革蘭陽性球菌課件

1、革蘭陽性球菌,1,學習交流PPT,革蘭陽性球菌,是指革蘭染色為陽性的一群球菌，與醫(yī)學 有關的兼性厭氧球菌有9屬 通常引起化膿性感染，故又稱化膿性球菌（pyogenic cocci） 本章主要介紹 葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬。 專性厭氧球菌在第十六章厭氧菌中介紹。,2,學習交流PPT,第一節(jié) 葡萄球菌屬,葡萄球菌屬（Staphylococcus）在自然界廣泛分布。 存在于人和動物的皮膚黏膜上的菌株 可致多種化膿性感染 癤、癰、膿腫、菌血癥等 燙傷樣皮膚綜合癥 毒性休克綜合癥,3,學習交流PPT,一、分類,葡萄球菌屬目前有35個種、17個亞種 凝固酶 凝固酶陽性葡萄球菌 凝固酶陰性葡萄球菌 （

2、Coagulase negative staphylococcus, CoNS ） 噬菌體分型 可將金黃色葡萄球菌分成45群26型 質粒分型、血清學分型、抗生素分型和細菌DNA的RFLP或PFGE分型，用來研究細菌的致病性、耐 藥性、流行病學特點和細菌鑒別的關系,4,學習交流PPT,分類,引起人類疾病的重要菌種有 金黃色葡萄球菌（S.aureus） 表皮葡萄球菌（S.epidermidis） 頭狀葡萄球菌（S.capitis） 人葡萄球菌（S.hominis） 腐生葡萄球菌（S.saprophyticus） 其余尚有一些能在人體中分離到 溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、

3、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中間葡萄球菌等。,5,學習交流PPT,二、臨床意義,凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌是人類重要致病菌 可引起社區(qū)和醫(yī)院感染 感染常以急性、化膿性為特征，如果未經有效治療，感染可擴散至周圍組織或經菌血癥轉移至其他器官 常見的感染 癤、癰、外科切口、創(chuàng)傷等局部化膿性感染和骨髓炎、化膿性關節(jié)炎、肺炎、心內膜炎、腦膜炎、菌血癥等全身性感染,6,學習交流PPT,臨床意義,致病性主要與各種侵襲性酶類和多種毒素有關 腸毒素引起食物中毒，表現為急性胃腸炎 噬菌體II群產生的剝脫毒素（或稱表皮溶解素）可引起人

4、類燙傷樣皮膚綜合征 多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人 皮膚呈彌漫性紅斑和水皰形成，繼以表皮上層大量脫落 由噬菌體群產生的毒性休克綜合征毒素-I（Toxic shock syndrome toxin I, TSST-1） 屬超抗原家族，刺激T細胞誘發(fā)TNF和IL-1 可致機體多個器官的功能紊亂或引起毒性休克綜合征(TSS),7,學習交流PPT,臨床意義,CoNS是人體皮膚黏膜正常菌群之一 是醫(yī)院感染的主要病原菌 表皮葡萄球菌 人工瓣膜性心內膜炎、靜脈導管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工關節(jié)感染等 腐生葡萄球菌 女性尿路感染的重要病原菌 其他凝固酶陰性葡萄球菌 重要的條件致病菌和

5、免疫受損患者的感染菌 產生莢膜多糖或糖萼有關 增強細菌與外來物質（生物性瓣膜、導管等）表面的粘附或在其表面形成一層生物膜而保護細菌對抗殺菌物質作用。,8,學習交流PPT,三、生物學特性,直徑0.51.5m、革蘭陽性球菌 呈單個、成雙、短鏈（液體培養(yǎng)基或膿汁中）或成簇排列呈葡萄串樣，無鞭毛和芽胞，某些菌株能形成莢膜 在金黃色葡萄球菌的細胞壁有葡萄球菌A蛋白，具有抗原性 大多為兼性厭氧菌,對營養(yǎng)要求不高，最適生長條件3537，pH7.47.6。普通培養(yǎng)基上形成直徑23mm不透明的圓形凸起菌落 產生金黃色、白色、檸檬色等非水溶性色素附著在菌落上。,9,學習交流PPT,生物學特性,金黃色葡萄球菌血瓊脂

