病毒感染的檢查方法與防治原則

1、.第12章 病毒感染的檢查方法與防治原則學(xué)習(xí)要點一、病毒感染的檢查方法1.檢材的采集與送檢病毒分離標(biāo)本的采集原則是：早期取材；注意無菌操作；正確處理含菌標(biāo)本；低溫保存與盡快送檢。2.病毒的分離培養(yǎng)與鑒定（1）動物接種（2）雞胚接種（3）組織培養(yǎng)：原代細(xì)胞；二倍體細(xì)胞；傳代細(xì)胞系 （4）病毒增殖的指標(biāo)：細(xì)胞的變化；紅細(xì)胞吸附；干擾現(xiàn)象；培養(yǎng)基ph改變。3.病毒感染的血清學(xué)診斷(1) 中和試驗；(2) 補體結(jié)合試驗；(3) 血凝抑制試驗4.病毒感染的快速診斷(1) 形態(tài)學(xué)檢查法：光學(xué)顯微鏡檢查法；電鏡和免疫電鏡檢查(2) 免疫學(xué)檢查法：檢查病毒抗原；檢查病毒特異性igm(3) 檢測病毒核酸：核酸雜

2、交技術(shù)；pcr技術(shù) 二、病毒感染的防治原則1.病毒感染的預(yù)防精品.(1) 人工自動免疫 用于人工自動免疫的生物制品有：滅活疫苗；減毒活疫苗；基因工程疫苗；還有亞單位疫苗、多肽疫苗、核酸疫苗等。(2) 人工被動免疫 人工被動免疫常用的制劑有：動物免疫血清、人血清丙種球蛋白、轉(zhuǎn)移因子等。2. 抗病毒治療(1) 抑制病毒穿入與脫殼 金剛烷胺(2) 抑制病毒生物合成 核苷類化合物（皰疹凈、阿昔洛韋、阿糖腺苷、病毒唑、疊氮脫氧胸苷、拉米呋啶等）；病毒蛋白酶的抑制物（沙喹納偉、英迪納偉等）；ifn及其誘生劑等。(3) 免疫制劑 特異性免疫球蛋白、治療性疫苗等。(4) 抗病毒中草藥復(fù)習(xí)題一、名詞解釋1.二倍

3、體細(xì)胞2.細(xì)胞病變效應(yīng)3.紅細(xì)胞吸附試驗4.血凝抑制試驗5.減毒活疫苗6.滅活疫苗二、選擇題a1型題精品.1.從患者體內(nèi)分離病毒，采集標(biāo)本時的錯誤做法是：a.在發(fā)病早期采集 b.選取正確部位取材 c.標(biāo)本冷藏 d.標(biāo)本盡快送實驗室 e.疾病恢復(fù)期取材2.細(xì)胞病變效應(yīng)不包括：a.細(xì)胞圓縮、脫落 b.細(xì)胞融合 c.形成包涵體d.干擾現(xiàn)象 e.細(xì)胞裂解3.病毒凝集紅細(xì)胞(血凝試驗)的機制是：a.紅細(xì)胞表面抗原和血凝素抗體結(jié)合 b.紅細(xì)胞表面受體與病毒表面血凝素結(jié)合 c.紅細(xì)胞表面病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合 d.病毒與結(jié)合在紅細(xì)胞表面的抗體結(jié)合 e.紅細(xì)胞上的血凝素與病毒結(jié)合4.預(yù)防病毒病最有效的方法是使

4、用： a.抗毒素 b.抗病毒化學(xué)療劑 c.中草藥 d.疫苗 e.抗菌藥物5.以下描述正確的是a.人工被動免疫接種的物質(zhì)為抗原 b.人工被動免疫不能用于治療c.人工主動免疫接種的物質(zhì)為丙種球蛋白 d.人工主動免疫主要用于治療e.人工被動免疫主要用于緊急預(yù)防6.無環(huán)鳥苷(acv)有效控制單純皰疹病毒的作用機理是a.acv作用于敏感細(xì)胞表面受體 b.acv抑制病毒dna多聚酶和dna合成c.acv抑制病毒rna聚合酶 d.acv抑制敏感細(xì)胞dna復(fù)制精品.e.acv抑制病毒蛋白合成7.下列不適于培養(yǎng)動物病毒的方法是a.雞胚培養(yǎng) b.人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng) c.器官培養(yǎng)d.二倍體細(xì)胞培養(yǎng) e.動物培養(yǎng)8.

