生物技術制藥大題的資料

1、現(xiàn)代生物藥物分類：重組DNA技術制造的多肽、蛋白質(zhì)類治療劑基因藥物：基因治療劑、基因疫苗和反義藥物等。天然生物藥物：來自動物、植物、微生物和海洋生物的天然產(chǎn)物。合成與部分合成生物藥物。生物技術藥物的特性:分子結(jié)構(gòu)復雜；具有種屬特異性；治療針對性強、療效高；穩(wěn)定性差；基因穩(wěn)定性；免疫原性；體內(nèi)的半衰期短；受體效應；多效性和網(wǎng)絡效應；檢驗的特殊性重組蛋白質(zhì)分離純化的方法及目的：1、離心/過濾（去除細胞、細胞碎片、顆粒性雜質(zhì)） 2、陰離子交換層析（去除雜質(zhì)蛋白、脂質(zhì)、DNA和病毒等） 3、40nm微孔濾膜過濾（進一步去除病毒） 4、陽離子交換層析（去除牛血清蛋白或轉(zhuǎn)鐵蛋白等） 5、超濾（去除沉淀物及

2、病毒） 6、疏水層析（去除殘余的雜蛋白） 7、凝膠過濾（與多聚體分離） 8、0.22um微孔濾膜過濾（除菌）宿主細胞的分類：1原核細胞：常用的有大腸桿菌（分泌能力不足，真核蛋白質(zhì)常形成不溶性的包涵體，不存在翻譯后修飾作用，對蛋白質(zhì)產(chǎn)物不能糖基化。）、枯草芽孢桿菌（分泌能力強，不形成包涵體，不能使蛋白質(zhì)糖基化。）、鏈霉菌（重要的工業(yè)微生物。分泌能力強，具有糖基化能力。）等；2真核細胞：酵母（表達產(chǎn)物直接分泌到細胞外，分泌能力強，表達產(chǎn)物能糖基化。）、絲狀真菌（很強的蛋白質(zhì)分泌能力，能正確進行翻譯后加工，包括肽剪切和糖基化。）、哺乳動物細胞（表達產(chǎn)物可由重組轉(zhuǎn)化的細胞分泌到培養(yǎng)液中，產(chǎn)物是糖基化的

3、，接近或類似于天然產(chǎn)物。）。影響目的基因在大腸桿菌中表達的因素：（1）外源基因的計量（2）外源基因的表達效率：啟動子的強弱、核糖體結(jié)合位點的有效性、SD序列和起始密碼的間距、密碼子組成（3）表達產(chǎn)物的穩(wěn)定性（4）細胞的代謝負荷（5）工程菌的培養(yǎng)條件真核基因在大腸桿菌中的表達的形式：以融合蛋白的形式表達藥物基因、以非融合蛋白的形式表達藥物基因、分泌型表達蛋白藥物基因影響目的基因在酵母中表達的因素：外源基因的劑量、外源基因的表達效率（啟動子、分泌信號、終止子）、外源蛋白的糖基化、宿主菌株的影響基因工程藥物生產(chǎn)的過程：獲得目的基因、組建重組質(zhì)粒、構(gòu)建基因工程菌、產(chǎn)物分離純化、除菌過濾、半成品檢定、成

4、品檢定、包裝。提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法：選擇合適的宿主菌、選擇合適的載體、選擇壓力、分階段控制培養(yǎng)、控制培養(yǎng)條件、固定化基因工程菌的培養(yǎng)方式：1. 分批培養(yǎng)2. 補料分批培養(yǎng)：將種子接入發(fā)酵反應器中進行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時間后，間歇或連續(xù)地補加新鮮培養(yǎng)基，使菌體進一步生長的方法。3. 連續(xù)培養(yǎng)：將種子接入發(fā)酵反應器中，攪拌培養(yǎng)至一定菌體濃度后，開動進料和出料的蠕動泵，以控制一定稀釋率進行不間斷的培養(yǎng)。4. 透析培養(yǎng)利用膜的半透性原理使代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基分離，通過去除培養(yǎng)液中的代謝產(chǎn)物來解除其對生產(chǎn)菌的不利影響。5. 固定化培養(yǎng)：將固定化技術用于工程菌的培養(yǎng)，質(zhì)粒穩(wěn)定性大大提高，特別是對分泌型菌種有利基因

5、工程菌的不穩(wěn)定性有哪幾種？如何對它進行改善1分裂不穩(wěn)定：指工程菌分裂時出現(xiàn)一定比例不含質(zhì)粒子代菌的現(xiàn)象。2結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定：指外源基因從質(zhì)粒上丟失或堿基重排、缺失所致工程菌性能的改變改善1、選擇合適的宿主菌2、選擇合適的載體3、選擇壓力4、分階段控制培養(yǎng)5、控制培養(yǎng)條件6、固定化基因工程藥物的分離純化：細胞破碎、固液分離、濃縮與初步純化、高度純化直至得到純品、成品加工。分離純化的方法一、根據(jù)分子大小不同的純化方法1.透析和超濾2.密度梯度離心 3.凝膠過濾二、根據(jù)電荷不同的純化方法1.電泳2.聚丙烯酰胺凝膠電泳3.毛細管電泳4.等電聚焦5.層析聚焦6.離子交換層析 三、利用選擇性吸附的純化方法：疏水

6、作用層析 四、利用配體的特異性親和力的純化方法：親和層析包含體表達形式的優(yōu)點：高密度，易于分離純化，能簡化外源基因表達產(chǎn)物的分離操作；有效地抵御了大腸桿菌中蛋白酶對目的蛋白的降解，在一定程度上保持表達產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；對宿主細胞無毒害。包含體表達形式的缺點：喪失了原有的生物活性，必須通過有效的變性復性操作，才能回收得到具有正確空間構(gòu)象的目標蛋白；體外復性蛋白質(zhì)成功率低，不超過30%。動物細胞的生理特點：1、細胞的分裂周期長 2、細胞生長需貼附于基質(zhì)，并有接觸抑制現(xiàn)象 3、正常二倍體細胞的生長壽命是有限的 4、動物細胞對周圍環(huán)境十分敏感 5、動物細胞對培養(yǎng)基的要求高 6、動物細胞對蛋白質(zhì)的合成途徑

7、和修飾功能與細菌不同動物細胞制藥的前景與展望：1、改進表達載體，提高表達水平和產(chǎn)量 2、利用代謝工程，改進培養(yǎng)工藝，降低生產(chǎn)資本 3、抑制細胞凋亡，延長培養(yǎng)周期 4、采用糖基化工程，提高產(chǎn)品質(zhì)量 5、轉(zhuǎn)基因動物的研究 6、組織工程的研究HAT培養(yǎng)基的原理:它是用次黃嘌呤（H）、氨基碟呤（A）和胸腺嘧啶（T）配制的。其中氨基碟呤能阻斷DNA合成的主要途徑，瘤-瘤融合細胞和瘤細胞不能合成DNA而死亡。脾-脾融合細胞和瘤細胞在這樣的組織培養(yǎng)條件，幾天內(nèi)亦迅速死亡。由于SP2/0等骨髓細胞都是次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）缺乏株，脾細胞內(nèi)卻有這種酶，因此脾-瘤融合的雜交細胞可利用HGPRT

