實(shí)驗(yàn)四甲醛滴定法測(cè)定氨基氮含量.ppt

1、實(shí)驗(yàn)八 甲醛滴定法測(cè)定氨基氮含量,一、目的,二、原理,水溶液中的氨基酸為兩性離子，因而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基。用甲醛處理氨基酸,甲醛與氨基結(jié)合,可形成羥甲基衍生物，使NH3+上的H+游離出來，這樣就可用堿滴定NH3+放出的H+，從而計(jì)算出氨基氮含量。,掌握甲醛滴定法測(cè)定氨基氮含量的原理和方法,如樣品中只含有某一種已知氨基酸，由甲醛滴定的結(jié)果即可算出氨基氮的含量。如果樣品是多種氨基酸的混合物（如蛋白質(zhì)水解物），則滴定結(jié)果不能作為氨基酸的定量依據(jù)。甲醛滴定法常用于測(cè)定蛋白質(zhì)的水解程度，隨著水解程度的增加，滴定值增加，當(dāng)水解完全后，滴定值保持恒定。,三、操作,1、 取3個(gè)100 mL的錐形瓶，

2、編號(hào)。于1、2號(hào)瓶?jī)?nèi)各加入0.1 mol/L的標(biāo)準(zhǔn)甘氨酸溶液2 mL和水5 mL，混勻。于3號(hào)瓶?jī)?nèi)加入水7mL 。然后向3個(gè)瓶中各加酚酞指示劑5滴，混勻后各加中性甲醛溶液2mL ，再混勻，分別用0.1 mol/L標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液滴定至溶液顯微紅色。重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)兩次，記錄每次每瓶消耗標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)。取平均值，計(jì)算甘氨酸氨基氮的回收率。,2、取未知濃度的甘氨酸溶液2mL，依上述方法進(jìn)行測(cè)定，平行做3份，取平均值。計(jì)算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克數(shù)。,四、結(jié)果計(jì)算,1.4008 為1mL 0.1mol/L標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液相當(dāng)于氮的毫克數(shù)。,1、回收率計(jì)算：,公式中: 實(shí)際測(cè)得量(mg

3、)為滴定1和2號(hào)瓶耗用的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液毫升數(shù)的平均值與3號(hào)瓶耗用的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液毫升數(shù)之差乘以1.4008。理論加入量(mg)等于2 乘以1.4008。,公式中： 為滴定待測(cè)液耗用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的平均毫升數(shù)。 為滴定對(duì)照液（3號(hào)瓶）耗用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的平均毫升數(shù)。,2、氨基氮計(jì)算：,1.4008 為1mL 0.1mol/L標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液相當(dāng)于氮的毫克數(shù)。,試劑和器材 1試劑： （1）0.1mol/L 標(biāo)準(zhǔn)甘氨酸溶液 準(zhǔn)確稱取750mg甘氨酸，溶解后定容至100mL。 （2）0.1mol/L 標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液 （3）0.5%酚酞指示劑 稱0.5g酚酞溶于100mL50%乙醇。 （4）中性甲醛溶液 甲醛溶液（3637，分析純） 50mL，加入0.5酚酞指示劑1 mL ，用0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液滴定至微紅，貯于密閉的玻璃瓶中。此試劑在臨用前配制。,試劑和器材 1試劑：