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文檔簡介
1、實驗93 紫外分光光度法測定水果(或蔬菜)中的維生素C含量,93.1 實驗目的 (1) 掌握紫外分光光度計的工作原理及使用方法。 (2) 掌握水果(或蔬菜)中的維生素C含量的測定方法。,93.2 實驗原理,紫外快速測定維生素C法,是根據(jù)維生素C具有對紫外產(chǎn)生吸收和對堿不穩(wěn)定的特性,于243 nm處測定樣品液與堿處理樣品液兩者消光值之差,通過查標準曲線,即可計算樣品中維生素C的含量。,(一)標準曲線的制作 1抗壞血酸標準溶液的配制:用分析天平準確稱取抗壞血酸10 mg,加2 mL 10%鹽酸,加蒸餾水定容至100 mL,混勻。此抗壞血酸溶液的濃度為100 gmL-1。,93.3 操作步驟,2.
2、標準曲線的繪制,3消光值的測定:以蒸餾水為空白,在243 nm處測定標準系列抗壞血酸溶液的消光值,以抗壞血酸的含量(g)為橫坐標,以相應的消光值為縱坐標作標準曲線。,(二)樣品的測定 1樣品的提?。簩⒐邩悠废磧簟⒉粮?、切碎、混勻。稱取5.00 g于研體中,加入25 mL 1% HCl,勻漿,轉(zhuǎn)移到25 mL容量瓶中,稀釋至刻度。若提取液澄清透明,則可直接取樣測定,若有渾濁現(xiàn)象,可通過離心(10000 g, 10 min)來消除。 2樣品的測定:取0.10.2 mL提取液,放入盛有0.20.4 mL 10%鹽酸的10 mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度后搖勻。以蒸餾水為空白,在243 nm處測定
3、其消光值。 3待測堿處理液的制備:分別吸取0.10.2 mL提取液,2 mL蒸餾水和0.60.8 mL 1 molL-1 NaOH溶液依次放入10 mL容量瓶中,混勻,15min后加入0.60.8 mL 10% HCl,混勻,并定容至刻度。以蒸餾水為空白。在243 nm處測定其消光值。,4由待測樣品與待測堿處理樣品的消光值之差和標準曲線,即可計算出樣品中維生素C的含量。 5也可直接以待測堿處理液為空白,測出待測液的消光值,通過查標準曲線,計算出樣品的維生素C的含量。,93.4 計算 V總 維生素C的含量(g/g)= V1W總 式中:從標準曲線上查得的抗壞血酸的含量 (g) V1測消光值時吸取樣品溶液的體積(mL) V總樣品定容體積(mL) W總稱樣重量(g),93.5 問題討論,()除了本實驗中的方法外,抗壞血酸還有哪些測定方法?,(1)除了本實驗中的方法外,抗壞血酸還有哪些測定方法? 答:一、氧化還原法 1. 直接碘量法 2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法 二、分光光度法 1. 紫外快速測定法 2. 2,4-二硝基苯肼法 3. 高鐵還原法測定血漿中的抗壞血酸 三、光電比濁法
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