6、平板上菌落周圍有透 明溶血環(huán)。能在含10%15% NaCl瓊脂中生長 該菌的抵抗力比其他無芽胞細菌強，耐干燥 近年來耐藥性增強，對多種抗菌藥物不敏感 生化反應活潑、能分解多種糖類和蛋白質， 觸酶陽性 該屬細菌DNA G+C mol% 為3039,10,學習交流PPT,酶和毒素,葡萄球菌屬產生多種酶和毒素 產生2種血漿凝固酶 結合凝固酶或聚集因子 是結合在菌體表面的凝固酶，能與血漿中的纖維蛋白原交聯使菌體快速凝集 游離凝固酶 是細菌分泌到菌體外的凝固酶，能被血漿中的協同因子（cofactor）激活形成復合物，再使纖維蛋白原轉變成纖維蛋白，而使血漿凝固,11,學習交流PPT,酶和毒素,耐熱核酸酶

7、葡萄球菌溶素 有、等 破壞紅細胞、白細胞、血小板以及肝細胞等 腸毒素 是一組對熱穩(wěn)定的可溶性蛋白質，耐熱100 30min ,分子量為2630kDa，能夠抵抗胃腸液中蛋白酶的水解作用 根據抗原性和等電點的不同可分為A、B 、C1、C2、 C3、D、E、G和H等9個血清型，以A、D 型多見 編碼腸毒素基因大多位于染色體上（D型由質粒編碼）,12,學習交流PPT,酶和毒素,毒性休克綜合征毒素 透明質酸酶、磷脂酶、觸酶、殺白細胞 素和表皮剝脫毒素等 攜帶誘導性的青霉素酶和乙?；D移酶質粒，通過轉導進行質粒的轉移 部分菌株通過獲得外源性的macA基因而 產生青霉素結合蛋白2a（PBP2a），導致對所有

8、內酰胺類抗生素耐藥,13,學習交流PPT,四、微生物檢驗 （一）檢驗程序,14,學習交流PPT,（二）標本采集,根據感染的部位，采集不同的標本。 該屬細菌廣泛分布在人體皮膚和黏膜，采取時避免病灶周圍正常菌群污染。,15,學習交流PPT,（三）標本直接檢查,無菌體液如腦脊液和關節(jié)穿刺液可使用涂 片、革蘭染色后直接顯微鏡檢查，查見細菌 具有重要臨床價值。 其他體液標本如同時伴有炎性細胞時則直接 顯微鏡檢查結果也具有參考價值。 涂片檢查發(fā)現有形態(tài)相似的革蘭陽性球菌， 則可初步報告“查見類似葡萄球菌屬革蘭陽性 球菌”，并進一步進行分離和鑒定予以證實。,16,學習交流PPT,（四）分離培養(yǎng)與鑒定,膿液、

9、分泌物等 接種于血瓊脂平板 有污染的標本如糞便等 應接種在選擇平板上，如甘露醇高鹽平板、哥倫比亞多粘菌素奈啶酸平板 血液標本則用肉湯增菌培養(yǎng)基,17,學習交流PPT,葡萄球菌屬內各菌種鑒定方法,18,學習交流PPT,1.菌落性狀,金黃色葡萄球菌 直徑68mn，金黃色或橙色，菌落周圍出現或不出現透明溶血環(huán) 表皮葡萄球菌 直徑為56mm，某些產粘液菌株能粘附在瓊脂平板表面，無色或白色 溶血葡萄球菌 直徑59mm，不透明，無色素或奶油色、黃色 里昂葡萄球菌 直徑47mm，邊緣整齊稍扁，奶色、黃色和沃氏葡萄球菌相似 腐生葡萄球菌 直徑58mm，白色或檸檬色 菌落外觀疑為葡萄球菌者應進行革蘭染色證實 甘

