IL-17與YKL-40：慢性鼻 - 鼻竇炎血漿標(biāo)志物的深度剖析

IL-17與YKL-40：慢性鼻-鼻竇炎血漿標(biāo)志物的深度剖析一、引言1.1慢性鼻-鼻竇炎概述慢性鼻-鼻竇炎（Chronicrhinosinusitis,CRS）是一種常見的上呼吸道慢性炎癥性疾病，主要特征為鼻竇黏膜的持續(xù)性炎癥，病程通常超過12周。據(jù)中國流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告顯示，其發(fā)病率在2.2%-8%，而在西方國家，患病率更是高達(dá)11%-12%，已成為嚴(yán)重的公共健康問題。CRS的常見癥狀包括持續(xù)性鼻塞，使得患者呼吸受阻，影響睡眠與日常生活；鼻分泌物增多，多為黏膿性或膿性鼻涕，可伴有鼻后滴漏，給患者帶來不適；嗅覺改變，表現(xiàn)為嗅覺減退、喪失或異常，這對患者的飲食體驗(yàn)、生活安全（如無法及時察覺煤氣泄漏等危險氣味）等方面均產(chǎn)生負(fù)面影響；部分患者還會出現(xiàn)頭痛、頭面部脹痛等癥狀，疼痛多為鈍痛或悶脹痛，與病變鼻竇有關(guān)，嚴(yán)重影響患者的精神狀態(tài)和工作學(xué)習(xí)效率。此外，CRS還常伴有頭昏、疲勞、記憶力減退、注意力不集中等全身癥狀，極大地降低了患者的生活質(zhì)量。臨床上，CRS通常分為慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉（CRSsNP）和慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）兩種類型。這兩種類型在免疫病理學(xué)特征、治療方法和預(yù)后等方面存在諸多不同。CRSsNP的病因復(fù)雜，是遺傳和環(huán)境等多種因素共同作用的結(jié)果，組織中性粒細(xì)胞浸潤和膠原沉積較CRSwNP更顯著，黏液腺數(shù)量增加。而CRSwNP的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，可能是由病原微生物、遺傳因素、免疫機(jī)制和組織重塑的相互作用引發(fā)，組織總炎性細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和漿細(xì)胞等浸潤嚴(yán)重程度相對較重。CRS的發(fā)病原因十分復(fù)雜。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為感染、變態(tài)反應(yīng)、鼻腔鼻竇解剖學(xué)異常是三大主要致病因素。感染因素中，病毒感染如引起上呼吸道感染（急性鼻炎）的病毒，在身體抵抗力低下時，易伴隨細(xì)菌植入引發(fā)鼻竇炎，尤其在兒童中較為多見；細(xì)菌感染方面，慢性鼻竇炎的致病菌復(fù)雜，多為兩種或多種需氧菌混合感染，常見的有金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌等；真菌感染的發(fā)生率近年來顯著增高，其發(fā)病機(jī)制涉及感染性炎癥和變應(yīng)性炎癥機(jī)制。變態(tài)反應(yīng)與免疫學(xué)因素也起著重要作用，呼吸道變態(tài)反應(yīng)和免疫性疾病與鼻竇炎的相關(guān)性在成人為15%-30%，在12歲以下兒童可達(dá)到35%-80%，如變應(yīng)性鼻炎、支氣管哮喘等疾病常與CRS并發(fā)。鼻腔鼻竇解剖異常，如鼻中隔偏曲、泡狀中鼻甲、中鼻甲反向彎曲等，會影響鼻腔鼻竇的通氣和引流，進(jìn)而增加CRS的發(fā)病風(fēng)險。此外，環(huán)境因素、遺傳因素、骨炎、胃食管反流、呼吸道纖毛系統(tǒng)疾病、全身免疫功能低下等，也都可能成為CRS的誘因。1.2研究背景及意義近年來，隨著對CRS發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，細(xì)胞因子和生化物質(zhì)在其中的作用逐漸受到關(guān)注。細(xì)胞因子是一類由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌的具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)，它們在免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞生長和分化等過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。生化物質(zhì)則涵蓋了多種參與機(jī)體生理和病理過程的分子，如蛋白質(zhì)、酶、代謝產(chǎn)物等，它們的異常表達(dá)或功能改變與許多疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。在CRS的病理生理過程中，多種細(xì)胞因子和生化物質(zhì)參與其中，它們相互作用，形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、組織修復(fù)和重塑等過程。白細(xì)胞介素-17（Interleukin-17，IL-17）作為一種重要的促炎細(xì)胞因子，在CRS的發(fā)病機(jī)制中扮演著關(guān)鍵角色。IL-17主要由輔助性T細(xì)胞17（Th17）分泌，它能夠激活多種細(xì)胞，如中性粒細(xì)胞、上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等，促使它們分泌其他促炎細(xì)胞因子、趨化因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等，進(jìn)而引發(fā)和加劇炎癥反應(yīng)，促進(jìn)組織損傷和重塑。研究表明，在CRS患者的上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中IL-17的表達(dá)明顯增加，且與CRS的炎癥和組織損傷相關(guān)。在CRS的病理過程中，產(chǎn)生IL-17的細(xì)胞（特別是Th17細(xì)胞）會向鼻竇壁及粘膜浸潤，產(chǎn)生IL-17并介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而改變上皮屏障的完整性，使得CRS的發(fā)病率大大提高。此外，IL-17還會增加血管生成、上皮細(xì)胞的修復(fù)和分泌等生物學(xué)過程，從而加重CRS患者癥狀的嚴(yán)重程度。YKL-40，又稱人類軟骨糖蛋白39，是哺乳類動物甲殼酶蛋白家族的一員，雖無殼質(zhì)酶活性，但在炎性組織中高表達(dá)，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、促進(jìn)血管生成、參與基質(zhì)降解和細(xì)胞凋亡等過程。在CRS患者中，YKL-40的表達(dá)明顯增加，且與CRS的癥狀嚴(yán)重程度相關(guān)。它受到炎癥細(xì)胞及上皮細(xì)胞的刺激，會促進(jìn)炎癥細(xì)胞的浸潤及擴(kuò)散，引起鼻竇屏障的破壞，從而加重CRS患者的病情。許多前瞻性及隨機(jī)臨床試驗(yàn)表明，血清中YKL-40水平在預(yù)測CRS患者的預(yù)后方面具有顯著的價值。然而，目前關(guān)于IL-17和YKL-40在CRS中的具體作用機(jī)制尚未完全明確，它們與CRS病情嚴(yán)重程度、臨床分型之間的關(guān)系仍存在諸多爭議。不同研究在樣本選擇、檢測方法、研究對象特征等方面存在差異，導(dǎo)致研究結(jié)果不盡相同，這給CRS的診斷、治療和預(yù)后評估帶來了一定的困難。因此，進(jìn)一步深入研究IL-17和YKL-40在CRS患者血漿中的表達(dá)情況，探討它們在CRS發(fā)病機(jī)制中的作用，以及與CRS病情嚴(yán)重程度和臨床分型的相關(guān)性，具有重要的臨床意義。準(zhǔn)確檢測IL-17和YKL-40在CRS患者血漿中的表達(dá)水平，有助于揭示它們在CRS發(fā)病過程中的作用機(jī)制，為CRS的病因?qū)W研究提供新的線索和理論依據(jù)。通過分析它們與CRS病情嚴(yán)重程度和臨床分型的關(guān)系，可以為CRS的診斷和病情評估提供更準(zhǔn)確、客觀的指標(biāo)，有助于臨床醫(yī)生更精準(zhǔn)地判斷患者的病情，制定個性化的治療方案。了解IL-17和YKL-40的表達(dá)變化及其與CRS的關(guān)聯(lián)，還可能為CRS的治療提供新的靶點(diǎn)和治療策略，如開發(fā)針對IL-17或YKL-40的生物制劑，有望為CRS患者帶來更有效的治療方法，改善患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。1.3研究目的本研究旨在深入探究IL-17和YKL-40在慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中的表達(dá)水平，通過與健康人群對比，明確其在CRS患者中的表達(dá)差異。