量土壤與生物樣品中有機碳含量與碳同位素比值、全氮含量與氮同位素比值的測定、穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜法。6安全與環(huán)保要求符合環(huán)境保護相關(guān)法規(guī)要，不含有害病原微生物或重金屬，符合土壤安全標準，參考GB/T41728-2022微生物肥料質(zhì)量安全評價通用準則。7包裝、標識、運輸和貯存7.1包裝根據(jù)不同產(chǎn)品劑型選擇適當?shù)陌b材料、容器、形式和方法，以滿足菌劑產(chǎn)品包裝的基本要求。產(chǎn)品包裝中應有產(chǎn)品使用說明書，在使用說明書中標明使用范圍、方法，用量及注意事項等內(nèi)容。4T/GRM103—2024液態(tài)菌劑可使用無菌塑料瓶灌裝；粉劑產(chǎn)品和包衣種子可使用無菌塑料管包裝，膠囊菌劑