2019年高中生物課時(shí)跟蹤檢測(cè)五土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù) 人教版選修1 含解析.doc

1、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)一、選擇題1下列關(guān)于“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是()A土壤取樣時(shí)應(yīng)選取距地表約38 cm的土壤層B測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105和106倍的稀釋液C土壤中能合成脲酶的細(xì)菌能分解尿素D向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入剛果紅溶液可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌解析：選D鑒定分解尿素的細(xì)菌時(shí)需向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。2分離土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí)，對(duì)培養(yǎng)基的要求是()加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽A BC D解析：選C土壤中分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，將尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自

2、身有機(jī)物。培養(yǎng)基中尿素作為唯一氮源，分解尿素的細(xì)菌能生長(zhǎng)，其他微生物不能生長(zhǎng)；分離微生物要用固體培養(yǎng)基，需要加瓊脂；土壤中分解尿素的細(xì)菌屬于異養(yǎng)微生物，需要加葡萄糖作為碳源。3下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL分別涂布于各組平板上C將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448 hD確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析：選D采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在30300的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。4下列操作需

3、要在火焰旁進(jìn)行的是()土壤取樣稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板微生物的培養(yǎng)A BC D解析：選D實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作，除實(shí)驗(yàn)空間必須消毒外，每個(gè)操作步驟都必須在無(wú)菌區(qū)進(jìn)行。土壤的稱取、溶液的稀釋、涂布平板都需要在酒精燈火焰旁的無(wú)菌區(qū)(或接種箱內(nèi)的酒精燈火焰旁)完成，以防止雜菌污染。5通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出的是()A大腸桿菌 B霉菌C放線菌 D固氮細(xì)菌解析：選A固氮微生物的生長(zhǎng)

4、不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)；加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)細(xì)菌和放線菌，則可收獲霉菌；加入酚的培養(yǎng)基使細(xì)菌和霉菌不能正常生長(zhǎng)，而放線菌卻能利用酚作為原料合成自身產(chǎn)物。6在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，一同學(xué)從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只篩選出大約50個(gè)菌落。該同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有()土樣不同培養(yǎng)基被污染操作失誤沒(méi)有設(shè)置對(duì)照A BC D解析：選A實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同，最可能的原因是土樣不同，其次是操作失誤或培養(yǎng)基被污染，而與是否設(shè)置對(duì)照沒(méi)有關(guān)系。7三個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入10 mL不同的培養(yǎng)基，然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36 h后，

5、計(jì)算菌落數(shù)，結(jié)果如下表。下列相關(guān)敘述正確的是()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)瓊脂、葡萄糖35瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)因子250瓊脂、生長(zhǎng)因子0A該實(shí)驗(yàn)采用的是液體培養(yǎng)基B該實(shí)驗(yàn)采用平板劃線法接種C和對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)不需要生長(zhǎng)因子D和對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要葡萄糖解析：選D該培養(yǎng)基加入了瓊脂，故為固體培養(yǎng)基；對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)宜采用稀釋涂布平板法接種，而不是平板劃線法接種；與中有葡萄糖、生長(zhǎng)因子兩種變量，不能得出相應(yīng)結(jié)論；和對(duì)照，自變量是有無(wú)葡萄糖，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要葡萄糖。8苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，

6、研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源D使用平板劃線法可以在上獲得單菌落解析：選C用苯酚作為選擇培養(yǎng)基中的碳源，也是微生物的能源物質(zhì)，會(huì)影響其他微生物生長(zhǎng)。測(cè)定培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)目常采用稀釋涂布平板法。若為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則中應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作為唯一碳源。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在上獲得單菌落。9關(guān)于土壤中細(xì)菌的分離，下列正確的操作步驟是()土壤取樣稱取10 g

7、土壤，加入盛有90 mL無(wú)菌水的錐形瓶中吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107倍的稀釋液A BC D解析：選C在分離土壤中某種細(xì)菌時(shí)，應(yīng)先選取土樣(10 g)，然后加無(wú)菌水獲得土壤浸出液，并進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)，并分離和計(jì)數(shù)。10下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A可采用干熱滅菌法對(duì)微生物培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計(jì)數(shù)法C分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選A培養(yǎng)基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法，而干熱滅菌法