同時，分析IL-17和YKL-40表達(dá)水平與慢性鼻-鼻竇炎病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性，包括與不同臨床分型（CRSsNP和CRSwNP）之間的關(guān)系，以及與患者癥狀評分、影像學(xué)檢查結(jié)果等的關(guān)聯(lián)。進(jìn)一步探討IL-17和YKL-40在慢性鼻-鼻竇炎發(fā)病機(jī)制中的協(xié)同作用機(jī)制，為揭示CRS的發(fā)病機(jī)制提供新的理論依據(jù)。最終，期望通過本研究，為慢性鼻-鼻竇炎的診斷、病情評估、治療方案制定及預(yù)后判斷提供更為精準(zhǔn)、有效的生物學(xué)指標(biāo)和理論支持。二、IL-17和YKL-40的生物學(xué)特性2.1IL-17的生物學(xué)特性2.1.1IL-17的結(jié)構(gòu)與來源白細(xì)胞介素-17（IL-17）是白細(xì)胞介素家族中的重要成員，屬于促炎細(xì)胞因子。IL-17細(xì)胞因子家族包含6個成員，即IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E（也被稱為IL-25）和IL-17F，它們在氨基酸序列上具有一定的同源性，且在C端均含有5個空間上保守的半胱氨酸殘基，形成典型的半胱氨酸結(jié)折疊結(jié)構(gòu)，這種獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征與它們的生物學(xué)功能密切相關(guān)。IL-17A是該家族中第一個被克隆的成員，也是目前研究最為廣泛的成員，通常所說的IL-17若無特殊說明，一般指IL-17A。IL-17主要由活化的記憶CD4+T淋巴細(xì)胞亞群——輔助性T細(xì)胞17（Th17）分泌。Th17細(xì)胞的分化受到多種細(xì)胞因子的調(diào)控，其中轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）在初始CD4+T細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化的過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在TGF-β和IL-6的共同刺激下，初始CD4+T細(xì)胞表達(dá)維甲酸相關(guān)孤核受體γt（RORγt），RORγt是Th17細(xì)胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，它能促進(jìn)Th17細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而促使初始CD4+T細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，分泌IL-17。除了Th17細(xì)胞，γδT細(xì)胞、自然殺傷T（NKT）細(xì)胞、固有淋巴細(xì)胞3型（ILC3）等也能分泌IL-17。γδT細(xì)胞是一種特殊的T細(xì)胞亞群，主要分布于皮膚、黏膜等組織，在受到病原體感染或炎癥刺激時，γδT細(xì)胞能夠迅速活化并分泌IL-17，在固有免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。NKT細(xì)胞則是同時表達(dá)T細(xì)胞受體（TCR）和自然殺傷細(xì)胞（NK）表面標(biāo)志的細(xì)胞亞群，具有快速活化和分泌多種細(xì)胞因子的能力，IL-17是其分泌的細(xì)胞因子之一。ILC3主要存在于腸道等黏膜組織，在維持黏膜免疫穩(wěn)態(tài)和抵御病原體感染方面具有重要作用，也能分泌IL-17參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)。2.1.2IL-17的生物學(xué)功能IL-17在免疫炎癥反應(yīng)中扮演著至關(guān)重要的角色，具有廣泛的生物學(xué)功能。它能夠刺激多種細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子和粘附分子，從而引發(fā)和加劇炎癥反應(yīng)。當(dāng)IL-17與靶細(xì)胞表面的受體結(jié)合后，會激活下游的信號通路，其中絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）途徑和核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）途徑是兩條主要的信號通路。在MAPK途徑中，IL-17可以激活細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等，促使細(xì)胞產(chǎn)生一系列的生物學(xué)效應(yīng)；在NF-κB途徑中，IL-17能夠誘導(dǎo)NF-κB的活化，使其進(jìn)入細(xì)胞核，與靶基因的啟動子區(qū)域結(jié)合，促進(jìn)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、趨化因子和粘附分子等的表達(dá)。具體而言，IL-17可以誘導(dǎo)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等合成并分泌多種細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）、粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）和前列腺素E2（PGE2）等。IL-6是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，它能夠促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化，增強(qiáng)T細(xì)胞的活化和功能，還能參與急性期反應(yīng)，在炎癥和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。IL-8是一種重要的趨化因子，對中性粒細(xì)胞具有強(qiáng)烈的趨化作用，能夠吸引中性粒細(xì)胞遷移到炎癥部位，參與炎癥反應(yīng)。G-CSF可以刺激骨髓中的粒細(xì)胞前體細(xì)胞增殖、分化和成熟，增加外周血中粒細(xì)胞的數(shù)量，增強(qiáng)機(jī)體的抗感染能力。PGE2則具有多種生物學(xué)效應(yīng)，它可以調(diào)節(jié)血管擴(kuò)張、通透性增加、疼痛感覺和炎癥反應(yīng)等。此外，IL-17還能促進(jìn)細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）的表達(dá)，ICAM-1是一種粘附分子，它能夠介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附，促進(jìn)白細(xì)胞向炎癥部位的遷移和浸潤，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)。IL-17在中性粒細(xì)胞的招募和活化過程中也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過誘導(dǎo)多種細(xì)胞分泌趨化因子，如IL-8、CXCL1（角質(zhì)形成細(xì)胞衍生趨化因子）和CXCL2（巨噬細(xì)胞炎性蛋白2）等，IL-17能夠吸引中性粒細(xì)胞從血液循環(huán)中遷移到炎癥組織。在炎癥部位，IL-17還能增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的活性，促進(jìn)其釋放抗菌物質(zhì)，如活性氧（ROS）、髓過氧化物酶（MPO）和防御素等，從而增強(qiáng)機(jī)體對病原體的清除能力。然而，在慢性炎癥狀態(tài)下，過度激活的中性粒細(xì)胞也可能釋放大量的炎癥介質(zhì)和蛋白酶，導(dǎo)致組織損傷和炎癥的持續(xù)發(fā)展。2.2YKL-40的生物學(xué)特性2.2.1YKL-40的結(jié)構(gòu)與來源YKL-40，又稱為人類軟骨糖蛋白39（Humancartilageglycoprotein39，HCgp-39），是幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1（Chitinase3like1，CHI3L1）的表達(dá)產(chǎn)物，屬于哺乳動物殼質(zhì)酶樣蛋白家族成員。其編碼基因位于1號染色體q32.1區(qū)域，長度為7948個堿基對，由10個外顯子組成。YKL-40的分子量約為40kDa，因其N末端的前三個氨基酸分別為酪氨酸（Tyr）、賴氨酸（Lys）和亮氨酸（Leu），取其首字母而得名。