生物技術(shù)制藥大題的資料

1、現(xiàn)代生物藥物分類(lèi)：重組DNA技術(shù)制造的多肽、蛋白質(zhì)類(lèi)治療劑基因藥物：基因治療劑、基因疫苗和反義藥物等。天然生物藥物：來(lái)自動(dòng)物、植物、微生物和海洋生物的天然產(chǎn)物。合成與部分合成生物藥物。生物技術(shù)藥物的特性:分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜；具有種屬特異性；治療針對(duì)性強(qiáng)、療效高；穩(wěn)定性差；基因穩(wěn)定性；免疫原性；體內(nèi)的半衰期短；受體效應(yīng)；多效性和網(wǎng)絡(luò)效應(yīng)；檢驗(yàn)的特殊性重組蛋白質(zhì)分離純化的方法及目的：1、離心/過(guò)濾（去除細(xì)胞、細(xì)胞碎片、顆粒性雜質(zhì)） 2、陰離子交換層析（去除雜質(zhì)蛋白、脂質(zhì)、DNA和病毒等） 3、40nm微孔濾膜過(guò)濾（進(jìn)一步去除病毒） 4、陽(yáng)離子交換層析（去除牛血清蛋白或轉(zhuǎn)鐵蛋白等） 5、超濾（去除沉淀物及

2、病毒） 6、疏水層析（去除殘余的雜蛋白） 7、凝膠過(guò)濾（與多聚體分離） 8、0.22um微孔濾膜過(guò)濾（除菌）宿主細(xì)胞的分類(lèi)：1原核細(xì)胞：常用的有大腸桿菌（分泌能力不足，真核蛋白質(zhì)常形成不溶性的包涵體，不存在翻譯后修飾作用，對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物不能糖基化。）、枯草芽孢桿菌（分泌能力強(qiáng)，不形成包涵體，不能使蛋白質(zhì)糖基化。）、鏈霉菌（重要的工業(yè)微生物。分泌能力強(qiáng)，具有糖基化能力。）等；2真核細(xì)胞：酵母（表達(dá)產(chǎn)物直接分泌到細(xì)胞外，分泌能力強(qiáng)，表達(dá)產(chǎn)物能糖基化。）、絲狀真菌（很強(qiáng)的蛋白質(zhì)分泌能力，能正確進(jìn)行翻譯后加工，包括肽剪切和糖基化。）、哺乳動(dòng)物細(xì)胞（表達(dá)產(chǎn)物可由重組轉(zhuǎn)化的細(xì)胞分泌到培養(yǎng)液中，產(chǎn)物是糖基化的

3、，接近或類(lèi)似于天然產(chǎn)物。）。影響目的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素：（1）外源基因的計(jì)量（2）外源基因的表達(dá)效率：?jiǎn)?dòng)子的強(qiáng)弱、核糖體結(jié)合位點(diǎn)的有效性、SD序列和起始密碼的間距、密碼子組成（3）表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性（4）細(xì)胞的代謝負(fù)荷（5）工程菌的培養(yǎng)條件真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)的形式：以融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因、以非融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因、分泌型表達(dá)蛋白藥物基因影響目的基因在酵母中表達(dá)的因素：外源基因的劑量、外源基因的表達(dá)效率（啟動(dòng)子、分泌信號(hào)、終止子）、外源蛋白的糖基化、宿主菌株的影響基因工程藥物生產(chǎn)的過(guò)程：獲得目的基因、組建重組質(zhì)粒、構(gòu)建基因工程菌、產(chǎn)物分離純化、除菌過(guò)濾、半成品檢定、成

4、品檢定、包裝。提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法：選擇合適的宿主菌、選擇合適的載體、選擇壓力、分階段控制培養(yǎng)、控制培養(yǎng)條件、固定化基因工程菌的培養(yǎng)方式：1. 分批培養(yǎng)2. 補(bǔ)料分批培養(yǎng)：將種子接入發(fā)酵反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后，間歇或連續(xù)地補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基，使菌體進(jìn)一步生長(zhǎng)的方法。3. 連續(xù)培養(yǎng)：將種子接入發(fā)酵反應(yīng)器中，攪拌培養(yǎng)至一定菌體濃度后，開(kāi)動(dòng)進(jìn)料和出料的蠕動(dòng)泵，以控制一定稀釋率進(jìn)行不間斷的培養(yǎng)。4. 透析培養(yǎng)利用膜的半透性原理使代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基分離，通過(guò)去除培養(yǎng)液中的代謝產(chǎn)物來(lái)解除其對(duì)生產(chǎn)菌的不利影響。5. 固定化培養(yǎng)：將固定化技術(shù)用于工程菌的培養(yǎng)，質(zhì)粒穩(wěn)定性大大提高，特別是對(duì)分泌型菌種有利基因

5、工程菌的不穩(wěn)定性有哪幾種？如何對(duì)它進(jìn)行改善1分裂不穩(wěn)定：指工程菌分裂時(shí)出現(xiàn)一定比例不含質(zhì)粒子代菌的現(xiàn)象。2結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定：指外源基因從質(zhì)粒上丟失或堿基重排、缺失所致工程菌性能的改變改善1、選擇合適的宿主菌2、選擇合適的載體3、選擇壓力4、分階段控制培養(yǎng)5、控制培養(yǎng)條件6、固定化基因工程藥物的分離純化：細(xì)胞破碎、固液分離、濃縮與初步純化、高度純化直至得到純品、成品加工。分離純化的方法一、根據(jù)分子大小不同的純化方法1.透析和超濾2.密度梯度離心 3.凝膠過(guò)濾二、根據(jù)電荷不同的純化方法1.電泳2.聚丙烯酰胺凝膠電泳3.毛細(xì)管電泳4.等電聚焦5.層析聚焦6.離子交換層析 三、利用選擇性吸附的純化方法：疏水

6、作用層析 四、利用配體的特異性親和力的純化方法：親和層析包含體表達(dá)形式的優(yōu)點(diǎn)：高密度，易于分離純化，能簡(jiǎn)化外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離操作；有效地抵御了大腸桿菌中蛋白酶對(duì)目的蛋白的降解，在一定程度上保持表達(dá)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)毒害。包含體表達(dá)形式的缺點(diǎn)：?jiǎn)适Я嗽械纳锘钚?，必須通過(guò)有效的變性復(fù)性操作，才能回收得到具有正確空間構(gòu)象的目標(biāo)蛋白；體外復(fù)性蛋白質(zhì)成功率低，不超過(guò)30%。動(dòng)物細(xì)胞的生理特點(diǎn)：1、細(xì)胞的分裂周期長(zhǎng) 2、細(xì)胞生長(zhǎng)需貼附于基質(zhì)，并有接觸抑制現(xiàn)象 3、正常二倍體細(xì)胞的生長(zhǎng)壽命是有限的 4、動(dòng)物細(xì)胞對(duì)周?chē)h(huán)境十分敏感 5、動(dòng)物細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基的要求高 6、動(dòng)物細(xì)胞對(duì)蛋白質(zhì)的合成途徑

7、和修飾功能與細(xì)菌不同動(dòng)物細(xì)胞制藥的前景與展望：1、改進(jìn)表達(dá)載體，提高表達(dá)水平和產(chǎn)量 2、利用代謝工程，改進(jìn)培養(yǎng)工藝，降低生產(chǎn)資本 3、抑制細(xì)胞凋亡，延長(zhǎng)培養(yǎng)周期 4、采用糖基化工程，提高產(chǎn)品質(zhì)量 5、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究 6、組織工程的研究HAT培養(yǎng)基的原理:它是用次黃嘌呤（H）、氨基碟呤（A）和胸腺嘧啶（T）配制的。其中氨基碟呤能阻斷DNA合成的主要途徑，瘤-瘤融合細(xì)胞和瘤細(xì)胞不能合成DNA而死亡。脾-脾融合細(xì)胞和瘤細(xì)胞在這樣的組織培養(yǎng)條件，幾天內(nèi)亦迅速死亡。由于SP2/0等骨髓細(xì)胞都是次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）缺乏株，脾細(xì)胞內(nèi)卻有這種酶，因此脾-瘤融合的雜交細(xì)胞可利用HGPRT

8、，用次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶（T）合成DNA，使雜交瘤細(xì)胞得以生長(zhǎng)。制備雙功能抗體的方法：1、非共價(jià)鍵二聚體 2、共價(jià)連接雙特異單鏈抗體 3、應(yīng)用亮氨酸拉鏈、螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋燈蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域?qū)蓡捂溈贵w連接起來(lái)抗體融合蛋白的類(lèi)型：1、配基-配基型融合蛋白 2、配基-Ig型嵌合蛋白 3、配基-Fv型嵌合蛋白 4、受體-Fv型融合蛋白 5、酶-抗體型融合蛋白構(gòu)建抗體融合蛋白的基本原則：將第一個(gè)蛋白的終止密碼子刪除，再接上帶有終止密碼子的第二個(gè)蛋白基因，即可實(shí)現(xiàn)兩個(gè)基因共表達(dá)。在構(gòu)建過(guò)程中關(guān)鍵的問(wèn)題是兩個(gè)蛋白間的街頭序列連接肽，一般來(lái)說(shuō)35個(gè)氨基酸就可滿足大部分融合蛋白的正確折疊的要求，加入一段有疏水