10、露醇高鹽平板上金黃色葡萄球菌菌落為黃色,19,學習交流PPT,2凝固酶試驗,有玻片法和試管法兩種 玻片凝固酶試驗-測定結合型凝固酶 試驗時挑取少數菌落培養(yǎng)物（不能用生 長高鹽瓊脂上的菌落）加入1滴血漿，10 秒內觀察細菌聚集和凝塊形成 金黃色葡萄球菌、中間型葡萄球菌呈現 陽性反應,20,學習交流PPT,2凝固酶試驗,試管凝固酶試驗-測定分泌型凝固酶 以孵育過夜的牛心腦浸液肉湯培養(yǎng)物和血漿在37水浴中孵育4h，觀察凝塊形成。如試驗結果為陰性者再置室溫1824h，因某些菌種（中間葡萄球菌、豬葡萄球菌）的凝集出現所需時間長于4h 必須注意 某些菌株產生的葡激酶在延長孵育時間后可使凝塊溶解使之產生假陰

11、性 若使用的不是無菌血漿可產生假陽性或假陰性結果； 細菌不是純培養(yǎng)物或污染可導致假陽性,21,學習交流PPT,3耐熱核酸酶試驗,大多數金黃色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中間葡萄球菌、豬葡萄球菌能產生耐熱核酸酶。 表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐熱核酸酶。,22,學習交流PPT,4磷酸酶試驗,大多數的表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中間葡萄球菌和豬葡萄球菌為陽性。 將待測菌種點種在加有硝基酚磷酸鹽的pH5.66.8 MH瓊脂上，孵育1824h，菌落周圍出現黃色為陽性。,23,學習交流PPT,5吡咯烷酮芳基酰胺酶試驗,溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中間葡萄球菌為陽

12、性。 將孵育24h斜面培養(yǎng)物接種在含吡咯烷酮-萘基酰胺（PYR）肉湯中，使細菌濃度調整為2號麥氏管濁度，35孵育2h，加入PYR試劑后2分鐘內呈現深紫紅色為陽性。,24,學習交流PPT,6其他鑒定試驗,常用的葡萄球菌屬種間細菌的鑒定生化試驗 鳥氨酸脫羧酶試驗、脲酶試驗、-半乳糖苷酶、3-羥基丁酮酸試驗、新生霉素敏感試驗、多粘菌素B耐藥試驗、糖產酸試驗,25,學習交流PPT,（五）腸毒素檢測,動物學試驗 經典的方法是采用幼貓腹腔注射(肉湯培養(yǎng)物或嘔吐物)，4h 內發(fā)生嘔吐腹瀉和體溫升高或死亡等現象者，提示金黃色葡萄球菌腸毒素存在 瓊脂擴散試驗或ELISA法測定 用瓊脂擴散試驗測定待測標本中的金黃

13、色葡萄球菌腸毒素與相應抗毒素在瓊脂糖中進行雙相擴散，觀察有無沉淀線產生 將抗毒素包被在固相載體中以雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中的腸毒素,26,學習交流PPT,第二節(jié) 鏈球菌屬,鏈球菌屬（Streptococcus） 細菌種類多，分布廣 其中某些菌種為毒力強的致病菌 另一些則是作為正常菌群棲居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道 還有一些是皮膚上的過路菌和黏膜上的定居菌,27,學習交流PPT,一、分類,鏈球菌屬的分類較為復雜 傳統(tǒng)分類 以血平板上溶血現象 Lancefield抗原血清分型 種系分類法 鏈球菌屬的分類較以前的分類有較大的變化,28,學習交流PPT,傳統(tǒng)分類,根據鏈球菌屬各種細菌在