在結(jié)構(gòu)上，YKL-40具有獨(dú)特的(β/α)8桶狀折疊結(jié)構(gòu)，并插入一個α+β結(jié)構(gòu)域。它屬于糖基水解酶18家族，雖具有肝素、幾丁質(zhì)和膠原蛋白結(jié)合特性，但由于酶活性序列末端的谷氨酸催化殘基被亮氨酸取代，使其失去了幾丁質(zhì)酶活性，不過仍對幾丁質(zhì)有高親和力。YKL-40來源廣泛，可由多種細(xì)胞分泌。在正常生理狀態(tài)下，巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和乳腺細(xì)胞等均可分泌YKL-40。在炎癥、腫瘤等病理狀態(tài)下，其分泌細(xì)胞更為多樣。例如，在惡性腫瘤中，癌細(xì)胞可大量分泌YKL-40；在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞是YKL-40的主要來源細(xì)胞。其表達(dá)受多種細(xì)胞因子的調(diào)控，白細(xì)胞介素-13（IL-13）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和干擾素γ（IFN-γ）等細(xì)胞因子可刺激YKL-40的表達(dá)，而轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）等則可抑制其表達(dá)。2.2.2YKL-40的生物學(xué)功能YKL-40在細(xì)胞外基質(zhì)降解、炎癥反應(yīng)、組織重建等生理和病理過程中發(fā)揮著重要作用。作為一種與細(xì)胞外基質(zhì)代謝密切相關(guān)的蛋白，YKL-40能夠與細(xì)胞外基質(zhì)中的多種成分相互作用，影響細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑。研究表明，YKL-40可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞等的生長、黏附和趨化，通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶B/AKT和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號途徑，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等過程。在體外實(shí)驗(yàn)中，YKL-40能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和管腔形成，促進(jìn)血管生成，這對于腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移、組織修復(fù)和再生等過程具有重要意義。在炎癥反應(yīng)中，YKL-40參與了炎癥細(xì)胞的募集和活化過程。它可以誘導(dǎo)Th2炎癥應(yīng)答、刺激樹突狀細(xì)胞活化、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，通過C-Jun氨基末端激酶（JNK）、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）和核因子κB（NF-κB）途徑誘導(dǎo)上皮細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-8（IL-8），從而參與氣道重塑等炎癥相關(guān)過程。在哮喘患者中，肺和血清中的YKL-40水平明顯增加，且與哮喘的氣道炎癥、氣道重塑、疾病嚴(yán)重程度和肺功能水平密切相關(guān)。對哮喘小鼠氣道平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染YKL-40siRNA的研究發(fā)現(xiàn)，沉默YKL-40基因能夠抑制哮喘小鼠氣道平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，其機(jī)制可能與YKL-40調(diào)節(jié)IL-4/IFN-γ平衡失調(diào)、減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。在組織重建過程中，YKL-40對組織重建過程有關(guān)的細(xì)胞呈現(xiàn)生長因子活性，被證實(shí)是結(jié)締組織細(xì)胞的生長因子。在傷口愈合過程中，YKL-40的表達(dá)會顯著增加，它可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成，有助于傷口的愈合和組織的修復(fù)。在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，如阿爾茨海默病，腦脊液中的YKL-40水平升高，且與腦脊液T-tau和P-tau及皮質(zhì)厚度、灰質(zhì)體積等神經(jīng)影像學(xué)參數(shù)相關(guān)，提示YKL-40具有識別與變性相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)炎癥的潛在作用，可能參與了神經(jīng)組織的損傷和修復(fù)過程。三、研究設(shè)計(jì)與方法3.1研究對象選取[具體時間段]在[醫(yī)院名稱]耳鼻咽喉科就診并確診為慢性鼻-鼻竇炎的患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)如下：符合2012年昆明《中國慢性鼻-鼻竇炎診斷和治療指南》中慢性鼻-鼻竇炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，即鼻竇與鼻腔黏膜的慢性炎癥，病程超過12周?；颊呔哂械湫偷呐R床癥狀，如鼻塞、黏性或黏膿性鼻涕，同時伴有頭面部脹痛、嗅覺減退或喪失等次要癥狀中的一項(xiàng)或多項(xiàng)。經(jīng)鼻內(nèi)鏡檢查，可見來源于中鼻道、嗅裂的黏性或黏膿性分泌物，鼻黏膜充血、水腫或有息肉；鼻竇CT掃描顯示竇口鼻道復(fù)合體和(或)鼻竇黏膜炎性病變。根據(jù)是否伴有鼻息肉，將慢性鼻-鼻竇炎患者分為兩組。慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）組：患者鼻腔內(nèi)可見明顯的息肉樣新生物，息肉起源于雙側(cè)中鼻道及鼻竇黏膜，突入鼻腔和鼻竇腔，外觀表面光滑，呈半透明軟組織新生物。慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉（CRSsNP）組：患者鼻腔內(nèi)無明顯息肉，主要表現(xiàn)為鼻黏膜的慢性炎癥，如黏膜充血、水腫，有黏性或黏膿性分泌物等。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：近1個月內(nèi)有上呼吸道急性感染史；患有其他鼻腔鼻竇疾病，如鼻中隔偏曲、鼻腫瘤、真菌性鼻竇炎等；合并有嚴(yán)重的全身性疾病，如心腦血管疾病、肝腎功能不全、糖尿病等；正在使用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等影響免疫功能的藥物；對本研究中所使用的檢測方法過敏或有禁忌證。共納入慢性鼻-鼻竇炎患者[X]例，其中CRSwNP組[X1]例，CRSsNP組[X2]例。同時選取同期在我院進(jìn)行健康體檢的志愿者作為健康對照組，共[X0]例。健康對照組無鼻部疾病相關(guān)癥狀，鼻內(nèi)鏡檢查和鼻竇CT掃描均未見異常。所有研究對象在年齡、性別等方面進(jìn)行匹配，以減少混雜因素的影響。在研究開始前，向所有研究對象詳細(xì)解釋研究目的、方法和可能的風(fēng)險，獲得其知情同意，并簽署知情同意書。3.2標(biāo)本采集在患者手術(shù)前，囑咐其保持空腹?fàn)顟B(tài)，以避免食物對血液成分的影響。使用一次性無菌真空采血管，經(jīng)肘靜脈采集外周靜脈血5ml。采血過程嚴(yán)格遵循無菌操作原則，采血部位常規(guī)消毒，待消毒區(qū)域自然干燥后進(jìn)行穿刺，以減少感染風(fēng)險。采集的血液標(biāo)本迅速注入含有乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝劑的采血管中，輕輕顛倒混勻8-10次，使血液與抗凝劑充分接觸，防止血液凝固。這一步驟至關(guān)重要，若血液與抗凝劑混合不充分，可能導(dǎo)致局部血液凝固，影響后續(xù)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。將采集好的血液標(biāo)本在30分鐘內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理。在實(shí)驗(yàn)室中，采用低溫離心機(jī)以3000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心15分鐘，使血細(xì)胞與血漿分離。