5、不能作為病毒在細(xì)胞內(nèi)生長繁殖指標(biāo)的一項是a.致細(xì)胞病變作用 b.紅細(xì)胞凝集 c.干擾現(xiàn)象 d.細(xì)胞培養(yǎng)液變混濁 e.細(xì)胞培養(yǎng)液ph改變9.有關(guān)病毒標(biāo)本的采集和運送,不正確的方法是a.發(fā)病早期或急性期采集標(biāo)本 b.發(fā)病晚期采集標(biāo)本 c.標(biāo)本運送應(yīng)放在帶有冰塊的保溫桶中 d.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送實驗室檢查e.運輸培養(yǎng)基中應(yīng)含有抗生素10.病毒的中和試驗是病毒血清學(xué)特異試驗,以下描述中不正確的是a.中和試驗是指中和抗體與病毒結(jié)合,使病毒失去感染性的一種試驗b.中和試驗需用活細(xì)胞或雞胚或動物來判斷結(jié)果 c.中和試驗是一種特異性較高的試驗d.中和抗體在體內(nèi)維持時間較短 e.中和試驗是用已知病毒抗原檢測中和

6、抗體12.抗病毒藥物不包括a.金剛烷胺 b.無環(huán)鳥苷 c.疊氮脫氧胸苷 d.干擾素 e.頭孢三嗪13.對治療病毒感染無效的藥物是精品.a.干擾素 b.抗生素 c.聚肌胞d.黃連、黃芩 e.三氮唑核苷b1型題（供13題備選答案）a.鼻咽漱液 b.糞便 c.血液 d.腦組織 e.尿1.分離狂犬病毒應(yīng)取：2.分離脊髓灰質(zhì)炎病毒最好?。?.分離流感病毒應(yīng)采集：（供46題備選答案）a.中和試驗 b.血凝抑制試驗 c.補體結(jié)合試驗 d.血凝試驗 e.多聚酶鏈反應(yīng)(pcr)4.鑒定流感病毒型別或亞型的試驗：5.測定病毒感染力的試驗：6.可體外擴增病毒核酸的試驗是：三、填空題精品.1.分離病毒最好采集發(fā)病 天

7、內(nèi)的標(biāo)本，采集標(biāo)本必須嚴(yán)格遵守 操作。2.含病毒標(biāo)本采集后必須 送檢，否則應(yīng)置 液中保存送檢。3.分離培養(yǎng)病毒的方法有 、 和 。4.常用于培養(yǎng)病毒的細(xì)胞類型有 、 和 。 5. 病毒血清學(xué)試驗通常取雙份血清檢查， 期抗體效價比 期增高 倍或以上時，有診斷意義。6.用化學(xué)方法裂解病毒，提取病毒 或 上與免疫有關(guān)的亞單位成分，除去核酸后制成的疫苗，稱為 。 四、問答題1.簡述目前最常用的培養(yǎng)病毒的方法。2.病毒檢測和細(xì)菌檢測有何區(qū)別?3.比較減毒活疫苗和滅活疫苗的異同。4.使用減毒活疫苗應(yīng)注意哪些事項？參考答案一、名詞解釋1.二倍體細(xì)胞：是目前常用培養(yǎng)病毒的細(xì)胞類型。其特點是在體外可連續(xù)傳40至

8、50代仍保持23對染色體，因此廣泛用于病毒的分離和疫苗的生產(chǎn)。2.細(xì)胞病變效應(yīng)：指病毒在體外細(xì)胞培養(yǎng)時引起的細(xì)胞損害。根據(jù)病毒種類和細(xì)胞種類的不同，細(xì)胞病變效應(yīng)可有不同表現(xiàn)，均可在顯微鏡下觀察到，作為病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)。 3.紅細(xì)胞吸附試驗：某些帶有血凝素的病毒在細(xì)胞內(nèi)生長不引起明顯的細(xì)胞病變效應(yīng)，但病毒在出芽釋放時可將其血凝素表達在宿主細(xì)胞膜上，使細(xì)胞可以吸附人和某些動物的紅細(xì)胞。精品.4.血凝抑制試驗：是一種特異性的抗體中和反應(yīng)，其基本原理是病毒的血凝素可凝集紅細(xì)胞，但若先用特異性抗體與病毒作用，再加入紅細(xì)胞，則不出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，稱為血凝抑制。該試驗常用于鑒定帶有血凝素的病毒的型別，或