8、通常適用于玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品；分離能分解尿素的細(xì)菌，用的選擇培養(yǎng)基里尿素是唯一的氮源，這樣才能分離出分解尿素的細(xì)菌。二、非選擇題11多氯聯(lián)苯是一種對(duì)人體有很大危害的有機(jī)物，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除。研究發(fā)現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用。為消除這種污染，科研人員計(jì)劃從受污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株。(1)篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品_，接種到以_為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_。 (2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行_，一般操作方法有兩種，如圖是_法。(3)若要測(cè)定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)，可在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)。若用_法統(tǒng)計(jì)菌

9、落數(shù)，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是_。(4)將1 mL酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58，據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為_(kāi)。解析：(1)依題意可知：篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋(溶解)接種到以多氯聯(lián)苯為唯一碳源的培養(yǎng)基上。在該培養(yǎng)基中，只有能降解多氯聯(lián)苯的微生物才能生長(zhǎng)，而其他微生物則不能生長(zhǎng)，所以從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行純化。圖中采用的操作方法是平板劃線法。(3)若要測(cè)定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)

10、，既可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可選用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，其目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功(或倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌)。(4)將1 mL酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58，據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為(565758)30.11001035.7107個(gè)/L。答案：(1)稀釋(溶解)多氯聯(lián)苯選擇培養(yǎng)基(2)純化平板劃線(3)稀釋涂布平板檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功(倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌)(4)5.

11、7107個(gè)/L12蛋白酶在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。某同學(xué)為篩選產(chǎn)蛋白酶的高產(chǎn)菌株，做了如下實(shí)驗(yàn)步驟(配制了下列培養(yǎng)基，在適宜條件下培養(yǎng))：步驟取樣培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果土壤樣品葡萄糖、(NH4)2SO4、K2HPO43H2O、KH2PO4、NaCl、CaCl2、MgSO47H2O，加水定容培養(yǎng)液a1mL培養(yǎng)液a同上菌落挑取單菌落細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)液b(1)為實(shí)現(xiàn)篩選目的，步驟所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除_并加入高濃度的_。(2)為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入_制成平板，采用的接種方法是_，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖A。(3)步驟應(yīng)挑取圖A中_處的菌落，本步驟的目的是_。

12、(4)圖B是該蛋白酶和其他酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在6070 條件下保溫一定時(shí)間，其作用是_。解析：(1)培養(yǎng)基中添加特定的成分以促進(jìn)需要的微生物生長(zhǎng)而抑制其他微生物生長(zhǎng)，用于進(jìn)行微生物篩選。根據(jù)題意，為篩選產(chǎn)蛋白酶的高產(chǎn)菌株，步驟所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除葡萄糖并加入高濃度的蛋白質(zhì)。(2)為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入瓊脂(凝固劑)制成平板，采用的接種方法是稀釋涂布平板法。(3)圖A中a處的菌落透明圈最大，故其菌種分解蛋白質(zhì)的能力最強(qiáng)，所以步驟應(yīng)挑取圖A中a處的

13、菌落，本步驟的目的是快速增加目的菌的種群數(shù)量(即擴(kuò)大培養(yǎng))。(4)圖B曲線表明，6070 條件下，蛋白酶的活性很高，而此時(shí)其他酶的活性很低，因此在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在6070 條件下保溫一定時(shí)間，可大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性。答案：(1)葡萄糖蛋白質(zhì)(2)瓊脂稀釋涂布平板法(3)a快速增加目的菌的種群數(shù)量(擴(kuò)大培養(yǎng))(4)大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性13(四川高考)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加_作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變

14、成_色。(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過(guò)程采取的接種方法是_，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較_。(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_(kāi)，突變基因表達(dá)的蛋白含_個(gè)氨基酸。解析：(1)脲酶能夠催化尿素水解釋放出氨和二氧化碳，因此選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源。挑取單菌落接種到加有酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，菌落周圍的氨增加，pH升高，酚紅指示劑將變紅。(2)該過(guò)程采取的接種方法為稀釋涂布平板法。利用稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30300的平板，因此平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落平均數(shù)為(156178191)3175個(gè)。每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為1750.110