淺析食品微生物檢驗(yàn)菌種標(biāo)準(zhǔn)化管理

菌種檢驗(yàn)是開(kāi)展微生物學(xué)檢驗(yàn)中的一種常規(guī)技術(shù)。菌種檢驗(yàn)主要是設(shè)置一個(gè)人工條件，以評(píng)估菌種的安全性，降低菌種的變異率，確保其能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)維持安全水平。在實(shí)驗(yàn)室管理與檢驗(yàn)控制中，菌種的標(biāo)準(zhǔn)化檢驗(yàn)是關(guān)鍵保障。其中，標(biāo)準(zhǔn)菌株管理工作，包括但不限于菌種管理、菌株來(lái)源、標(biāo)準(zhǔn)菌株試驗(yàn)條件等。1食品微生物檢驗(yàn)菌種保藏的目的和原理1.1食品微生物檢驗(yàn)菌種保藏的目的在開(kāi)展微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工作時(shí)，菌種保存是一項(xiàng)基礎(chǔ)性工作。在微生物實(shí)驗(yàn)工作中的多個(gè)環(huán)節(jié)，均需要菌種的支持，包括但不限于細(xì)菌染色、細(xì)菌分離培養(yǎng)等。通過(guò)合理保存菌種，可以保障菌種的生物學(xué)特征，防止菌種出現(xiàn)退化、污染、死亡等問(wèn)題，為后續(xù)的科研工作創(chuàng)造有利條件[1]。1.2食品微生物檢驗(yàn)菌種保藏的原理開(kāi)展菌種保藏工作時(shí)，需要利用菌種的生化特性和生理特性，創(chuàng)設(shè)最有利于菌種進(jìn)入休眠狀態(tài)的環(huán)境條件，包括但不限于低溫環(huán)境、干燥環(huán)境、氧氣環(huán)境等。如此一來(lái)，可降低菌種的代謝活動(dòng)，有效避免菌種出現(xiàn)變異問(wèn)題，使菌種達(dá)到長(zhǎng)期保存的效果。通過(guò)科學(xué)保存菌種，可以保證菌種呈現(xiàn)更高的存活率以及更優(yōu)質(zhì)的特性。此外，進(jìn)行菌種保藏時(shí)，也需要權(quán)衡經(jīng)濟(jì)性和簡(jiǎn)便性。2食品微生物檢測(cè)的概念及重要性在食品微生物檢驗(yàn)中，工作人員要確定具體的檢測(cè)方法，開(kāi)展多方面、多角度的質(zhì)量控制，對(duì)食品中的各類(lèi)元素種類(lèi)和數(shù)量進(jìn)行判斷，包括微生物、毒素等，并在定性分析和定量分析的基礎(chǔ)上，評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量。目前，在食品質(zhì)量管理中，食品微生物檢驗(yàn)有著十分重要的作用，通過(guò)合理開(kāi)展食品微生物檢驗(yàn)工作，有利于規(guī)避食品問(wèn)題，保護(hù)人體健康。另外，食品微生物檢驗(yàn)是衡量食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。食品微生物檢驗(yàn)可針對(duì)食品生產(chǎn)、食品加工、食品運(yùn)輸、食品保藏等多個(gè)環(huán)節(jié)加以檢測(cè)，判斷食品安全質(zhì)量[2]。3食品微生物檢驗(yàn)菌種標(biāo)準(zhǔn)化管理3.1標(biāo)準(zhǔn)菌株的驗(yàn)收在接收菌株入庫(kù)期間，工作人員需要重點(diǎn)檢查包裝，觀察外包裝材料是否存在損壞、其是否仍在保質(zhì)期內(nèi)，以及是否采取的冷凍運(yùn)輸方式。如果以上內(nèi)容均符合條件要求，工作人員就可以進(jìn)行入庫(kù)備案處理，并詳細(xì)記錄各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù)信息，包括但不限于接種時(shí)間數(shù)據(jù)信息、名稱(chēng)數(shù)據(jù)信息、產(chǎn)地?cái)?shù)據(jù)信息、編號(hào)數(shù)據(jù)信息、接收單位數(shù)據(jù)信息、實(shí)驗(yàn)室名稱(chēng)數(shù)據(jù)信息等。3.2各類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物（1）在儲(chǔ)備菌株時(shí)，工作人員需要對(duì)其進(jìn)行生化鑒定試驗(yàn)并開(kāi)展純化試驗(yàn)。需要注意的是，不能直接運(yùn)用凍結(jié)的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存菌種，而要提前解凍標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌種。同時(shí)，建立記錄文件，保證菌種在利用、傳代、保藏等方面均能有所追溯。（2）控制菌株的傳代培養(yǎng)次數(shù)。在實(shí)踐中，工作人員需遵循標(biāo)準(zhǔn)方法中的規(guī)定，嚴(yán)格將菌株的傳代培養(yǎng)次數(shù)控制在5次以內(nèi)。（3）重點(diǎn)關(guān)注已經(jīng)發(fā)生衰老、退化、突變、污染等問(wèn)題的標(biāo)準(zhǔn)菌種。