明膠藥用空心膠囊鉻檢測(cè)方法指導(dǎo)原則.ppt

1、明膠藥用空心膠囊中鉻檢測(cè)方法指導(dǎo)原則的解讀,孫會(huì)敏 中國(guó)食品藥品檢定研究院 2012.4.30 北京,目 錄,一、背景資料,4月15日，央視每周質(zhì)量報(bào)告欄目披露了國(guó)內(nèi)部分醫(yī)藥生產(chǎn)企業(yè)使用皮革明膠制膠囊，空心膠囊鉻超標(biāo)，在社會(huì)上反響巨大。工業(yè)明膠違法用于生產(chǎn)藥用明膠內(nèi)幕：,一、背景資料,一、背景資料,一、背景資料,4月15日晚國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)出緊急通知，要求對(duì)媒體報(bào)道的13個(gè)鉻超標(biāo)產(chǎn)品暫停銷售和使用。待監(jiān)督檢查和產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果明確后，合格產(chǎn)品繼續(xù)銷售，不合格產(chǎn)品依法處理。對(duì)違反規(guī)定生產(chǎn)銷售使用藥用空心膠囊的企業(yè)，將依法嚴(yán)肅查處。 4月16日中檢院組織召開關(guān)于對(duì)部分膠囊劑產(chǎn)品開展監(jiān)督抽驗(yàn)的緊急會(huì)議，成立

2、了以李云龍為組長(zhǎng)的應(yīng)急工作領(lǐng)導(dǎo)小組，成立了應(yīng)急檢驗(yàn)技術(shù)專家組，安排部署應(yīng)急檢驗(yàn)的具體事宜。,一、背景資料,發(fā)布明膠藥用空心膠囊鉻檢測(cè) 方法指導(dǎo)原則的通知 各省、自治區(qū)、直轄市(食品)藥品檢驗(yàn)所（院）： 根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局的要求，為指導(dǎo)明膠藥用空心膠囊中鉻檢測(cè)，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，我院依據(jù)中國(guó)藥典2010年版（二部）的標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合前期工作經(jīng)驗(yàn)，組織制定了明膠藥用空心膠囊鉻檢測(cè)方法指導(dǎo)原則（見附件），供各單位檢測(cè)時(shí)參考。 附件：明膠藥用空心膠囊鉻檢測(cè)方法指導(dǎo)原則 ( 二一二年四月二十一日,一、背景資料,一、背景資料,明膠空心膠囊（Vacant Capsules） 系由膠囊用明膠加輔料制成的空心硬膠

3、囊。由帽、體兩節(jié)膠囊殼組成，可容納各種藥粉、液體、半固體和藥片。可掩飾藥物的異味，易于吞服，具良好的崩解能力，較長(zhǎng)的保質(zhì)期等優(yōu)點(diǎn)。 規(guī)格尺寸：從大到小依次為000#、 00#、0#、1#、2#、3#、4#、5#等8種型號(hào)。,明膠藥用空心膠囊的成分,主要原材料：由明膠、甘油、水以及其它的藥用材料(TiO2)組成。明膠約占所有原輔料的90%以上）。 明膠是從動(dòng)物（牛、馬、豬、魚、驢）的皮、骨、腱、鱗等含膠原蛋白的組織，經(jīng)過(guò)酸、堿或酶水解處理以后降解生成的非均勻多肽混合物，由多種氨基酸所組成。 明膠成分：8590%蛋白質(zhì)，0.3%0.2%礦物質(zhì)，9%12%水分。 外觀近于無(wú)色或者呈淡黃色， 為透明、

4、無(wú)特殊臭味的固體， 分子量為1.75-45萬(wàn)。,明膠的分類和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)用途分為三類：藥用明膠，食用明膠和工業(yè)明膠(照相明膠)。 有關(guān)標(biāo)準(zhǔn) 膠囊用明膠： 中國(guó)藥典2010年版（二部）（Cr:2.0mg/kg） Gelatin ： EP7.0/BP2010 （Cr:10ppm） USP34（Cr:沒(méi)有規(guī)定） JP16（Cr:沒(méi)有規(guī)定） 藥用明膠： QB 2354-2005 （Cr:2.0mg/kg）(QB:輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)) 食品添加劑 明膠： GB 6783-94 （A級(jí)：1.0mg/kg，B級(jí)：2.0mg/kg） 食用明膠： QB /T 4087-2010 （Cr:2.0mg/kg） 工業(yè)明膠

