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文檔簡介
1、恢復試驗,第一,實驗目的,第一,掌握恢復試驗的原理和方法。熟悉本實驗的操作過程,掌握數(shù)據(jù)處理方法。2.實驗原理1。葡萄糖氧化酶法測血糖原理:葡萄糖氧化酶能將葡萄糖氧化成葡萄糖酸并釋放出過氧化氫。在過氧化物酶(POD)的作用下,后者與生色氧受體4-氨基安替比林偶聯(lián)合成紅色醌,即Trinder反應。紅色醌化合物的產(chǎn)率與葡萄糖含量成正比。回收實驗的原理,這種分析方法正確地確定了添加到常規(guī)分析樣品中的純分析物的能力,并且用于確定測試方法的比例系統(tǒng)誤差,該誤差隨著分析物濃度(指添加劑的濃度)的增加而增加,這是由普通樣品中的其它物質(zhì)與分析物競爭并與它們反應引起的。通過測量GOD-POD法測得的血糖回收率,
2、可以反映該方法的比例系統(tǒng)誤差的存在或大小。3。設備、微量吸管、計算器、三用水浴、722可見分光光度計、4。試劑,1。含2.2摩爾/升血糖的血清樣品(用于恢復實驗),2。葡萄糖標準溶液(80毫摩爾/升),3。葡萄糖測定的God-Pod法,5。操作步驟。樣品回收制備基礎樣品:血清0.9毫升0.1毫升蒸餾水回收樣品:血清0.9毫升0.01毫升80毫升/升葡萄糖標準溶液0.09毫升蒸餾水回收樣品:血清0.06毫升80毫升/升葡萄糖標準溶液0.04毫升蒸餾水回收樣品:血清0.9毫升0.09毫升80毫升/升葡萄糖標準溶液0.01毫升蒸餾水,按下表操作,混合均勻,放入水浴中37分鐘15分鐘,調(diào)整空白6.回收
3、實驗1的結(jié)果計算、數(shù)據(jù)處理。添加濃度計算:添加濃度(毫摩爾/升)=2?;厥諠舛扔嬎悖和ㄟ^回收樣品3測量的濃度?;厥章视嬎悖夯厥章?100%,4。請?zhí)顚懹嬎憬Y(jié)果表:7。注意事項:在本實驗中,準確添加樣品尤為重要,因為要分析的理論值是根據(jù)標準溶液和原始樣品的體積獲得的。添加樣品溶液后,總濃度必須在該方法的分析范圍內(nèi)。通常,需要添加高、中、低濃度進行回收實驗,并計算平均回收率。加入標準溶液后,最好使實驗樣品的測量濃度達到醫(yī)學確定的水平。加入的標準溶液的體積優(yōu)選在整個反應溶液體積的10%以內(nèi)。如果稀釋度太大,誤差會改變。方法學評價和回收率試驗:一般檢驗方法要求回收率在95.5%之間,最理想的回收率應為100%。回收率接近100%,表明分析方法對純?nèi)芤夯驈碗s基質(zhì)環(huán)境中的分析物具有相同的反應能力,且
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