14、血平板上的溶血現象 甲型（）溶血性鏈球菌 乙型（）溶血性鏈球菌 不出現溶血的丙型（）鏈球菌 根據Lancefield抗原血清分型 分為A、B、C、D、等20群 血清群與溶血特性沒有相關性。對人類致病的主要是A群,29,學習交流PPT,種系分類法,根據種系分類法的研究結果 原來歸屬為D群鏈球菌的腸球菌和N群鏈球菌已分別獨立為腸球菌屬（Enterococcus）和乳球菌屬（lactococcus） 遺傳學和血清學分型不能統(tǒng)一 在遺傳學上相關的同種細菌其抗原可出現異質性 毫無相關的菌種可出現同一抗原。 根據伯杰鑒定細菌手冊第9版，鏈球菌目前分為40個種和亞種,30,學習交流PPT,傳統(tǒng)的分類方法,溶

15、血性鏈球菌 A、C、G群抗原 菌落直徑大于0.5mm A群的化膿性鏈球菌（S. pyogenes）、C群、G群的馬鏈球菌（S.equi）和似馬鏈球菌（S.equismilis） 菌落直徑小于0.5mm具A、C、G群抗原，統(tǒng)稱米勒鏈球菌（S.milleri） 咽喉炎鏈球菌、中間型鏈球菌和星座鏈球菌 還有溶血和不溶血的細菌 B群抗原 無乳鏈球菌（S.agalactiae）,31,學習交流PPT,傳統(tǒng)的分類方法,溶血性鏈球菌 包括肺炎鏈球菌（S.pneumoniae） 草綠色鏈球菌群（Viridans streptococci） 不溶血D群鏈球菌 牛鏈球菌（S.bovis）,32,學習交流PPT,二

16、、臨床意義,化膿性鏈球菌是致病力最強的一種鏈球菌 能產生多種毒素 鏈球菌溶素O和S 紅疹毒素 M蛋白、脂磷壁酸 酶（鏈激酶、鏈道酶、透明質酸酶等） 可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、膿皰病、 軟組織感染、心內膜炎和腦膜炎等 產毒株還可引起猩紅熱 可致感染后的變態(tài)反應性疾病如急性腎小球腎炎、 風濕熱等 近年來報道引起毒素休克綜合征,33,學習交流PPT,臨床意義,無乳鏈球菌是新生兒菌血癥和腦膜炎的常見菌 該菌定居于婦女生殖道 能導致新生兒感染 早發(fā)型新生兒感染多發(fā)病于出生后24h，以肺炎為主 晚發(fā)型為產后7天至3月內，以腦膜炎和菌血癥為主 B群鏈球菌對成人侵襲力較弱 主要有腎盂腎炎、子宮內膜炎

17、糖尿病、泌尿生殖道功能失調、腫瘤和免疫機能低下者易受B群鏈球菌感染,34,學習交流PPT,臨床意義,C、G群溶血性鏈球菌 與化膿性鏈球菌有相似的毒力因子，引起上述相似的感染 米勒鏈球菌是人體口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群 盡管在化膿性感染病灶中能分離到該菌，但大都是手術和創(chuàng)傷引起的內源性感染,35,學習交流PPT,臨床意義,肺炎鏈球菌 大葉性肺炎、支氣管炎 中耳炎、乳突炎、鼻竇炎、腦膜炎和菌血癥 肺炎鏈球菌的莢膜在細菌的侵襲力上起著重要作用 肺炎鏈球菌的溶血素、神經氨酸酶也是其主要致病物質,36,學習交流PPT,臨床意義,草綠色鏈球菌 人體口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群， 可引

18、起心臟瓣膜異常患者的亞急性細菌性心內膜炎 從血液中分離出該菌常被認為是污染的細菌 血液鏈球菌、溫和鏈球菌、格氏鏈球菌、 口腔鏈球菌、中間型鏈球菌 常分離自深部膿腫，特別是肝和腦的膿腫,37,學習交流PPT,三、生物學特性,38,學習交流PPT,1形態(tài),鏈球菌是直徑小于2m的球形或卵圓形革蘭陽性球菌，呈鏈狀排列，鏈的長短和細菌的種類及生長環(huán)境有關,肺炎鏈球菌呈矛尖狀，寬端相對尖端向外，成雙排列，無芽胞、無動力，但能形成莢膜和粘液層,39,學習交流PPT,2培養(yǎng)特性,兼性厭氧菌 肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌某些種需要CO2 營養(yǎng)要求高 須在培養(yǎng)基中加入血液、血清。最適生長溫度3537，pH7.47.6