9、性和一定伸展性的較長(zhǎng)肽鏈，可緩解兩種蛋白相互干擾。噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的基本方法：獲取目的基因，抗體庫(kù)技術(shù)的載體，淘篩，表達(dá)和檢定噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn)：1、將抗體的基因型與表達(dá)型緊密聯(lián)系 2、模擬天然全套抗體庫(kù) 3、避開(kāi)了人工免疫和雜交瘤技術(shù) 4、可獲得高親和力的人源化抗體植物培養(yǎng)細(xì)胞的生理特性：1、植物細(xì)胞較大，有纖維素細(xì)胞壁，細(xì)胞耐拉不耐扭，抗剪切力差 2、生長(zhǎng)速度緩慢，易被污染，需用抗生素 3、細(xì)胞生長(zhǎng)的中期及對(duì)數(shù)期，多以非均相集合體的細(xì)胞團(tuán)形式存在，懸浮培養(yǎng)較難 4、培養(yǎng)時(shí)需供氧，培養(yǎng)液粘度大，不能耐受強(qiáng)力通風(fēng)和攪拌 5、具有群體效應(yīng)，無(wú)接觸抑制性 6、產(chǎn)物多停留于細(xì)胞內(nèi)，且產(chǎn)量較低 7

10、、細(xì)胞重量的增加在對(duì)數(shù)期，次級(jí)代謝產(chǎn)物的累積在穩(wěn)定期影響植物次級(jí)代謝產(chǎn)物累積的因素：1、生物條件（外植體、季節(jié)、休眠、分化）2、物理?xiàng)l件（光、溫度、PH、通氣）3、化學(xué)條件（培養(yǎng)基的化學(xué)組成、滲出物）4、工業(yè)培養(yǎng)條件（兩步培養(yǎng)法、攪拌頻率、培養(yǎng)容器的影響）植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)需考察的因素：1、供氧能力及氣泡分散程度 2、剪切力大小及對(duì)細(xì)胞的影響 3、高密度培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)液的混合程度 4、溫度、PH及營(yíng)養(yǎng)物濃度的控制能力 5、細(xì)胞團(tuán)大小的控制能力 6、易于放大利用微生物生產(chǎn)酶制劑的優(yōu)點(diǎn)：（1）能夠生產(chǎn)酶的微生物種類(lèi)繁多，有較大的選擇余地。（2）微生物繁殖快、培養(yǎng)周期短、培養(yǎng)方法簡(jiǎn)便，培養(yǎng)過(guò)程容易控制，

11、（3）微生物具有較強(qiáng)的適應(yīng)性，能夠培育出新的高產(chǎn)菌株。固定化細(xì)胞的特點(diǎn)：1、無(wú)需進(jìn)行酶的分離純化 2、細(xì)胞保持酶的原始狀態(tài)，固定化過(guò)程中酶的回收率高 3、細(xì)胞內(nèi)酶比固定化酶穩(wěn)定性高 4、細(xì)胞內(nèi)酶的輔助因子可以自動(dòng)再生 5、細(xì)胞本身含多酶體系，可催化一系列反應(yīng) 6、抗污染能力強(qiáng)固定化酶的性質(zhì)：（1）酶活力的變化 （2）酶反應(yīng)特性的變化 （3）最適PH值 （4）最適溫度 （5）米氏常數(shù) （6）最大反應(yīng)速度固定化酶的特點(diǎn)：（1）固定化酶屬于修飾酶，這種酶可以通過(guò)化學(xué)、生物、分子工程手段加以改良。（2）固定化酶的穩(wěn)定性很高，可以多次連續(xù)使用。（3）反應(yīng)以后，產(chǎn)物中不含酶，易于純化。（4）反應(yīng)條件易于控

12、制，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)化和自動(dòng)控制。（5）酶的利用率高，酶的實(shí)際使用量較少。（6）固定化酶比水溶性酶更適合進(jìn)行多酶反應(yīng)。固定化反應(yīng)器的類(lèi)型：（1）間歇式攪拌反應(yīng)罐（BSTR）（2）連續(xù)流動(dòng)攪拌反應(yīng)罐（CSTR）（3）填充式反應(yīng)罐（PBR）（4）流化床反應(yīng)器（FBR）（5）循環(huán)反應(yīng)器（RCR）（6）連續(xù)流動(dòng)攪拌超濾膜反應(yīng)器（CSTR/UF）（7）其它反應(yīng)器反應(yīng)器的選擇依據(jù)：（1）根據(jù)固定化酶的形狀來(lái)選擇。（2）根據(jù)底物的物理性質(zhì)來(lái)選擇。（3）根據(jù)外界環(huán)境條件對(duì)于酶的穩(wěn)定性來(lái)選擇。（4）根據(jù)操作要求和固定化酶反應(yīng)器的投資費(fèi)用來(lái)選擇。酶化學(xué)修飾的方法1.酶的表面化學(xué)修飾(大分子修飾、小分子修飾、交聯(lián)修飾、固

13、定化修飾)2、酶分子內(nèi)部的修飾（非催化活性基團(tuán)的修飾、蛋白主鏈修飾、催化活性基團(tuán)的修飾、與輔因子相關(guān)的修飾、肽鏈伸展后的修飾）3.結(jié)合位點(diǎn)突變的化學(xué)修飾有機(jī)相酶反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)：1、增加疏水性底物或產(chǎn)物的溶解度 2、熱力學(xué)平衡向合成方向移動(dòng) 3、可抑制有水參與的副反應(yīng) 4、酶不溶于有機(jī)介質(zhì)，易于回收再利用 5、易從低沸點(diǎn)溶劑中分離純化產(chǎn)物 6、酶的熱穩(wěn)定性提高，pH的適應(yīng)性擴(kuò)大 7、無(wú)微生物污染 8、能測(cè)定某些在水介質(zhì)中不能測(cè)定的常數(shù) 9、固定化酶方法簡(jiǎn)單修飾酶的特性：1、熱穩(wěn)定性提高2、抗各類(lèi)失活因子能力提高3、抗原性消失4、體內(nèi)半衰期延長(zhǎng)5、最適pH改變6、酶學(xué)性質(zhì)變化7、對(duì)組織分布能力改變有機(jī)

14、相酶反應(yīng)的溶劑體系：水水溶性溶劑均相體系、水水不溶性溶劑兩相體系、膠束與反相膠束體系、單相有機(jī)溶劑體系有機(jī)相酶反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)：1、增加疏水性底物或產(chǎn)物的溶解度 2、熱力學(xué)平衡向合成方向移動(dòng) 3、可抑制有水參與的副反應(yīng) 4、酶不溶于有機(jī)介質(zhì)，易于回收再利用 5、易從低沸點(diǎn)溶劑中分離純化產(chǎn)物 6、酶的熱穩(wěn)定性提高，pH的適應(yīng)性擴(kuò)大 7、無(wú)微生物污染 8、能測(cè)定某些在水介質(zhì)中不能測(cè)定的常數(shù) 9、固定化酶方法簡(jiǎn)單抗生素生物合成基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：1、高G-C堿基組成 2、屬于同一個(gè)基因簇 3、抗生素生物合成基因除在染色體上外，有的也定位在質(zhì)粒上克隆抗生素生物合成基因的方法：1、在準(zhǔn)宿主系統(tǒng)中克隆檢測(cè)單基因產(chǎn)物

15、 2、阻斷變株法 3、突變克隆法 4、直接克隆法5、克隆抗生素抗性基因法 6、寡核苷酸探針?lè)?7、同源基因雜交法基因工程抗體概念及其目的: 基因工程抗體：又稱重組抗體，是指利用重組DNA和蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)編碼抗體的基因按不同需要進(jìn)行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞所表達(dá)的抗體分子。目的：降低鼠源性單克隆抗體分子的免疫原性、降低抗體的相對(duì)分子質(zhì)量，以增加組織的透過(guò)性基因工程抗體改造實(shí)例：免疫原性：人一鼠嵌合抗體 改型抗體 分子量：Fab、Fv、ScFv、單域抗體基因表達(dá)研究關(guān)注的主要問(wèn)題:1目的基因的表達(dá)產(chǎn)量2表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性3產(chǎn)物的生物學(xué)活性4表達(dá)產(chǎn)物的分離純化。影響植物次生代謝積累因

