醫(yī)學微生物學課件：第2篇-第34章 朊粒

1、第34章 朊粒,* 又稱朊病毒，是一種由宿主細胞編碼的、構象異常的具有自我復制能力的和傳染性。* 是人和動物傳染性海綿狀腦?。═SE）的病原體。,朊粒（prion）,Stanely B. Prusiner 1997諾貝爾生理學或醫(yī)學獎,Daniel C. Gajdusek 1976諾貝爾生理學或醫(yī)學獎,生物學性狀,朊粒的本質是一種異常折疊的朊蛋白（prion protein，PrP）。異常蛋白在電鏡下呈纖維狀或桿狀（直徑為10-20nm），稱為羊瘙癢病相關纖維（scrapie associated fibril， SAF）。,PrPC 與 PrPSC,正常宿主細胞具有編碼產生朊蛋白的基因，人類

2、PrP基因位于第20號染色體，小鼠PrP基因位于第2號染色體。 PrPC與PrPSc由同一染色體基因編碼，其氨基酸序列完全一致（253254個氨基酸），根本的差別在于它們空間構象上的差異。,正常情況下，細胞PrP基因編碼產生細胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC）， PrPC以螺旋為主，對蛋白酶K敏感，無致病性。,PrPC 與 PrPSC,螺旋,折疊,某些條件下，PrPC構型發(fā)生異常變化（以折疊為主）形成致病的PrPSc（羊瘙癢病朊蛋白，scrapie prion protein），對蛋白酶K有抗性，具有致病性與傳染性。,螺旋,PrPC轉變?yōu)镻rPSC的因素,外源

3、性朊粒的侵入，和體內PrPC結合催化轉變?yōu)镻rPSc，見于傳染性朊粒?。?體內PrP基因突變使PrPC結構失去穩(wěn)定性，自發(fā)轉變?yōu)镻rPSc，常見于遺傳性朊粒?。?自發(fā)性的PrPC異常折疊形成PrPSc，散發(fā)性朊粒病。,PrPC與PrPSc的主要區(qū)別,人類及動物prion病,* 動物TSE，如： 羊瘙癢?。╯crapie of sheep and goat） 牛海綿狀腦病（bovine spongiform encephalopathy, BSE）瘋牛病 * 人類TSE，如： 庫魯?。╧uru disease） 克雅病變種（variant CJD, v-CJD）,傳染性海綿狀腦病 （transm

4、issible spongiform encephalopathy, TSE）,Prion對理化因素有很強的抵抗力 * 抵抗蛋白酶K的消化作用； * 標準的高壓蒸氣滅菌（121.3,20 min）不能破壞Prion，需高壓蒸氣滅菌134、2 h，才能使其失去傳染性。 * 對輻射、紫外線、及常用消毒劑有很強的抗性。,抵 抗 力,* 傳染性（TSE）： 如庫魯病、克雅病變種 多種途徑傳播（消化道、血液、神經(jīng)及醫(yī)源性） * 遺傳性： 如家族性克雅病，與遺傳有關（PrP基因突變） * 散發(fā)性： 如散發(fā)性克雅病，傳播途徑尚不明,人類Prion病的傳播途徑,庫魯?。↘uru disease）,瘋牛病，與病

5、牛接觸或進食病牛肉是人v-CJD最主要的發(fā)病原因。,瘋牛?。╩ad cow disease）,v-CJD病人大腦組織切片：示海綿狀病變（左）和淀粉樣蛋白沉淀（右）,變異型克雅病（variant CJD，vCJD）,免疫組化法：標本先用蛋白酶K處理破壞PrPC，然后再用PrP單克隆抗體或多克隆抗體檢測對蛋白酶K有抗性的PrPSc。 Western blotting：目前國際上診斷Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K處理組織標本，電泳后轉印至硝酸纖維膜，再用PrP單克隆抗體或多克隆抗體檢測PrPSc。,病原學確診-檢測致病因子PrPSc,醫(yī)源性Prion病的預防 對污染物必須徹底滅菌：1mol/L NaOH處理1h，再高壓滅菌134，2 h。 BSE及vCJD的預防 禁止用牛羊等反芻動物的骨肉粉作為飼料添加劑喂養(yǎng)牛等反芻動物。對從有BSE的國家進口的?；蚺Ｖ破?，必須嚴格地進