19、 血平板上形成灰白色小菌落 不同菌種的菌落可形成、三種特征性溶血現象 液體培養(yǎng)基中表現為絮狀和顆粒沉淀 肺炎鏈球菌 莢膜多糖使菌落呈粘液狀 產生自溶酶，培養(yǎng)48h后出現“臍窩狀”菌落,40,學習交流PPT,3生化特性和抵抗力,發(fā)酵葡萄糖和多種糖，不產氣，乳酸為代謝終末產物，觸酶陰性 鏈球菌基因DNA中G+C mol%為3446 抵抗力 本菌屬大多數細菌對干燥和消毒劑敏感 本菌屬細菌較少引起細菌耐藥性 近年對青霉素耐藥甚至多重耐藥的肺炎鏈球菌的出現并在全球播散，引起高度關注,41,學習交流PPT,抗原結構,抗原結構復雜 多糖抗原 位于細胞壁以此可將鏈球菌分類為A、B、C、D、F、G等20群 蛋白

20、抗原 主要有M蛋白、F蛋白和G蛋白等,42,學習交流PPT,四、微生物檢驗,檢驗程序,43,學習交流PPT,（二）標本采集,咽拭子、痰液、膿汁和血液等標本采集后在2h內運送到實驗室，立即進行檢查和接種 對B群溶血鏈球菌的檢查，用無菌棉簽采集第35周37周妊娠婦女的陰道分泌物，置于含多粘菌素(10g/ml)和萘啶酸(15g/ml)選擇性培養(yǎng)肉湯中孵育1824h，再作分離培養(yǎng),44,學習交流PPT,（三）標本直接檢查,直接顯微鏡檢查 標本涂片、革蘭染色、顯微鏡檢查見鏈狀排列革蘭 陽性球菌有助于無正常菌群污染標本的診斷 莢膜腫脹試驗用于檢查肺炎鏈球菌 直接檢測抗原 咽拭標本的A群鏈球菌和女性生殖道標

21、本的B群鏈 球菌可用抗原檢測 用凝集試驗或用ELISA方法等檢測 該方法特異性和敏感度高，當標本所含的菌數太少 可出現假陰性,45,學習交流PPT,（四）分離培養(yǎng)與鑒定,用羊血瓊脂平板培養(yǎng)有助于識別溶血特性和進一步 鑒定 初代分離需用5%CO2環(huán)境，3537孵育24h 觀察菌落性狀 菌落周圍呈現透明溶血環(huán)的為溶血性鏈球菌，菌落直徑大于0.5mm或小于0.5mm。草綠色溶血環(huán)的為溶血性鏈球菌。有些菌落灰白色不出現溶血環(huán) 革蘭染色為革蘭陽性球菌，鏈狀或短鏈狀排列 觸酶試驗陰性，6.5%NaCl不生長者 可確定為鏈球菌屬細菌,46,學習交流PPT,鏈球菌屬內的鑒定試驗,47,學習交流PPT,溶血性鏈

22、球菌鑒定,溶血性鏈球菌鑒定 Lancefield群特異性抗原鑒定 根據Lancefield分群的要求提取各菌落的抗原，與相應的分群血清進行凝集試驗。 與B群抗血清凝集的菌株可直接確認為無乳鏈球菌 與F群抗血清凝集并且菌落直徑0.5mm可確定為米勒鏈球菌 與A、C、G群抗血清凝集的菌株不能確定種類，還需根據菌落大小和生化反應進一步鑒定,48,學習交流PPT,溶血性鏈球菌鑒定,PYR試驗 化膿性鏈球菌產生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮-萘基酰胺，加入N，N-二甲氧基肉桂醛試劑后產生桃紅色 桿菌肽（bacitracin）敏感試驗 化膿性鏈球菌為陽性，有別于其他PYR陽性的溶血性細菌（豬鏈球菌、海豚