16、素一、生物條件。外植體：培養(yǎng)時(shí)期、大小、前處理、細(xì)胞密度 。季節(jié) 休眠 分化二、物理?xiàng)l件 光：植物光照和激素具有協(xié)同作用或?qū)棺饔?溫度 ph 通氣三、化學(xué)條件 培養(yǎng)基的化學(xué)組成 滲出物 四、工業(yè)培養(yǎng)條件 兩步培養(yǎng)法細(xì)胞工程：按照一定的設(shè)計(jì)方案，通過(guò)在細(xì)胞、亞細(xì)胞或組織水平上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，獲得重構(gòu)的細(xì)胞、組織、器官以及個(gè)體，創(chuàng)造優(yōu)良品種和產(chǎn)品的綜合性生物工程。包括的技術(shù)：真核細(xì)胞的基因重組、導(dǎo)入、擴(kuò)增和表達(dá)的理論和技術(shù)；細(xì)胞融合的理論和技術(shù)；細(xì)胞器特別是細(xì)胞核移植的理論和技術(shù)；染色體改造的理論和技術(shù)；轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的理論和技術(shù)；細(xì)胞大量培養(yǎng)的理論和技術(shù)，以及將有關(guān)產(chǎn)物提取純化的理論和技術(shù) ；論述

17、：基因工程藥物生產(chǎn)的過(guò)程（論述）：基因工程技術(shù)就是將所要組建對(duì)象的目的基因插入載體、拼接、轉(zhuǎn)入新的宿主細(xì)胞，構(gòu)建成工程菌，實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)?；蚬こ趟幬镏圃斓闹饕襟E是：目的基因的克隆，構(gòu)建DNA重組體，構(gòu)建工程菌，目的基因的表達(dá)，外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化，產(chǎn)品的檢驗(yàn)等?？煞譃樯嫌魏拖掠蝺蓚€(gè)階段。上游階段：主要是分離目的基因、構(gòu)建工程菌(細(xì)胞)。目的基因獲得后，最主要的就是目的基因的表達(dá)。選擇基因表達(dá)系統(tǒng)主要考慮的是保證表達(dá)的蛋白質(zhì)的功能，其次是表達(dá)的量和分離純化的難易。此階段的工作主要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成。下游階段：從工程菌的大量培養(yǎng)一直到產(chǎn)品的

18、分離純化和質(zhì)量控制。此階段是將實(shí)驗(yàn)室的成果產(chǎn)業(yè)化、商品化，主要包括：工程菌大規(guī)模發(fā)酵最佳參數(shù)的確立、新型生物反應(yīng)器的研制、高效分離介質(zhì)及裝置的開(kāi)發(fā)、分離純化的優(yōu)化控制、高純度產(chǎn)品的制備技術(shù)、生物傳感器等一系列儀器儀表的設(shè)計(jì)和制造、電子計(jì)算機(jī)的優(yōu)化控制等。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)條件，培養(yǎng)方法與培養(yǎng)方式：培養(yǎng)條件（1）器材的清洗和消毒：器材的清洗：浸泡、刷洗、泡酸、沖洗；器材的消毒滅菌：物理消毒、化學(xué)消毒（2）水質(zhì)：電阻值大于18M,去熱原。（3）pH：7.27.4（4） 滲透壓：290300mOsm/kg（5） 溫度：370.5 C（6） 空氣：氧的飽和質(zhì)60%，氧分壓40.7kPa培養(yǎng)方法：【1】細(xì)胞

19、分離（1）離心分離法。主要用于從含有細(xì)胞的體液如血液，羊水，胸腹水中分離細(xì)胞，離心速度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，易擠壓細(xì)胞使之受損傷或死亡。（2）消化分離法。是從生物體取來(lái)組織塊，將其剪碎，并用消化液將其消化，使組織松散或細(xì)胞懸液然后用緩沖液洗滌，離心，去除殘留的消化液而獲得所需的細(xì)胞?！?】細(xì)胞計(jì)數(shù)（1）自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。原理：讓一定體積的細(xì)胞懸液經(jīng)一小孔，并在兩個(gè)電極間通過(guò)，此時(shí)通過(guò)的細(xì)胞就會(huì)對(duì)電極產(chǎn)生干擾而使電壓發(fā)生改變，這樣就會(huì)在電子計(jì)數(shù)器上形成一個(gè)信號(hào)被記錄下來(lái)（2）血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)（3）結(jié)晶紫染色細(xì)胞核計(jì)數(shù)法（4）MTT染色計(jì)數(shù)法。該方法的原理是活細(xì)胞內(nèi)的線粒體脫氫酶能將MTT(淡黃色)轉(zhuǎn)變

20、為不可溶性的紫色甲 結(jié)晶，它可溶于脫色液，其色澤的深淺與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，通過(guò)比色即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線求出細(xì)胞數(shù)。【3】細(xì)胞傳代。（1）懸浮細(xì)胞的傳代（2）貼壁細(xì)胞的傳代【4】細(xì)胞凍存和復(fù)蘇。（1）細(xì)胞的凍存。在凍存時(shí)，冷凍速度很重要，不能太快也不能太慢（2）細(xì)胞的復(fù)蘇。復(fù)蘇時(shí)總的要求是快融mtt原理：活細(xì)胞中線粒體脫氫酶能將四唑鹽（淡黃色）還原成不溶干水的紫色產(chǎn)物甲臢（formazan)，并沉淀在細(xì)胞中，而死細(xì)胞沒(méi)有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細(xì)胞中紫色結(jié)晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法【1】懸浮培養(yǎng)。讓細(xì)胞自由地懸浮

21、于培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)增殖【2】貼壁培養(yǎng)。必須讓細(xì)胞貼附在某種基質(zhì)上生長(zhǎng)繁殖的培養(yǎng)方法【3】貼壁-懸浮培養(yǎng)。（1）微載體培養(yǎng)（2）包埋和微囊培養(yǎng)（3）結(jié)團(tuán)培養(yǎng)操作方式【1】分批式操作【2】半連續(xù)式操作【3】灌流式操作大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)載體必須具備的條件：（1）載體能夠獨(dú)立的復(fù)制；（2）具有靈活的克隆位點(diǎn)和方便的篩選標(biāo)記，以籃球外源基因的克隆、鑒定和篩選；（3）具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子，能為大腸桿菌的RNA聚合酶所識(shí)別；（4）具有阻遏子，使啟動(dòng)子受到控制，只有當(dāng)誘導(dǎo)時(shí)才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄；（5）具有很強(qiáng)的終止子，以便使RNA聚合酶集中力量轉(zhuǎn)錄克隆的外源基因， 而不轉(zhuǎn)錄無(wú)關(guān)的基因；（6）所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的

22、起始信號(hào)，即起始密碼AUG和SD序列， 以便轉(zhuǎn)錄后能順利翻譯?；蚬こ躺L(zhǎng)代謝菌的特點(diǎn)？菌體的生長(zhǎng)通常用比生長(zhǎng)速率來(lái)表示?？刂凭w的生長(zhǎng)對(duì)提高質(zhì)粒的穩(wěn)定性、減少代謝副產(chǎn)物積累、提高外源蛋白產(chǎn)率有重要意義。 工程菌培養(yǎng)可通過(guò)選用不同的碳源控制補(bǔ)料和稀釋速率等方法來(lái)控制菌體的生長(zhǎng)。大腸桿菌的蛋白/菌體量的比值是基本恒定的，因而菌體的生長(zhǎng)速度反映了蛋白質(zhì)的合成速度。培養(yǎng)條件的改變，都會(huì)改變菌體的能量代謝和小分子前體的供應(yīng)，影響生物大分子的合成和菌體的生長(zhǎng)。對(duì)菌體生長(zhǎng)的調(diào)控主要有兩種觀點(diǎn)：一種觀點(diǎn)認(rèn)為能量的供應(yīng)決定了菌體的最大比生長(zhǎng)速率；另一種觀點(diǎn)認(rèn)為是小分子前體和催化組分的限制決定了菌體的最大比生長(zhǎng)

23、率。一、菌體的生長(zhǎng)與能量的關(guān)系1、碳源物質(zhì)是組成培養(yǎng)基的主要成分。碳源物質(zhì)為細(xì)胞提供能量；當(dāng)菌體生長(zhǎng)所需能量大于菌體有氧代謝提供的能量時(shí)，菌體會(huì)產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物乙酸；高濃度的乙酸明顯抑制菌體的生長(zhǎng)。乙醇的抑制作用與pH有關(guān)，適當(dāng)提高pH，可減少乙酸的抑制作用。培養(yǎng)方式中的措施：分批培養(yǎng)中選擇不同的碳源，補(bǔ)料培養(yǎng)中通過(guò)控制補(bǔ)料速度，連續(xù)培養(yǎng)中控制稀釋速度等培養(yǎng)方法，都能一定范圍內(nèi)控制菌體的生長(zhǎng)，從而控制乙酸的產(chǎn)生，減少它的抑制作用，以實(shí)現(xiàn)工程菌的高密度培養(yǎng)和提高重組產(chǎn)物的表達(dá)水平。加入蛋氨酸和酵母提取物都能減少乙酸的產(chǎn)生。實(shí)質(zhì)：控制菌體的糖酵解速度，使之低于三羧酸循環(huán)和呼吸鏈的最大代謝能力，從而避

