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文檔簡介

1、生物工業(yè)下游技術(生物分離工程),劉紅占QQ:704274516TEL第一章緒論,本章要求,熟悉下游加工過程的重要性和特點 了解下游加工技術的發(fā)展過程 掌握下游加工過程的主要步驟和主要單元操作,一般認為是以生物學的理論和技術為基礎,結合化工、機械、電子計算機等現代工程技術,充分運用分子生物學的最新成就,自覺地操縱遺傳物質,定向地改造生物或其功能,短期內創(chuàng)造出具有超 遠緣性狀的新物種,再通過合適的生物反應器對這類“工程菌”或“工程細胞株”進行大規(guī)模的培養(yǎng),以生產大量有用代謝產物或發(fā)揮它們獨特生理功能一門新興技術。,生物工程:,生物工程5大支柱:,一、下游加工過程在生物技

2、術中的地位,下游技術(工程) (downstream processing):對于由生物界自然產生的或由微生物菌體發(fā)酵的、動植物細胞組織培養(yǎng)的、酶反應等各種生物工業(yè)生產過程獲得的生物原料,經提取分離、加工并精制目的成分,最終使其成為產品的技術。 下游加工過程的重要性。(組成、費用和關注程度),組成:下游加工過程是生物技術的重要組成部分,發(fā)酵液或反應液需要經過下游加工過程才能成為成品; 費用:傳統發(fā)酵工業(yè)中下游部分的費用占整個工廠投資費用的,而對重組生產蛋白質等基因工程產品,下游加工的費用可占整個生產費用的; 關注程度:英國政府工業(yè)部于年發(fā)起生物分離計劃(),專門研究下游加工過程;年英國化學工業(yè)

3、會召開了專門討論下游加工過程的國際會議;我國也于年在濟南召開了一次專門會議;近十年來國內外有關生物分離或蛋白質純化的專著陸續(xù)出版。,二、生物技術下游加工過程的特點,含水多,產物含量低; 含菌體蛋白; 溶有原來培養(yǎng)基成分; 相當多的副產物和色素; 易被雜菌污染或使產物進一步分解; 易起泡,粘性物質多。,1. 發(fā)酵液的特點,2. 整個下游加工過程應遵循下列四個原則,時間短; 溫度低; pH適中(選擇在生物物質的溫度范圍內); 嚴格清洗消毒(包括廠房、設備及管路,注意死角),這和傳統產品抗生素的生產是一致的。,對基因工程產品還應注意生物安全(biosafety)問題,要防止菌體擴散,一般要求在密封的

4、環(huán)境下操作。,三、生物工業(yè)下游技術的發(fā)展歷程,古代釀造業(yè) 2. 第一代生物技術,古代釀造業(yè)包括釀酒、制醬(油)、醋、酸奶和干酪等。技術原始、家庭式作坊、產物基本不經過后處理而直接食用,無下游技術。,主要指19世紀60年代-20世紀40年代青霉素等抗生素出現之前的生物技術產業(yè)。發(fā)現了發(fā)酵的本質是微生物的作用,掌握了純種培養(yǎng)技術,生物技術進入近代釀造產業(yè)的發(fā)展階段。到20世紀上半葉,逐漸開發(fā)形成了發(fā)酵法生產酒精、丙酮、丁醇等微生物發(fā)酵工業(yè)(厭氧發(fā)酵),其產品相對簡單,基本上是無活性的小分子。此時開始引入過濾、蒸餾、精餾等近代分離技術。,3. 第二代生物技術,3. 第二代生物技術,3. 第二代生物技

5、術,以20世紀40年代出現的青霉素產品為代表。 無菌空氣制備技術、大型好氧發(fā)酵裝置開發(fā),一大批通風發(fā)酵技術產品相繼投入了工業(yè)生產,如抗生素(鏈霉素)、氨基酸(谷氨酸)、有機酸(核酸、檸檬酸)、酶制劑(淀粉酶)、微生物多糖和單細胞蛋白等。產品多樣性決定了分離方法的多樣性。借鑒和引進吸收了大量的近代化學工業(yè)的分離技術,如沉淀、離子交換、萃取、結晶等。,3. 第二代生物技術,以20世紀70年代末崛起的DNA重組技術及細胞融合技術為代表。 生物技術在其主要領域:基因工程、酶工程、細胞工程和微生物發(fā)酵工程取得了長足進步,一批高附加值的產品開始面世,如乙肝疫苗、干擾素等。80年代,發(fā)現了一大批生理功能性物

6、質,如活性糖質、活性肽、高度不飽和脂肪酸等,生物技術在深度和廣度上都取得了很大的進展。1988年,日本由40多家公司組建高度分離系統技術研究聯合體,瑞典的Pharmacia,Alfa-Laval等組建了Biolink公司,加強在生物工業(yè)下游技術領域的研究開發(fā)力量,不斷推出新技術、新產品、新裝備,以搶占更多的市場。新技術有超臨界CO2萃取技術、膜過濾、滲透蒸發(fā)技術、各種色譜(層析)技術等。,4. 第三代生物技術,20世紀80年代以來,生物工業(yè)下游技術進步很快,出現了很多新概念、新技術、新產品和新裝備。大致可分為以下幾大類:,(1)固液分離技術 (2)細胞破碎技術 (3)初步分離純化技術 (4)高

