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植物組織中超氧物歧化酶活性的測(cè)定,制作人:劉洪慶 單 位: 植物生理學(xué)教研室,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握SOD酶活性測(cè)定方法。 掌握分光光度計(jì)、光照培養(yǎng)箱、冷凍離心機(jī)使用方法。,二、實(shí)驗(yàn)原理,因此光還原反應(yīng)后,反應(yīng)液藍(lán)色愈深說(shuō)明酶活性愈低,反之酶活性愈高。,本實(shí)驗(yàn)依據(jù)超氧物歧化酶抑制氮藍(lán)四唑(NBT)在光下的還原作用來(lái)確定酶活性大小。,核黃素,被氧化物質(zhì),還原的核黃素,氧,氮藍(lán)四唑,藍(lán)色的化合物,(560nm),2 + 2H+ H2O2 + O2,SOD,三、實(shí)驗(yàn)材料,綠豆芽下胚軸,四、 實(shí)驗(yàn)步驟,1、酶液提取,2、顯色反應(yīng),表1 各溶液加入量,3、SOD活性測(cè)定,五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算,SOD總活性 =,單位:酶單位/g鮮重表示;,Ack照光對(duì)照管的光密度值; AE樣品管的光密度值; V樣液總體積(ml); a測(cè)定時(shí)樣品用量(ml); W樣重(g);,六、思考題,1、在SOD測(cè)定中為什么設(shè)暗中和照光兩個(gè)對(duì)照管? 2、影響本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的主要因素是什么?應(yīng)如何克服?,
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