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文檔簡介
1、實驗三 卵磷脂的提取和鑒定,實驗目的 了解磷脂類物質(zhì)的結構和性質(zhì) 學習卵磷脂的提取鑒定的原理和方法。,實驗原理 磷脂是生物體組織細胞的重要成分,在腦、神經(jīng)組織、腎上腺和紅細胞中含量較高,在蛋黃中含量特別豐富(10%左右)。卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂、蛋白質(zhì)及糖類等不溶,利用此性質(zhì)可將卵磷脂和其它成分分離。卵磷脂溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性質(zhì)可將其與醇溶性的中性脂肪分離開,達到純化卵磷脂的目的。,1 2 * 3,R1 常為飽和脂肪酸如C16,C18,R2 常為不飽和脂肪酸如花生四烯酸,卵磷脂徹底水解的產(chǎn)物是什么?,卵磷脂的化學結構,卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽,可分別進行
2、化學鑒定。 膽堿:在堿的進一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺; 磷酸鹽:在酸性條件下與鉬酸銨作用,生成黃色的磷鉬酸沉淀。 甘油:(略);脂肪酸:(略) 通過對分解產(chǎn)物的檢驗可以對提取的卵磷脂粗品進行鑒定。,實驗器材 材料與試劑:雞蛋黃,95%乙醇,乙醚,丙酮,10% NaOH,鉬酸銨試劑; 儀器:50 mL、500 mL燒杯,電爐,蒸發(fā)皿,藥勺,玻璃棒,玻璃漏斗,試管,一次性刻度吸管,石蕊試紙,試管夾,洗瓶,規(guī)格?,實驗操作步驟與現(xiàn)象觀察記錄 (一)卵磷脂的提取,將濾液置于蒸發(fā)皿內(nèi),水浴蒸干,所得干物即為卵磷脂粗品。,取約10g (兩吸管)蛋黃于50 ml小燒杯中,邊攪拌邊加入95%乙醇30mL,現(xiàn)象:,濾紙過濾,濾液性狀:,粗提物性狀:,藥勺刮取取粗提物少許,置干燥試管底部,,(二)卵磷脂的溶解性觀察,加入2mL丙酮,加入1mL 乙醚,用玻棒攪動,現(xiàn)象?,現(xiàn)象?,注意:加乙醚在第3實驗室進行,禁止明火。,(三)卵磷脂的水解與鑒定,1.三甲胺的檢驗 取干燥試管一支,加入少量提取物和3mL 10% NaOH 溶液,水浴加熱15min,在管口放一片蒸餾水潤濕過的紅色石蕊試紙,觀察顏色有無變化,并嗅其氣味,記錄。 將上述加熱過的溶液過濾。濾液性狀: 2.磷酸的檢驗 取干凈試管一支,加入10滴上述濾液,加入10滴95%乙醇,搖勻
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