選修一 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用.ppt

1、酵母菌,醋酸菌,毛霉,乳酸菌,兼性厭氧,需氧,需氧,厭氧,1825,3035,1518,室溫,以上微生物屬于真核生物的是？ 毛霉、酵母菌,幾種傳統(tǒng)發(fā)酵的比較,以上微生物細(xì)胞中含有核糖體的是？ 毛霉、酵母菌、醋酸菌、乳酸菌,異養(yǎng) 異養(yǎng) 異養(yǎng) 異養(yǎng),幾種傳統(tǒng)發(fā)酵易考知識點(diǎn),1、傳統(tǒng)果酒制作的酵母菌來源于？ 葡萄皮上的野生型酵母菌,2、發(fā)酸的酒表面形成的菌膜是由哪種菌形成？ 醋酸菌,3、在缺乏糖源時，醋酸菌能利用何種物質(zhì)？ 乙醇， 能將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?4、如何檢測是否產(chǎn)生酒精？ 酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈灰綠色,幾種傳統(tǒng)發(fā)酵易考知識點(diǎn),5、參與腐乳制作的只有毛霉？ 多種微生物，

2、主要是毛霉,6、加鹽腌制腐乳的目的是？ 析出豆腐中水分，使其成形 抑制微生物的生長，避免豆腐腐敗,7、腌制腐乳的鹵湯中酒精濃度為多少？原因？ 12%左右 酒精濃度過高，腐乳成熟時間延長 酒精濃度過低，腐乳容易腐敗變質(zhì),幾種傳統(tǒng)發(fā)酵易考知識點(diǎn),8、制作泡菜時，對鹽水的要求是？ 清水與鹽的質(zhì)量比是4：1 煮沸冷卻,9、測定亞硝酸鹽含量的方法 比色法在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合，形成玫瑰紅色染料。,（2011年江蘇卷）下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述，正確的是 A腐乳制作所需要的適宜溫度最高 B果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵 C使用的菌

3、種分別是酵母菌、醋酸菌、乳 酸菌 D使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、 DNA和RNA,D,低,毛霉,醋酸菌最高,微生物的實驗室培養(yǎng),培養(yǎng)基：,人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。,1、碳源：,CO2、糖類、牛肉膏,2、氮源：,NH3、硝酸鹽、 牛肉膏、蛋白胨、尿素,4、特別條件：,3、水、無機(jī)鹽,凡是碳源都能提供能量？ 不是，如CO2,無機(jī)氮源也能提供能量？ 可以，如NH3,同一種物質(zhì)不可能既為碳源又為氮源？ 可能，如牛肉膏，可提供氮源和碳源,培養(yǎng)基的分類,1、物理性質(zhì)： 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基,（加入凝固劑瓊脂）,若想形成菌落，則應(yīng)該使用？,2、功能用途： 通用

4、培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基,碳源,氮源,（唯一）,唯一碳源,1.下列說法正確的是( ) A.銨鹽、硝酸鹽可以作為自養(yǎng)微生物的氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的無機(jī)物僅提供無機(jī)鹽 D.無機(jī)氮源不能提供能量,CO2,CO2,NH3,A,無菌技術(shù)：,防止一切外來雜菌的進(jìn)入，并保持已滅菌物品及無菌區(qū)域不再被污染。,1、對實驗操作的空間，操作者的衣著和 手進(jìn)行清潔和消毒；,2、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；,3、為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行； 4、實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。,制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,計算

5、 稱量 溶化 滅菌 倒平板,1、操作為何在酒精燈火焰附近進(jìn)行？ 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,2、為何待平板冷卻后倒過來放置？ 防止皿蓋上的水珠落在培養(yǎng)基上，造成污染,2.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中，錯誤的是( )雙選 A.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B.牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙 C.待培養(yǎng)基冷卻至室溫時，進(jìn)行倒平板 D.待平板冷卻凝固約5 min10 min后，將平板倒過來放置,AC,50左右,滅菌、倒平板,純化大腸桿菌,平板劃線法,純化大腸桿菌,稀釋涂布平板法,系列稀釋,涂布平板,還可用來進(jìn)行活菌計數(shù),有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成

6、的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐栴}： （1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。 （2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和 。,2011全國高考卷,原油,選擇,平板劃線法,稀釋涂布平板法,（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力 。 （4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。,強(qiáng),干熱滅菌,高壓蒸汽滅菌,火焰,2.用平

7、板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時( ) 可以用相同的培養(yǎng)基 都需要使用接種針進(jìn)行接種 都需要在火焰旁進(jìn)行接種 都可以用來計數(shù)活菌 A. B. C. D.,C,碳源,氮源,（唯一）,選擇培養(yǎng)基,無機(jī)鹽,凝固劑,系列稀釋,涂布平板,稀釋涂布平板法,鑒別培養(yǎng)基,pH升高 指示劑（酚紅）將變紅,纖維素酶一種復(fù)合酶,唯一碳源,酵母浸膏（酵母膏）是采用新鮮酵母為原料，經(jīng)酵母酶解自溶、分離過濾、濃縮而得到的。酵母浸膏富含蛋白質(zhì)、氨基酸類、肽類、核苷酸、B族維生素、微量元素。主要作用是補(bǔ)充氮源和提供微生物生長的各種維生素及氨基酸及生長因子。,即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。 分為酶水解酪素和酸水解酪素,

8、選擇培養(yǎng),液體培養(yǎng)基,鑒別培養(yǎng)基,+ 剛果紅,剛果紅染色法,3.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是( ) A.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 B.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑 C.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑 D.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑 【解析】選A。,5.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題： (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_ _和_。 (2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。,氮

9、源,碳源,無機(jī)鹽 水,高壓蒸汽滅菌,(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實驗。 (4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。 (5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為_。,選擇培養(yǎng)基,鹽,恒溫箱,無菌水,多,大,【例證2】下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)的實驗，完成下列問題： 實驗原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將

10、用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離。 材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有9mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有90mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。,(1)方法步驟： 倒平板：分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應(yīng)在_ _操作。 制備土壤稀釋液：取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1mL，轉(zhuǎn)至盛有9mL的無菌水的試管中，依次稀釋到107稀釋度。,酒精燈火焰旁,涂布：按照由107103稀釋度的順序分別吸取0

11、.1mL進(jìn)行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布_個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布_個。 培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在28 30 下培養(yǎng)3d4d。 細(xì)菌的計數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計數(shù)。如果測試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數(shù)是_。(稀釋度是105),3,1,30-300,3.(2011惠州)從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從_環(huán)境中采集。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇_的培