24、免乙酰輔酶A的積累和乙酸的產(chǎn)生。代價(jià)：降低供能速度或前體供應(yīng)速度來(lái)降低蛋白合成和菌體生長(zhǎng)速度2、 菌體生長(zhǎng)與前體供應(yīng)的關(guān)系：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入氨基酸（小分子前體）能使菌體比生長(zhǎng)率提高，蛋白合成增加。由于菌體中小分子前體量和催化結(jié)構(gòu)是有限的，因而生物大分子的合成處于亞飽和狀態(tài)，限制了菌體的比生長(zhǎng)速率?；虮磉_(dá)在各個(gè)水平的競(jìng)爭(zhēng)又是各個(gè)基因互相競(jìng)爭(zhēng)共同的前體和催化結(jié)構(gòu)的結(jié)果。對(duì)于基因工程菌來(lái)說(shuō)，由于基因工程菌質(zhì)粒的復(fù)制和外源基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯需要與宿主細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)共同的前體和催化結(jié)構(gòu)，從而加劇了這些成分的不足，因而在同樣的培養(yǎng)基中，工程菌的比生長(zhǎng)速率往往低于其宿主細(xì)胞，特別是工程菌誘導(dǎo)后，由于外源基因的大

25、量表達(dá)，引起菌體比生長(zhǎng)速率下降，甚至生長(zhǎng)停滯。質(zhì)粒存在對(duì)菌體代謝的影響：中等拷貝質(zhì)粒（56拷貝）的工程菌中與前體合成有關(guān)的酶增加，這些酶的基因大多受終產(chǎn)物的反饋調(diào)節(jié)。高拷貝質(zhì)粒的工程菌（240拷貝）中，生長(zhǎng)速率和菌體總蛋白合成均減少。這與工程菌大量前體被利用引起前體不足，從而產(chǎn)生“嚴(yán)緊反應(yīng)”有關(guān)?！皣?yán)緊反應(yīng)”是當(dāng)氨酰tRNA不足時(shí),核糖體在密碼子上停留,并合成被稱為魔點(diǎn)的ppGpp的結(jié)果。ppGpp是一個(gè)重要的調(diào)控分子。兩種觀點(diǎn)：ppGpp的濃度增加會(huì)導(dǎo)致在合成mRNA和rRNA時(shí)RNA聚合酶在模板上的移動(dòng)產(chǎn)生停頓，RNA鏈延長(zhǎng)速度減慢，使游離的RNA聚合酶濃度降低，嚴(yán)緊控制的啟動(dòng)子如rrnA

26、等的轉(zhuǎn)錄減少；也可能ppGpp是通過(guò)干擾RNA聚合酶與PL啟動(dòng)子專(zhuān)一識(shí)別反應(yīng)。固定化酶的優(yōu)點(diǎn)及如何制備？固定化酶的優(yōu)點(diǎn)：（1）固定化酶屬于修飾酶，這種酶可以通過(guò)化學(xué)、生物、分子工程手段加以改良。（2）固定化酶的穩(wěn)定性很高，可以多次連續(xù)使用。（3）反應(yīng)以后，產(chǎn)物中不含酶，易于純化。（4）反應(yīng)條件易于控制，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)化和自動(dòng)控制。（5）酶的利用率高，酶的實(shí)際使用量較少。（6）固定化酶比水溶性酶更適合進(jìn)行多酶反應(yīng)。酶的固定化，就是通過(guò)載體等將酶限制或固定于特定的空間位置，使酶變成不易隨水流失即運(yùn)動(dòng)受到限制，而又能發(fā)揮催化作用的酶制劑。根據(jù)酶的應(yīng)用目的和特性來(lái)選擇固定化方法。酶固定化的方法：1載體結(jié)合

27、法（物理吸附法、離子結(jié)合法、共價(jià)結(jié)合法）載體結(jié)合法是將酶結(jié)合到不溶性載體上的一種固定化方法，根據(jù)結(jié)合形式的不同，可以分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價(jià)結(jié)合法等三種；2交聯(lián)法：用雙功能或多功能試劑使酶與酶或微生物的細(xì)胞與細(xì)胞之間交聯(lián)的固定化方法；3包埋法（網(wǎng)格型、微囊型）將酶或含酶菌體包埋在各種多孔載體中，使酶固定化的方法。包埋法可分為網(wǎng)格型和微囊型兩種。將酶或細(xì)胞包埋在高分子凝膠細(xì)微網(wǎng)絡(luò)中的稱為網(wǎng)格型，將酶或細(xì)胞包埋在高分子半透膜中的稱為微囊型；4熱處理（細(xì)胞）。 以下是附加文檔，不需要的朋友下載后刪除，謝謝班主任工作總結(jié)專(zhuān)題8篇第一篇:班主任工作總結(jié)小學(xué)班主任特別是一年級(jí)的班主任，是一個(gè)復(fù)合性

28、角色。當(dāng)孩子們需要關(guān)心愛(ài)護(hù)時(shí)，班主任應(yīng)該是一位慈母，給予他們細(xì)心的體貼和溫暖；當(dāng)孩子們有了缺點(diǎn)，班主任又該是一位嚴(yán)師，嚴(yán)肅地指出他的不足，并幫助他改正。于是，我認(rèn)為班主任工作是一項(xiàng)既艱巨而又辛苦的工作。說(shuō)其艱巨，是指學(xué)生的成長(zhǎng)，發(fā)展以至能否成為合格人才，班主任起著關(guān)鍵性的作用，說(shuō)其辛苦，是指每天除了對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)負(fù)責(zé)以外，還要關(guān)心他們的身體、紀(jì)律、衛(wèi)生、安全以及心理健康等情況。盡管這樣，下面我就談幾點(diǎn)做法和體會(huì)。一、常規(guī)習(xí)慣，常抓不懈學(xué)生良好的行為習(xí)慣的養(yǎng)成不是一節(jié)課、一兩天說(shuō)說(shuō)就行的，它必須貫穿在整個(gè)管理過(guò)程中。于是我制定出詳細(xì)的班規(guī)，要求學(xué)生對(duì)照?qǐng)?zhí)行，使學(xué)生做到有規(guī)可循，有章可依。由于低年級(jí)

29、學(xué)生自覺(jué)性和自控力都比較差，避免不了會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的錯(cuò)誤，因此這就需要班主任做耐心細(xì)致的思想工作、不能操之過(guò)急。于是，我經(jīng)常利用班會(huì)對(duì)學(xué)生中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行曉之以理、動(dòng)之以情、導(dǎo)之以行的及時(shí)教育，給他們講明道理及危害性，從而使學(xué)生做到自覺(jué)遵守紀(jì)律。二、細(xì)處關(guān)愛(ài)，親近學(xué)生愛(ài)，是教師職業(yè)道德的核心，一個(gè)班主任要做好本職工作，首先要做到愛(ài)學(xué)生?！案腥诵恼撸群跚?。”工作中，我努力做到于細(xì)微處見(jiàn)真情，真誠(chéng)的關(guān)心孩子，熱心的幫助孩子。我深信，愛(ài)是一種傳遞，當(dāng)教師真誠(chéng)的付出愛(ài)時(shí)，收獲的必定是孩子更多的愛(ài)！感受孩子們的心靈之語(yǔ)，便是我最快樂(lè)的一件事！”三、具體要求，指導(dǎo)到位心理學(xué)研究表明，兒童對(duì)事物的認(rèn)知

30、是整體性的，能熟知輪廓，但不注重細(xì)節(jié)。我認(rèn)為，首先要蹲下來(lái)，以孩子的視角觀察事物，用孩子能聽(tīng)懂的話和他們交流。其次，要注重細(xì)節(jié)教育，把該做的事指導(dǎo)到位，因?yàn)樗麄兒芟氚凑绽蠋煹囊笕プ?，很想把事情做好。四、示范帶頭，直觀引導(dǎo)大教育家烏申斯基曾有過(guò)這樣一段話：“教師個(gè)人的范例，對(duì)于學(xué)生的心靈是任何東西都不能代替的最有用的陽(yáng)光。”低年級(jí)的學(xué)生對(duì)自己的班主任是一個(gè)怎樣的老師，他們會(huì)留心觀察班主任的每一個(gè)動(dòng)作、每一個(gè)眼神、每一種表情，會(huì)細(xì)心傾聽(tīng)班主任的每一句話，他們對(duì)班主任有著一種特殊的信任和依賴情感。班主任的自身素質(zhì)，道德修養(yǎng)，班主任的一言一行，一舉一動(dòng)，無(wú)形之中會(huì)成為全班幾十個(gè)孩子的榜樣。因此，在班

