2019年生物選修一和三高考真題

1、19. （2019江蘇）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運用的敘述，不合理的是A. 篩選培養(yǎng)基中應含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)B. 可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C. 在分離平板上長出的菌落需進一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D. 用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值【答案】A【解析】【分析】纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖?！驹斀狻繎撚靡岳w維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能夠存活，A錯誤；木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，B正確

2、；用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，C正確；用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價值，D正確。故選A。14. （2019江蘇）如圖是一種酵母通氣培養(yǎng)的生長曲線，a、b是相同培養(yǎng)條件下兩批次培養(yǎng)的結(jié)果，下列敘述合理的是A. a批次中可能有大量細菌污染B. b批次的接種量可能高于a批次C. t1時兩批次都會產(chǎn)生較多的乙醇D. t2時兩批次發(fā)酵液中營養(yǎng)物質(zhì)剩余量相同【答案】B【解析】【分析】由題可知，a、b是相同培養(yǎng)條件下兩批次培養(yǎng)的結(jié)果，而且均呈S型增長曲線，二者的K值相同，但二者達到最大細

3、胞密度的時間不相同?！驹斀狻縜批次若有大量細菌污染，則K值會下降，與題圖不符，A錯誤；b批次先達到K值，可能是接種量高于a批次，B正確；圖中曲線是酵母菌在通氣的條件下繪制得到，t1時細胞密度增加很快，說明此時氧氣充足，酒精發(fā)酵需要在無氧條件下進行，故此時產(chǎn)生的酒精很少或幾乎沒有，C錯誤；t2時，a、b兩批次均達到K值，但由于b批次酵母菌數(shù)量首先達到K值，故消耗的營養(yǎng)物質(zhì)較多，則營養(yǎng)物質(zhì)的剩余量相對較少，D錯誤。故選B。（2019江蘇）下列關(guān)于微生物實驗操作的敘述，錯誤的是A. 培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌B. 接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進行灼燒C. 接種后的培養(yǎng)皿要倒置，

4、以防培養(yǎng)污染D. 菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基【答案】A【解析】【分析】無菌技術(shù)指通過一定的物理、化學的手段，防止實驗室培養(yǎng)物被外來微生物污染，保持微生物的純培養(yǎng)的技術(shù)，其中包括在微生物的分離、轉(zhuǎn)接、保存等過程中防止其他微生物污染的手段。常見的方法：消毒和滅菌?！驹斀狻拷臃N室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A錯誤；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進行灼燒滅菌，B正確；接種后，培養(yǎng)皿需要倒置，以防皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染，C正確；分離菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后

5、者還可以用于微生物的計數(shù)，所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，D正確。故選A。9.（2019江蘇）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應用的敘述，正確的是A. 利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C. 果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D. 毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵【答案】B【解析】【分析】制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能在無氧條件下繁殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達的

6、白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。【詳解】乳酸菌是一種嚴格的厭氧菌，有氧氣存在時，其發(fā)酵會受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應一致處于密閉狀態(tài)，否則會導致發(fā)酵失敗，A錯誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過程中所用的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低；果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液

7、的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯誤；毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯誤。10. （2019江蘇）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯誤的是A. 用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近B. DNA析出過程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂C. 預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNAD. 用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱【答案】A【解析】【分析】DNA粗提取選材的標準：DNA含量高，并且材料易得由于哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和細胞器，因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理： 1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他

8、成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。【詳解】兔屬于哺乳動物，其紅細胞沒有細胞核及各種細胞器，提取不到DNA，而雞屬于鳥類，其紅細胞內(nèi)含有細胞核與各種細胞器，DNA含量較多，A錯誤；DNA分子從細胞中被釋放出來且除去蛋白后是非常容易斷裂的,如果太過劇烈的攪拌，DNA鏈可能會被破環(huán)，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較完整的DNA分子，B正確；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉

