羅氏cobash232檢測(cè)原理-Wu.ppt

1、,cobas h 232 檢測(cè)原理及操作培訓(xùn),上海亦揚(yáng)醫(yī)療器械有限公司 羅氏血?dú)夥治鰞x,Company Logo,Contents,POC,POCT特點(diǎn),商業(yè)實(shí)驗(yàn)室,醫(yī)生診所,社區(qū)診所,家庭,檢驗(yàn)科,監(jiān)護(hù)室,急診,手術(shù)室,中心實(shí)驗(yàn)室,醫(yī)院,醫(yī)生 / 社區(qū) 診所,家庭,快速診斷,有效診斷,便捷診斷,“在中心實(shí)驗(yàn)室以外進(jìn)行的檢驗(yàn),時(shí)間：即時(shí) 地點(diǎn)：在患者床邊 人物：醫(yī)護(hù)人員，患者本人及家屬等,4,實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)向“兩極”發(fā)展的趨勢(shì)中心實(shí)驗(yàn)室-高大上,高分析速度 高自動(dòng)化程度 高智能化水平 高精密度分析結(jié)果 大型化 上檔次,實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)向“兩極”發(fā)展的趨勢(shì)POCT小快簡(jiǎn),儀器小型便捷 非專業(yè)人員簡(jiǎn)單操作 即時(shí)

2、報(bào)告 結(jié)果穩(wěn)定具有可比性 成本低 采血量少,危重疾病需要快速的測(cè)試結(jié)果，以便減少治療的延誤,醫(yī)生期待時(shí)間,檢驗(yàn)人員估計(jì)時(shí)間,實(shí)際樣本檢測(cè)時(shí)間,6,ESC指南建議：POCT可縮短TAT，60min內(nèi)中心實(shí)驗(yàn)室無法獲得檢測(cè)結(jié)果的，建議使用POCT。,NACB指南指出：樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間需要快速，建議cardiac TAT 60 min，最好是30min或更少。,TAT (Turn Around Time) 的現(xiàn)狀,7,POCT帶來了哪些優(yōu)點(diǎn)？,POCT的檢測(cè)技術(shù),POCT的基本原理是：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)試劑浸潤(rùn)于試紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的干燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)基質(zhì)上。成為各種形式的

3、診斷試劑條；或把傳統(tǒng)分析儀器微型化，操作方法簡(jiǎn)單化，使之成為便攜式和手掌式的設(shè)備，或?qū)⑸鲜鰞煞N整合為統(tǒng)一的系統(tǒng)。 POCT的主要技術(shù)包括： 簡(jiǎn)單顯色（干化學(xué)法）技術(shù) 多層涂膜（干化學(xué)法）技術(shù) 免疫金標(biāo)記技術(shù) 免疫熒光技術(shù) 生物傳感器技術(shù) 生物芯片技術(shù) 紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù) 其他技術(shù),Company Logo,Contents,常用的免疫膠體金檢測(cè)技術(shù),（1）免疫膠體金光鏡染色法 細(xì)胞懸液涂片或組織切片，可用膠體金標(biāo)記的抗體進(jìn)行染色，也可在膠體金標(biāo)記的基礎(chǔ)上，以銀顯影液增強(qiáng)標(biāo)記，使被還原的銀原子沉積于已標(biāo)記的金顆粒表面，可明顯增強(qiáng)膠體金標(biāo)記的敏感性。免疫膠體金電鏡染色法可用膠體金標(biāo)記的抗體或

4、抗抗體與負(fù)染病毒樣本或組織超薄切片結(jié)合，然后進(jìn)行負(fù)染。可用于病毒形態(tài)的觀察和病毒檢測(cè)。 （2）斑點(diǎn)免疫金滲濾法 應(yīng)用微孔濾膜（如膜）作載體，先將抗原或抗體點(diǎn)于膜上，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標(biāo)記的抗體檢測(cè)相應(yīng)的抗原或抗體。 （3）膠體金免疫層析法 將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng)，再移動(dòng)至固定的抗原或抗體的區(qū)域時(shí)，待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生特異性結(jié)合而被截留，聚集在檢測(cè)帶上，可通過肉眼觀察或者儀器光源檢測(cè)得到顯色結(jié)果，從而得到