31、級(jí)工作中我時(shí)刻注意自身形象，事事從我做起，以良好的形象率先垂范，潛移默化的影響著我的學(xué)生。凡要求學(xué)生做到的，教師首先自己做到，而且做得更好。要求學(xué)生講衛(wèi)生，不隨便亂扔垃圾，自己就做到隨手撿拾垃圾。要求學(xué)生不遲到，在我的帶動(dòng)下，我們班的大多數(shù)學(xué)生都能做到講衛(wèi)生不遲到，個(gè)個(gè)講文明守紀(jì)律。五、及時(shí)表?yè)P(yáng)，延遲批評(píng)德國(guó)美學(xué)家黑格爾說(shuō)：“不應(yīng)該使孩子們的注意力長(zhǎng)久地集中在一些過(guò)失上，對(duì)此，盡可能委婉地提醒一下就夠了。最重要的是要在學(xué)生身上激發(fā)出對(duì)自身力量和自身榮譽(yù)的信念?！苯踢^(guò)低年級(jí)的老師都知道：孩子小，事兒多，一上課就“告狀”。當(dāng)老師的又不能不公平處理，這樣耽誤的時(shí)間太多，而且學(xué)生因?yàn)槭芰伺u(píng)，注意力長(zhǎng)

32、時(shí)間集中在自己的過(guò)失上，情緒受影響，低落的情緒體驗(yàn)使智力活動(dòng)水平明顯下降，課堂吸收效率變低。針對(duì)這一情況，我采取延遲批評(píng)，這樣既培養(yǎng)學(xué)生愉快的情緒體驗(yàn)，又給予其改正和返回的機(jī)會(huì)，之后老師只要加以指導(dǎo)，就能很好的解決問(wèn)題.本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第二篇:四年級(jí)班主任工作總結(jié)學(xué)生是涌動(dòng)著無(wú)限活力的生命體，是教育的起點(diǎn)和歸宿。面對(duì)學(xué)生，祖國(guó)的未來(lái)，我們要做一個(gè)真正有意義的班主任，素質(zhì)教育要求我們要面向全體學(xué)生，為學(xué)生服好務(wù)，使學(xué)生的思想道德、文化科學(xué)、勞動(dòng)技能、身體心理素質(zhì)得到全面和諧地發(fā)展，我們的班級(jí)管理究竟該如何閱讀學(xué)生個(gè)體，提升學(xué)生學(xué)習(xí)生活及生命的質(zhì)量呢?

33、在過(guò)去的一學(xué)期里，我們班在學(xué)校的統(tǒng)一組織、領(lǐng)導(dǎo)和同學(xué)們的共同努力下及任課老師的大力支持和配合下，各項(xiàng)工作順利開(kāi)展，安全、學(xué)習(xí)、工作等方面都取得較突出的成績(jī)，現(xiàn)將我所做的一些工作總結(jié)如下：一、做好學(xué)生的思想工作，培養(yǎng)學(xué)生良好的道德品質(zhì)，凈化學(xué)生的心靈，努力培養(yǎng)德智體全面發(fā)展的人才做好學(xué)生的思想工作從兩方面入手，一是重視每周的班會(huì)課，開(kāi)好班會(huì)課；二是重視與學(xué)生的思想交流，多與學(xué)生談心。重視班會(huì)，開(kāi)好班會(huì)，為的是在班中形成正確的輿論導(dǎo)向，形成良好的班風(fēng)、學(xué)風(fēng)，為學(xué)生提供一個(gè)好的大環(huán)境，重視的是學(xué)生的共性。為配合學(xué)校各項(xiàng)工作的落實(shí)，我們班積極開(kāi)展了許多有益于學(xué)生身心健康發(fā)展的活動(dòng)，讓學(xué)生在活動(dòng)中明事理

34、、長(zhǎng)見(jiàn)識(shí)。學(xué)生自尊心也很強(qiáng)，直接的批評(píng)換回來(lái)的可能是思想的叛逆，利用班會(huì)課對(duì)學(xué)生進(jìn)行思想教育的好處，就是避免單調(diào)重復(fù)的批評(píng)說(shuō)教而引起學(xué)生的反感，容易為學(xué)生接受，能切實(shí)幫助學(xué)生澄清思想上的模糊認(rèn)識(shí)，提高學(xué)生的思想境界。但開(kāi)班會(huì)課不一定都要等到每周二下午第四節(jié)，可利用一些零碎的又不影響學(xué)科學(xué)習(xí)的時(shí)間開(kāi)短小精悍的班會(huì)也能取得良好的效果。不必長(zhǎng)篇大論，班主任把及時(shí)發(fā)現(xiàn)的不良思想的苗頭一針見(jiàn)血地指出來(lái)，對(duì)事不對(duì)人，進(jìn)行警示性的引導(dǎo)教育，往往能把一些影響班風(fēng)、學(xué)風(fēng)的不良思想消滅在萌芽階段。而重視與學(xué)生的思想交流，多與學(xué)生談心，注重的是學(xué)生的個(gè)性和因材施教。我常利用課余時(shí)間和學(xué)生促膝談心，及時(shí)對(duì)學(xué)生進(jìn)行針對(duì)

35、性的教育。用個(gè)人的魅力征服學(xué)生，用自己的熱情和朝氣感染學(xué)生。體現(xiàn)在學(xué)習(xí)、生活的方方面面。做任何事情，一定要從學(xué)生的角度去考慮，為學(xué)生利益著想，學(xué)生才易于接受。在這個(gè)時(shí)候，我就是他們的好朋友，盡量為他們排憂解難，也正因如此，我得到了班上大多數(shù)學(xué)生的喜愛(ài)和信任。二、加強(qiáng)班級(jí)管理，培養(yǎng)優(yōu)秀的學(xué)風(fēng)、班風(fēng)，深入全面地了解學(xué)生，努力培養(yǎng)團(tuán)結(jié)、嚴(yán)格、活潑、奮進(jìn)的班集體四年級(jí)的學(xué)生思想、心理發(fā)展、變化很快。因此，對(duì)學(xué)生的思想工作顯得尤其復(fù)雜和重要。在這個(gè)學(xué)期里，我的班級(jí)管理工作主要從三方面實(shí)施：一方面，我主要加大了對(duì)學(xué)生自治自理能力培養(yǎng)的力度，通過(guò)各種方式，既注意指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行自我教育，讓學(xué)生在自我意識(shí)的基礎(chǔ)上

36、產(chǎn)生進(jìn)取心，逐漸形成良好的思想行為品質(zhì)；又注意指導(dǎo)學(xué)生如何進(jìn)行自我管理，培養(yǎng)他們多方面的能力，放手讓學(xué)生自我設(shè)計(jì)、自我組織各種教育活動(dòng)，在活動(dòng)中把教育和娛樂(lè)融入一體；還注意培養(yǎng)學(xué)生的自我服務(wù)的能力，讓學(xué)生學(xué)會(huì)規(guī)劃、料理、調(diào)控自己，使自己在集體中成為班集體的建設(shè)者，而不是包袱。在這點(diǎn)上，特別值得一提的是班干部的選用，這是讓學(xué)生自治的重要途徑。班主任的管理代表的是學(xué)校的管理，不論班主任如何和顏悅色都帶有不容質(zhì)疑的權(quán)威性，也難免有不被理解和接受的時(shí)候，通過(guò)班干部的協(xié)調(diào)，往往能夠取得意想不到的效果。班干部起的是協(xié)助班主任管理班級(jí)的作用，他們接受班主任的指導(dǎo)，又及時(shí)向班主任反饋班級(jí)情況和同學(xué)們的思想動(dòng)態(tài)

37、；他們分工管理班級(jí)的各項(xiàng)事務(wù)，同時(shí)又是一個(gè)團(tuán)結(jié)合作的整體。選好班干部，不但有利于班級(jí)管理，而且有利于全體學(xué)生共同發(fā)展。培養(yǎng)學(xué)生擔(dān)任班干部，是培養(yǎng)學(xué)生能力、提高學(xué)生素質(zhì)的一種很有效的方法，如培養(yǎng)其組織能力、管理能力、社交能力、語(yǔ)言表達(dá)能力等，還可以培養(yǎng)其關(guān)心集體、關(guān)心他人、樂(lè)于奉獻(xiàn)、積極進(jìn)取等優(yōu)良的思想品質(zhì)。多培養(yǎng)班干部有利于多數(shù)學(xué)生全面發(fā)展.本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第三篇:特教班主任工作總結(jié)本學(xué)期在校領(lǐng)導(dǎo)的信任和支持下,我繼續(xù)擔(dān)任高考班班主任的工作,為了在今后的工作能夠取長(zhǎng)補(bǔ)短,特總結(jié)如下:（一）抓常規(guī)管理規(guī)范學(xué)生的行為習(xí)慣早到校、兩操、打掃除、校各項(xiàng)活動(dòng)

38、的參加都認(rèn)真組織，嚴(yán)格要求，決不馬虎，讓學(xué)生感到做人就要這樣嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真、一絲不茍。至今學(xué)生以習(xí)慣成自然。例如間操時(shí)間一到不用老師強(qiáng)調(diào)，都主動(dòng)自覺(jué)去做，贏得任課老師的好評(píng)。（二）實(shí)行班級(jí)管理我們班級(jí)發(fā)展的目標(biāo)都是由師生共同商討確立的，并且分工負(fù)責(zé)。這樣，使管理者和被管理者做到和諧統(tǒng)一。師生能以誠(chéng)相待，共同決策，使學(xué)生感覺(jué)到班級(jí)的事也有他們的一部分。通過(guò)分級(jí)管理，班干部承擔(dān)了一些日常事務(wù)的管理工作，并有權(quán)獨(dú)立處理相關(guān)事務(wù)。班主任則激勵(lì)和指導(dǎo)學(xué)生自主性的發(fā)揮，化解工作中的矛盾。通過(guò)自我管理，既加強(qiáng)了班干部隊(duì)伍的建設(shè)，培養(yǎng)了學(xué)生組織管理能力，又提高了全體學(xué)生的自覺(jué)性，自制力。（三）營(yíng)造良好的學(xué)習(xí)環(huán)境現(xiàn)