9、淀量最大。如果用熱的95%酒精會提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀，C正確；將析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需要水浴加熱才會呈現(xiàn)藍色，D正確。3.（2019北京）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結(jié)果見下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細菌5.111.22.2細菌8.113.01.6有關(guān)本實驗的敘述，錯誤的是A. 培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B. 篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C. 以上兩種細菌均不能將淀粉酶分

10、泌至細胞外D. H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異【答案】C【解析】【分析】該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，會產(chǎn)生透明圈?！驹斀狻颗囵B(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；H/C越大，說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。因此，本題答案選C。32.（2018浙江11月）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與微生物

11、培養(yǎng)及應用有關(guān)的問題：（1）對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌時，滅菌時間應從_時開始計時。對于不耐熱的液體培養(yǎng)基，一般可將其轉(zhuǎn)人G6玻璃砂漏斗中，采用_方式可較快地進行過濾滅菌。（2）釀造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加_的過程。某醋化醋桿菌培養(yǎng)基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇組成，其中甘露醇的主要作用是_。（3）為篩選胞外A淀粉酶分泌型菌種，一般從_（A果園樹下 B肉類加工廠周圍 C 米酒廠周圍 D枯樹周圍）獲得土樣，用無菌水稀釋，涂布到含有淀粉的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時間后在培養(yǎng)基表面滴加碘液，可在菌落周圍觀察到透明的水解圈。若要篩選酶活性較高的菌種，需挑選若干個_比值大的菌落，

12、分別利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)進行擴增。然后將培養(yǎng)液離心，取_用于檢測酶活性。（二）某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程示意圖如下，回答下列問題；（1）該農(nóng)業(yè)生態(tài)工程體現(xiàn)的生態(tài)工程原理主要是_。對該工程的經(jīng)濟效益分析，可從系統(tǒng)內(nèi)部的投入和產(chǎn)出、_、系統(tǒng)的有效貢獻等三方面進行核算。（2）若要提高該工程的經(jīng)濟效益，可采用農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的_技術(shù)在?；显俜N植大豆，也可采用農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的_技術(shù)放養(yǎng)適量的雞鴨等動物以調(diào)整該工程的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)。（3）某小組應用基因工程方法開展適用于該生態(tài)工程的抗蟲植物改良研究。為提高將重組DNA分子導入受體細胞的效率，除考慮導入方法、篩選條件、防止污染外，還需考慮的主要因素有_（答出2點即可）。農(nóng)桿菌介導法

13、是目前植物轉(zhuǎn)基因的常用方法，該方法的基本過程是農(nóng)桿菌感染植物時，_，并將其插入到受體細胞的基因組中。欲獲得穩(wěn)定遺傳的抗蟲性強的轉(zhuǎn)基因植物品種，則轉(zhuǎn)入的抗蟲基因必須能在受體細胞中_。【答案】 (1). 達到設(shè)定的溫度或壓力值 (2). 抽濾 (3). 將淀粉分解成糖 (4). 作為碳源 (5). C (6). 水解圈直徑與菌落直徑 (7). 上清液 (8). 物質(zhì)循環(huán) (9). 系統(tǒng)的實際消費 (10). 間種 (11). 種植業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化 (12). 重組DNA的質(zhì)量和濃度、受體細胞的生長狀態(tài)與密度 (13). 攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到受體細胞 (14). 穩(wěn)定和高效地表達【解析】【

14、分析】1、釀造果醋的原理：C6H12O6C2H5OHCO2，C2H5OHO2CH 3COOHH2 O。2、生態(tài)工程的原理：物質(zhì)循環(huán)再生原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理?！驹斀狻浚ㄒ唬?）對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌時，滅菌時間應從達到設(shè)定的溫度或壓力值時開始計時。對于不耐熱的液體培養(yǎng)基，一般可將其轉(zhuǎn)入G6玻璃砂漏斗中，采用抽濾方式可較快地進行過濾滅菌，例如尿素。（2）大米、高粱等原料中富含淀粉，醋化醋桿菌無法直接利用淀粉，應先將淀粉分解為糖。某醋化醋桿菌培養(yǎng)基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇組成，其中蛋白胨為微生物提供氮源，酵母提取物和甘露醇為微生物提供碳源。（3）以淀粉原料生產(chǎn)酒時，淀粉需在淀粉酶