8、，用次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶（T）合成DNA，使雜交瘤細胞得以生長。制備雙功能抗體的方法：1、非共價鍵二聚體 2、共價連接雙特異單鏈抗體 3、應用亮氨酸拉鏈、螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋燈蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域?qū)蓡捂溈贵w連接起來抗體融合蛋白的類型：1、配基-配基型融合蛋白 2、配基-Ig型嵌合蛋白 3、配基-Fv型嵌合蛋白 4、受體-Fv型融合蛋白 5、酶-抗體型融合蛋白構(gòu)建抗體融合蛋白的基本原則：將第一個蛋白的終止密碼子刪除，再接上帶有終止密碼子的第二個蛋白基因，即可實現(xiàn)兩個基因共表達。在構(gòu)建過程中關鍵的問題是兩個蛋白間的街頭序列連接肽，一般來說35個氨基酸就可滿足大部分融合蛋白的正確折疊的要求，加入一段有疏水

9、性和一定伸展性的較長肽鏈，可緩解兩種蛋白相互干擾。噬菌體抗體庫技術的基本方法：獲取目的基因，抗體庫技術的載體，淘篩，表達和檢定噬菌體抗體庫技術的特點：1、將抗體的基因型與表達型緊密聯(lián)系 2、模擬天然全套抗體庫 3、避開了人工免疫和雜交瘤技術 4、可獲得高親和力的人源化抗體植物培養(yǎng)細胞的生理特性：1、植物細胞較大，有纖維素細胞壁，細胞耐拉不耐扭，抗剪切力差 2、生長速度緩慢，易被污染，需用抗生素 3、細胞生長的中期及對數(shù)期，多以非均相集合體的細胞團形式存在，懸浮培養(yǎng)較難 4、培養(yǎng)時需供氧，培養(yǎng)液粘度大，不能耐受強力通風和攪拌 5、具有群體效應，無接觸抑制性 6、產(chǎn)物多停留于細胞內(nèi)，且產(chǎn)量較低 7

10、、細胞重量的增加在對數(shù)期，次級代謝產(chǎn)物的累積在穩(wěn)定期影響植物次級代謝產(chǎn)物累積的因素：1、生物條件（外植體、季節(jié)、休眠、分化）2、物理條件（光、溫度、PH、通氣）3、化學條件（培養(yǎng)基的化學組成、滲出物）4、工業(yè)培養(yǎng)條件（兩步培養(yǎng)法、攪拌頻率、培養(yǎng)容器的影響）植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)需考察的因素：1、供氧能力及氣泡分散程度 2、剪切力大小及對細胞的影響 3、高密度培養(yǎng)時培養(yǎng)液的混合程度 4、溫度、PH及營養(yǎng)物濃度的控制能力 5、細胞團大小的控制能力 6、易于放大利用微生物生產(chǎn)酶制劑的優(yōu)點：（1）能夠生產(chǎn)酶的微生物種類繁多，有較大的選擇余地。（2）微生物繁殖快、培養(yǎng)周期短、培養(yǎng)方法簡便，培養(yǎng)過程容易控制，

11、（3）微生物具有較強的適應性，能夠培育出新的高產(chǎn)菌株。固定化細胞的特點：1、無需進行酶的分離純化 2、細胞保持酶的原始狀態(tài)，固定化過程中酶的回收率高 3、細胞內(nèi)酶比固定化酶穩(wěn)定性高 4、細胞內(nèi)酶的輔助因子可以自動再生 5、細胞本身含多酶體系，可催化一系列反應 6、抗污染能力強固定化酶的性質(zhì)：（1）酶活力的變化 （2）酶反應特性的變化 （3）最適PH值 （4）最適溫度 （5）米氏常數(shù) （6）最大反應速度固定化酶的特點：（1）固定化酶屬于修飾酶，這種酶可以通過化學、生物、分子工程手段加以改良。（2）固定化酶的穩(wěn)定性很高，可以多次連續(xù)使用。（3）反應以后，產(chǎn)物中不含酶，易于純化。（4）反應條件易于控

12、制，可實現(xiàn)連續(xù)化和自動控制。（5）酶的利用率高，酶的實際使用量較少。（6）固定化酶比水溶性酶更適合進行多酶反應。固定化反應器的類型：（1）間歇式攪拌反應罐（BSTR）（2）連續(xù)流動攪拌反應罐（CSTR）（3）填充式反應罐（PBR）（4）流化床反應器（FBR）（5）循環(huán)反應器（RCR）（6）連續(xù)流動攪拌超濾膜反應器（CSTR/UF）（7）其它反應器反應器的選擇依據(jù)：（1）根據(jù)固定化酶的形狀來選擇。（2）根據(jù)底物的物理性質(zhì)來選擇。（3）根據(jù)外界環(huán)境條件對于酶的穩(wěn)定性來選擇。（4）根據(jù)操作要求和固定化酶反應器的投資費用來選擇。酶化學修飾的方法1.酶的表面化學修飾(大分子修飾、小分子修飾、交聯(lián)修飾、固

13、定化修飾)2、酶分子內(nèi)部的修飾（非催化活性基團的修飾、蛋白主鏈修飾、催化活性基團的修飾、與輔因子相關的修飾、肽鏈伸展后的修飾）3.結(jié)合位點突變的化學修飾有機相酶反應的優(yōu)點：1、增加疏水性底物或產(chǎn)物的溶解度 2、熱力學平衡向合成方向移動 3、可抑制有水參與的副反應 4、酶不溶于有機介質(zhì)，易于回收再利用 5、易從低沸點溶劑中分離純化產(chǎn)物 6、酶的熱穩(wěn)定性提高，pH的適應性擴大 7、無微生物污染 8、能測定某些在水介質(zhì)中不能測定的常數(shù) 9、固定化酶方法簡單修飾酶的特性：1、熱穩(wěn)定性提高2、抗各類失活因子能力提高3、抗原性消失4、體內(nèi)半衰期延長5、最適pH改變6、酶學性質(zhì)變化7、對組織分布能力改變有機

14、相酶反應的溶劑體系：水水溶性溶劑均相體系、水水不溶性溶劑兩相體系、膠束與反相膠束體系、單相有機溶劑體系有機相酶反應的優(yōu)點：1、增加疏水性底物或產(chǎn)物的溶解度 2、熱力學平衡向合成方向移動 3、可抑制有水參與的副反應 4、酶不溶于有機介質(zhì)，易于回收再利用 5、易從低沸點溶劑中分離純化產(chǎn)物 6、酶的熱穩(wěn)定性提高，pH的適應性擴大 7、無微生物污染 8、能測定某些在水介質(zhì)中不能測定的常數(shù) 9、固定化酶方法簡單抗生素生物合成基因的結(jié)構(gòu)特點：1、高G-C堿基組成 2、屬于同一個基因簇 3、抗生素生物合成基因除在染色體上外，有的也定位在質(zhì)粒上克隆抗生素生物合成基因的方法：1、在準宿主系統(tǒng)中克隆檢測單基因產(chǎn)物