39、在初中學(xué)生的學(xué)習(xí)、生活有絕大部分時(shí)間是在學(xué)校里度過(guò)的。班級(jí)即是學(xué)生的一個(gè)大家庭。營(yíng)造良好的學(xué)習(xí)環(huán)境，對(duì)提高學(xué)生的德育素質(zhì)，起了相當(dāng)大的作用。首先對(duì)學(xué)生進(jìn)行理想教育，學(xué)習(xí)目的教育，習(xí)慣的養(yǎng)成教育，培養(yǎng)其自信心及責(zé)任意識(shí)，其次，建立一些監(jiān)督機(jī)制，獎(jiǎng)懲制度，定期檢查，定期反饋，賞罰分明，現(xiàn)在班級(jí)風(fēng)氣正，學(xué)風(fēng)濃，凝聚力強(qiáng)。班級(jí)真正成為一個(gè)和諧向上的集體。（四）個(gè)別教育與表?yè)P(yáng)相結(jié)合班級(jí)中思想基礎(chǔ)和學(xué)習(xí)都比較差的學(xué)生。通常表現(xiàn)為精力旺盛而又學(xué)不進(jìn)去，思想活躍而又任性好動(dòng)，對(duì)班集體正常的學(xué)習(xí)生活秩序有一定影響。在教育轉(zhuǎn)化這部分學(xué)生時(shí)，我從建立和培養(yǎng)感情入手，親近他、關(guān)心他、了解他，努力發(fā)現(xiàn)他身上的閃光點(diǎn)，如

40、在班級(jí)活動(dòng)中，象打掃衛(wèi)生、主動(dòng)抬水，拾到東西主動(dòng)上繳，積極參加校運(yùn)會(huì)入場(chǎng)式等等，都及時(shí)表?yè)P(yáng)，使這些不管在家里，還是在學(xué)校，極少獲得表?yè)P(yáng)，久而久之，已經(jīng)失去了上進(jìn)心和自我認(rèn)同感，缺乏自信心的同學(xué)，從拾自信，使他們?cè)诎嘀魅纬浞掷斫夂托湃蔚幕A(chǔ)上，使性格和人格回到了正確的軌道上來(lái).本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第四篇:優(yōu)秀班主任工作總結(jié)素質(zhì)教育要求我們要面向全體學(xué)生，使學(xué)生的思想道德、文化科學(xué)、勞動(dòng)技能、身體心理素質(zhì)得到全面和諧地發(fā)展，個(gè)性特長(zhǎng)得到充分的培育。這是一項(xiàng)長(zhǎng)期的、具有劃時(shí)代意義的改革。學(xué)校教育是我國(guó)主要的教學(xué)形式，班級(jí)授課制是學(xué)校教育的基本形式。因此，作為

41、班集體靈魂的班主任應(yīng)該充分認(rèn)識(shí)到自己所承擔(dān)的歷史重任。小學(xué)班主任面對(duì)6、7歲-11、12歲的兒童，工作更加繁重。我相信，任何一位班主任都希望勝任這項(xiàng)工作并把自己從繁重中盡量解脫出來(lái)，那么，如何開(kāi)展小學(xué)班主任工作就至關(guān)重要。下面我談?wù)勛约旱捏w會(huì)。一、親近學(xué)生，研究學(xué)生；展現(xiàn)自我，樹(shù)立威望。誰(shuí)愛(ài)孩子，孩子就會(huì)愛(ài)他，只有用愛(ài)才能教育孩子。班主任要善于接近孩子，體貼和關(guān)心學(xué)生，和他們進(jìn)行親密的思想交流，讓他們真正感受到老師對(duì)他的親近和愛(ài)。這是班主任順利開(kāi)展一切工作的基礎(chǔ)。研究學(xué)生是教育取得成功的必要條件，最好的途徑是通過(guò)活動(dòng)觀察。了解班風(fēng)、學(xué)風(fēng)，了解全班主要的優(yōu)缺點(diǎn)并分析其原因所在，了解家長(zhǎng)普遍的文化

42、層次，找到亟待糾正的弱點(diǎn)；二要研究學(xué)生的個(gè)性特征（包括能力、氣質(zhì)、性格、愛(ài)好等），了解個(gè)人的生活環(huán)境，掌握哪些是積極分子，哪些是特別需要注意的學(xué)生等等。在親近與研究學(xué)生的過(guò)程中，班主任要努力展現(xiàn)自身廣博的文化與高尚的道德情操，使學(xué)生對(duì)你既親近又崇拜，既認(rèn)定你是值得信賴的老師，又把你當(dāng)作好朋友，樹(shù)立起班主任崇高的威望。那么，你的教育可能取得事半功倍的效果。二、班干部隊(duì)伍的組建和培養(yǎng)。一個(gè)班的集體面貌如何，很大程度上是由小班干部決定的。小班干部對(duì)班集體有著以點(diǎn)帶面和以面帶面的作用，我稱他們是班主任的左右手。所以唯有慎重地選拔和培養(yǎng)班干部隊(duì)伍，班主任工作才能逐漸從繁重走向簡(jiǎn)單與輕松。當(dāng)選的班干部應(yīng)具

43、有較強(qiáng)的號(hào)召力和自我管理能力。班干部隊(duì)伍的組建不能僅僅作為一種形式存在，班主任必須精心培養(yǎng)：其一，要大力表?yè)P(yáng)班干部?jī)?yōu)點(diǎn)，宣傳他們的先進(jìn)事跡，幫助小班干部樹(shù)立威信；其二，在鼓勵(lì)班干部大膽工作，指點(diǎn)他們工作方法的同時(shí)，要更嚴(yán)格要求班干部個(gè)人在知識(shí)、能力上取得更大進(jìn)步，在紀(jì)律上以身作則，力求從各方面給全班起到模范帶頭作用，亦即以點(diǎn)帶面；其三，培養(yǎng)*部團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神，要能夠通過(guò)*部這個(gè)小集體建立正確、健全的輿論，帶動(dòng)整個(gè)班集體開(kāi)展批評(píng)與自我批評(píng)，形成集體的組織性、紀(jì)律性和進(jìn)取心，亦即以面帶面。三、以強(qiáng)化常規(guī)訓(xùn)練帶動(dòng)教育教學(xué)工作。良好的常規(guī)是進(jìn)行正常的學(xué)習(xí)和生活的保障，一個(gè)學(xué)生調(diào)皮搗蛋、不合常規(guī)的舉動(dòng)往

44、往會(huì)使一堂好課留下遺憾，使整個(gè)集體活動(dòng)宣告失敗，甚至使全班努力爭(zhēng)取的榮譽(yù)付諸東流，直接影響到班集體的利益。因此，要扎實(shí)有效地加強(qiáng)一個(gè)學(xué)生的常規(guī)訓(xùn)練。訓(xùn)練的內(nèi)容包括小學(xué)生守則和小學(xué)生日常行為規(guī)范要求的常規(guī)、課堂常規(guī)、集會(huì)和出操常規(guī)、衛(wèi)生常規(guī)、勞動(dòng)常規(guī)、參觀常規(guī)以及路隊(duì)常規(guī)等等諸多方面。訓(xùn)練可以通過(guò)集體或個(gè)人、單項(xiàng)強(qiáng)化或全面優(yōu)化相結(jié)合的方式進(jìn)行（根據(jù)具體情況選擇），務(wù)必使每個(gè)學(xué)生具有服從集體，服從命令的思想.本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第五篇:大學(xué)班主任工作總結(jié)見(jiàn)習(xí)期剛滿的我，回顧這一年的工作，除了代理團(tuán)委書(shū)記一職外，另外很重要的一部分工作就是擔(dān)任班主任。我當(dāng)任的

45、是2000級(jí)英教及2001級(jí)0103、0104班的班主任。以下我分別將兩個(gè)專(zhuān)業(yè)的班級(jí)工作進(jìn)行總結(jié)。2000級(jí)英教專(zhuān)業(yè)兩個(gè)班情況比較好。他們已經(jīng)基本適應(yīng)大學(xué)生活，兩個(gè)班班委工作認(rèn)真負(fù)責(zé)，能起到核心帶頭作用，與我也保持著密切聯(lián)系，作好了橋梁工作。因此，兩個(gè)班取得了不少成績(jī)：2001班在今年被評(píng)為優(yōu)秀班集體。班上有2/3的同學(xué)參加了黨校學(xué)習(xí)，并都以優(yōu)異的成績(jī)結(jié)業(yè)。其中有一名同學(xué)被發(fā)展為預(yù)備黨員。該班學(xué)風(fēng)濃厚，平時(shí)堅(jiān)持早讀，在期末考試中無(wú)一人重修。在英語(yǔ)劇比賽中，該班也獲得了二等獎(jiǎng)的好成績(jī)。2002班在去年也被評(píng)為了紅旗團(tuán)支部。該班也是積極要求進(jìn)步。全班33人，有22人向黨組織遞交了入黨申請(qǐng)書(shū)，形成一