9、是檢測此類病毒感染者體內(nèi)特異性抗體。5.減毒活疫苗：用人工誘導(dǎo)病毒發(fā)生毒力變異而獲得的毒力降低而抗原性不變的病毒株制備的疫苗，如脊髓灰質(zhì)炎疫苗。 6.滅活疫苗：用甲醛滅活病毒核酸但抗原性不變而制備的疫苗，如乙型腦炎疫苗和狂犬疫苗等。二、選擇題a1型題1.e 2.d 3.b 4.d 5.e 6.b 7.b 8.d 9.b 10.d 11.e 12.bb1型題 1.d 2.b 3.a 4.b 5.d 6.e三、填空題1.4；無菌；2.立即；50%甘油緩沖；3.組織培養(yǎng)；動物接種；雞胚培養(yǎng)；4.原代細(xì)胞；二倍體細(xì)胞株；傳代細(xì)胞系；5.恢復(fù)；急性；4；6.衣殼；包膜；亞單位疫苗四、問答題1.目前最常用

10、的培養(yǎng)病毒的方法是細(xì)胞培養(yǎng)。根據(jù)細(xì)胞來源和性狀的不同可分為三類：(1)原代細(xì)胞：新鮮組織經(jīng)胰酶消化后形成單細(xì)胞，加入培養(yǎng)液后37 培養(yǎng)，數(shù)日可貼壁長成單層細(xì)胞，即為原代細(xì)胞培養(yǎng)； (2)二倍體細(xì)胞：是目前最常用的細(xì)胞，該細(xì)胞可以在體外連續(xù)傳40至50代仍保持23對染色體的特點，故廣泛用于病毒的分離和疫苗的制備；(3)傳代細(xì)胞：是體外可以無限傳代的細(xì)胞，來源于腫瘤細(xì)胞或細(xì)胞株傳代過程中發(fā)生的變異株。精品.2.病毒檢測和細(xì)菌檢測的區(qū)別主要在于，病毒是非細(xì)胞型微生物，必須在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖，因此與細(xì)菌檢測主要在分離培養(yǎng)和形態(tài)觀察上有較大區(qū)別：（1）病毒的觀察需電子顯微鏡。光學(xué)顯微鏡只能觀察病毒在細(xì)胞

11、內(nèi)形成的包涵體；細(xì)菌則可以用光學(xué)顯微鏡觀察。（2）病毒的分離培養(yǎng)需用動物接種、雞胚培養(yǎng)和組織細(xì)胞培養(yǎng)，而細(xì)菌大多可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)。（3）培養(yǎng)物的簽定：病毒多通過觀察動物發(fā)病或細(xì)胞病變效應(yīng)等方法；細(xì)菌則主要通過生化反應(yīng)。3.相同點：兩種疫苗都用于人工主動免疫。不同點：(1)免疫效果：活疫苗免疫效果好，既可產(chǎn)生體液免疫，也可產(chǎn)生細(xì)胞免疫，免疫維持時間長。而滅活疫苗免疫效果較差，僅產(chǎn)生體液免疫而無細(xì)胞免疫，免疫維持時間短；(2)給藥途徑和次數(shù)：活疫苗可模擬自然感染方式或注射，免疫一次即可；滅活疫苗只能通過注射且需多次免疫；(3)保存：活疫苗需冷藏，不易保存；滅活疫苗不需冷藏，易保存；(4)缺點：活疫苗極偶然可能發(fā)生并發(fā)癥、持續(xù)感染、毒力回復(fù)突變等，免疫缺陷者和孕婦不能應(yīng)用；滅活疫苗的最大缺點是免疫力不強。4.使用減毒活疫苗應(yīng)注意：(1)冷藏：活疫苗對溫度很敏感，使用之前應(yīng)一直保持冷藏以保證疫苗活性。精品.(2)注意給藥時間、濃度和途徑：接種疫苗應(yīng)選擇適當(dāng)時間，如不同的疫苗選擇不同年齡分