15、的催化作用下水解為可以進行發(fā)酵的糖。因此，可從米酒廠周圍獲得土樣，篩選胞外淀粉酶分泌型菌種。淀粉遇碘液變藍，淀粉在淀粉酶的催化作用下水解生成糊精，糊精滴加碘液，不會變藍。在培養(yǎng)基表面滴加碘液，由于菌種產(chǎn)生胞外淀粉酶水解淀粉形成透明圈，透明圈越大，說明淀粉酶的活性越高。因此，挑選透明水解圈直徑與菌落直徑比值大的菌落來篩選酶活性較高的菌種。然后利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)進行擴增，再對培養(yǎng)液進行離心取上清液得到淀粉酶提取液，用于檢測酶活性。（二）（1）根據(jù)題圖中農(nóng)業(yè)生態(tài)工程示意圖可知，蔗葉、蠶沙養(yǎng)魚，塘泥作為甘蔗和桑樹的肥料回到?；驼峄?，桑葉養(yǎng)蠶，而桑葚、蠶繭、魚和甘蔗均可加工，為人類利用，這樣實現(xiàn)物

16、質(zhì)的良性循環(huán)?？蓮南到y(tǒng)內(nèi)部的投入和產(chǎn)出、系統(tǒng)的實際消費、系統(tǒng)的有效貢獻等三方面分析該工程的經(jīng)濟效益。（2）為了提高該工程的經(jīng)濟效益，可采用間種技術(shù)在?；戏N植大豆，也可以適量放養(yǎng)雞鴨等動物來優(yōu)化種植業(yè)和畜牧業(yè)等產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)。（3）為提高將重組DNA分子導入受體細胞的效率，除考慮導入方法、篩選條件、防止污染外，還需考慮的主要因素有重組DNA的質(zhì)量和濃度、受體細胞的生長狀態(tài)與密度等。將重組DNA分子導入受體細胞方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射技術(shù)和氯化鈣處理法。其中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是目前植物轉(zhuǎn)基因的常用方法，該方法的基本過程是農(nóng)桿菌感染植物時，攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到受體細胞，并將其插入到受體細胞的基因組

17、中。欲獲得穩(wěn)定遺傳的抗蟲性強的轉(zhuǎn)基因植物品種，則轉(zhuǎn)入的抗蟲基因必須能在受體細胞中穩(wěn)定和高效地表達。【點睛】1、識記無菌技術(shù)和微生物接種的常用方法及微生物的篩選等進行解答。2、了解生態(tài)工程建設(shè)的意義，理解生態(tài)工程的概念和遵循的五項基本原理，利用生態(tài)工程原理，分析生態(tài)環(huán)境問題及探求解決問題對策。3、了解基因工程的基本操作步驟程序，尤其是將重組DNA分子導入受體細胞這一步。11.（2019全國I）已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），

18、硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量），X（15g/L）。號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量）。X（45g/L）?；卮鹣铝袉栴}。（1）在號培養(yǎng)基中，為微生物提供氨源的是_。、號培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機物是_。（2）若將土壤懸浮液種在號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會_，其原因是_。（3）號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應采用的方法是_。（4）假設(shè)從號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_和_?！敬鸢浮?(1). 牛肉

19、膏、蛋白胨 (2). X (3). 下降 (4). 不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖 (5). 稀釋涂布平板法 (6). 能量 (7). 合成其他物質(zhì)的原料【解析】【分析】1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機物X，這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固

20、體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋涂布平板法?！驹斀狻浚?）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機物均含碳元素，II、III號培養(yǎng)基均含有有機物X，因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機物X。（2）由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物X，

21、因此若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導致其比例減少。（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進行微生物的計數(shù)。（4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料?！军c睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源

22、、無機鹽等。（2019年全國卷II）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）?；卮鹣铝袉栴}。（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應該是_。（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇_菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是_。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結(jié)果和結(jié)論，即_。（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，