46、股“一顆紅星向著黨”的良好精神面貌。團(tuán)支部認(rèn)真負(fù)責(zé)，組織開(kāi)展了以“揭批”為中心的團(tuán)支部會(huì)議，使同學(xué)們對(duì)邪教有了清醒地認(rèn)識(shí)。李國(guó)宏同學(xué)雖然曾經(jīng)犯過(guò)錯(cuò)誤，但在班上同學(xué)的幫助下，勇于改正，并且一次意外中舍己救人，為外語(yǔ)學(xué)院爭(zhēng)了光。該班另一特色就是活躍，能全面發(fā)展。在冬季長(zhǎng)跑中，報(bào)名踴躍，最后有7人參加。在“十大歌星”比賽中，有兩人獲獎(jiǎng)。“十大笑星”中，該班節(jié)目代表外語(yǔ)學(xué)院參賽，獲得第一名的好成績(jī)。作為班主任能看到這樣的班級(jí)成績(jī)感到非常欣慰與驕傲。下學(xué)期他們將進(jìn)入大三，班委要改選，我希望能有跟多的同學(xué)得到鍛煉。我?guī)У牧硗鈨蓚€(gè)班與他們形成對(duì)比，大一的0103、0104總的情況另我擔(dān)憂。先談?wù)劜蛔惆?，總?/p>

47、有以下幾點(diǎn).本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第六篇:差班班主任工作總結(jié)擔(dān)任八所中學(xué)初一年級(jí)（6）班的班主任一年了，在與孩子們接觸打交道的這一年中，有苦有淚，有歡笑也有悲痛，更有些許成功也有些許遺憾！現(xiàn)我對(duì)這一年的班主任工作作出如下總結(jié)：一班風(fēng)管理俗話說(shuō)：一個(gè)班的班風(fēng)猶如這個(gè)班的班主任的性格特點(diǎn)。我是一個(gè)比較“苛刻”的人，對(duì)人對(duì)事都極度的講究“完美”。在管理班級(jí)的時(shí)候，我是以“軍隊(duì)化”的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行的。一個(gè)學(xué)生，如果能夠約束自己，并能夠服從管理、聽(tīng)從指揮，我想，這個(gè)學(xué)生就達(dá)到了自我的升華。1.學(xué)生的品德一個(gè)班級(jí)的優(yōu)秀與否，表現(xiàn)在每位學(xué)生品德的優(yōu)劣上面。我們班一共有87

48、個(gè)人，男生59個(gè)，女生28個(gè)，其中少數(shù)民族生共有6人，從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來(lái)的學(xué)生占了本班人數(shù)的78。無(wú)論是從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來(lái)的學(xué)生還是在市內(nèi)的學(xué)生，幾乎每個(gè)學(xué)生的品德思想多多少少都存在著個(gè)體的差異性。概括來(lái)講，從下面鄉(xiāng)鎮(zhèn)上來(lái)的學(xué)生普遍會(huì)在心理及思想上認(rèn)為自己是從農(nóng)村來(lái)的，無(wú)論是學(xué)習(xí)還是見(jiàn)識(shí)方面都不如城市的孩子，難免會(huì)產(chǎn)生自卑的心理；城市的孩子則會(huì)認(rèn)為自己比從農(nóng)村上來(lái)的孩子優(yōu)秀很多，甚至有瞧不起人的這種不良心態(tài)；還有這兩類(lèi)孩子之間會(huì)進(jìn)行物質(zhì)上的攀比。這些品德思想上的認(rèn)識(shí)多多少少都影響了一個(gè)班級(jí)的凝聚力，也影響了個(gè)人的品德素養(yǎng)！面對(duì)這些問(wèn)題，我主要采用“鼓勵(lì)限制”的方法。鼓勵(lì)具有自卑心理的學(xué)生向精神方面看齊

49、；鼓勵(lì)具有攀比之心的學(xué)生也向精神方面看齊！同時(shí)限制家庭條件好的同學(xué)要特別注意學(xué)校的規(guī)章制度，不能帶手機(jī)、帶MP3和MP4進(jìn)入教室的，堅(jiān)決不能讓他們帶入！當(dāng)然，在學(xué)生們交往接觸的過(guò)程中，難免也會(huì)發(fā)生矛盾，主要體現(xiàn)在吵架和打架這兩大方面上。對(duì)于如何避免這些沖突，我堅(jiān)持的原則是寬以待人。如果學(xué)生之間發(fā)生沖突了，我會(huì)找他們了解情況，無(wú)論是誰(shuí)對(duì)是誰(shuí)錯(cuò)，都要讓他們站在對(duì)方的角度去進(jìn)行思考：換成是我，我能不能這樣做？讓他們學(xué)會(huì)寬以待人，避免下次再發(fā)生矛盾沖突。2.學(xué)生的考勤著名教師魏書(shū)生說(shuō)過(guò)一句話：學(xué)生能做的事學(xué)生自己做！學(xué)生的考勤情況，我是這么進(jìn)行管理的：各個(gè)組長(zhǎng)負(fù)責(zé)各組成員的遲到、曠課以及課堂紀(jì)律的考勤

50、；紀(jì)律委員負(fù)責(zé)對(duì)每個(gè)組長(zhǎng)的紀(jì)律考勤；副班長(zhǎng)監(jiān)督紀(jì)律委員的紀(jì)律考勤；正班長(zhǎng)對(duì)副班長(zhǎng)的紀(jì)律進(jìn)行考勤。不管是身為普通身份的學(xué)生，還是身處“要職”的班干部，如果出現(xiàn)亂子，我都會(huì)找該負(fù)責(zé)人進(jìn)行對(duì)話，及時(shí)地進(jìn)行處理。且在合適的時(shí)間，比如說(shuō)每周周一的班會(huì)課上進(jìn)行點(diǎn)名批評(píng)，當(dāng)然對(duì)于做得比較好的學(xué)生，也會(huì)進(jìn)行點(diǎn)名表?yè)P(yáng).本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第七篇:幼兒園班主任工作總結(jié)本學(xué)期我班根據(jù)綱要精神，以幼兒園工作計(jì)劃為指導(dǎo)，緊緊圍繞學(xué)期計(jì)劃，在班上老師的緊密配合下，有的放矢，循序漸進(jìn)的開(kāi)展班級(jí)各項(xiàng)工作?，F(xiàn)將本學(xué)期主要工作總結(jié)如下：一、教育工作1、“多元化幼兒藝術(shù)教育融化”的嘗試根據(jù)

51、幼兒園及班工作計(jì)劃，我班進(jìn)行了“多元化幼兒藝術(shù)教育融化”的嘗試，并制訂了春雨的色彩、夏天的主題網(wǎng)絡(luò)。在春雨的色彩的主題網(wǎng)絡(luò)中，以文學(xué)作品為切入點(diǎn)，以“春”為核心，涉及科學(xué)、社會(huì)、語(yǔ)言、藝術(shù)、健康等領(lǐng)域的各項(xiàng)活動(dòng)。春雨的色彩中還生成了小主題雨，并根據(jù)“雨”進(jìn)行了“雨的形成”、“小雨滴旅行記”、“小雨點(diǎn)”等等的活動(dòng)。在進(jìn)行這些活動(dòng)時(shí)，我們注重利用各種資源，合理整合。通過(guò)實(shí)驗(yàn)、圖片、電教設(shè)施來(lái)啟發(fā)幼兒了解有關(guān)雨的知識(shí)；或許是因?yàn)橛變耗挲g知識(shí)水平的因素，或許所選知識(shí)涉及過(guò)深，在活動(dòng)進(jìn)行中，發(fā)現(xiàn)效果不理想，沒(méi)有達(dá)到預(yù)定目標(biāo)。因此，在進(jìn)行第二主題網(wǎng)絡(luò)夏天時(shí)，我們總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，反思不足，及時(shí)進(jìn)行調(diào)整。從幼兒生活