15、 2、阻斷變株法 3、突變克隆法 4、直接克隆法5、克隆抗生素抗性基因法 6、寡核苷酸探針法 7、同源基因雜交法基因工程抗體概念及其目的: 基因工程抗體：又稱重組抗體，是指利用重組DNA和蛋白質(zhì)工程技術對編碼抗體的基因按不同需要進行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉(zhuǎn)染適當?shù)氖荏w細胞所表達的抗體分子。目的：降低鼠源性單克隆抗體分子的免疫原性、降低抗體的相對分子質(zhì)量，以增加組織的透過性基因工程抗體改造實例：免疫原性：人一鼠嵌合抗體 改型抗體 分子量：Fab、Fv、ScFv、單域抗體基因表達研究關注的主要問題:1目的基因的表達產(chǎn)量2表達產(chǎn)物的穩(wěn)定性3產(chǎn)物的生物學活性4表達產(chǎn)物的分離純化。影響植物次生代謝積累因

16、素一、生物條件。外植體：培養(yǎng)時期、大小、前處理、細胞密度 。季節(jié) 休眠 分化二、物理條件 光：植物光照和激素具有協(xié)同作用或?qū)棺饔?溫度 ph 通氣三、化學條件 培養(yǎng)基的化學組成 滲出物 四、工業(yè)培養(yǎng)條件 兩步培養(yǎng)法細胞工程：按照一定的設計方案，通過在細胞、亞細胞或組織水平上進行實驗操作，獲得重構(gòu)的細胞、組織、器官以及個體，創(chuàng)造優(yōu)良品種和產(chǎn)品的綜合性生物工程。包括的技術：真核細胞的基因重組、導入、擴增和表達的理論和技術；細胞融合的理論和技術；細胞器特別是細胞核移植的理論和技術；染色體改造的理論和技術；轉(zhuǎn)基因動植物的理論和技術；細胞大量培養(yǎng)的理論和技術，以及將有關產(chǎn)物提取純化的理論和技術 ；論述

17、：基因工程藥物生產(chǎn)的過程（論述）：基因工程技術就是將所要組建對象的目的基因插入載體、拼接、轉(zhuǎn)入新的宿主細胞，構(gòu)建成工程菌，實現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進行復制和表達的技術?；蚬こ趟幬镏圃斓闹饕襟E是：目的基因的克隆，構(gòu)建DNA重組體，構(gòu)建工程菌，目的基因的表達，外源基因表達產(chǎn)物的分離純化，產(chǎn)品的檢驗等?？煞譃樯嫌魏拖掠蝺蓚€階段。上游階段：主要是分離目的基因、構(gòu)建工程菌(細胞)。目的基因獲得后，最主要的就是目的基因的表達。選擇基因表達系統(tǒng)主要考慮的是保證表達的蛋白質(zhì)的功能，其次是表達的量和分離純化的難易。此階段的工作主要在實驗室內(nèi)完成。下游階段：從工程菌的大量培養(yǎng)一直到產(chǎn)品的

18、分離純化和質(zhì)量控制。此階段是將實驗室的成果產(chǎn)業(yè)化、商品化，主要包括：工程菌大規(guī)模發(fā)酵最佳參數(shù)的確立、新型生物反應器的研制、高效分離介質(zhì)及裝置的開發(fā)、分離純化的優(yōu)化控制、高純度產(chǎn)品的制備技術、生物傳感器等一系列儀器儀表的設計和制造、電子計算機的優(yōu)化控制等。動物細胞的培養(yǎng)條件，培養(yǎng)方法與培養(yǎng)方式：培養(yǎng)條件（1）器材的清洗和消毒：器材的清洗：浸泡、刷洗、泡酸、沖洗；器材的消毒滅菌：物理消毒、化學消毒（2）水質(zhì)：電阻值大于18M,去熱原。（3）pH：7.27.4（4） 滲透壓：290300mOsm/kg（5） 溫度：370.5 C（6） 空氣：氧的飽和質(zhì)60%，氧分壓40.7kPa培養(yǎng)方法：【1】細胞

19、分離（1）離心分離法。主要用于從含有細胞的體液如血液，羊水，胸腹水中分離細胞，離心速度過高或時間過長，易擠壓細胞使之受損傷或死亡。（2）消化分離法。是從生物體取來組織塊，將其剪碎，并用消化液將其消化，使組織松散或細胞懸液然后用緩沖液洗滌，離心，去除殘留的消化液而獲得所需的細胞?！?】細胞計數(shù)（1）自動細胞計數(shù)器計數(shù)。原理：讓一定體積的細胞懸液經(jīng)一小孔，并在兩個電極間通過，此時通過的細胞就會對電極產(chǎn)生干擾而使電壓發(fā)生改變，這樣就會在電子計數(shù)器上形成一個信號被記錄下來（2）血球計數(shù)板計數(shù)（3）結(jié)晶紫染色細胞核計數(shù)法（4）MTT染色計數(shù)法。該方法的原理是活細胞內(nèi)的線粒體脫氫酶能將MTT(淡黃色)轉(zhuǎn)變

20、為不可溶性的紫色甲 結(jié)晶，它可溶于脫色液，其色澤的深淺與活細胞的數(shù)量成正比，通過比色即可從標準曲線求出細胞數(shù)?！?】細胞傳代。（1）懸浮細胞的傳代（2）貼壁細胞的傳代【4】細胞凍存和復蘇。（1）細胞的凍存。在凍存時，冷凍速度很重要，不能太快也不能太慢（2）細胞的復蘇。復蘇時總的要求是快融mtt原理：活細胞中線粒體脫氫酶能將四唑鹽（淡黃色）還原成不溶干水的紫色產(chǎn)物甲臢（formazan)，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細胞中紫色結(jié)晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法【1】懸浮培養(yǎng)。讓細胞自由地懸浮

21、于培養(yǎng)基內(nèi)生長增殖【2】貼壁培養(yǎng)。必須讓細胞貼附在某種基質(zhì)上生長繁殖的培養(yǎng)方法【3】貼壁-懸浮培養(yǎng)。（1）微載體培養(yǎng)（2）包埋和微囊培養(yǎng)（3）結(jié)團培養(yǎng)操作方式【1】分批式操作【2】半連續(xù)式操作【3】灌流式操作大腸桿菌表達系統(tǒng)中表達載體必須具備的條件：（1）載體能夠獨立的復制；（2）具有靈活的克隆位點和方便的篩選標記，以籃球外源基因的克隆、鑒定和篩選；（3）具有很強的啟動子，能為大腸桿菌的RNA聚合酶所識別；（4）具有阻遏子，使啟動子受到控制，只有當誘導時才能進行轉(zhuǎn)錄；（5）具有很強的終止子，以便使RNA聚合酶集中力量轉(zhuǎn)錄克隆的外源基因， 而不轉(zhuǎn)錄無關的基因；（6）所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的