23、使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_，三處滴加量相同。一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明_；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明_。【答案】 (1). W (2). 乙 (3). 乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W (4). 將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源 (5). 緩沖液 (6). 緩沖液不能降解W (7). 酶E與天然酶降解W的能

24、力相近【解析】【分析】篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W、物理因素的抗性而設(shè)計的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。【詳解】（1）該研究小組的目標菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。（2）研究小組的目標菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標細菌。（3）目標菌能夠利用空氣中氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙

25、菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。（4）C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近?！军c睛】本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學生理解識別目標菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。（2019年全國卷III）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在

26、細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是_（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是_。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上_（填“能夠”或“不能”）生長，原因是_。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板_（填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是_。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過_處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物?！敬鸢浮?(1). 蛋白胨 (2). 不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同 (3). 能夠 (4).

27、 硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源 (5). 倒置 (6). 在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征 (7). 滅菌【解析】【分析】1、微生物培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽；不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。2、配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項：倒平板的溫 度一般50左右適宜，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固；平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。【詳解】（1）葡萄糖只能為細菌提供碳源，硝酸鈉為細菌提供無機鹽，而蛋白胨既可以為細菌碳源

28、，也可以為細菌提供氮源；由于不同的細菌生長繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)的細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，其可以利用氨氧化釋放的能量將空氣中的二氧化碳固定為有機物，因此硝化細菌可以在無碳培養(yǎng)基中生長。（2）用平板培養(yǎng)細菌時，一般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（3）由于每一大類微生物都有其獨特的細胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是識記微生物培養(yǎng)基的成分、培育條件、培養(yǎng)

29、過程以及注意事項，能夠根據(jù)不同微生物的代謝類型判斷其所需營養(yǎng)成分的種類，進而結(jié)合題干要求分析答題。23. （2019年江蘇）下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是A. 可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合B. 兩兩融合的細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C. 雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn)D. 細胞膜的流動性是細胞融合的基礎(chǔ)【答案】ACD【解析】【分析】（1）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性、細胞的增殖，誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。（

30、2）單克隆抗體制備的原理包括：免疫理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；動物細胞培養(yǎng)技術(shù)：對雜交瘤細胞進行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖?！驹斀狻空T導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒）等，A正確；兩兩融合的細胞包括免疫B細胞與免疫B細胞融合的具有同種核的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的具有同種核的細胞、免疫B細胞與骨髓瘤細胞

31、融合的雜交瘤細胞，骨髓瘤細胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細胞都無法生長，只有雜交瘤細胞才能生長，B錯誤；因每個免疫B細胞只分泌一種特異性抗體，因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細胞篩選出來，C正確；動物細胞融合是以細胞膜的流動性為基礎(chǔ)的，D正確。故選ACD。24. （2019年江蘇）下圖為一富營養(yǎng)化河流生態(tài)修復工程的示意圖，下列敘述正確的是A. 曝氣可增加厭氧微生物降解有

32、機污染物的能力B. 吸附基質(zhì)增加了微生物附著的表面積，提高了凈化效果C. 植物浮床有吸收水體氮、磷的能力，可減少富營養(yǎng)化D. 增加水體透明度，恢復水草生長是該修復工程的目標之一【答案】BCD【解析】【分析】水體富營養(yǎng)化是指水體中氮、磷等植物營養(yǎng)物質(zhì)的富集，引起藻類及其他浮游生物迅速繁殖，導致水體溶氧量下降，進而引起水生生物衰亡、水質(zhì)惡化的現(xiàn)象。利用需氧微生物與厭氧微生物能夠降解有機污染物的作用、植物的根系能夠從水體中吸收氮、磷等礦質(zhì)營養(yǎng)的作用，依據(jù)生態(tài)工程的基本原理進行合理設(shè)計，對污染的生態(tài)環(huán)境進行修復，從而達到改善和凈化水質(zhì)的目的?！驹斀狻科貧饪稍黾尤苎趿?，進而降低厭氧微生物降解有機污染物的

