優(yōu)質(zhì)課培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化

1、實(shí)驗(yàn)：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,實(shí)驗(yàn)原理： 探究問題： 提出假設(shè)：,酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng), 培養(yǎng)液成分、空間、pH、溫度等因素 會(huì)影響酵母菌種群的增長(zhǎng),培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？,在資源和空間有限的環(huán)境中，酵母菌的種群呈“S”型增長(zhǎng),需要準(zhǔn)備的材料及用具,探究所需要的菌種和無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、滴管、顯微鏡等，都是由老師提供,目的要求 1、學(xué)習(xí)使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù) 2、實(shí)驗(yàn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化 3、體會(huì)影響種群數(shù)量變化的因素,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu),血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器

2、，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。,大方格,中方格,小方格,方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。,大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容積為0.1mm3； 大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，即2mm2mm0.1mm，其容積為0.4mm3,計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格,1625型： 即大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格,2516型： 即大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。,不管計(jì)數(shù)室是哪一種

3、構(gòu)造，其每一大方格都是由1625=2516=400個(gè)小方格組成。,2、計(jì)數(shù),1625型： 一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù),2516型： 一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。,蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm，請(qǐng)推算出將一個(gè)小方格范圍內(nèi)的酵母菌數(shù)，換算成10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式。（大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容積為0.1mm3；) （ 1ml =1cm3=1000mm3） 每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)計(jì)算公式,（1）16格25格的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù) 4 106（稀釋

4、倍數(shù)）,（2）25格x16格的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù) 4 106（稀釋倍數(shù)）,大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，其容積為0.4mm3。則：每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)計(jì)算公式（2mm 2mm ） ：,（1）16格25格的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù)106（稀釋倍數(shù)）,（2）25格x16格的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式: 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù)106（稀釋倍數(shù)）,1.通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成，若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有

5、5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè)。,540010000102108,2、檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0.1mm3。,現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻多少個(gè)。,n/ 8040010000105n105,怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？ 提示：對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：先將蓋

6、玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù) 量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。,注意事項(xiàng),從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議將試管震蕩幾次，目的是什么？ 本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照嗎？ 本實(shí)驗(yàn)需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？,目的：使培養(yǎng)液中酵母菌分布均勻，以保證 估算準(zhǔn)確，減少誤差,不需要，因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成自身前后對(duì)照,需要，提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,注意事項(xiàng),如果計(jì)數(shù)時(shí)，一個(gè)小方格中酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)該采取什么措施？ 對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)

7、當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？,可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計(jì)數(shù)。目的是方便計(jì)數(shù),計(jì)相鄰兩邊及其夾角上的酵母菌,計(jì)數(shù)方法：方格內(nèi)部及相鄰兩邊及其夾角上的酵母菌,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的如何清潔？,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。,怎樣記錄結(jié)果？怎樣表怎樣設(shè)計(jì)？,首先通過顯微鏡觀察，估算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌的初始數(shù)量（N0）,在此之后，每天同一時(shí)間，取出各組試管，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。,（4）計(jì)數(shù) 計(jì)數(shù)：首先取樣，每 天取樣時(shí)間大體一致，并要遵守?zé)o菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地使用1mL刻度吸管將lmL酵母菌培養(yǎng)液移入1支干凈的試管里，然后用滴管吸取1滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上的蓋玻片的邊緣，待培養(yǎng)液自行滲入并充滿網(wǎng)格后，再放在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，后立即將數(shù)據(jù)填到記錄表格中。如 記數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞數(shù)較多，不易分辨，吸取的樣液應(yīng)當(dāng)稀釋。 參考1：一次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表 參考2：出A、B、C各個(gè)處理的曲線圖,酵母菌的種群數(shù)量在資源和空間有限的情況下是呈S型增長(zhǎng)。但之后會(huì)下降。,1、探究酵母菌的種群數(shù)量實(shí)驗(yàn)中，某學(xué)生的部分操作過程如下：（1）把酵母菌培養(yǎng)液放置于冰箱中培養(yǎng)，（2）從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液計(jì)數(shù)，（3）到第七天取樣計(jì)數(shù)，請(qǐng)糾正其錯(cuò)誤： （1）_ （2）_ （3）