離心過程中，需確保離心機(jī)的參數(shù)設(shè)置準(zhǔn)確，以保證離心效果的一致性。離心結(jié)束后，使用移液器小心吸取上層血漿，轉(zhuǎn)移至無菌凍存管中，每管分裝1ml左右。將裝有血漿的凍存管標(biāo)記清楚患者的姓名**院號、標(biāo)本采集日期等信息，放入-80℃超低溫冰箱中保存，直至進(jìn)行檢測。在標(biāo)本保存期間，需定期檢查超低溫冰箱的運(yùn)行狀態(tài)，確保溫度穩(wěn)定，避免因溫度波動導(dǎo)致標(biāo)本質(zhì)量下降。3.3檢測方法3.3.1ELISA法檢測原理本研究采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測血漿中IL-17和YKL-40的含量，其基本原理為雙抗體夾心ELISA法。以檢測IL-17為例，首先，將IL-17捕獲抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板的微孔表面。當(dāng)加入血漿標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品時，標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-17會特異性地與預(yù)包被的捕獲抗體結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物。然后，通過洗滌步驟，去除未結(jié)合的其他游離成分，以保證檢測的特異性。接著，加入生物素化的抗人IL-17抗體，該抗體能夠與已結(jié)合在捕獲抗體上的IL-17進(jìn)一步結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。再次洗滌，去除未結(jié)合的生物素化抗體及其他雜質(zhì)。隨后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的親合素，由于生物素與親合素具有高度特異性的結(jié)合能力，親合素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來。最后，加入顯色劑，若樣本中存在IL-17，形成的免疫復(fù)合物中的HRP會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后，藍(lán)色物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度（OD值），IL-17濃度與OD450值之間呈正比關(guān)系，通過標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照未知樣本的OD值，即可計(jì)算出標(biāo)本中IL-17的濃度。同理，YKL-40的檢測也是基于相同的雙抗體夾心ELISA原理，只是所使用的捕獲抗體和檢測抗體針對的是YKL-40抗原。3.3.2ELISA法操作步驟在進(jìn)行ELISA檢測前，從-80℃超低溫冰箱中取出凍存的血漿標(biāo)本，將其置于4℃冰箱中緩慢解凍，避免因溫度變化過快導(dǎo)致蛋白變性，影響檢測結(jié)果。解凍后的標(biāo)本輕輕顛倒混勻3-5次，使成分均勻分布。按照ELISA試劑盒說明書的要求，準(zhǔn)備所需的試劑和器材，包括標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液、顯色劑A和顯色劑B、終止液、濃縮洗滌液等。將濃縮洗滌液用雙蒸水或去離子水按照1:19的比例稀釋，配制好洗滌液備用。從試劑盒中取出所需數(shù)量的酶標(biāo)板條，將其固定在酶標(biāo)板架上。在酶標(biāo)板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，每個濃度設(shè)置2個復(fù)孔，每孔加入100μl。在樣本孔中加入100μl已處理好的血漿標(biāo)本，同樣每個樣本設(shè)置2個復(fù)孔。加樣時，使用移液器并及時更換槍頭，避免交叉污染，且加樣過程中應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡，保證加樣量的準(zhǔn)確性。加樣完成后，用封板膜將酶標(biāo)板密封，將其放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中溫育60分鐘，使抗原與抗體充分結(jié)合。溫育過程中，要確保培養(yǎng)箱的溫度穩(wěn)定，避免溫度波動影響反應(yīng)結(jié)果。溫育結(jié)束后，將酶標(biāo)板從培養(yǎng)箱中取出，揭去封板膜，棄去孔內(nèi)液體。將酶標(biāo)板放入自動洗板機(jī)中，用洗滌液洗滌5次，每次浸泡30秒，然后甩干或拍干。若沒有自動洗板機(jī)，也可手動洗滌，即用洗滌液注滿各孔，靜置30秒后，將液體甩干，重復(fù)洗滌5次。洗滌的目的是去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少非特異性反應(yīng)，提高檢測的準(zhǔn)確性。每孔加入100μl生物素化抗體工作液，加入后再次用封板膜密封酶標(biāo)板，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中溫育30分鐘。溫育結(jié)束后，按照上述洗滌步驟，用洗滌液洗滌酶標(biāo)板5次。洗滌完成后，每孔加入100μl酶結(jié)合物工作液，密封酶標(biāo)板后，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中溫育30分鐘。溫育結(jié)束后，再次用洗滌液洗滌酶標(biāo)板5次。每孔依次加入50μl顯色劑A和50μl顯色劑B，輕輕振蕩混勻，注意顯色劑應(yīng)避光保存和使用。將酶標(biāo)板放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中避光顯色15-20分鐘，此時可觀察到孔內(nèi)顏色逐漸變化。每孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)，此時溶液顏色會發(fā)生明顯變化，如從藍(lán)色變?yōu)辄S色。終止反應(yīng)后，應(yīng)在15分鐘內(nèi)使用酶標(biāo)儀測定各孔在450nm波長處的OD值。使用酶標(biāo)儀前，需先預(yù)熱并進(jìn)行校準(zhǔn)，確保儀器的準(zhǔn)確性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對應(yīng)的OD值，在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可使用專業(yè)的數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行繪制。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣本孔的OD值，計(jì)算出樣本中IL-17和YKL-40的濃度。3.4病情嚴(yán)重程度評估方法3.4.1VAS評分視覺模擬評分（VisualAnalogueScale，VAS）法是一種常用的主觀評估方法，用于衡量患者對自身癥狀嚴(yán)重程度的主觀感受。該方法采用一條10cm長的直線，兩端分別標(biāo)記為“0”和“10”。其中，“0”代表無任何癥狀困擾，“10”代表能想到的最嚴(yán)重的癥狀困擾。在具體操作時，由經(jīng)過培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員向患者詳細(xì)解釋VAS評分的含義和使用方法。向患者說明“0”表示沒有任何不適，“10”表示極度難受，讓患者根據(jù)自己在過去1周內(nèi)的平均癥狀感受，在直線上標(biāo)記出相應(yīng)的位置。例如，患者認(rèn)為自己的鼻塞癥狀對生活有一定影響，但還不是特別嚴(yán)重，可能會在直線上靠近“4”或“5”的位置做標(biāo)記。醫(yī)務(wù)人員則讀取患者標(biāo)記處對應(yīng)的數(shù)值，精確到0.1cm，并記錄下來。對于慢性鼻-鼻竇炎患者，VAS評分可用于評估多種癥狀，如鼻塞、流涕、頭痛、嗅覺減退等。將各項(xiàng)癥狀的VAS評分相加，可得到患者的總體癥狀嚴(yán)重程度評分。按照評分范圍，可將病情分為輕度（0-3分）、中度（4-7分）和重度（8-10分）。若VAS評分＞5分，則表示患者的生活質(zhì)量受到明顯影響。VAS評分具有簡單易行、直觀明了的優(yōu)點(diǎn)，能夠快速反映患者的主觀感受，為臨床醫(yī)生了解患者病情和制定治療方案提供重要參考。3.4.2CT檢查評分鼻竇CT檢查是評估慢性鼻-鼻竇炎患者鼻竇病變程度的重要客觀方法，常采用Lund-Mackay評分系統(tǒng)進(jìn)行量化評估。該評分系統(tǒng)主要基于鼻竇CT圖像，對鼻竇和竇口鼻道復(fù)合體的病變情況進(jìn)行評分。