7、度分離純化技術 (5)其他新型分離技術,近20年來,將在污水處理、化學工程和選礦工程上廣泛使用的絮凝技術引入到發(fā)酵液的預處理上,研究開發(fā)了菌體及懸浮物絮凝技術,改善了發(fā)酵液的分離性能,加之纖維素助濾劑的開發(fā),大大提高了發(fā)酵液的固液分離效率。在固液分離機械方面,也出現了一些性能優(yōu)良的新型機械,如帶式過濾機、連續(xù)半連續(xù)板框過濾機、螺旋沉降式離心機等。微濾膜可高效分離細微的懸浮粒子。,(1)固液分離技術 (2)細胞破碎技術 (3)初步分離純化技術 (4)高度分離純化技術 (5)其他新型分離技術,已開發(fā)出球磨破碎、壓力釋放破碎、冷凍加壓釋放破碎和化學破碎等技術。該技術的成熟使得胞內生物物質的大規(guī)模工業(yè)

8、化生產成為可能。,(1)固液分離技術 (2)細胞破碎技術 (3)初步分離純化技術 (4)高度分離純化技術 (5)其他新型分離技術,主要開發(fā)了沉淀、離子交換、萃取、超濾等技術。較早出現的是酶及蛋白質的鹽析法;有機溶劑沉淀法;雙水相萃取技術比較適合于胞內活性物質和細胞碎片的分離,為進一步純化精制創(chuàng)造了前提;超濾技術解決了生物大分子對pH、熱、有機溶劑、金屬離子敏感等難題,在生物大分子的分級、濃縮、脫鹽等操作中得到了廣泛的使用。,(1)固液分離技術 (2)細胞破碎技術 (3)初步分離純化技術 (4)高度分離純化技術 (5)其他新型分離技術,小分子物質一般可通過離子交換、脫色和結晶、重結晶等方法獲得純

9、度很高的產品。生物大分子的純化一直是個難題。20世紀70年代以來,逐漸開發(fā)出各種色譜(層析)技術,如親和色譜、疏水色譜、離子交換色譜和凝膠色譜等,后兩種技術已開始用于批量生產。,(1)固液分離技術 (2)細胞破碎技術 (3)初步分離純化技術 (4)高度分離純化技術 (5)其他新型分離技術,超臨界CO2萃取技術在獲得天然生物物質方面有著獨特的優(yōu)勢。20世紀80年代以來,已經在許多領域中迅速實現了工業(yè)化。如啤酒花中有效成分和咖啡豆中咖啡因的萃取分離。介于反滲透和超濾之間的納米濾(Nanofiltration)技術,由于其能使水和大部分無機鹽通過而截留分子量300-1000u的小分子有機物,且操作壓

10、力低,在生物工業(yè)和水處理中具有廣闊的應用前景。滲透蒸發(fā)技術、液膜技術及反膠團技術的研究和應用開發(fā)等也相繼取得了很大的進展。,四、生物技術下游加工過程的一般流程和單元操作,培養(yǎng)液(發(fā)酵液)的預處理和固液分離; 初步純化(提?。?; 高度純化(精制); 成品加工。,1. 一般下游加工過程可分為4個階段,2. 下游加工過程的一般流程,產品的收得率和質量控制。,下游工藝過程決定于產品的性質和要求達到的純度 如產品為菌體本身,則工藝比較簡單,只需經過濾、得到菌體,再經干燥就可,如單細胞蛋白的生產。 如可以從發(fā)酵液直接提取,則可省去固液分離步驟。 如為胞外產物則可省去細胞破碎步驟。,3. 單元操作,過濾、離

11、心固液分離; 蒸發(fā)、蒸餾、結晶進一步純化; 萃取濃縮或提取液相中的成分; 離子交換、層析、膜技術、超濾; 干燥,適合于大規(guī)模工業(yè)化生產的傳統技術經過改造提高后,適應面更寬,效率會更高,仍然顯示出強勁的生命力。(如差壓蒸餾;多效蒸發(fā)技術) 各種新型高效的過濾機械和離心機械的問世,結晶理論和離子交換技術的新進展,提高了產品的收率、質量和生產效率。,五、生物工業(yè)下游技術的發(fā)展動態(tài),成本、質量、環(huán)保將是該技術發(fā)展方向和動力,1. 傳統分離技術的提高和完善,1)新型分離介質的研究開發(fā) 2)子代分離技術 3)其他新興下游技術,2. 新技術的研究開發(fā),膜(膜材料和膜制造工藝)、樹脂(離子交換樹脂和大網格樹脂

12、)和凝膠(瓊脂糖凝膠為基質,與各種配基結合后制成各種色譜分離介質)是目前主要的新型分離介質。,各種分離純化技術相互結合、交叉、滲透,形成子代分離技術。如膜技術和萃取、蒸餾、蒸發(fā)技術相結合形成了膜萃取技術、膜蒸餾及滲透蒸發(fā)技術;色譜技術與離子交換技術等結合形成了離子交換色譜、等電聚焦色譜等。,由溶劑萃取技術衍生出一大批生物工業(yè)分離技術,如雙水相萃取、超臨界CO2萃取、反膠團萃?。毎槠コ⒓毎麅任镔|、酶及蛋白質、天然生物物質的提取分離);菌體絮凝技術和菌體細胞破碎技術的進展為工業(yè)化經濟地分離菌體細胞和大規(guī)模生產胞內物質創(chuàng)造了技術前提。,3. 清潔生產 清潔生產是指將綜合預防的環(huán)境保護策略持續(xù)應用于生產過程和產品中,以期減少對人類和環(huán)境的風險。 包括三方面內容: (1)清潔生產工藝(節(jié)約原材料和能源,淘汰有毒害的原材料,無廢和少廢技術) (2)清潔產品(使用中和使用后對人體和環(huán)境無害) (3)清潔能源(常規(guī)能源清潔利用、可再生能源和新能源的開發(fā)利用),作業(yè):,1.什么是生物工業(yè)下游技術? 2.試述生物工業(yè)下游技術的一般工藝過程。

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