5、待測(cè)物的檢測(cè)值。,膠體金免疫層析法相關(guān)概念,抗原抗體反應(yīng)： 每個(gè)抗體結(jié)合特定抗原,雙抗體夾心法,膠體金標(biāo)記物,cobas h 232檢測(cè)原理以NT-proBNP為例,加樣,免疫膠體金抗體,識(shí)別NT-proBNP的抗體,含有NT-proBNP的血樣,包被好抗體反應(yīng)膜層,cobas h 232檢測(cè)原理以NT-proBNP為例,反應(yīng),免疫膠體金抗體,識(shí)別NT-proBNP的抗體,雙抗體夾心復(fù)合物,玻璃纖維膜層,雙抗體夾心復(fù)合物隨血漿過濾到下一層,cobas h 232檢測(cè)原理以NT-proBNP為例,檢測(cè),醋酸纖維膜層,雙抗體夾心的抗原抗體復(fù)合物 與信號(hào)線結(jié)合 信號(hào)線顯色,免疫膠體金抗體 結(jié)合質(zhì)控線

6、 質(zhì)控線顯色,沒有結(jié)合的抗體 與信號(hào)線結(jié)合 信號(hào)線不顯色,cobas h 232檢測(cè)原理影響抗原抗體反應(yīng)的因素,外部因素 溫度：18C 至32C室溫下 濕度：10%至85%的相對(duì)濕度 環(huán)境：是否處于水平、無震的平面,內(nèi)部因素 測(cè)試條性能：芯片、條碼和保存條件 保存2-8/室溫下1周/撕開15min 機(jī)內(nèi)反應(yīng)溫度：一般37 機(jī)內(nèi)檢測(cè)光源 反應(yīng)時(shí)間,cobas h 232檢測(cè)原理操作步驟,Company Logo,Contents,心機(jī)標(biāo)志物市場(chǎng)分布,自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備采用的技術(shù),免疫檢測(cè)原理未變，依舊利用抗原與抗體的特異性結(jié)合；改變的只是標(biāo)記物的種類以及相應(yīng)的檢測(cè)方法和手段。,電化學(xué)發(fā)光,1960S

7、,197080S,2000S,放射免疫,酶聯(lián)免疫 熒光免疫 化學(xué)發(fā)光,cobas e 411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀,架式,盤式,電化學(xué)發(fā)光技術(shù),電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)原理,酶聯(lián)免疫熒光標(biāo)記技術(shù),梅里埃 Vidas,化學(xué)發(fā)光分析技術(shù),雙抗體夾心法,Beckman Access 2,時(shí)間分辨熒光法,AQT90 FLEX快速免疫分析儀采用時(shí)間分辨熒光法檢測(cè)捕捉抗體、銪螯合物標(biāo)記的熒光示蹤劑抗體及有關(guān)抗原間形成的三明治復(fù)合體 AQT90 FLEX快速免疫分析儀光電倍增管可計(jì)算銪螯合物射出的光量子（光粒子）的數(shù)量。血液中抗原的濃度與標(biāo)記示蹤抗體產(chǎn)生的熒光水平成正比。,雷杜 AQT90,免疫熒光法,加樣孔 濾

8、膜 反應(yīng)池 第二次包被 廢液池 （第一次 抗原抗體包被） （熒光信號(hào)產(chǎn)生 ）,Biosite Triage 診斷儀測(cè)試板條原理平面圖,免疫熒光法,Response 瑞普,膠體金法/雙向側(cè)流免疫法,深圳瑞萊,免疫膠體金法,美德聲 德帕斯,深圳 微點(diǎn),南京 普朗,廣州 萬孚,免疫熒光法,Thank you for your attention,Roche Diagnostics (Shanghai) Limited Shanghai 200031 China,This presentation is our intellectual property. Without our written consent, it shall neither be copied in