血培養(yǎng)采集的方法及注意事項課件

1、血培養(yǎng)采集的方法及注意事項,2017-05-22,血培養(yǎng)的概念,血培養(yǎng)是一項實驗室檢查，是采集患者血液標本并接種到培養(yǎng)瓶，用以發(fā)現、識別導致患者感染的病原微生物 是診斷菌血癥和真菌血癥的基本而重要的方法 對感染性疾病的診斷、治療和預后都有極為重要的臨床意義,血培養(yǎng)的目的,證實有感染性的病原體 鑒定病原體，做藥敏試驗 指導抗菌藥物的使用,能夠更好的幫助醫(yī)生合理用藥，減少患者的死亡率,目前血培養(yǎng)存在的主要問題-醫(yī)生,血培養(yǎng)重視程度不夠，送檢率低 血培養(yǎng)用處不大，治療費用增加，有指征不送檢 血培養(yǎng)時間長，不能適應臨床需求 只做需氧培養(yǎng)，不同時做厭氧培養(yǎng)，病原菌檢出率低,目前血培養(yǎng)存在的主要問題-檢驗

2、員,血培養(yǎng)檢測運輸標準及接收標準不規(guī)范 應室溫儲存的卻低溫儲存 標本沒有及時檢驗，導致微生物檢測延遲 實驗室人員沒有認真核查接收標本（采血量不夠、培養(yǎng)瓶有破損等） 血培養(yǎng)陽性結果的處理不夠及時 沒有及時將結果反饋給臨床 “時間就是生命”,目前血培養(yǎng)存在的主要問題-護理人員,采血消毒不夠嚴格，導致污染率偏高 皮膚消毒不夠嚴格 培養(yǎng)瓶的消毒問題 不規(guī)范的血培養(yǎng) 采血量、采血時間、采血套數不符合規(guī)范 不規(guī)范的血培養(yǎng)導致病原菌分離率低 難以判斷病原菌是污染造成還是感染造成的 標本沒有及時送檢，導致檢測延遲,血培養(yǎng)標本如何采集,？,血培養(yǎng)臨床實踐指南,CLSI是美國【臨床實驗室標準化協會】的英文縮寫，英

3、文名為Clinical and Laboratory Standards Institute 美國CLSI的抗微生物藥物敏感性試驗操作方法和判斷標準，是國內臨床細菌檢驗遵循的標準。由于制訂該項標準需要投入大量的人力、財力和物力，所以大多數國家包括中國都還沒有建立自己的標準而依賴CLSI的方法和標準 CLSI標準每年更新,關鍵要點,采血指征 采血時間 采血套數 采血次數 接種血量 消毒滅菌,采血指征,不明原因的發(fā)熱(38)或體溫過低(36) 白細胞增多（ 10109/L），粒細胞減少（1.0109/L） 休克，寒顫 嚴重的局部感染(腦膜炎、心內膜炎、肺炎、腎盂腎炎、感染) 心率異常加快 低血壓或

4、高血壓 呼吸頻率加快(20次/分或CO2分壓32mmHg),懷疑血流感染時要做血培養(yǎng),發(fā)熱要做血培養(yǎng)！,0,30,60,時間 (分鐘),體溫,細菌濃度,采血時間,采集血培養(yǎng)時間的重要性?,9% +,14% +,9% +,11% +,發(fā)熱高峰前12-2.5小時,發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時,發(fā)熱高峰期間,發(fā)熱高峰后1-12小時,166 病人,105 病人,199 病人,258 病人,Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study,采血時間,寒顫和發(fā)熱初起，心內膜炎（持續(xù)性菌血癥）例外 在應用抗菌藥物之前 如果患者已經應用抗菌藥物治療，應該在下一次用藥之前

5、采集血培養(yǎng),采血套數,基本概念 成人“一套” 血培養(yǎng)包括：需氧瓶和厭氧瓶各一個 注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應從另一穿刺點獲得 “雙瓶雙側”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位 采血接種另一套培養(yǎng)瓶，一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應視為單 個血培養(yǎng) 兒童一般只做需氧培養(yǎng)，特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng),采血套數,指南中強調：血培養(yǎng)至少送2套 除外新生兒外，成人：任何時候，不能只送一瓶！,23套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,污染菌,致病菌,？,采集1套無法判斷是病原菌還是污染菌,Cockerill,