22、起始信號，即起始密碼AUG和SD序列， 以便轉(zhuǎn)錄后能順利翻譯?；蚬こ躺L代謝菌的特點？菌體的生長通常用比生長速率來表示?？刂凭w的生長對提高質(zhì)粒的穩(wěn)定性、減少代謝副產(chǎn)物積累、提高外源蛋白產(chǎn)率有重要意義。 工程菌培養(yǎng)可通過選用不同的碳源控制補料和稀釋速率等方法來控制菌體的生長。大腸桿菌的蛋白/菌體量的比值是基本恒定的，因而菌體的生長速度反映了蛋白質(zhì)的合成速度。培養(yǎng)條件的改變，都會改變菌體的能量代謝和小分子前體的供應，影響生物大分子的合成和菌體的生長。對菌體生長的調(diào)控主要有兩種觀點：一種觀點認為能量的供應決定了菌體的最大比生長速率；另一種觀點認為是小分子前體和催化組分的限制決定了菌體的最大比生長

23、率。一、菌體的生長與能量的關系1、碳源物質(zhì)是組成培養(yǎng)基的主要成分。碳源物質(zhì)為細胞提供能量；當菌體生長所需能量大于菌體有氧代謝提供的能量時，菌體會產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物乙酸；高濃度的乙酸明顯抑制菌體的生長。乙醇的抑制作用與pH有關，適當提高pH，可減少乙酸的抑制作用。培養(yǎng)方式中的措施：分批培養(yǎng)中選擇不同的碳源，補料培養(yǎng)中通過控制補料速度，連續(xù)培養(yǎng)中控制稀釋速度等培養(yǎng)方法，都能一定范圍內(nèi)控制菌體的生長，從而控制乙酸的產(chǎn)生，減少它的抑制作用，以實現(xiàn)工程菌的高密度培養(yǎng)和提高重組產(chǎn)物的表達水平。加入蛋氨酸和酵母提取物都能減少乙酸的產(chǎn)生。實質(zhì)：控制菌體的糖酵解速度，使之低于三羧酸循環(huán)和呼吸鏈的最大代謝能力，從而避

24、免乙酰輔酶A的積累和乙酸的產(chǎn)生。代價：降低供能速度或前體供應速度來降低蛋白合成和菌體生長速度2、 菌體生長與前體供應的關系：在基礎培養(yǎng)基中加入氨基酸（小分子前體）能使菌體比生長率提高，蛋白合成增加。由于菌體中小分子前體量和催化結(jié)構(gòu)是有限的，因而生物大分子的合成處于亞飽和狀態(tài)，限制了菌體的比生長速率?；虮磉_在各個水平的競爭又是各個基因互相競爭共同的前體和催化結(jié)構(gòu)的結(jié)果。對于基因工程菌來說，由于基因工程菌質(zhì)粒的復制和外源基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯需要與宿主細胞競爭共同的前體和催化結(jié)構(gòu)，從而加劇了這些成分的不足，因而在同樣的培養(yǎng)基中，工程菌的比生長速率往往低于其宿主細胞，特別是工程菌誘導后，由于外源基因的大

25、量表達，引起菌體比生長速率下降，甚至生長停滯。質(zhì)粒存在對菌體代謝的影響：中等拷貝質(zhì)粒（56拷貝）的工程菌中與前體合成有關的酶增加，這些酶的基因大多受終產(chǎn)物的反饋調(diào)節(jié)。高拷貝質(zhì)粒的工程菌（240拷貝）中，生長速率和菌體總蛋白合成均減少。這與工程菌大量前體被利用引起前體不足，從而產(chǎn)生“嚴緊反應”有關?！皣谰o反應”是當氨酰tRNA不足時,核糖體在密碼子上停留,并合成被稱為魔點的ppGpp的結(jié)果。ppGpp是一個重要的調(diào)控分子。兩種觀點：ppGpp的濃度增加會導致在合成mRNA和rRNA時RNA聚合酶在模板上的移動產(chǎn)生停頓，RNA鏈延長速度減慢，使游離的RNA聚合酶濃度降低，嚴緊控制的啟動子如rrnA

26、等的轉(zhuǎn)錄減少；也可能ppGpp是通過干擾RNA聚合酶與PL啟動子專一識別反應。固定化酶的優(yōu)點及如何制備？固定化酶的優(yōu)點：（1）固定化酶屬于修飾酶，這種酶可以通過化學、生物、分子工程手段加以改良。（2）固定化酶的穩(wěn)定性很高，可以多次連續(xù)使用。（3）反應以后，產(chǎn)物中不含酶，易于純化。（4）反應條件易于控制，可實現(xiàn)連續(xù)化和自動控制。（5）酶的利用率高，酶的實際使用量較少。（6）固定化酶比水溶性酶更適合進行多酶反應。酶的固定化，就是通過載體等將酶限制或固定于特定的空間位置，使酶變成不易隨水流失即運動受到限制，而又能發(fā)揮催化作用的酶制劑。根據(jù)酶的應用目的和特性來選擇固定化方法。酶固定化的方法：1載體結(jié)合

27、法（物理吸附法、離子結(jié)合法、共價結(jié)合法）載體結(jié)合法是將酶結(jié)合到不溶性載體上的一種固定化方法，根據(jù)結(jié)合形式的不同，可以分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價結(jié)合法等三種；2交聯(lián)法：用雙功能或多功能試劑使酶與酶或微生物的細胞與細胞之間交聯(lián)的固定化方法；3包埋法（網(wǎng)格型、微囊型）將酶或含酶菌體包埋在各種多孔載體中，使酶固定化的方法。包埋法可分為網(wǎng)格型和微囊型兩種。將酶或細胞包埋在高分子凝膠細微網(wǎng)絡中的稱為網(wǎng)格型，將酶或細胞包埋在高分子半透膜中的稱為微囊型；4熱處理（細胞）。 以下是附加文檔，不需要的朋友下載后刪除，謝謝班主任工作總結(jié)專題8篇第一篇:班主任工作總結(jié)小學班主任特別是一年級的班主任，是一個復合性

28、角色。當孩子們需要關心愛護時，班主任應該是一位慈母，給予他們細心的體貼和溫暖；當孩子們有了缺點，班主任又該是一位嚴師，嚴肅地指出他的不足，并幫助他改正。于是，我認為班主任工作是一項既艱巨而又辛苦的工作。說其艱巨，是指學生的成長，發(fā)展以至能否成為合格人才，班主任起著關鍵性的作用，說其辛苦，是指每天除了對學生的學習負責以外，還要關心他們的身體、紀律、衛(wèi)生、安全以及心理健康等情況。盡管這樣，下面我就談幾點做法和體會。一、常規(guī)習慣，常抓不懈學生良好的行為習慣的養(yǎng)成不是一節(jié)課、一兩天說說就行的，它必須貫穿在整個管理過程中。于是我制定出詳細的班規(guī)，要求學生對照執(zhí)行，使學生做到有規(guī)可循，有章可依。由于低年級