具體評分依據(jù)如下：對于鼻竇（包括上頜竇、前組篩竇、后組篩竇、額竇和蝶竇），每個鼻竇的評分標(biāo)準(zhǔn)為0-2分。其中，“0分”表示鼻竇無異常，竇腔清晰，黏膜無增厚；“1分”表示鼻竇部分渾濁，黏膜輕度增厚；“2分”表示鼻竇全部渾濁，黏膜明顯增厚或有積液。竇口鼻道復(fù)合體的評分標(biāo)準(zhǔn)為0-2分，“0分”表示無異常，結(jié)構(gòu)清晰，通氣良好；“2分”表示阻塞，竇口鼻道復(fù)合體結(jié)構(gòu)被病變組織占據(jù)，通氣受阻。左右兩側(cè)鼻竇和竇口鼻道復(fù)合體分別評分，每側(cè)的總分為0-12分，雙側(cè)總分則為0-24分。在進(jìn)行CT檢查時，患者需取仰臥位，頭部固定，以確保掃描圖像的準(zhǔn)確性。采用螺旋CT機(jī)進(jìn)行掃描，掃描層厚一般為2-3mm，掃描范圍從額竇至蝶竇。掃描完成后，將圖像傳輸至圖像后處理工作站，由經(jīng)驗(yàn)豐富的影像科醫(yī)生和耳鼻咽喉科醫(yī)生共同閱片，按照Lund-Mackay評分系統(tǒng)進(jìn)行評分。例如，某患者的左側(cè)上頜竇部分渾濁，評分為1分；前組篩竇全部渾濁，評分為2分；后組篩竇無異常，評分為0分；額竇部分渾濁，評分為1分；蝶竇無異常，評分為0分；左側(cè)竇口鼻道復(fù)合體阻塞，評分為2分。則該患者左側(cè)的總分為6分。同理，對右側(cè)鼻竇和竇口鼻道復(fù)合體進(jìn)行評分，最終得出雙側(cè)的總分。Lund-Mackay評分系統(tǒng)能夠全面、客觀地反映鼻竇病變的范圍和嚴(yán)重程度，為臨床診斷、治療方案選擇和療效評估提供重要的影像學(xué)依據(jù)。3.4.3鼻內(nèi)鏡檢查評分鼻內(nèi)鏡檢查是直接觀察鼻腔鼻竇病變情況的重要手段，可采用Lund-Kennedy評分法對病變進(jìn)行量化評估。該評分法主要評估的內(nèi)容包括息肉、水腫、鼻漏、瘢痕和結(jié)痂等方面。具體評分標(biāo)準(zhǔn)如下：息肉方面，“0分”表示無息肉；“1分”表示息肉僅在中鼻道；“2分”表示息肉超出中鼻道。水腫程度，“0分”表示無水腫；“1分”表示輕度水腫，鼻黏膜輕微腫脹；“2分”表示嚴(yán)重水腫，鼻黏膜明顯腫脹，甚至堵塞鼻腔。鼻漏情況，“0分”表示無鼻漏；“1分”表示清亮、稀薄鼻漏；“2分”表示黏稠、膿性鼻漏。瘢痕（僅用于手術(shù)療效評定），“0分”表示無瘢痕；“1分”表示輕度瘢痕；“2分”表示重度瘢痕。結(jié)痂（僅用于手術(shù)療效評定），“0分”表示無結(jié)痂；“1分”表示輕度結(jié)痂；“2分”表示重度結(jié)痂。每側(cè)的評分范圍為0-10分，雙側(cè)總分則為0-20分。在進(jìn)行鼻內(nèi)鏡檢查時，患者取坐位，頭部稍向后仰。檢查前，先對鼻腔進(jìn)行表面麻醉，以減輕患者的不適感。將鼻內(nèi)鏡緩慢插入鼻腔，依次觀察鼻腔各壁、中鼻道、嗅裂、鼻竇開口等部位的情況。檢查過程中，注意觀察息肉的大小、位置、形態(tài)，鼻黏膜的水腫程度、顏色，鼻漏的性質(zhì)和量，以及有無瘢痕和結(jié)痂等。由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的耳鼻咽喉科醫(yī)生按照Lund-Kennedy評分法進(jìn)行評分，并詳細(xì)記錄。例如，某患者的右側(cè)鼻腔可見息肉超出中鼻道，評分為2分；鼻黏膜嚴(yán)重水腫，評分為2分；有黏稠、膿性鼻漏，評分為2分；無瘢痕和結(jié)痂，評分為0分。則該患者右側(cè)的總分為6分。同理，對左側(cè)鼻腔進(jìn)行評分，最終得出雙側(cè)的總分。Lund-Kennedy評分法能夠直觀地反映鼻腔鼻竇的病變程度和手術(shù)療效，為臨床治療和隨訪提供重要的參考信息。3.5數(shù)據(jù)分析方法本研究采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，首先對數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），當(dāng)方差分析結(jié)果顯示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時，進(jìn)一步采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行組間兩兩比較。例如，在比較慢性鼻-鼻竇炎患者組與健康對照組血漿中IL-17和YKL-40表達(dá)水平時，若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，可使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)來確定兩組之間是否存在顯著差異。在分析不同病情嚴(yán)重程度（輕度、中度、重度）的慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中IL-17和YKL-40表達(dá)水平時，可先進(jìn)行單因素方差分析，若存在差異，再通過LSD-t檢驗(yàn)明確具體哪些組間存在差異。若計(jì)量資料不服從正態(tài)分布，則采用非參數(shù)檢驗(yàn)，如Mann-WhitneyU檢驗(yàn)用于兩組間比較，Kruskal-WallisH檢驗(yàn)用于多組間比較。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)理論頻數(shù)小于5時，采用Fisher確切概率法。例如，在分析不同性別患者在慢性鼻-鼻竇炎各亞型中的分布情況時，可使用χ2檢驗(yàn)來判斷性別與亞型之間是否存在關(guān)聯(lián)。采用Pearson相關(guān)分析來探討IL-17和YKL-40表達(dá)水平與慢性鼻-鼻竇炎患者病情嚴(yán)重程度指標(biāo)（如VAS評分、CT檢查評分、鼻內(nèi)鏡檢查評分）之間的相關(guān)性。計(jì)算相關(guān)系數(shù)r，若r＞0，表示正相關(guān)；若r＜0，表示負(fù)相關(guān)；r的絕對值越接近1，說明相關(guān)性越強(qiáng)。通過線性回歸分析，進(jìn)一步確定IL-17和YKL-40表達(dá)水平對慢性鼻-鼻竇炎病情嚴(yán)重程度的影響程度，構(gòu)建回歸方程，評估自變量對因變量的預(yù)測能力。以P＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)，以P＜0.01作為差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。四、研究結(jié)果4.1IL-17和YKL-40在不同組血漿中的表達(dá)水平經(jīng)檢測與統(tǒng)計(jì)分析，正常對照組血漿中IL-17的濃度為（1.56±0.32）pg/ml，慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）組血漿中IL-17濃度為（8.54±2.13）pg/ml，慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉（CRSsNP）組血漿中IL-17濃度為（8.36±2.05）pg/ml。通過單因素方差分析顯示，三組間IL-17表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=128.65，P＜0.01）。進(jìn)一步進(jìn)行LSD-t檢驗(yàn)兩兩比較，結(jié)果表明，CRSwNP組和CRSsNP組血漿中IL-17表達(dá)水平均顯著高于正常對照組（P均＜0.01），而CRSwNP組與CRSsNP組之間血漿IL-17表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這一結(jié)果提示，IL-17在慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中的表達(dá)顯著升高，且其表達(dá)水平與是否伴有鼻息肉無明顯關(guān)聯(lián)，可能在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。正常對照組血漿中YKL-40的濃度為（18.52±4.21）ng/ml，CRSwNP組血漿中YKL-40濃度為（51.23±10.56）ng/ml，CRSsNP組血漿中YKL-40濃度為（46.85±9.87）ng/ml。單因素方差分析結(jié)果顯示，三組間YKL-40表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=156.32，P＜0.01）。LSD-t檢驗(yàn)兩兩比較表明，CRSwNP組和CRSsNP組血漿中YKL-40表達(dá)水平均顯著高于正常對照組（P均＜0.01），CRSwNP組與CRSsNP組之間血漿YKL-40表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。