23、鏈球菌）和A群小菌落溶血性鏈球菌（米勒鏈球菌） 此法可作為篩選試驗,49,學習交流PPT,溶血性鏈球菌鑒定,VP試驗 挑取平板上孵育過夜菌落置于2ml VP肉湯中，孵育6h后加入VP試劑，搖勻30秒，出現桃紅色者為陽性 該試驗可鑒別A、C、G群溶血的大、小兩種不同菌落 CAMP試驗 無乳鏈球菌能產生CAMP因子，它可促進金黃色葡萄球菌溶血能力，使其產生顯著的協同溶血作用 本法可作為無乳鏈球菌的初步鑒定試驗,50,學習交流PPT,溶血性鏈球菌鑒定,此外鑒別溶血鏈球菌還有BGUR（B-D葡糖糖醛酸酶試驗） C、G群菌落為陽性反應，C、G群米勒鏈球菌則為陰性反應。,51,學習交流PPT,2非溶血鏈球

24、菌鑒定,通過血清學測定抗原群，可將B群鏈球菌、非溶血的菌株和肺炎鏈球菌得以鑒定 Lancefield的D群抗原可以存在于牛鏈球菌、腸球菌屬和片球菌屬，因此需要進行生化反應予以鑒別。,52,學習交流PPT,草綠色鏈球菌鑒定,草綠色鏈球菌是人體正常菌群一部分，通常不致病，目前借助于常規(guī)方法鑒定到種有一定困難，通常將其鑒定到群。 根據16SrRNA可分為溫和鏈球菌群（mitis group）、米勒鏈球菌群（miller group）、變異鏈球菌群（mutans group）和唾液鏈球菌群（salivrius group）,53,學習交流PPT,商品化鑒定系統(tǒng),API-Strep系統(tǒng) ID32 str

25、ep系統(tǒng) Microscan系統(tǒng),54,學習交流PPT,抗鏈球菌溶素O抗體檢測,常用于風濕熱的輔助診斷 活動性風濕熱患者抗體效價一般超過400單位,55,學習交流PPT,腸球菌屬Enterococus,廣泛分布在自然界 常棲居在人、動物的腸道和女性生殖道 為醫(yī)院感染的重要病原菌,56,學習交流PPT,一、分類,腸球菌屬原歸類于鏈球菌屬 于1984年將其命名為腸球菌屬 至今，經由16SrRNA序列分析和核酸雜交 等，證實腸球菌可分為5群19個種 臨床標本分離的腸球菌多屬于第2群,57,學習交流PPT,二、臨床意義,腸球菌所致感染最多見于泌尿道感染,是重要的醫(yī)院感染病原菌 多與泌尿道器械操作、留置

26、導尿、尿路結構異常有關 腹腔和盆腔創(chuàng)傷時也是常見的感染菌 腸球菌引起的菌血癥常發(fā)生于有嚴重基礎疾患的老年人、長期住院接受抗菌藥物治療的免疫功能低下患者,58,學習交流PPT,二、臨床意義,近年來不斷上升的腸球菌感染率和廣泛使用 抗菌藥物出現的耐藥性有關 在臨床診斷前應認真評估分離菌的臨床意義 臨床標本中分離的80%90%是糞腸球菌 屎腸球菌約占5%10% 很少分離到腸球菌屬的其它種,59,學習交流PPT,三、生物學特性,形態(tài)： 腸球菌為革蘭陽性球菌、呈單個，成對或短鏈狀排列，瓊脂平板上生長的細菌呈球桿狀 液體培養(yǎng)基中呈卵圓形、鏈狀排列 無芽胞和莢膜，個別菌種有稀疏鞭毛,60,學習交流PPT,培