29、學生自覺性和自控力都比較差，避免不了會出現(xiàn)這樣或那樣的錯誤，因此這就需要班主任做耐心細致的思想工作、不能操之過急。于是，我經(jīng)常利用班會對學生中出現(xiàn)的問題進行曉之以理、動之以情、導之以行的及時教育，給他們講明道理及危害性，從而使學生做到自覺遵守紀律。二、細處關愛，親近學生愛，是教師職業(yè)道德的核心，一個班主任要做好本職工作，首先要做到愛學生?！案腥诵恼撸群跚??！惫ぷ髦校遗ψ龅接诩毼⑻幰娬媲?，真誠的關心孩子，熱心的幫助孩子。我深信，愛是一種傳遞，當教師真誠的付出愛時，收獲的必定是孩子更多的愛！感受孩子們的心靈之語，便是我最快樂的一件事！”三、具體要求，指導到位心理學研究表明，兒童對事物的認知

30、是整體性的，能熟知輪廓，但不注重細節(jié)。我認為，首先要蹲下來，以孩子的視角觀察事物，用孩子能聽懂的話和他們交流。其次，要注重細節(jié)教育，把該做的事指導到位，因為他們很想按照老師的要求去做，很想把事情做好。四、示范帶頭，直觀引導大教育家烏申斯基曾有過這樣一段話：“教師個人的范例，對于學生的心靈是任何東西都不能代替的最有用的陽光?！钡湍昙壍膶W生對自己的班主任是一個怎樣的老師，他們會留心觀察班主任的每一個動作、每一個眼神、每一種表情，會細心傾聽班主任的每一句話，他們對班主任有著一種特殊的信任和依賴情感。班主任的自身素質(zhì)，道德修養(yǎng)，班主任的一言一行，一舉一動，無形之中會成為全班幾十個孩子的榜樣。因此，在班

31、級工作中我時刻注意自身形象，事事從我做起，以良好的形象率先垂范，潛移默化的影響著我的學生。凡要求學生做到的，教師首先自己做到，而且做得更好。要求學生講衛(wèi)生，不隨便亂扔垃圾，自己就做到隨手撿拾垃圾。要求學生不遲到，在我的帶動下，我們班的大多數(shù)學生都能做到講衛(wèi)生不遲到，個個講文明守紀律。五、及時表揚，延遲批評德國美學家黑格爾說：“不應該使孩子們的注意力長久地集中在一些過失上，對此，盡可能委婉地提醒一下就夠了。最重要的是要在學生身上激發(fā)出對自身力量和自身榮譽的信念?！苯踢^低年級的老師都知道：孩子小，事兒多，一上課就“告狀”。當老師的又不能不公平處理，這樣耽誤的時間太多，而且學生因為受了批評，注意力長

32、時間集中在自己的過失上，情緒受影響，低落的情緒體驗使智力活動水平明顯下降，課堂吸收效率變低。針對這一情況，我采取延遲批評，這樣既培養(yǎng)學生愉快的情緒體驗，又給予其改正和返回的機會，之后老師只要加以指導，就能很好的解決問題.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第二篇:四年級班主任工作總結(jié)學生是涌動著無限活力的生命體，是教育的起點和歸宿。面對學生，祖國的未來，我們要做一個真正有意義的班主任，素質(zhì)教育要求我們要面向全體學生，為學生服好務，使學生的思想道德、文化科學、勞動技能、身體心理素質(zhì)得到全面和諧地發(fā)展，我們的班級管理究竟該如何閱讀學生個體，提升學生學習生活及生命的質(zhì)量呢?

33、在過去的一學期里，我們班在學校的統(tǒng)一組織、領導和同學們的共同努力下及任課老師的大力支持和配合下，各項工作順利開展，安全、學習、工作等方面都取得較突出的成績，現(xiàn)將我所做的一些工作總結(jié)如下：一、做好學生的思想工作，培養(yǎng)學生良好的道德品質(zhì)，凈化學生的心靈，努力培養(yǎng)德智體全面發(fā)展的人才做好學生的思想工作從兩方面入手，一是重視每周的班會課，開好班會課；二是重視與學生的思想交流，多與學生談心。重視班會，開好班會，為的是在班中形成正確的輿論導向，形成良好的班風、學風，為學生提供一個好的大環(huán)境，重視的是學生的共性。為配合學校各項工作的落實，我們班積極開展了許多有益于學生身心健康發(fā)展的活動，讓學生在活動中明事理

34、、長見識。學生自尊心也很強，直接的批評換回來的可能是思想的叛逆，利用班會課對學生進行思想教育的好處，就是避免單調(diào)重復的批評說教而引起學生的反感，容易為學生接受，能切實幫助學生澄清思想上的模糊認識，提高學生的思想境界。但開班會課不一定都要等到每周二下午第四節(jié)，可利用一些零碎的又不影響學科學習的時間開短小精悍的班會也能取得良好的效果。不必長篇大論，班主任把及時發(fā)現(xiàn)的不良思想的苗頭一針見血地指出來，對事不對人，進行警示性的引導教育，往往能把一些影響班風、學風的不良思想消滅在萌芽階段。而重視與學生的思想交流，多與學生談心，注重的是學生的個性和因材施教。我常利用課余時間和學生促膝談心，及時對學生進行針對

35、性的教育。用個人的魅力征服學生，用自己的熱情和朝氣感染學生。體現(xiàn)在學習、生活的方方面面。做任何事情，一定要從學生的角度去考慮，為學生利益著想，學生才易于接受。在這個時候，我就是他們的好朋友，盡量為他們排憂解難，也正因如此，我得到了班上大多數(shù)學生的喜愛和信任。二、加強班級管理，培養(yǎng)優(yōu)秀的學風、班風，深入全面地了解學生，努力培養(yǎng)團結(jié)、嚴格、活潑、奮進的班集體四年級的學生思想、心理發(fā)展、變化很快。因此，對學生的思想工作顯得尤其復雜和重要。在這個學期里，我的班級管理工作主要從三方面實施：一方面，我主要加大了對學生自治自理能力培養(yǎng)的力度，通過各種方式，既注意指導學生進行自我教育，讓學生在自我意識的基礎上