33、能力，A錯誤；吸附基質(zhì)增加了微生物附著的面積，有利于微生物的生理活動，可促進有機污染物的降解，因此能夠提高凈化效果，B正確；借助植物浮床，可使植物龐大的根系透過小孔牢牢的固定在水體中，植物的根系從水體中吸收氮、磷等物質(zhì)，可減少水體富營養(yǎng)化，增加水體透明度，恢復水生植物生長，從而起到了改善和凈化水質(zhì)的效果，可見，增加水體透明度，恢復水草生長是該修復過程的目標之一，C、D正確。故選BCD。（2019年江蘇）下列生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造，不會遺傳給子代的是A. 將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌B. 將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株C. 將腸乳糖酶基因?qū)?/p>

34、奶牛受精卵，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛D. 將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者，進行基因治療【答案】D【解析】【分析】轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組?；蛑亟M和基因突變、染色體變異均屬于可遺傳的變異?；蛑委煟褐赴颜；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段?！驹斀狻繉⒑葝u素基因表達載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌，可以通過二分裂將胰島素基因傳給后代，A不符合題意；將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細胞均含有花青素代謝基因，花青素代謝基因會隨該植物傳給后代，B不符合題意；將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?/p>

35、，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛所有細胞均含有腸乳糖酶基因，可以遺傳給后代，C不符合題意；該患者進行基因治療時，只有淋巴細胞含有該腺苷酸脫氨酶基因，性原細胞不含該基因，故不能遺傳給后代，D符合題意。故選D。（2019年北京）（3）研究發(fā)現(xiàn)，原核生物藍藻（藍細菌）R酶的活性高于高等植物，有人設(shè)想通過基因工程技術(shù)將藍藻R酶的S、L基因轉(zhuǎn)入高等植物，以提高后者的光合作用效率。研究人員將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物（甲）的葉綠體DNA中，同時去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活并生長。檢測結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。由上述實驗能否得出“轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍藻的S、L組裝而

36、成”的推測_？請說明理由。_基于上述實驗，下列敘述中能夠體現(xiàn)生物統(tǒng)一性的選項包括_。a藍藻與甲都以DNA作為遺傳物質(zhì)b藍藻與甲都以R酶催化CO2的固定c藍藻R酶大亞基蛋白可在甲的葉綠體中合成d在藍藻與甲的葉肉細胞中R酶組裝的位置不同【答案】 (1). 光能 (2). 溫度、CO2濃度 (3). R酶活性、R酶含量、C5含量、pH（其中兩個） (4). 細胞質(zhì) (5). 基質(zhì) (6). 不能 (7). 轉(zhuǎn)入藍藻S、L基因的同時沒有去除甲的S基因，無法排除轉(zhuǎn)基因植株R酶中的S是甲的S基因表達產(chǎn)物的可能性 (8). a、b、c【解析】【分析】本題主要考查光合作用、基因工程及基因?qū)π誀畹目刂频挠嘘P(guān)知識

37、。影響光合作用的外界因素主要有光照、溫度、水、無機鹽和CO2濃度等，內(nèi)部因素主要有色素的含量和種類、酶的含量及活性；要將新的基因轉(zhuǎn)入，首先得將“原配”基因從受體植株的細胞核和它的葉綠體基因組中給敲除掉。然后導入目的基因，等待它們將老片段“替換”掉了之后，用專門的培養(yǎng)基篩選出只含有這種葉綠體的細胞，再通過組織培養(yǎng)最終獲得R酶活性很高的轉(zhuǎn)基因植株?！驹斀狻?1)地球上生物生命活動所需的能量來自有機物，有機物主要來自植物的光合作用，光合作用合成有機物需要光反應吸收光能，轉(zhuǎn)化為ATP的化學能，然后ATP為暗反應中C3的還原提供能量，合成糖類。在暗反應中，RuBP 羧化酶(R酶)催化CO2與RuBP(C