5、： QB/T 1995-2005 （Cr:沒(méi)有規(guī)定。用途：1，火柴的起火劑；2，粘合劑；3，電解工業(yè)；4，紡織工業(yè)；5，感光耐蝕膜；）,二、檢測(cè)方法,中國(guó)藥典2010年版（二部）明膠空心膠囊項(xiàng)下鉻檢查項(xiàng)（P1204） 取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸510ml，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干，用2%硝酸轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液；另取鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0g的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時(shí)，分別精密量

6、取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻080ng的對(duì)照品溶液。 取供試品溶液與對(duì)照溶液，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（附錄IV D第一法），在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，計(jì)算，即得。含鉻不得過(guò)百萬(wàn)分之二（2mg/kg）。,二、檢測(cè)方法試驗(yàn)設(shè)備,儀器 原子吸收分光光度計(jì)（含石墨爐原子化裝置） 電子天平 微波消解儀 電熱板或其他趕酸設(shè)備，如：恒溫消解儀、趕酸器等。 試劑 硝酸（優(yōu)級(jí)純,國(guó)藥集團(tuán)） 鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000g/ml，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）,二、檢測(cè)方法試驗(yàn)步驟,檢驗(yàn)樣品： 膠囊劑（由明膠空心膠囊殼裝載的膠囊） 檢驗(yàn)項(xiàng)目： 明膠空心膠囊中的鉻 檢驗(yàn)所需檢品量的參考

7、值：,二、檢測(cè)方法試驗(yàn)步驟,空心膠囊殼的制備： 參考附錄I E 膠囊劑裝量差異項(xiàng)（附錄8） 具體制備方法：傾出膠囊劑的內(nèi)容物，膠囊殼用棉棒或小刷試凈（不得損壞囊殼），放置，待用。 膠囊劑中明膠空心膠囊殼中鉻的測(cè)定方法： 鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備：取鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000g/ml），用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0g的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液(不得超過(guò)一個(gè)月)。 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻080ng的對(duì)照品溶液。臨用時(shí)現(xiàn)配。,二、檢測(cè)方法試驗(yàn)步驟,膠囊劑中明膠空心膠囊殼中鉻測(cè)定方法(過(guò)夜) ： 供試品溶液的制備：精密稱取本品0.5g(膠囊整體稱重，如1

8、號(hào)膠囊約7個(gè)，精密稱定)，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸510ml，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波爐內(nèi)消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干(12mL)，用2%硝酸轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液，作為空白校正。 測(cè)定法：取供試品溶液與對(duì)照品溶液適量，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（中國(guó)藥典2010年版（二部）附錄IV D第一法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法），在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，計(jì)算，即得。,二、檢測(cè)方法試驗(yàn)步驟,膠囊劑中明膠空心膠囊殼中鉻新測(cè)定方法(不過(guò)夜)： 取樣品0.5g，置聚四氟乙

9、烯消解罐中，加硝酸5ml，10030分鐘使溶解，補(bǔ)加硝酸2ml，加水1mL，待冷卻至室溫，加0.5ml氫氟酸，進(jìn)行第一次微波消解（參考程序?yàn)?0min升溫至120，保持5min，10min升溫至140，保持15min）。冷卻放氣（無(wú)需完全打開消解罐蓋，只需扭松即可）。隨后進(jìn)行第二次消解（參考程序?yàn)?0min升溫至150，保持5min，10min升溫至185，保持15min）。冷卻后，加熱趕酸至12ml， 2%硝酸溶液至50ml，作為供試品溶液。同法制備試劑空白溶液；另取鉻單元標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0ug的鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，臨用時(shí)，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀

10、釋制成每1ml含鉻080ng的對(duì)照品溶液。 測(cè)定法：取供試品溶液與對(duì)照品溶液適量，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（中國(guó)藥典2010年版（二部）附錄IV D第一法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法），在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，計(jì)算，即得。,三、方法學(xué)驗(yàn)證,線性： 制備含鉻的對(duì)照品溶液至少5份，濃度依次遞增，最高濃度吸收值應(yīng)在0.8以下，保證具有較好的線性范圍，相關(guān)系數(shù)（r）0.99。檢測(cè)波長(zhǎng)： 357.9nm。 準(zhǔn)確性： 應(yīng)進(jìn)行整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的（包括前處理）方法學(xué)回收率驗(yàn)證，暫定回收率應(yīng)為80%-120%的范圍內(nèi)。每波次測(cè)定需進(jìn)行隨行回收試驗(yàn)，每10個(gè)樣品加一個(gè)質(zhì)控樣品。,2ppm,LOQ:0.5ppm,