36、產(chǎn)生進取心，逐漸形成良好的思想行為品質(zhì)；又注意指導學生如何進行自我管理，培養(yǎng)他們多方面的能力，放手讓學生自我設計、自我組織各種教育活動，在活動中把教育和娛樂融入一體；還注意培養(yǎng)學生的自我服務的能力，讓學生學會規(guī)劃、料理、調(diào)控自己，使自己在集體中成為班集體的建設者，而不是包袱。在這點上，特別值得一提的是班干部的選用，這是讓學生自治的重要途徑。班主任的管理代表的是學校的管理，不論班主任如何和顏悅色都帶有不容質(zhì)疑的權(quán)威性，也難免有不被理解和接受的時候，通過班干部的協(xié)調(diào)，往往能夠取得意想不到的效果。班干部起的是協(xié)助班主任管理班級的作用，他們接受班主任的指導，又及時向班主任反饋班級情況和同學們的思想動態(tài)

37、；他們分工管理班級的各項事務，同時又是一個團結(jié)合作的整體。選好班干部，不但有利于班級管理，而且有利于全體學生共同發(fā)展。培養(yǎng)學生擔任班干部，是培養(yǎng)學生能力、提高學生素質(zhì)的一種很有效的方法，如培養(yǎng)其組織能力、管理能力、社交能力、語言表達能力等，還可以培養(yǎng)其關心集體、關心他人、樂于奉獻、積極進取等優(yōu)良的思想品質(zhì)。多培養(yǎng)班干部有利于多數(shù)學生全面發(fā)展.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第三篇:特教班主任工作總結(jié)本學期在校領導的信任和支持下,我繼續(xù)擔任高考班班主任的工作,為了在今后的工作能夠取長補短,特總結(jié)如下:（一）抓常規(guī)管理規(guī)范學生的行為習慣早到校、兩操、打掃除、校各項活動

38、的參加都認真組織，嚴格要求，決不馬虎，讓學生感到做人就要這樣嚴謹、認真、一絲不茍。至今學生以習慣成自然。例如間操時間一到不用老師強調(diào)，都主動自覺去做，贏得任課老師的好評。（二）實行班級管理我們班級發(fā)展的目標都是由師生共同商討確立的，并且分工負責。這樣，使管理者和被管理者做到和諧統(tǒng)一。師生能以誠相待，共同決策，使學生感覺到班級的事也有他們的一部分。通過分級管理，班干部承擔了一些日常事務的管理工作，并有權(quán)獨立處理相關事務。班主任則激勵和指導學生自主性的發(fā)揮，化解工作中的矛盾。通過自我管理，既加強了班干部隊伍的建設，培養(yǎng)了學生組織管理能力，又提高了全體學生的自覺性，自制力。（三）營造良好的學習環(huán)境現(xiàn)

39、在初中學生的學習、生活有絕大部分時間是在學校里度過的。班級即是學生的一個大家庭。營造良好的學習環(huán)境，對提高學生的德育素質(zhì)，起了相當大的作用。首先對學生進行理想教育，學習目的教育，習慣的養(yǎng)成教育，培養(yǎng)其自信心及責任意識，其次，建立一些監(jiān)督機制，獎懲制度，定期檢查，定期反饋，賞罰分明，現(xiàn)在班級風氣正，學風濃，凝聚力強。班級真正成為一個和諧向上的集體。（四）個別教育與表揚相結(jié)合班級中思想基礎和學習都比較差的學生。通常表現(xiàn)為精力旺盛而又學不進去，思想活躍而又任性好動，對班集體正常的學習生活秩序有一定影響。在教育轉(zhuǎn)化這部分學生時，我從建立和培養(yǎng)感情入手，親近他、關心他、了解他，努力發(fā)現(xiàn)他身上的閃光點，如

40、在班級活動中，象打掃衛(wèi)生、主動抬水，拾到東西主動上繳，積極參加校運會入場式等等，都及時表揚，使這些不管在家里，還是在學校，極少獲得表揚，久而久之，已經(jīng)失去了上進心和自我認同感，缺乏自信心的同學，從拾自信，使他們在班主任充分理解和信任的基礎上，使性格和人格回到了正確的軌道上來.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第四篇:優(yōu)秀班主任工作總結(jié)素質(zhì)教育要求我們要面向全體學生，使學生的思想道德、文化科學、勞動技能、身體心理素質(zhì)得到全面和諧地發(fā)展，個性特長得到充分的培育。這是一項長期的、具有劃時代意義的改革。學校教育是我國主要的教學形式，班級授課制是學校教育的基本形式。因此，作為

41、班集體靈魂的班主任應該充分認識到自己所承擔的歷史重任。小學班主任面對6、7歲-11、12歲的兒童，工作更加繁重。我相信，任何一位班主任都希望勝任這項工作并把自己從繁重中盡量解脫出來，那么，如何開展小學班主任工作就至關重要。下面我談談自己的體會。一、親近學生，研究學生；展現(xiàn)自我，樹立威望。誰愛孩子，孩子就會愛他，只有用愛才能教育孩子。班主任要善于接近孩子，體貼和關心學生，和他們進行親密的思想交流，讓他們真正感受到老師對他的親近和愛。這是班主任順利開展一切工作的基礎。研究學生是教育取得成功的必要條件，最好的途徑是通過活動觀察。了解班風、學風，了解全班主要的優(yōu)缺點并分析其原因所在，了解家長普遍的文化

42、層次，找到亟待糾正的弱點；二要研究學生的個性特征（包括能力、氣質(zhì)、性格、愛好等），了解個人的生活環(huán)境，掌握哪些是積極分子，哪些是特別需要注意的學生等等。在親近與研究學生的過程中，班主任要努力展現(xiàn)自身廣博的文化與高尚的道德情操，使學生對你既親近又崇拜，既認定你是值得信賴的老師，又把你當作好朋友，樹立起班主任崇高的威望。那么，你的教育可能取得事半功倍的效果。二、班干部隊伍的組建和培養(yǎng)。一個班的集體面貌如何，很大程度上是由小班干部決定的。小班干部對班集體有著以點帶面和以面帶面的作用，我稱他們是班主任的左右手。所以唯有慎重地選拔和培養(yǎng)班干部隊伍，班主任工作才能逐漸從繁重走向簡單與輕松。當選的班干部應具

43、有較強的號召力和自我管理能力。班干部隊伍的組建不能僅僅作為一種形式存在，班主任必須精心培養(yǎng)：其一，要大力表揚班干部優(yōu)點，宣傳他們的先進事跡，幫助小班干部樹立威信；其二，在鼓勵班干部大膽工作，指點他們工作方法的同時，要更嚴格要求班干部個人在知識、能力上取得更大進步，在紀律上以身作則，力求從各方面給全班起到模范帶頭作用，亦即以點帶面；其三，培養(yǎng)*部團結(jié)協(xié)作的精神，要能夠通過*部這個小集體建立正確、健全的輿論，帶動整個班集體開展批評與自我批評，形成集體的組織性、紀律性和進取心，亦即以面帶面。三、以強化常規(guī)訓練帶動教育教學工作。良好的常規(guī)是進行正常的學習和生活的保障，一個學生調(diào)皮搗蛋、不合常規(guī)的舉動往