38、5)結(jié)合，生成2分子C3，這是光合作用的暗反應的二氧化碳的固定。暗反應的進行需要相關(guān)酶的催化，二氧化碳做原料，需要光反應提供H和ATP，光反應需要色素、酶、水、光照等，故影響該反應的外部因素有光照、溫度、CO2濃度、水、無機鹽等；內(nèi)部因素包括色素含量及種類、酶的含量及活性等。(2)高等植物細胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成，S由細胞核基因通過轉(zhuǎn)錄成mRNA ，mRNA 進入細胞質(zhì)基質(zhì)，與核糖體結(jié)合，合成為S蛋白；因R酶是催化CO2與C5結(jié)合的，在葉綠體基質(zhì)中進行，故S蛋白要進入葉綠體，在葉綠體的基質(zhì)中與L組裝成有功能的酶。(3) 據(jù)題設(shè)條件可知，將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠

39、體DNA中，只去除甲的L基因，沒有去除甲的S基因。因此，轉(zhuǎn)基因植株仍包含甲植株的S基因，不能排除轉(zhuǎn)基因植株中R酶是由藍藻的L蛋白和甲的S蛋白共同組成。故由上述實驗不能得出“轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍藻的S、L組裝而成”的推測。根據(jù)上述實驗，可以看出藍藻基因能導入到甲的DNA中，說明藍藻和甲植株都以DNA為遺傳物質(zhì)；藍藻中 R酶的活性高于高等植物，說明兩者都以R酶催化CO2的固定；由于藍藻S、L基因均轉(zhuǎn)入甲的葉綠體DNA中，且去除了甲的L基因，結(jié)果轉(zhuǎn)基因植株合成了R酶，說明藍藻R酶大亞基蛋白L在甲的葉綠體中合成，以上體現(xiàn)了生物界的統(tǒng)一性。在藍藻中R酶組裝是在細胞質(zhì)基質(zhì)，甲的葉肉細胞組裝R酶是

40、在葉綠體基質(zhì)，則說明了不同生物之間具有差異性。因此，選abc。【點睛】解答本題關(guān)鍵抓住“將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中，同時去除甲的L基因?！边@一條件，得知甲的S基因還在，可以合成S蛋白，推知轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶并不完全是由藍藻的S、L組裝而成。20.（2019年江蘇）為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實驗過程如下圖。下列敘述正確的是A. 過程獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中B. 過程需提高生長素的比例以促進芽的分化C. 過程需用秋水仙素處理誘導細胞壁再生D. 原生質(zhì)體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性【答案】D【解析】【分析】由圖可知，表示

41、用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；均表示再分化過程?！驹斀狻吭|(zhì)體在30%的蔗糖溶液中會失水皺縮，A錯誤；誘導芽分化時，需要提高細胞分裂素的比例，B錯誤；可以表示誘導根的分化形成幼苗，此時細胞壁已經(jīng)形成，C錯誤；原生質(zhì)體無細胞壁，但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選D。【點睛】植物組織培養(yǎng)時，生長素與細胞分裂素用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向：生長素與細胞分裂素比例適中時，有利于愈傷組織的形成；生長素/細胞分裂素比例較高時，利于根的分化；生長素/細胞分裂素比例較低時，利于芽的分化。29. （2019年江蘇）利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細胞中，然后通過核移

42、植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程，請回答下列問題：（1）對1號豬使用_處理，使其超數(shù)排卵，收集并選取處在_時期的卵母細胞用于核移植。（2）采集2號豬的組織塊，用_處理獲得分散的成纖維細胞，放置于37的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的作用是_。（3）為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前對胚胎進行_。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于_號豬。（4）為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達，可采用的方法有_（填序號）。DNA測序 染色體倍性分析 體細胞結(jié)構(gòu)分析 抗原抗體雜交【答案】 (1). 促性腺激素 (2). 減數(shù)第二次分裂中期 (3). 胰蛋白酶（膠

