桂枝、柴胡與白芍分別配伍的相關(guān)藥效學研究

1、桂枝、柴胡與白芍分別配伍的相關(guān)藥效學研究 【摘要】目的:研究桂枝、柴胡與白芍分別配伍后的相關(guān)藥效學作用。 方法:以酚紅比色法觀察生理狀態(tài)下小鼠胃排空、小腸推進功能;放免法測生理狀態(tài)下小鼠血清內(nèi)皮素(endothelin，ET);給予小鼠以1.1%冰醋酸腹腔注射致痛、致炎法觀察藥物的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。 結(jié)果:與正常組比較，柴芍低劑量組抑制小鼠胃排空、小腸推進功能，差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);柴芍高劑量組抑制小鼠胃排空、小腸推進功能(P0.05)。與模型對照組比較，桂芍低和高劑量組、柴芍低劑量組均能減少小鼠扭體次數(shù)，差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);柴芍高劑量組減少小鼠扭體次數(shù)，差異有統(tǒng)計學意義(

2、P0.05);桂芍高劑量組降低小鼠腹腔毛細血管通透性，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結(jié)論:柴芍配伍后具有解痙作用與鎮(zhèn)痛作用;桂芍配伍后具有鎮(zhèn)痛、抗炎作用，且桂芍配伍后在鎮(zhèn)痛作用方面具有協(xié)同作用。 【關(guān)鍵詞】桂枝;柴胡;白芍;配伍;藥效學;小鼠 1材料與方法 1.1材料 1.1.1動物 昆明種小鼠250只，普通級，體質(zhì)量(202)g，雌雄各半，由湖南中醫(yī)學院動物實驗中心提供實驗動物。 1.1.2藥物 桂枝、柴胡、白芍。全部藥材購自湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院藥房，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學藥植教研室鑒定為正品。硫酸阿托品注射液(無錫市第四制藥廠，批號：990102);阿司匹林片(中國上海信誼藥廠，批號：

3、990201-193號)。 1.1.3儀器 FA1004電子分析天平(上海精科天平廠);DD-S型低速離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司);半自動生化光譜分析儀(法國西克曼公司)。 1.1.4試劑 ET試劑盒(北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供，批號xx0625);苯酚紅，分析純(廣州化學試劑廠，批號：980910);伊文思藍(上?；瘜W試劑采購供應(yīng)站分裝廠，批號：990807)。 1.2方法 1.2.1動物分組 先按性別和體質(zhì)量分層，用隨機數(shù)字表法隨機分為25組。每組為10只，各組均為雌雄各半。小鼠胃排空、小腸推進功能實驗及小鼠血清ET含量測定共分13組，正常組，桂枝低、高劑量組，白芍低、高劑量

4、組，柴胡低、高劑量組，桂芍低、高劑量組，柴芍低、高劑量組，阿托品組，阿司匹林組，其中阿托品組為胃排空、小腸推進功能的陽性藥物對照組，阿司匹林組為血清ET的陽性藥物對照組;冰醋酸致炎、致痛小鼠扭體次數(shù)、腹腔血管通透性實驗共分12組，測生理狀態(tài)小鼠胃排空、小腸推進功能分組中正常組換為模型對照組，去阿托品組，余組同上。 1.2.2藥物劑量按體表面積換算，相當于成人(70kg)劑量的5倍為小鼠的低劑量，10倍為高劑量。測生理狀態(tài)小鼠胃排空、小腸推進功能;生理狀態(tài)小鼠血清ET;冰醋酸致炎、致痛小鼠扭體次數(shù)、腹腔血管通透性的各組小鼠用藥量(生藥量)均為：桂枝低劑量6.5g/kg、高劑量13g/kg;白芍低

5、劑量6.5g/kg、高劑量13g/kg;柴胡低劑量6.5g/kg、高劑量13g/kg;桂芍低劑量13g/kg、高劑量26g/kg;柴芍低劑量13g/kg、高劑量26g/kg。乙酰水楊酸80mg/100g;阿托品1mg/100g。 1.2.3小鼠胃排空、小腸推進功能測定采用酚紅定量測定法2。各組給藥灌胃體積為0.2mL/10g，1次/d，連續(xù)灌胃6d，末次給藥1h后灌胃0.1%酚紅0.8mL/只，給酚紅30min后處死動物，取胃及小腸全段，并將小腸全長均分為5段.將胃腸各段放入3mL0.1MNaOH液中消化提取。經(jīng)24h消化后以1mL20%三氯乙酸沉淀蛋白，經(jīng)3000r/min離心15min，取

6、上清液1mL，加入3mL0.5MNaOH.混勻后于560nm波長比色，記錄OD值。 1.2.4ET采用放射免疫法測定各組給藥灌胃體積為0.2mL/10g，1次/d，連續(xù)灌胃6d后取血，按照試劑盒說明采用放射免疫法測定。 1.2.5小鼠扭體次數(shù)的觀察3306各組給藥灌胃體積為0.2mL/10g，1次/d，連續(xù)灌胃6d，末次給藥1h后，腹腔注射1.1%冰醋酸，注射后520min內(nèi)直接觀察動物的扭體次數(shù)。 1.2.6小鼠腹腔血管通透性的測定3306各組給藥灌胃體積為0.2mL/10g，1次/d，連續(xù)灌胃6d，末次給藥1h后，腹腔注射1.1%冰醋酸，于注射后30min，每鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍生