44、往會使一堂好課留下遺憾，使整個集體活動宣告失敗，甚至使全班努力爭取的榮譽付諸東流，直接影響到班集體的利益。因此，要扎實有效地加強一個學生的常規(guī)訓練。訓練的內(nèi)容包括小學生守則和小學生日常行為規(guī)范要求的常規(guī)、課堂常規(guī)、集會和出操常規(guī)、衛(wèi)生常規(guī)、勞動常規(guī)、參觀常規(guī)以及路隊常規(guī)等等諸多方面。訓練可以通過集體或個人、單項強化或全面優(yōu)化相結(jié)合的方式進行（根據(jù)具體情況選擇），務必使每個學生具有服從集體，服從命令的思想.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第五篇:大學班主任工作總結(jié)見習期剛滿的我，回顧這一年的工作，除了代理團委書記一職外，另外很重要的一部分工作就是擔任班主任。我當任的

45、是2000級英教及2001級0103、0104班的班主任。以下我分別將兩個專業(yè)的班級工作進行總結(jié)。2000級英教專業(yè)兩個班情況比較好。他們已經(jīng)基本適應大學生活，兩個班班委工作認真負責，能起到核心帶頭作用，與我也保持著密切聯(lián)系，作好了橋梁工作。因此，兩個班取得了不少成績：2001班在今年被評為優(yōu)秀班集體。班上有2/3的同學參加了黨校學習，并都以優(yōu)異的成績結(jié)業(yè)。其中有一名同學被發(fā)展為預備黨員。該班學風濃厚，平時堅持早讀，在期末考試中無一人重修。在英語劇比賽中，該班也獲得了二等獎的好成績。2002班在去年也被評為了紅旗團支部。該班也是積極要求進步。全班33人，有22人向黨組織遞交了入黨申請書，形成一

46、股“一顆紅星向著黨”的良好精神面貌。團支部認真負責，組織開展了以“揭批”為中心的團支部會議，使同學們對邪教有了清醒地認識。李國宏同學雖然曾經(jīng)犯過錯誤，但在班上同學的幫助下，勇于改正，并且一次意外中舍己救人，為外語學院爭了光。該班另一特色就是活躍，能全面發(fā)展。在冬季長跑中，報名踴躍，最后有7人參加。在“十大歌星”比賽中，有兩人獲獎?！笆笮π恰敝校摪喙?jié)目代表外語學院參賽，獲得第一名的好成績。作為班主任能看到這樣的班級成績感到非常欣慰與驕傲。下學期他們將進入大三，班委要改選，我希望能有跟多的同學得到鍛煉。我?guī)У牧硗鈨蓚€班與他們形成對比，大一的0103、0104總的情況另我擔憂。先談談不足吧，總的

47、有以下幾點.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第六篇:差班班主任工作總結(jié)擔任八所中學初一年級（6）班的班主任一年了，在與孩子們接觸打交道的這一年中，有苦有淚，有歡笑也有悲痛，更有些許成功也有些許遺憾！現(xiàn)我對這一年的班主任工作作出如下總結(jié)：一班風管理俗話說：一個班的班風猶如這個班的班主任的性格特點。我是一個比較“苛刻”的人，對人對事都極度的講究“完美”。在管理班級的時候，我是以“軍隊化”的標準來進行的。一個學生，如果能夠約束自己，并能夠服從管理、聽從指揮，我想，這個學生就達到了自我的升華。1.學生的品德一個班級的優(yōu)秀與否，表現(xiàn)在每位學生品德的優(yōu)劣上面。我們班一共有87

48、個人，男生59個，女生28個，其中少數(shù)民族生共有6人，從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來的學生占了本班人數(shù)的78。無論是從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來的學生還是在市內(nèi)的學生，幾乎每個學生的品德思想多多少少都存在著個體的差異性。概括來講，從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來的學生普遍會在心理及思想上認為自己是從農(nóng)村來的，無論是學習還是見識方面都不如城市的孩子，難免會產(chǎn)生自卑的心理；城市的孩子則會認為自己比從農(nóng)村上來的孩子優(yōu)秀很多，甚至有瞧不起人的這種不良心態(tài)；還有這兩類孩子之間會進行物質(zhì)上的攀比。這些品德思想上的認識多多少少都影響了一個班級的凝聚力，也影響了個人的品德素養(yǎng)！面對這些問題，我主要采用“鼓勵限制”的方法。鼓勵具有自卑心理的學生向精神方面看齊

49、；鼓勵具有攀比之心的學生也向精神方面看齊！同時限制家庭條件好的同學要特別注意學校的規(guī)章制度，不能帶手機、帶MP3和MP4進入教室的，堅決不能讓他們帶入！當然，在學生們交往接觸的過程中，難免也會發(fā)生矛盾，主要體現(xiàn)在吵架和打架這兩大方面上。對于如何避免這些沖突，我堅持的原則是寬以待人。如果學生之間發(fā)生沖突了，我會找他們了解情況，無論是誰對是誰錯，都要讓他們站在對方的角度去進行思考：換成是我，我能不能這樣做？讓他們學會寬以待人，避免下次再發(fā)生矛盾沖突。2.學生的考勤著名教師魏書生說過一句話：學生能做的事學生自己做！學生的考勤情況，我是這么進行管理的：各個組長負責各組成員的遲到、曠課以及課堂紀律的考勤

50、；紀律委員負責對每個組長的紀律考勤；副班長監(jiān)督紀律委員的紀律考勤；正班長對副班長的紀律進行考勤。不管是身為普通身份的學生，還是身處“要職”的班干部，如果出現(xiàn)亂子，我都會找該負責人進行對話，及時地進行處理。且在合適的時間，比如說每周周一的班會課上進行點名批評，當然對于做得比較好的學生，也會進行點名表揚.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第七篇:幼兒園班主任工作總結(jié)本學期我班根據(jù)綱要精神，以幼兒園工作計劃為指導，緊緊圍繞學期計劃，在班上老師的緊密配合下，有的放矢，循序漸進的開展班級各項工作。現(xiàn)將本學期主要工作總結(jié)如下：一、教育工作1、“多元化幼兒藝術教育融化”的嘗試根據(jù)

51、幼兒園及班工作計劃，我班進行了“多元化幼兒藝術教育融化”的嘗試，并制訂了春雨的色彩、夏天的主題網(wǎng)絡。在春雨的色彩的主題網(wǎng)絡中，以文學作品為切入點，以“春”為核心，涉及科學、社會、語言、藝術、健康等領域的各項活動。春雨的色彩中還生成了小主題雨，并根據(jù)“雨”進行了“雨的形成”、“小雨滴旅行記”、“小雨點”等等的活動。在進行這些活動時，我們注重利用各種資源，合理整合。通過實驗、圖片、電教設施來啟發(fā)幼兒了解有關雨的知識；或許是因為幼兒年齡知識水平的因素，或許所選知識涉及過深，在活動進行中，發(fā)現(xiàn)效果不理想，沒有達到預定目標。因此，在進行第二主題網(wǎng)絡夏天時，我們總結(jié)經(jīng)驗，反思不足，及時進行調(diào)整。從幼兒生活