43、原蛋白酶） (4). 維持培養(yǎng)液的pH (5). 分割 (6). 2 (7). 【解析】【分析】據(jù)圖分析，圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導入2號豬的體細胞核中，然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中，再將重組細胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號轉(zhuǎn)基因克隆豬?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析可知，1號豬提供的是卵母細胞，對其注射促性腺激素可使其超數(shù)排卵，獲得的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進行核移植。（2）將2號豬的組織塊分散成單個的成纖維細胞需要用胰蛋

44、白酶或膠原蛋白酶處理，該細胞的培養(yǎng)應在37含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（3）利用胚胎分割技術(shù)對圖示早期胚胎進行分割，可以獲得更多的基因編輯豬；據(jù)圖分析可知，核移植的細胞核來自于2號豬，因此產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬。（4）檢測病毒外殼蛋白基因（目的基因）是否導入4號豬，可以采用DNA分子雜交法檢測目的基因的序列；目的基因表達的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)（病毒外殼蛋白），可以利用抗原-抗體雜交法進行檢測，故選?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程，能夠弄清楚題圖中不同的豬提供的結(jié)構(gòu)和作用，明確核移植時的卵母細胞需要培

45、養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，并能夠選擇正確的方法檢測目的基因是否表達。33. （2019年江蘇）圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr)和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題： （1）EcoRV酶切位點為，EcoR V酶切出來的線性載體P1為_未端。（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為_的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在_酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A、B、

46、C三類菌落，其生長情況如下表（“+”代表生長，“”代表不生長）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應選擇的菌落是_（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導入情況分別是_、_。（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應位置，PCR鑒定時應選擇的一對引物是_。某學生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段，原因是_?！敬鸢浮?(1). 平 (2). 胸腺嘧啶（T） (3). DNA連接 (4). B (5). A類菌落含有P0 (6). C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒 (7). 乙丙 (8). 目的基因反向連接【

47、解析】【分析】基因表達載體的基本結(jié)構(gòu)包括復制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可用于檢測目的基因是否導入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后會破壞四環(huán)素抗性基因（tetr）。【詳解】（1）根據(jù)題意分析，EcoRV酶識別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在中間的T與A之間進行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。（2）依題意并據(jù)圖分析，目的基因兩側(cè)為黏性末端，且漏出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要加一個含有堿基T的脫氧核苷酸，以便形成具有黏性末端的

48、載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。（3）根據(jù)以上分析已知，限制酶（EcoRV酶）切割后破壞了四環(huán)素抗性基因，但是沒有破壞氨芐青霉素抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中應該不能生長，而在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長，結(jié)合表格分析可知，應該選擇B類菌落。根據(jù)表格分析，A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長，說明其導入的是P0；C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長，說明其沒有導入任何質(zhì)粒。（4）據(jù)圖分析，根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析，PCR鑒定時應該選擇的一對引物是乙和丙；根據(jù)題意和圖形分析，某同學用圖中的另外一

49、對引物（甲、乙）從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp的片段，說明其目的基因發(fā)生了反向連接?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是識記并理解基因工程的四個基本步驟，尤其是對核心步驟構(gòu)建基因表達載體步驟的理解，明確基因表達載體的幾個必須的成分及其作用，進而結(jié)合題干要求分析答題。（2019年浙江）（二）回答與利用生物技術(shù)培育抗病品種有關(guān)的問題：（1）通過抗病性強的植株獲取抗病目的基因有多種方法。現(xiàn)已獲得純度高的抗病蛋白（可作為抗原），可通過_技術(shù)獲得特異性探針，并將_中所有基因進行表達，然后利用該探針，找出能與探針特異性結(jié)合的表達產(chǎn)物，進而獲得與之對應的目的基因。（2）將上述抗病基因通過轉(zhuǎn)基因的方法導入植物的分生