52、中選材，以南京教材中找涼快為藍(lán)本進(jìn)行課程整合，而收到了較好的成效。在夏天的主題網(wǎng)絡(luò)中，從小朋友找涼快動(dòng)物找涼快到昆蟲(chóng)的夏眠多種多樣的乘涼工具我發(fā)明的乘涼工具；幼兒參與程度的熱情較上一主題高漲。2、環(huán)境創(chuàng)設(shè)我班幼兒三十九人，性格活潑開(kāi)朗，但個(gè)性鮮明突出。因此，我班在進(jìn)行環(huán)境創(chuàng)設(shè)中能依據(jù)綱要中的精神，結(jié)合本班幼兒實(shí)際情況，有針對(duì)性的創(chuàng)設(shè)各區(qū)域：1、對(duì)個(gè)性霸道、任性的幼兒創(chuàng)設(shè)了“謙讓是美德”角色扮演區(qū)。2、對(duì)愛(ài)表現(xiàn)、外露的幼兒設(shè)置了小舞臺(tái)。3、壁畫(huà)的設(shè)計(jì)及進(jìn)度緊扣教育主題，充分利用家長(zhǎng)資源和幼兒作品.本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。第八篇:初中班主任工作總結(jié)一個(gè)學(xué)期很快

53、結(jié)束了，在領(lǐng)導(dǎo)和各位老師的關(guān)心和幫助下，順利走過(guò)了一學(xué)期?，F(xiàn)在就把一學(xué)期的工作情況總結(jié)一下。一、我所做的主要工作初三是整個(gè)初中重要的時(shí)期，我深知自己肩負(fù)的責(zé)任重大，不敢有絲毫的怠慢。學(xué)生在心理和生理上都發(fā)生了很大的變化，對(duì)于這一變化，學(xué)生的精神上有更多的壓力，而大多數(shù)的學(xué)生在這個(gè)轉(zhuǎn)折時(shí)期顯得無(wú)所適從。怎樣讓學(xué)生盡快適應(yīng)這一變化，順利度過(guò)轉(zhuǎn)折時(shí)期，這是擺在我眼前的首要任務(wù)。我當(dāng)班主任力爭(zhēng)做到兩點(diǎn)：一是尊重每一個(gè)學(xué)生，滿足學(xué)生尊重的需要，承認(rèn)的需要，情感的需要，努力克服固執(zhí)己見(jiàn)，偏激的思維方式，尊重學(xué)生個(gè)性發(fā)展，為孩子的成長(zhǎng)創(chuàng)造一個(gè)愉快的心理運(yùn)動(dòng)空間；二是善待每一個(gè)學(xué)生，用真誠(chéng)的愛(ài)心對(duì)待每一個(gè)孩子

54、。對(duì)于優(yōu)等生，不掩飾他們的缺點(diǎn)，積極引導(dǎo)他們揚(yáng)長(zhǎng)改過(guò)，努力使其達(dá)到卓越。對(duì)于后進(jìn)生，不歧視他們，善于發(fā)現(xiàn)他們身上的閃光點(diǎn)，激勵(lì)他們一步一步自我完善。我班的王帥同學(xué)學(xué)習(xí)很差，上課不注意聽(tīng)講，作業(yè)經(jīng)常不交，課上、課下紀(jì)律不能保證，是典型的后進(jìn)生。對(duì)于這樣的孩子如果只是批評(píng)、指責(zé)，他的自信心肯定會(huì)越來(lái)越少，甚至還會(huì)自暴自棄。我發(fā)現(xiàn)他的足球踢得不錯(cuò)，于是就鼓勵(lì)他，如果你在學(xué)習(xí)上能象踢球那么專(zhuān)注，你的學(xué)習(xí)成績(jī)一定會(huì)取得大進(jìn)步。對(duì)于他身上的每一點(diǎn)進(jìn)步，我都及時(shí)發(fā)現(xiàn)，并且及時(shí)予以鼓勵(lì)，培養(yǎng)他的自信心。對(duì)于后進(jìn)生，我動(dòng)員學(xué)習(xí)好的同學(xué)幫助他們，帶動(dòng)他們把學(xué)習(xí)成績(jī)提高上去，組成一幫一學(xué)習(xí)互助學(xué)習(xí)小組。這個(gè)班的學(xué)生

55、整體給人的感覺(jué)就是思維活躍，反應(yīng)敏捷，但就是組織紀(jì)律性差，紀(jì)律松散，缺乏自我約束能力。如今的孩子已經(jīng)今非昔比，他們接觸面廣，思維活躍，自尊心強(qiáng)，但又有著現(xiàn)代青少年極大的弱點(diǎn)即缺乏勤奮刻苦拼搏的精神，這些都表現(xiàn)在一言一行中。在隊(duì)列隊(duì)行訓(xùn)練中表現(xiàn)尤其明顯。他們自由散漫，在隊(duì)列里有說(shuō)話的、打鬧的，無(wú)精打采，步伐隨便。我向孩子提出要求，從起步到走步，從轉(zhuǎn)體到每一個(gè)動(dòng)作，都給他們提出規(guī)范化的要求，親身示范，身體力行。通過(guò)這些訓(xùn)練，使孩子們體會(huì)到嚴(yán)格有序管理帶來(lái)的效果?，F(xiàn)在的孩子普遍自私，在小事上斤斤計(jì)較，不能寬厚待人。這表現(xiàn)在處理同學(xué)關(guān)系上，同學(xué)之間有了矛盾，出言不遜，動(dòng)輒大打出手，拳腳相加。針對(duì)這一現(xiàn)

56、象，我教育學(xué)生怎樣正確處理同學(xué)關(guān)系，并以此開(kāi)展主題班會(huì)，對(duì)學(xué)生進(jìn)行教育。在處理鬧矛盾的學(xué)生時(shí)，我讓學(xué)生多做自我批評(píng)，在自己身上找不足，以比來(lái)培養(yǎng)學(xué)生寬厚待人的精神，學(xué)會(huì)以寬容和大度之心對(duì)待周?chē)娜?。勞?dòng)更培育學(xué)生德育思想品質(zhì)的機(jī)會(huì)。現(xiàn)在的孩子一提起勞動(dòng)就有厭煩心理，這些獨(dú)生子女平時(shí)干活的機(jī)會(huì)很少，養(yǎng)成了懶惰的習(xí)慣。首先必須得教會(huì)學(xué)生怎樣干活，從掃地到拖地，從擦玻璃到擦墻圍子，我都示范指導(dǎo)并嚴(yán)格檢查，及時(shí)表?yè)P(yáng)做得好的同學(xué)，批評(píng)做的不認(rèn)真和逃跑的同學(xué)，讓孩子們知道老師不僅在意他們的學(xué)習(xí)更注重他們的人品.大學(xué)生實(shí)習(xí)總結(jié)專(zhuān)題8篇第一篇:大學(xué)生實(shí)習(xí)總結(jié)一、社會(huì)實(shí)踐目的：認(rèn)識(shí)當(dāng)代社會(huì)對(duì)大學(xué)生的要求、及從中

57、找出自己的不足之處、在四年中在這方面加強(qiáng)學(xué)習(xí)。了解一些社會(huì)的其他人如何在努力生活，對(duì)自己以后畢業(yè)找工作有一定的幫助，了解一些就業(yè)崗位需要怎么樣的技能，怎樣的工作、以及我們應(yīng)該如何去做。最主要的就是鍛煉自己，使自己不會(huì)再像以前那么那樣懶惰，讓自己變得堅(jiān)強(qiáng)不再懦弱、學(xué)會(huì)忍受忍受一些不公、學(xué)會(huì)忍受孤獨(dú)！二、實(shí)踐內(nèi)容：在寒假開(kāi)始時(shí)我一回到家就開(kāi)始給家里幫忙，家里在市場(chǎng)批發(fā)蔬菜每天早上6點(diǎn)就要在零下20度的環(huán)境下將自己從別的地方運(yùn)來(lái)的蔬菜進(jìn)行批發(fā)、今年已經(jīng)近20歲了、對(duì)家里的幫助也是很少很少，感覺(jué)慚愧，只是每天早早的去幫忙送菜，這個(gè)實(shí)踐對(duì)自己的專(zhuān)業(yè)知識(shí)倒是沒(méi)有什么運(yùn)用的地方，也許是現(xiàn)在用不上，我是很希望

58、將自己所學(xué)的運(yùn)用到工作使自己所學(xué)的不至于一無(wú)用處!但現(xiàn)在這種機(jī)會(huì)是少之又少。以前只要是星期天、假期都會(huì)給家里幫忙這只是對(duì)自己的小鍛煉、在大學(xué)校園中也許是舒服貫了變得無(wú)所事事、現(xiàn)在早上早起感覺(jué)這么的困難這在以前是怎么也不會(huì)出現(xiàn)的事情，這個(gè)假期這個(gè)毛病也有了少許的改變、呵這就是所謂的成績(jī)、我從小就希望自己長(zhǎng)大能去做自己喜歡的生意、通過(guò)給家里好幾年的批發(fā)零售我看到也許做生意會(huì)很枯燥、乏味、但是能忍受這種孤獨(dú)、乏味并在其中創(chuàng)造出成績(jī)的我認(rèn)為這就是成功的，這便是生活的意義所在。三、實(shí)踐結(jié)果：回嘉峪關(guān)在家中的這幾日雖不比在學(xué)校的安逸但是也讓自己成長(zhǎng)了少許、通過(guò)寒假的幫忙的幫忙發(fā)現(xiàn)自己的人際交往能力還是很弱，這是以后必須解決的問(wèn)題、使自己變得無(wú)所畏懼。在