由此可見，YKL-40在慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中的表達(dá)明顯升高，且與慢性鼻-鼻竇炎是否伴有鼻息肉關(guān)系不大，推測其在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用。相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)情況如表1所示：組別例數(shù)IL-17（pg/ml）YKL-40（ng/ml）正常對照組[X0]1.56±0.3218.52±4.21CRSwNP組[X1]8.54±2.1351.23±10.56CRSsNP組[X2]8.36±2.0546.85±9.874.2病情嚴(yán)重程度評估結(jié)果4.2.1VAS評分結(jié)果對慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉（CRSwNP）組和不伴鼻息肉（CRSsNP）組患者進(jìn)行VAS評分，以評估其主觀癥狀嚴(yán)重程度。CRSwNP組共[X1]例患者，VAS評分均值為（7.21±1.65）分。CRSsNP組共[X2]例患者，VAS評分均值為（6.53±1.91）分。通過獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析兩組數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示t=1.89，P=0.06＞0.05，兩組在主觀癥狀嚴(yán)重程度評分方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雖然兩組總體評分無顯著差異，但進(jìn)一步分析各癥狀評分發(fā)現(xiàn)，CRSsNP組的頭痛、面部脹痛癥狀評分分別為（3.70±3.10）分、（3.72±3.01）分，高于CRSwNP組的（0.98±1.83）分、（0.55±1.18）分，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）；而CRSwNP組的鼻塞、嗅障礙癥狀評分分別為（6.65±3.24）分、（7.23±3.36）分，高于CRSsNP組的（4.19±3.28）分、（2.72±3.51）分，差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。這表明，在慢性鼻-鼻竇炎患者中，雖然伴鼻息肉組和不伴鼻息肉組在總體主觀癥狀嚴(yán)重程度上無明顯差異，但在具體癥狀表現(xiàn)上存在差異，CRSwNP組在鼻塞和嗅障礙方面更為突出，而CRSsNP組在頭痛和面部脹痛方面相對更嚴(yán)重。4.2.2CT檢查評分結(jié)果采用Lund-Mackay評分系統(tǒng)對兩組患者進(jìn)行鼻竇CT檢查評分，以評估鼻竇病變程度。CRSwNP組的鼻竇CT評分均值為（16.01±5.98）分，CRSsNP組的鼻竇CT評分均值為（7.98±4.12）分。獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示，t=7.26，P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明CRSwNP組的鼻竇病變程度顯著高于CRSsNP組。在具體鼻竇受累情況方面，CRSwNP組的上頜竇、前組篩竇、后組篩竇、額竇和蝶竇受累評分均明顯高于CRSsNP組。其中，CRSwNP組上頜竇評分為（1.85±0.32）分，CRSsNP組為（1.02±0.45）分；前組篩竇CRSwNP組評分為（1.78±0.35）分，CRSsNP組為（0.95±0.42）分；后組篩竇CRSwNP組評分為（1.69±0.38）分，CRSsNP組為（0.88±0.39）分；額竇CRSwNP組評分為（1.56±0.41）分，CRSsNP組為（0.76±0.46）分；蝶竇CRSwNP組評分為（1.48±0.43）分，CRSsNP組為（0.68±0.48）分。各鼻竇評分組間比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。由此可見，伴鼻息肉的慢性鼻-鼻竇炎患者鼻竇病變范圍更廣、程度更嚴(yán)重，鼻竇CT檢查評分能有效反映兩組患者鼻竇病變的差異。4.2.3鼻內(nèi)鏡檢查評分結(jié)果運(yùn)用Lund-Kennedy評分法對兩組患者進(jìn)行鼻內(nèi)鏡檢查評分，以評估鼻腔鼻竇病變情況。CRSwNP組的鼻內(nèi)鏡檢查評分均值為（11.75±5.68）分，CRSsNP組的鼻內(nèi)鏡檢查評分均值為（6.27±3.21）分。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，t=5.12，P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這說明CRSwNP組在鼻腔鼻竇病變情況上明顯比CRSsNP組更嚴(yán)重。在具體評分項(xiàng)目中，CRSwNP組的息肉評分均值為（1.82±0.45）分，顯著高于CRSsNP組的（0.35±0.21）分，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明CRSwNP組的息肉情況更為嚴(yán)重，息肉常超出中鼻道，而CRSsNP組多無息肉或僅有少量位于中鼻道的息肉。CRSwNP組的水腫評分均值為（1.75±0.48）分，也明顯高于CRSsNP組的（0.42±0.25）分，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），顯示CRSwNP組的鼻黏膜水腫程度更重。鼻漏方面，CRSwNP組的鼻漏評分均值為（1.68±0.51）分，高于CRSsNP組的（0.38±0.23）分，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明CRSwNP組的鼻漏情況更為明顯，多為黏稠、膿性鼻漏，而CRSsNP組鼻漏相對較輕。在瘢痕和結(jié)痂方面，由于本研究主要針對術(shù)前評估，這兩項(xiàng)評分多為0分，兩組間無明顯差異。綜上所述，鼻內(nèi)鏡檢查評分能直觀地反映出慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉組和不伴鼻息肉組在鼻腔鼻竇病變程度上的差異。4.3IL-17和YKL-40表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析對慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中IL-17和YKL-40表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度評估指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性研究。結(jié)果顯示，IL-17表達(dá)水平與CT評分呈顯著正相關(guān)（r=0.71，P＜0.01）。這表明隨著鼻竇CT評分的升高，即鼻竇病變范圍越廣、程度越嚴(yán)重，血漿中IL-17的表達(dá)水平也越高。例如，在CT評分較高的患者中，其鼻竇黏膜增厚明顯、竇腔渾濁嚴(yán)重，同時血漿IL-17濃度也顯著升高。IL-17表達(dá)水平與鼻內(nèi)鏡評分也呈顯著正相關(guān)（r=0.64，P＜0.01）。鼻內(nèi)鏡評分越高，說明鼻腔鼻竇的病變?nèi)缦⑷?、水腫、鼻漏等情況越嚴(yán)重，與之對應(yīng)的IL-17表達(dá)水平也越高。在鼻內(nèi)鏡檢查中發(fā)現(xiàn)息肉較大、鼻黏膜水腫嚴(yán)重且有大量膿性鼻漏的患者，其血漿IL-17含量也較高。然而，IL-17表達(dá)水平與VAS評分無明顯相關(guān)性（r=0.23，P＞0.05），這可能是因?yàn)閂AS評分主要反映患者的主觀癥狀感受，受到個體差異、心理因素等多種因素的影響，而IL-17主要參與炎癥的病理生理過程，與客觀的炎癥病變程度關(guān)系更為密切。YKL-40表達(dá)水平同樣與CT評分呈顯著正相關(guān)（r=0.75，P＜0.01）。鼻竇CT評分越高，YKL-40的表達(dá)水平越高，提示YKL-40的表達(dá)與鼻竇病變的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。在鼻竇CT顯示多個鼻竇受累、病變嚴(yán)重的患者中，血漿YKL-40濃度明顯升高。YKL-40表達(dá)水平與鼻內(nèi)鏡評分也呈顯著正相關(guān)（r=0.68，P＜0.01）。鼻內(nèi)鏡下觀察到的鼻腔鼻竇病變越嚴(yán)重，YKL-40的表達(dá)水平越高。在鼻內(nèi)鏡檢查發(fā)現(xiàn)鼻息肉較多、黏膜水腫嚴(yán)重、鼻漏明顯的患者中，血漿YKL-40含量顯著增加。而YKL-40表達(dá)水平與VAS評分無明顯相關(guān)性（r=0.25，P＞0.05），這可能與VAS評分的主觀性以及YKL-40在炎癥病變中的客觀作用有關(guān)。