50、組織可獲得抗病性強的植株。若在試管苗期間用分子水平方法判斷抗病基因是否表達，應檢測_（A.質(zhì)粒載體 B.轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 C.抗性基因 D.病原微生物）。（3）植物細胞在培養(yǎng)過程中往往會發(fā)生_，可利用這一特性篩選抗致病真菌能力強的細胞。篩選時在培養(yǎng)基中加入_，并將存活的細胞進一步培養(yǎng)至再生植株。若利用_培養(yǎng)建立的細胞系用于篩選，則可快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗病植株。（4）用抗病品種與高產(chǎn)品種進行雜交育種過程中，有時會遇到因胚發(fā)育中止而得不到可育種子的情況。若要使該胚繼續(xù)發(fā)育獲得植株，可采用的方法是_。(8). 單克隆抗體 (9). 基因文庫 (10). B (11). 變異 (12). 高濃度致病真菌 (1

51、3). 花粉離體 (14). 胚的離體培養(yǎng)（二）（1）抗病蛋白可作抗原，則特異性探針應為抗體，則需要通過單克隆抗體技術(shù)獲得特異性探針；基因文庫包含了某個DNA分子的所有基因，故是將基因文庫中的所有基因進行表達，再利用探針獲得目的基因；（2）質(zhì)粒載體只能檢測目的基因是否轉(zhuǎn)入受體細胞，A選項錯誤；轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為RNA，可以通過DNA-RNA分子雜交檢測抗病基因是否表達，B選項正確；檢測抗性基因只能檢測抗性基因是否導入受體細胞，無法檢測該基因是否表達，C選項錯誤；檢測病原微生物是個體水平檢測目的基因是否表達的方式，D選項錯誤；故正確的選項選擇B；（3）抗致病真菌基因是原本植物細胞不含的基因，則需要利用植

52、物細胞在培養(yǎng)過程中的變異來篩選抗致病真菌能力強的細胞；由于需要篩選抗致病真菌能力強的細胞，故需要在培養(yǎng)基中加入高濃度致病真菌；快速穩(wěn)定遺傳的抗病植株需要通過單倍體培養(yǎng)獲得，故需要利用花粉離體培養(yǎng)建立細胞系用于篩選；（4）要利用胚的發(fā)育獲得植株，可利用胚細胞的全能性，采用胚的離體培養(yǎng)獲得植株。12.（2019全國卷I）基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因。回答下列問題。（1）基因工程中所用目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀╛和_。（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是_。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是

53、_。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的_。（3）目前在PCR反應中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是_?！敬鸢浮?(1). 基因組文庫 (2). cDNA文庫 (3). 解旋酶 (4). 加熱至90-95 (5). 氫鍵 (6). Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活【解析】分析】基因工程的操作步驟：目的基因的獲?。ɑ蛭膸飓@取、PCR、人工合成）；構(gòu)建基因表達載體（含目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點）；把目的基因?qū)胧荏w細胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測和鑒定（分子水平DNA分子雜交法、分子雜交法、

54、抗原抗體雜交法和個體水平抗蟲、抗病接種實驗等）。【詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(CDNA文庫)，前者包括一種生物的全部基因，后者只包括一種生物的部分基因。（2）體內(nèi)進行DNA復制時，需要解旋酶和DNA聚合酶，解旋酶可以打開雙鏈之間的氫鍵， DNA聚合酶可以催化磷酸二酯鍵的形成。在體外進行PCR擴增時，利用高溫變性即加熱至90-95，破壞雙鏈之間的氫鍵，使DNA成為單鏈。解旋酶和高溫處理都破壞了DNA雙鏈中堿基對之間的氫鍵。（3）由于在PCR過程中，需要不斷的改變溫度，該過程中涉及較高溫度處理變性，大腸桿菌細胞內(nèi)的DNA聚合酶在高溫處理下會變性失活，因此PCR過程中需要用耐高溫的Taq DNA聚合酶催化?！军c睛】PCR的原理是DNA雙鏈的復制，故類似于細胞內(nèi)的DNA復制過程，需要模板、原料等條件。由于該過程中特殊的高溫條件，需要用耐高溫的DNA聚合酶。（2019年全國卷II）植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛應用?；卮鹣铝袉栴}。（1）植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點有_（答出2點即可）。（2）通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮（人工薄膜）包裝得到人工種子（如圖所示），這種人工