針對(duì)此類(lèi)菌種，如果已完成鑒定檢驗(yàn)，確定其已經(jīng)不符合標(biāo)準(zhǔn)，則可以對(duì)其進(jìn)行銷(xiāo)毀處理。（4）判斷標(biāo)準(zhǔn)菌種。一般來(lái)說(shuō)，工作菌種都是在標(biāo)準(zhǔn)菌種基礎(chǔ)上繁殖的商業(yè)派生菌種。商業(yè)化質(zhì)控菌株一般從標(biāo)準(zhǔn)菌種機(jī)構(gòu)中選取。4保藏方法4.1傳代保存方法傳代保存方法更適用于工作菌種的保藏。實(shí)踐中，工作人員需要分析菌種的特性，選擇適合菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。一般來(lái)說(shuō)，純化菌種轉(zhuǎn)接，更加適用于平板培養(yǎng)基、瓊脂斜面培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。實(shí)踐中，工作人員需設(shè)置好溫度和時(shí)間，展開(kāi)培養(yǎng)，然后對(duì)管塞部分使用封口膜進(jìn)行包扎處理，并設(shè)置4℃的冰箱溫度加以保存。此外，在實(shí)際操作中，對(duì)于創(chuàng)傷弧菌、副溶血性弧菌等，則需要采取室溫保存方式。在應(yīng)用傳代保存方法的過(guò)程中，面對(duì)不同的微生物種類(lèi)，設(shè)置的保存時(shí)間也存在差異。一般情況下，保存時(shí)間為1周至3個(gè)月不等。然而，傳代保存方法的應(yīng)用，僅適用于一些短期內(nèi)使用的菌種。具體來(lái)看，在傳代保存方法應(yīng)用中，雖然整體操作比較簡(jiǎn)單，但是由于存在菌種多次傳代相關(guān)問(wèn)題，很容易造成菌種的變質(zhì)，改變菌株的特性[3]。對(duì)此，工作人員需要限制菌種的傳代次數(shù)，一般需控制在5次以內(nèi)。4.2低溫冷凍保藏方法在應(yīng)用低溫冷凍保藏方法時(shí)，需要在-60～-80℃的低溫冰箱內(nèi)對(duì)菌種進(jìn)行保藏，以此減緩菌種的生理活動(dòng)。在實(shí)踐中，低溫冷凍保藏方法更加適用于一些需要長(zhǎng)期保藏的菌種。因?yàn)榇蠖鄶?shù)微生物在-60℃中，都會(huì)停止新陳代謝。一般情況下，設(shè)置的冷凍溫度越低，能夠達(dá)到的效果也就越好。同時(shí)，在應(yīng)用低溫冷凍保藏方法時(shí)，為了得到滿意的冷凍效果，需要準(zhǔn)備2.0mL的菌種凍存管，避免出現(xiàn)冰箱故障問(wèn)題和停電事故。如此一來(lái)，當(dāng)保藏菌種的低溫冷凍環(huán)境發(fā)生變化后，工作人員能夠及時(shí)加入干冰，以此防止培養(yǎng)物的融化。如果菌株已經(jīng)解凍，則不能直接對(duì)菌種再次進(jìn)行低溫保存，而是需要開(kāi)展重新移種處理，再進(jìn)行冷凍保藏[4]。除此之外，在菌種保藏期間，工作人員需要檢查菌種的活力情況。一般情況下，保藏周期在1～5年。對(duì)比其他方法，低溫冷凍保藏方法的應(yīng)用具有十分顯著的優(yōu)勢(shì)，如更長(zhǎng)的保藏期限、更簡(jiǎn)單的操作、更低的成本等，是當(dāng)前菌種保藏中的一種常用保藏方式[5]。4.3冷凍真空干燥保藏方法冷凍真空干燥保藏方法是菌種保藏中最為安全的方法。一般情況下，標(biāo)準(zhǔn)菌種都會(huì)選擇應(yīng)用冷凍真空干燥保藏方法。同時(shí)，保存很多活力較強(qiáng)的微生物和孢子時(shí)，也可以采用冷凍真空干燥保藏方法。冷凍真空干燥保藏方法，具有時(shí)間長(zhǎng)、范圍廣、存活率高的特點(diǎn)。在實(shí)踐中，工作人員需要在三角瓶中放入卵白、脫脂奶、血清，然后對(duì)其進(jìn)行高壓滅菌處理。之后，準(zhǔn)備好接種環(huán)，選擇生長(zhǎng)良好的孢子、菌種，在培養(yǎng)基中對(duì)其進(jìn)行懸浮處理，從而形成菌懸液。之后，選擇0.2mL菌懸液，在經(jīng)滅菌處理的玻璃安瓿瓶中，對(duì)其進(jìn)行無(wú)菌操作分裝處理。同時(shí)，將安瓿瓶放入-30～-40℃的冷凍槽環(huán)境中，迅速冷凍。5菌種的管理5.1定人定點(diǎn)管理微生物實(shí)驗(yàn)室需要建立健全完善的菌種保藏制度和使用制度，在開(kāi)展菌種管理工作時(shí)要安排專(zhuān)門(mén)人員，一般需要選擇2人共同保管。同時(shí)，將菌種保存于安全環(huán)境中。如果需要使用冰箱、鐵箱子等容器，則需要對(duì)其進(jìn)行加鎖，并采取雙人雙鎖的設(shè)置方式。此外，在面對(duì)不同菌種時(shí)，工作人員需要完善不同菌種的實(shí)驗(yàn)資料，做好不同菌種的詳細(xì)記錄。之后，開(kāi)展菌種管理，落實(shí)菌種的申購(gòu)、領(lǐng)用、保管、接種傳代等方面的標(biāo)準(zhǔn)化程序。其中，工作人員需要嚴(yán)格重視菌種保存、菌種使用、菌種傳代、菌種轉(zhuǎn)移、菌種銷(xiāo)毀等各項(xiàng)處理工作，并在規(guī)定的指導(dǎo)下完成操作。同時(shí)，記錄具體操作流程，方便后期追溯。5.2定期檢查通過(guò)組織專(zhuān)業(yè)人員開(kāi)展定期檢查工作，能夠檢查菌種的情況，包括但不