7、理鹽水溶液0.1mL/10g體質(zhì)量。20min后脫頸椎處死，輕揉腹部50次后，剪開腹部皮膚肌肉，用5mL生理鹽水沖洗腹腔.并收集腹腔液，經(jīng)3000r/min離心5min取上清液于590nm比色，記錄OD值。 1.3統(tǒng)計學分析 計量資料結(jié)果用xs表示，各組間比較，先進行方差齊性檢驗，如方差齊用兩兩比較用LSD檢驗;如方差不齊，則按秩和H檢驗。全部數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行分析。結(jié)果用P值顯示。 2結(jié)果 2.1不同配伍對正常小鼠胃腸推進功能的影響 與正常組比較，桂枝高劑量組胃、腸3段酚紅低于正常組，表明其有增加胃腸推進功能的作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.001，P0.05);白芍低劑量組腸

8、2段酚紅高于正常組，表明其對胃腸推進功能有抑制作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);柴芍低劑量組腸2段酚紅高于正常組，表明其對胃腸推進功能有抑制作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);白芍高劑量組腸3與腸5段、柴芍高劑量組腸2段、阿托品組腸2與腸5段酚紅高于正常組，表明其對胃腸推進功能有顯著抑制作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(結(jié)果見表1) 2.2不同配伍對正常小鼠血清ET的影響 與正常組比較，阿司匹林組小鼠血清ET降低，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(結(jié)果見表2) 2.3不同配伍對冰醋酸致痛小鼠扭體次數(shù)及腹腔血管通透性的影響 與模型組比較，白芍低劑量組、柴芍高劑量組均具有鎮(zhèn)痛作用，差異

9、有統(tǒng)計學意義(P0.05);白芍高劑量組、桂芍低劑量組、桂芍高劑量組、柴芍低劑量組、阿司匹林組均具有鎮(zhèn)痛作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)，其中阿司匹林組作用較強(P0.05)。與模型組比較，桂枝低劑量組、桂芍高劑量組具有降低腹腔血管通透性的作用，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);桂枝高劑量組、白芍高劑量組、阿司匹林組具有明顯降低腹腔血管通透性的作用，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.05)。(結(jié)果見表3) 3討論 藥物組合或藥對的配伍及其作用體現(xiàn)，是方劑學的特色，而散收相配、相反相成的配伍特點尤為突出4。桂芍相伍，出自傷寒論桂枝湯。桂枝辛溫，發(fā)汗通陽主動;白芍酸寒，和營斂陰主靜。二者配伍，一散一斂

10、，散收結(jié)合，發(fā)汗之中有收斂之意，和營之中有調(diào)衛(wèi)之功;桂枝發(fā)散因白芍之斂而不傷陰，白芍酸斂不滯邪。柴芍相伍，首見于傷寒論的四逆散得桂枝之散則。白芍養(yǎng)血斂陰，柔肝和血，緩急止痛，清解虛熱;柴胡疏肝開郁，和解退熱，升舉陽氣。白芍酸寒收斂，能斂津液而護營血，養(yǎng)血以柔肝，緩急而止痛，瀉肝之邪熱，以補脾陰;柴胡輕清辛散，能引清陽之氣上升，以疏調(diào)少陽之氣，而理肝脾、調(diào)中宮、消痞滿。二藥伍用，相互依賴，相互促進，互制其短而展其長。故以白芍之酸斂，制柴胡之辛散，用柴胡之辛散，又佐白芍之酸斂，以引藥直達少陽之經(jīng)，而清膽疏肝，和解表里，升陽斂陰，解郁止痛4。 散收配伍在方中起相反相成的作用，但如何將這一配伍方式及其不同藥對作用的多樣性加以揭示，需要引入現(xiàn)代研究方法，以便于了解和探討散收藥對二者相配后其作用的協(xié)同性或拮抗性、是否與單味藥的藥效有區(qū)別。本實驗結(jié)果表明，桂枝、柴胡、白芍單味藥不具有的藥效，配伍后可有，且其在藥效方面具有協(xié)同性。如桂枝、柴胡單味藥對胃腸推進功能與血管通透性均無影響，而柴芍配伍后均可抑制胃腸推進功能，解痙作用增強;桂芍、柴芍配伍后均具有鎮(zhèn)痛作用，且桂芍高劑量配伍后作用強于白芍單味藥，桂芍高劑量還可降低毛細血管通透性顯示出抗炎作用。同是散收配伍的藥對，桂芍、柴芍等比例配伍后既可發(fā)揮相同作用，也可發(fā)揮不同作用。如桂芍、柴芍