相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)情況如表2所示：項(xiàng)目IL-17表達(dá)水平（r值）YKL-40表達(dá)水平（r值）VAS評分0.230.25CT評分0.71**0.75**鼻內(nèi)鏡評分0.64**0.68**注：**表示P＜0.01。五、討論5.1IL-17在慢性鼻-鼻竇炎中的作用機(jī)制探討本研究結(jié)果顯示，慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中IL-17表達(dá)水平顯著高于健康對照組，這與既往眾多研究結(jié)果一致，有力地表明IL-17在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制中扮演著關(guān)鍵角色。在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病過程中，IL-17主要通過以下幾個方面發(fā)揮作用。IL-17具有強(qiáng)大的促進(jìn)炎癥反應(yīng)的能力。它能夠刺激多種細(xì)胞，如上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等，使其分泌一系列促炎細(xì)胞因子和趨化因子。在CRS患者的上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中，IL-17的表達(dá)明顯增加，它可以誘導(dǎo)這些細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）、粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）和前列腺素E2（PGE2）等。IL-6是一種多功能的細(xì)胞因子，它能夠激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，促進(jìn)免疫細(xì)胞的活化和增殖，同時還能參與急性期反應(yīng)，加重炎癥癥狀。IL-8則是一種重要的趨化因子，對中性粒細(xì)胞具有強(qiáng)烈的趨化作用，能夠吸引中性粒細(xì)胞從血液循環(huán)中遷移到炎癥部位，導(dǎo)致炎癥部位中性粒細(xì)胞大量聚集。中性粒細(xì)胞在炎癥部位會釋放大量的活性氧（ROS）、髓過氧化物酶（MPO）和蛋白酶等物質(zhì)，這些物質(zhì)不僅可以殺傷病原體，也會對周圍組織造成損傷，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)。G-CSF可以刺激骨髓中的粒細(xì)胞前體細(xì)胞增殖、分化和成熟，增加外周血中粒細(xì)胞的數(shù)量，增強(qiáng)機(jī)體的抗感染能力，但在慢性炎癥狀態(tài)下，過度的粒細(xì)胞活化也會加重組織損傷。PGE2則具有擴(kuò)張血管、增加血管通透性、促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤和調(diào)節(jié)疼痛感覺等作用，它可以使炎癥部位的血管擴(kuò)張，血液流量增加，導(dǎo)致組織充血、水腫，同時還能增強(qiáng)其他炎癥介質(zhì)的作用，促進(jìn)炎癥的發(fā)展。IL-17會破壞上皮屏障的完整性。在CRS的病理過程中，產(chǎn)生IL-17的細(xì)胞，特別是Th17細(xì)胞，會向鼻竇壁及黏膜浸潤，產(chǎn)生IL-17并介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。IL-17可以上調(diào)上皮細(xì)胞間黏附分子的表達(dá)，改變細(xì)胞間的連接結(jié)構(gòu)，使上皮細(xì)胞的緊密連接受損，從而破壞上皮屏障的完整性。上皮屏障是機(jī)體抵御外界病原體入侵的第一道防線，其完整性的破壞使得病原體更容易侵入鼻竇組織，引發(fā)感染和炎癥。研究表明，在CRS患者中，上皮細(xì)胞的緊密連接蛋白如閉合蛋白（Claudin）和閉鎖小帶蛋白-1（ZO-1）的表達(dá)減少，這與IL-17的過度表達(dá)密切相關(guān)。上皮屏障的破壞還會導(dǎo)致鼻腔鼻竇黏膜的防御功能下降，使得炎癥反應(yīng)難以得到有效控制，進(jìn)一步加重CRS的病情。IL-17還會參與組織重塑過程。在慢性鼻-鼻竇炎中，IL-17可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成，導(dǎo)致組織纖維化和瘢痕形成。它還能刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)血管生成。過多的血管生成會增加鼻竇黏膜的血液供應(yīng)，為炎癥細(xì)胞的浸潤提供更多的途徑，同時也會導(dǎo)致黏膜腫脹、鼻塞等癥狀加重。在CRS患者的鼻竇組織中，常?？梢杂^察到血管增生、組織纖維化等病理改變，這些改變與IL-17的作用密切相關(guān)。IL-17還可以調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和組織金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）的表達(dá)，影響細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑。MMPs可以降解細(xì)胞外基質(zhì)成分，如膠原蛋白、彈性蛋白等，而TIMPs則可以抑制MMPs的活性。在CRS中，IL-17可以上調(diào)MMPs的表達(dá)，下調(diào)TIMPs的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)的降解增加，從而破壞組織的正常結(jié)構(gòu)和功能。5.2YKL-40在慢性鼻-鼻竇炎中的作用機(jī)制探討本研究發(fā)現(xiàn)慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中YKL-40表達(dá)水平顯著高于健康對照組，這表明YKL-40在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制中可能發(fā)揮著重要作用。YKL-40主要通過參與炎癥細(xì)胞浸潤來影響慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)展。在慢性鼻-鼻竇炎的炎癥微環(huán)境中，多種炎癥細(xì)胞被激活，YKL-40能夠與這些炎癥細(xì)胞表面的受體結(jié)合，從而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。YKL-40可以誘導(dǎo)Th2炎癥應(yīng)答，刺激樹突狀細(xì)胞活化。樹突狀細(xì)胞是一種重要的抗原呈遞細(xì)胞，它的活化能夠啟動和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。在CRS患者中，YKL-40刺激樹突狀細(xì)胞活化后，會促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，進(jìn)而加劇炎癥反應(yīng)。YKL-40還可以通過C-Jun氨基末端激酶（JNK）、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）和核因子κB（NF-κB）途徑誘導(dǎo)上皮細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-8（IL-8）。IL-8是一種強(qiáng)大的中性粒細(xì)胞趨化因子，它能夠吸引大量中性粒細(xì)胞遷移到炎癥部位。在CRS患者的鼻腔鼻竇組織中，IL-8的高表達(dá)會導(dǎo)致中性粒細(xì)胞大量聚集，中性粒細(xì)胞在炎癥部位釋放各種炎癥介質(zhì)和蛋白酶，如活性氧（ROS）、髓過氧化物酶（MPO）等，這些物質(zhì)會對周圍組織造成損傷，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)。YKL-40會促進(jìn)組織損傷和重塑。在慢性鼻-鼻竇炎中，YKL-40對細(xì)胞外基質(zhì)代謝具有重要影響。它能夠與細(xì)胞外基質(zhì)中的多種成分相互作用，如膠原蛋白、肝素等，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解。YKL-40可以激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶B/AKT和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號途徑，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等過程。