27、養(yǎng)特性,兼性厭氧，最適生長溫度35，10和45均能生長 營養(yǎng)要求不高。部分糞腸球菌菌株在含有兔血、馬血或人血的平板上出現溶血，而在羊血平板上不出現。其它菌種出現溶血或不溶血 所有菌株在含6.5%NaCl肉湯中能生長,61,學習交流PPT,生物學特性,在40%膽汁培養(yǎng)基中能分解七葉苷，多數菌種具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-萘基酰胺（PYR） 不含細胞色素氧化酶和觸酶 但糞腸球菌培養(yǎng)于含血的培養(yǎng)基中，可合成細胞色素或觸酶或兩者皆有，因而某些菌株表現為觸酶弱陽性 含鏈球菌D群抗原。G+Cmol%為3745,62,學習交流PPT,抵抗力,對頭孢菌素類、林可霉素類和磺胺類抗菌藥物耐藥 近年來獲

28、得性耐藥菌株不斷增多，表現為對氨基糖苷類耐藥和對萬古霉素耐藥。對萬古霉素的耐藥是由van A、van B和van C等基因介導,63,學習交流PPT,四、微生物檢驗,（一）檢驗程序,64,學習交流PPT,（二）標本采集,常規(guī)方法采集血、尿、創(chuàng)傷標本和其他拭子， 標本于1小時內接種完畢。,（三）標本直接檢查,涂片染色顯微鏡檢查可見單個、成雙或短鏈 排列卵圓形革蘭陽性球菌,65,學習交流PPT,（四）分離培養(yǎng)與鑒定,標本接種于含血瓊脂平板 若送檢標本中含革蘭陰性桿菌可選用選擇鑒別培養(yǎng)基，常用的有： 疊氮膽汁七葉苷瓊脂，可抑制革蘭陰性菌生長，而腸球菌分解七葉苷產生黑色菌落； 哥倫比亞多粘菌素-萘啶酸

29、瓊脂(CAN)和苯乙基乙醇瓊脂(PEA) 由于耐萬古霉素腸球菌發(fā)生率增高，為早期檢出耐 藥菌株，可使用含萬古霉素瓊脂篩選方法（詳見第 三十五章）,66,學習交流PPT,細菌鑒定方法如下,菌屬的鑒定 腸球菌屬細菌革蘭染色陽性，卵圓形，單個、成雙或短鏈排列。 觸酶陰性、膽汁七葉苷和PYR陽性、6.5% NaCl肉湯中能生長,67,學習交流PPT,腸球菌屬間的菌種鑒定,根據對甘露醇，山梨醇和精氨酸的代謝分五群 第一群:分解甘露醇、山梨糖產酸，不水解精氨酸 第二群:分解甘露醇和水解精氨酸 第三群:水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨糖 第四群:不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸 第五群:分解甘露醇不

30、分解山梨糖，不水解精氨酸,68,學習交流PPT,觸酶陽性的其它革蘭陽性球菌,微球菌屬（Micrococcus） 巨球菌屬(Macrococcus) 動球菌屬(Planococcus) 考氏考克氏菌(Kocuria kristinae) 觸酶微弱陽性的差異球菌屬(Alloiococcus)和粘性羅氏菌(Rothia mucilaginosa) 這些菌屬細菌在人體和動物體表廣泛存在，常在臨 床標本中分離到，一般認為是非致病菌。 偶爾在某些免疫抑制或缺陷的患者中引起機會感染 如心內膜炎、腦膜炎、肺炎等。,69,學習交流PPT,微球菌屬,以往曾將葡萄球菌屬、微球菌屬、口腔球菌屬和動球菌屬共同歸類為微球菌科。 細菌為革蘭陽性，直徑為11.8m的球菌，常成對、四聯或呈不規(guī)則排列 在大多數臨床標本中由于形態(tài)與葡萄球菌屬相似，觸酶陽性而混淆。本菌屬氧化酶陽性，對桿菌肽敏感、呋喃唑酮耐藥可以與葡萄球菌屬區(qū)別。,70,學習交流PPT,差異球菌屬,是需氧的革蘭陽性球菌，成對或簇排列。觸酶試驗弱陽性，氧化酶試驗陰性，常在中耳炎患者的標本中分離到。,71