6、CID 2004,血培養(yǎng)套數與陽性檢出率（）,65,80,96,99,Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,血培養(yǎng)套數與檢測靈敏度（）,為何要送厭氧血培養(yǎng)瓶？,In this study, use of paired aerobic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci, members

7、 of the family Enterobacteriaceae, and anaerobes when compared to paired aerobic blood culture bottles.50 it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52 When less than the recommended volume of blood is drawn for culture, the blood should b

8、e inoculated into the aerobic vial first; any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.,這些研究中，使用“配對需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶”比用“兩個需氧血培養(yǎng)瓶”能檢出更多的金葡、腸桿菌科細菌和厭氧菌 推薦常規(guī)血培養(yǎng)要包括配對的需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶,CLSI 2007 M47-A,厭氧瓶平均報陽時間快于需氧瓶,h,厭氧瓶檢出致病菌時間更短,同樣檢出致病菌，BACTEC平均檢測時間比Bact/Alert少4.36小時,Zadroga R et al. Clin Infe

9、ct Dis. 2013;56:790-797,厭氧瓶、需氧瓶互相補充：提高檢出率,J Microbiol Immunol Infect. 2007;40:445-449,采血次數,對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，推薦同時或短時間內（10分鐘內）從不同部位（如雙臂）采集 23 套血培養(yǎng)標本，做到“雙瓶雙側”，如有必要可同時從下肢靜脈采血接種第三套培養(yǎng)瓶，采血后的 2 5 天內不需要重復采集血培養(yǎng) 急性心內膜炎：30分鐘內完成3套血培養(yǎng)的采集，如果24小時內報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng) 亞急性心內膜炎：每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標本，如果24小時內報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng),

10、接種血量,采血量與檢出率的關系,血量每增加1毫升，成年人菌血癥陽性檢出率增加3,但并非越多越好，超過一定數量的采血量會稀釋培養(yǎng)瓶內的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質（補體、抗體、抗生素），所以血液與肉湯的最佳比例為1：41：10,接種血量,成人一套標本（需氧厭氧2個培養(yǎng)瓶），每瓶810ml，共20ml，雙側雙瓶即40ml 嬰幼兒推薦的采血量應少于患兒總血容量的 1%，每瓶不少于2ml 采血量不足時應優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染,利用瓶身刻度準確采血,規(guī)范采集血培養(yǎng)標本,您知道您有多重要！,無菌操作：污染率的指標是3% 手衛(wèi)生 皮膚消毒 培養(yǎng)瓶的消毒,每次采

11、集血液標本前一定要洗手 使用3-5ml抗菌皂液 保證所有手部皮膚接觸皂液的時間超過15秒 注意指尖及指甲內側 不要遺忘拇指 紙巾干手并勿用手直接關閉水籠頭,你的手真得洗干凈了嗎？,嚴格執(zhí)行手衛(wèi)生,皮膚凝固酶陰性葡萄球菌定植于輸液管,嚴格執(zhí)行皮膚消毒程序,定植細菌“污染”血培養(yǎng),推薦使用碘酊、碘伏或洗必泰作為皮膚消毒劑 碘酊作用時間：1min 碘伏作用時間：1.5-2min 洗必泰作用時間：1min （但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒）,皮膚消毒,70%乙醇擦拭靜脈穿刺部位，待干30秒,1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒，從穿刺點向外畫圈消毒,直徑1.5-2cm,用70%乙醇消毒 60秒

12、（脫碘），待酒精揮發(fā)干燥后采血,細菌是干死的，不是淹死的,皮膚消毒程序（三步法）,培養(yǎng)瓶的消毒程序,去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋 70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒 自然待干 將標本注入培養(yǎng)瓶內 5. 顛倒混勻標本與肉湯，以避免血液凝集 （兒童采血量少，更應注意顛倒混勻）,細菌是干死的，不是淹死的,蝶翼針采血程序,血培養(yǎng)采血注意事項,血培養(yǎng)建議從外周靜脈采血，不建議采動脈血 常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導管或靜脈留置裝置取血 注射器采血，采好后注入血培養(yǎng)瓶之前不需要更換針頭 標本采集部位：從兩側上肢靜脈采血“雙瓶雙側”，必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng) 采多種血液標本時一定最先采集血培養(yǎng)標本,無需保留的：從獨立的外周靜脈采集2套血培養(yǎng)，無菌狀態(tài)下取出導管 并剪下5cm導管尖端或近心端于無菌試管內送實驗室進行培養(yǎng)