52、中選材，以南京教材中找涼快為藍本進行課程整合，而收到了較好的成效。在夏天的主題網(wǎng)絡中，從小朋友找涼快動物找涼快到昆蟲的夏眠多種多樣的乘涼工具我發(fā)明的乘涼工具；幼兒參與程度的熱情較上一主題高漲。2、環(huán)境創(chuàng)設我班幼兒三十九人，性格活潑開朗，但個性鮮明突出。因此，我班在進行環(huán)境創(chuàng)設中能依據(jù)綱要中的精神，結(jié)合本班幼兒實際情況，有針對性的創(chuàng)設各區(qū)域：1、對個性霸道、任性的幼兒創(chuàng)設了“謙讓是美德”角色扮演區(qū)。2、對愛表現(xiàn)、外露的幼兒設置了小舞臺。3、壁畫的設計及進度緊扣教育主題，充分利用家長資源和幼兒作品.本文來自公務員之家，查看正文請使用公務員之家站內(nèi)搜索查看正文。第八篇:初中班主任工作總結(jié)一個學期很快

53、結(jié)束了，在領導和各位老師的關心和幫助下，順利走過了一學期?，F(xiàn)在就把一學期的工作情況總結(jié)一下。一、我所做的主要工作初三是整個初中重要的時期，我深知自己肩負的責任重大，不敢有絲毫的怠慢。學生在心理和生理上都發(fā)生了很大的變化，對于這一變化，學生的精神上有更多的壓力，而大多數(shù)的學生在這個轉(zhuǎn)折時期顯得無所適從。怎樣讓學生盡快適應這一變化，順利度過轉(zhuǎn)折時期，這是擺在我眼前的首要任務。我當班主任力爭做到兩點：一是尊重每一個學生，滿足學生尊重的需要，承認的需要，情感的需要，努力克服固執(zhí)己見，偏激的思維方式，尊重學生個性發(fā)展，為孩子的成長創(chuàng)造一個愉快的心理運動空間；二是善待每一個學生，用真誠的愛心對待每一個孩子

54、。對于優(yōu)等生，不掩飾他們的缺點，積極引導他們揚長改過，努力使其達到卓越。對于后進生，不歧視他們，善于發(fā)現(xiàn)他們身上的閃光點，激勵他們一步一步自我完善。我班的王帥同學學習很差，上課不注意聽講，作業(yè)經(jīng)常不交，課上、課下紀律不能保證，是典型的后進生。對于這樣的孩子如果只是批評、指責，他的自信心肯定會越來越少，甚至還會自暴自棄。我發(fā)現(xiàn)他的足球踢得不錯，于是就鼓勵他，如果你在學習上能象踢球那么專注，你的學習成績一定會取得大進步。對于他身上的每一點進步，我都及時發(fā)現(xiàn)，并且及時予以鼓勵，培養(yǎng)他的自信心。對于后進生，我動員學習好的同學幫助他們，帶動他們把學習成績提高上去，組成一幫一學習互助學習小組。這個班的學生

55、整體給人的感覺就是思維活躍，反應敏捷，但就是組織紀律性差，紀律松散，缺乏自我約束能力。如今的孩子已經(jīng)今非昔比，他們接觸面廣，思維活躍，自尊心強，但又有著現(xiàn)代青少年極大的弱點即缺乏勤奮刻苦拼搏的精神，這些都表現(xiàn)在一言一行中。在隊列隊行訓練中表現(xiàn)尤其明顯。他們自由散漫，在隊列里有說話的、打鬧的，無精打采，步伐隨便。我向孩子提出要求，從起步到走步，從轉(zhuǎn)體到每一個動作，都給他們提出規(guī)范化的要求，親身示范，身體力行。通過這些訓練，使孩子們體會到嚴格有序管理帶來的效果。現(xiàn)在的孩子普遍自私，在小事上斤斤計較，不能寬厚待人。這表現(xiàn)在處理同學關系上，同學之間有了矛盾，出言不遜，動輒大打出手，拳腳相加。針對這一現(xiàn)

56、象，我教育學生怎樣正確處理同學關系，并以此開展主題班會，對學生進行教育。在處理鬧矛盾的學生時，我讓學生多做自我批評，在自己身上找不足，以比來培養(yǎng)學生寬厚待人的精神，學會以寬容和大度之心對待周圍的人。勞動更培育學生德育思想品質(zhì)的機會?，F(xiàn)在的孩子一提起勞動就有厭煩心理，這些獨生子女平時干活的機會很少，養(yǎng)成了懶惰的習慣。首先必須得教會學生怎樣干活，從掃地到拖地，從擦玻璃到擦墻圍子，我都示范指導并嚴格檢查，及時表揚做得好的同學，批評做的不認真和逃跑的同學，讓孩子們知道老師不僅在意他們的學習更注重他們的人品.大學生實習總結(jié)專題8篇第一篇:大學生實習總結(jié)一、社會實踐目的：認識當代社會對大學生的要求、及從中

57、找出自己的不足之處、在四年中在這方面加強學習。了解一些社會的其他人如何在努力生活，對自己以后畢業(yè)找工作有一定的幫助，了解一些就業(yè)崗位需要怎么樣的技能，怎樣的工作、以及我們應該如何去做。最主要的就是鍛煉自己，使自己不會再像以前那么那樣懶惰，讓自己變得堅強不再懦弱、學會忍受忍受一些不公、學會忍受孤獨！二、實踐內(nèi)容：在寒假開始時我一回到家就開始給家里幫忙，家里在市場批發(fā)蔬菜每天早上6點就要在零下20度的環(huán)境下將自己從別的地方運來的蔬菜進行批發(fā)、今年已經(jīng)近20歲了、對家里的幫助也是很少很少，感覺慚愧，只是每天早早的去幫忙送菜，這個實踐對自己的專業(yè)知識倒是沒有什么運用的地方，也許是現(xiàn)在用不上，我是很希望

58、將自己所學的運用到工作使自己所學的不至于一無用處!但現(xiàn)在這種機會是少之又少。以前只要是星期天、假期都會給家里幫忙這只是對自己的小鍛煉、在大學校園中也許是舒服貫了變得無所事事、現(xiàn)在早上早起感覺這么的困難這在以前是怎么也不會出現(xiàn)的事情，這個假期這個毛病也有了少許的改變、呵這就是所謂的成績、我從小就希望自己長大能去做自己喜歡的生意、通過給家里好幾年的批發(fā)零售我看到也許做生意會很枯燥、乏味、但是能忍受這種孤獨、乏味并在其中創(chuàng)造出成績的我認為這就是成功的，這便是生活的意義所在。三、實踐結(jié)果：回嘉峪關在家中的這幾日雖不比在學校的安逸但是也讓自己成長了少許、通過寒假的幫忙的幫忙發(fā)現(xiàn)自己的人際交往能力還是很弱，這是以后必須解決的問題、使自己變得無所畏懼。在