11、三、方法學(xué)驗(yàn)證,重復(fù)性 取限度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液重復(fù)測(cè)定5次，吸收度（測(cè)定值）的變化范圍（RSD）不得過(guò)5%。 定量限（LOQ） 本方法定量限應(yīng)不低于0.5mg/kg。,四、注意事項(xiàng),消解： 樣品前處理是試驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟，既要保證消解完全，又要保證消解過(guò)程樣品中的鉻不損失，因此試驗(yàn)中建議加入10ml硝酸（優(yōu)級(jí)純），并需要浸泡過(guò)夜后一步消解/或不過(guò)夜二步消解。參考消解程序?yàn)椋?min由室溫升至120，維持3min；6min由120升至150，維持2min；6min由150升至180，維持20min。 為避免玻璃容器的干擾，試驗(yàn)中宜采用塑料容量瓶（聚丙烯材質(zhì)）定容。,四、注意事項(xiàng),不同原子吸收儀試驗(yàn)

12、參數(shù)可能不同，可根據(jù)原子吸收儀說(shuō)明書中推薦程序設(shè)定測(cè)定參數(shù)（國(guó)產(chǎn)參考石墨爐升溫程序如下：5s升溫至100，保持10s；5s升溫至500，保持10s；0s升溫至2100，保持3s；0s升溫至2200，保持2s） 含鈦白粉的膠囊殼（不透明膠囊）建議在微波消解時(shí)，樣品中除加硝酸外可另加0.5ml氫氟酸，其他同供試品溶液制備，注意空白校正和方法學(xué)驗(yàn)證。,四、注意事項(xiàng),實(shí)驗(yàn)用水：應(yīng)采用純化水，儲(chǔ)藏水的容器宜用聚乙烯塑料材料制成，不宜選用玻璃容器長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 試劑應(yīng)采用優(yōu)級(jí)純及以上級(jí)別試劑。 試驗(yàn)中所用容器及器皿均需在每次使用前用鹽酸溶液（濃鹽酸：水/1:1）浸泡1h，再用硝酸溶液（濃硝酸：水/1:1）浸泡

13、1h，再用純化水沖洗干凈后使用。微波消解容器應(yīng)采用儀器清洗程序清洗，不得采用鉻酸清洗液洗滌容器。,四、注意事項(xiàng),可供選擇的鉻元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000g/mL）由國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心提供（電話傳真；也可以由中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院提供（電話4703)。鉻對(duì)照貯備溶液應(yīng)密封，冷暗處保存。 結(jié)果判斷：標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定不得過(guò)百萬(wàn)分之二(2mg/kg)。由于是微量測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的偏差會(huì)較大，一般兩份樣品的相對(duì)偏差10%，取平均值即可（低濃度尤其明顯）。,四、注意事項(xiàng),樣品檢測(cè)應(yīng)嚴(yán)格遵守中國(guó)藥典2010年版（二部）“明膠空心

14、膠囊”鉻項(xiàng)下方法試驗(yàn)，如因試驗(yàn)需要改變樣品前處理方法及檢測(cè)波長(zhǎng)，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室有關(guān)質(zhì)量管理程序(偏離)進(jìn)行。 若試劑空白溶液測(cè)定值過(guò)高（宜不超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點(diǎn)吸光度值的50%），應(yīng)換用空白干擾小的溶液重新試驗(yàn)。,四、注意事項(xiàng),注意試驗(yàn)所需的所有儀器均應(yīng)在計(jì)量檢定合格效期內(nèi)。 若供試品溶液濃度過(guò)高，可稀釋到標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。,聯(lián)系方式,對(duì)本指導(dǎo)原則如有不清楚的地方，請(qǐng)聯(lián)系 中檢院包材所： 孫會(huì)敏（電話13910586702） 趙霞（電話15901363556） 楊銳（電話15010941516） 中檢院中藥所 金紅宇（電話13611388528） 中檢院化藥所麻醉藥品室 陳華（電話13520311576）,聯(lián)系方式,中檢院器械所 馮曉明（電話13366772637） 王?。娫挘?1