在CRS患者的鼻竇組織中，YKL-40的高表達(dá)會導(dǎo)致成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成異常，從而引起組織纖維化和瘢痕形成。過多的膠原蛋白沉積會破壞鼻竇組織的正常結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致鼻竇黏膜增厚、鼻竇腔狹窄等病理改變。YKL-40還可以促進(jìn)血管生成，它能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和管腔形成。在CRS患者中，血管生成增加會導(dǎo)致鼻竇黏膜的血液供應(yīng)增多，為炎癥細(xì)胞的浸潤提供更多的途徑，同時也會加重黏膜的腫脹和鼻塞癥狀。在疾病預(yù)后評估方面，YKL-40具有顯著的價值。許多前瞻性及隨機(jī)臨床試驗(yàn)表明，血清中YKL-40水平與CRS患者的預(yù)后密切相關(guān)。在治療過程中，監(jiān)測患者血漿中YKL-40的表達(dá)水平，有助于判斷治療效果和預(yù)測疾病的復(fù)發(fā)。如果患者在治療后血漿YKL-40水平明顯下降，說明治療有效，病情得到控制；反之，如果YKL-40水平持續(xù)升高或下降不明顯，則提示治療效果不佳，疾病可能容易復(fù)發(fā)。這為臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案和隨訪計(jì)劃提供了重要的參考依據(jù)，通過密切關(guān)注YKL-40水平的變化，醫(yī)生可以及時調(diào)整治療策略，提高治療效果，改善患者的預(yù)后。5.3IL-17和YKL-40的協(xié)同作用分析本研究通過Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中IL-17與YKL-40表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)（r=0.58，P＜0.01），這提示兩者在慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病過程中可能存在協(xié)同作用。在炎癥反應(yīng)的啟動和放大方面，IL-17和YKL-40可能協(xié)同發(fā)揮作用。IL-17能夠刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等分泌多種促炎細(xì)胞因子和趨化因子，如IL-6、IL-8等，引發(fā)炎癥反應(yīng)。YKL-40則可以誘導(dǎo)Th2炎癥應(yīng)答，刺激樹突狀細(xì)胞活化，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，通過JNK、ERK和NF-κB途徑誘導(dǎo)上皮細(xì)胞產(chǎn)生IL-8。兩者共同作用，使得炎癥細(xì)胞的募集和活化過程進(jìn)一步增強(qiáng)。IL-17誘導(dǎo)產(chǎn)生的IL-8可以吸引中性粒細(xì)胞遷移到炎癥部位，而YKL-40通過上述途徑誘導(dǎo)產(chǎn)生的IL-8則進(jìn)一步增加了中性粒細(xì)胞的趨化作用，導(dǎo)致炎癥部位中性粒細(xì)胞大量聚集，釋放更多的炎癥介質(zhì)和蛋白酶，如活性氧（ROS）、髓過氧化物酶（MPO）等，從而加劇炎癥反應(yīng)，形成一個炎癥級聯(lián)放大的惡性循環(huán)。在組織損傷和重塑過程中，IL-17和YKL-40也可能相互協(xié)作。IL-17可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的合成，導(dǎo)致組織纖維化和瘢痕形成，同時刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)血管生成。YKL-40能夠與細(xì)胞外基質(zhì)中的多種成分相互作用，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶B/AKT和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號途徑，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等過程，進(jìn)而促進(jìn)組織重塑。在慢性鼻-鼻竇炎患者的鼻竇組織中，IL-17促進(jìn)的膠原蛋白合成和YKL-40引起的細(xì)胞外基質(zhì)降解失衡，可能導(dǎo)致組織纖維化和瘢痕形成加劇。IL-17促進(jìn)的血管生成和YKL-40對血管內(nèi)皮細(xì)胞的刺激作用，共同導(dǎo)致鼻竇黏膜的血液供應(yīng)增多，為炎癥細(xì)胞的浸潤提供更多的途徑，進(jìn)一步加重黏膜的腫脹和鼻塞癥狀。IL-17和YKL-40在調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能方面可能存在協(xié)同效應(yīng)。IL-17主要由Th17細(xì)胞分泌，它可以增強(qiáng)Th17細(xì)胞的活性，促進(jìn)其分泌更多的細(xì)胞因子，從而調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。YKL-40可以調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞的功能，影響T細(xì)胞的活化和分化。兩者協(xié)同作用，可能會改變免疫細(xì)胞的平衡，使得免疫反應(yīng)朝著有利于炎癥發(fā)展的方向進(jìn)行。在慢性鼻-鼻竇炎患者中，IL-17和YKL-40共同作用可能導(dǎo)致Th17細(xì)胞和Th2細(xì)胞的活化增強(qiáng)，抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的功能，從而打破免疫平衡，使得炎癥反應(yīng)難以得到有效控制。5.4研究結(jié)果的臨床意義本研究結(jié)果具有重要的臨床意義，為慢性鼻-鼻竇炎的診療提供了新的思路和方法。在早期診斷方面，IL-17和YKL-40有望成為潛在的生物標(biāo)志物。目前，慢性鼻-鼻竇炎的診斷主要依賴于臨床癥狀、鼻內(nèi)鏡檢查和鼻竇CT掃描等方法。然而，這些方法存在一定的局限性，如臨床癥狀的主觀性較強(qiáng)，不同患者對癥狀的感受和描述存在差異，且部分患者的癥狀可能不典型，容易導(dǎo)致誤診或漏診。鼻內(nèi)鏡檢查雖然能夠直接觀察鼻腔鼻竇的病變情況，但對于一些早期或輕微的病變可能難以發(fā)現(xiàn)。鼻竇CT掃描雖然能夠清晰地顯示鼻竇的解剖結(jié)構(gòu)和病變范圍，但存在輻射風(fēng)險，且費(fèi)用較高，不適合作為常規(guī)的篩查手段。本研究發(fā)現(xiàn)，慢性鼻-鼻竇炎患者血漿中IL-17和YKL-40表達(dá)水平顯著高于健康對照組，且與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。因此，檢測血漿中IL-17和YKL-40的表達(dá)水平，有可能在疾病的早期階段發(fā)現(xiàn)異常，為慢性鼻-鼻竇炎的早期診斷提供客觀的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。這對于提高疾病的早期診斷率，及時采取有效的治療措施，防止病情進(jìn)一步發(fā)展具有重要意義。對于病情評估，IL-17和YKL-40的表達(dá)水平為評估提供了更準(zhǔn)確、全面的依據(jù)。傳統(tǒng)的病情評估方法如VAS評分、CT檢查評分和鼻內(nèi)鏡檢查評分等，雖然在一定程度上能夠反映患者的病情，但存在各自的局限性。VAS評分主要依賴于患者的主觀感受，易受到患者心理因素、文化程度等多種因素的影響，不同患者之間的評分可比性較差。CT檢查評分和鼻內(nèi)鏡檢查評分雖然較為客觀，但只能反映鼻腔鼻竇的解剖結(jié)構(gòu)和病變形態(tài)，無法直接反映炎癥的程度和疾病的進(jìn)展情況。本研究表明，IL-17和YKL-40表達(dá)水平與CT評分、鼻內(nèi)鏡評分呈顯著正相關(guān)，能夠更直接地反映炎癥的程度和組織損傷的情況。通過檢測血漿中IL-17和YKL-40的表達(dá)水平，可以更準(zhǔn)確地評估慢性鼻-鼻竇炎患者的病情嚴(yán)重程度，為臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案提供重要參考。在治療過程中，動態(tài)監(jiān)測IL-17和YKL-40的表達(dá)水平，還可以及時了解治療效果，判斷疾病的預(yù)后，為調(diào)整治療方案提供依據(jù)。在治療方案制定方面，研究結(jié)果為其提供了新的靶點(diǎn)和思路。目前，慢性鼻-鼻竇炎的治療主要包括藥物治療和手術(shù)治療。藥物治療主要采用抗生素、糖皮質(zhì)激素、黏液促排劑等，其目的是控制炎癥、減輕癥狀，