銨態(tài)氮測量方法

1、銨態(tài)氮測量方法（2molL-1KCl浸提靛酚藍比色法）1）方法原理2molL-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.050.5molL-1的范圍內，吸光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測定。2）試劑（1）2molL-1KCl溶液稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學純）溶于水中，稀釋至1L。（2）苯酚溶液稱取苯酚（C6H5OH，化學純）10g和硝基鐵氰化鈉Na2Fe(CN)5NO2H2O100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4冰箱中保存。

2、（3）次氯酸鈉堿性溶液稱取氫氧化鈉（化學純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO47H2O, 化學純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO412H2O, 化學純）31.8g和 52.5gL-1次氯酸鈉(NaOCl，化學純，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4冰箱中保存。（4）掩蔽劑將400gL-1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O64H2O, 化學純）與100gL-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 molL-1氫氧化鈉0.5mL。（5）2.5gmL 1銨態(tài)氮（NH4+N）標準溶液稱取干燥的硫酸銨(NH4)2SO4，分析純0.4717g溶于

3、水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100gmL 1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋40倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）2.5gmL 1的標準溶液備用。3）儀器與設備：往復式振蕩機、分光光度計。4）分析步驟（1）浸提稱取相當于10.00g干土的新鮮土樣（若是風干土，過10號篩）準確到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化鉀溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機上振蕩1h。取出靜置，待土壤氯化鉀懸濁液澄清后，吸取一定量上層清液進行分析。如果不能在24h內進行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲存在冰箱中備用。（2）比色吸取土壤浸出液5mL(含NH4+N2g25g)放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶

4、液補充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波長處（或紅色濾光片）進行比色，讀取吸光度。（3）工作曲線 分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+N標準液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進行比色測定。5）結果計算土壤中NH4+（N）含量（mgkg-1）=式中：顯色液銨態(tài)氮的質量濃度(gmL 1)； V顯色液的體積(mL)； ts分取倍數； m樣品質量（g）。6）注釋注1. 顯色后在2

5、0左右放置1h,再加入掩蔽劑.過早加入會使顯色反應很慢,藍色偏弱;加入過晚,則生成的氫氧化物沉淀可能老化而不易溶解.硝態(tài)氮測定方法（雙波長紫外分光光度法）實驗原理：利用硝酸根離子在220 nm處有較強的紫外吸收這一特性,定量分析了土壤浸提液中的NO3 -. 溶解的有機物在210 nm和275 nm處均有吸收,而NO3 -在275 nm處沒有吸收,因此在275 nm波長處做另一測量,以校正硝酸鹽值. 最低檢出濃度0.004 mg/ kg ,測定上限為4.000 mg/ kg ,適合高濃度土樣浸提液的高倍稀釋.試劑：CaSO4 (分析純) , 量濃度為1 mol/ L的鹽酸(優(yōu)級純) 溶液, 質量

6、濃度為100g/ mL的硝酸鹽氮標準貯備液, 質量濃度為25g/ mL的硝酸鹽氮標準使用液.實驗方法標準曲線的繪制：分別取硝酸鹽氮標準使用液0.0 ,0.5 ,1.0 ,2.0 ,3.0 ,4.0g/ mL 置于50 mL 比色管中, 各管中加入1.0 mL 1 mol的鹽酸溶液,搖勻,用紫外分光光度計在210 nm和275 nm處,用1 cm石英比色皿測定吸光度. 以A= A210-kA275的計算方法求得校正吸光度. （系數k的確定方法分別準確移取10g/ mL 硝酸鹽氮使用液2.00mL 、土壤浸提液2.00 mL 置于各自的50 mL 比色管中, 用二次蒸餾水定容, 搖勻, 用1 cm

7、 的石英比色皿,以二次蒸餾水作參比, 在紫外- 可見分光光度計上測定吸光值。土壤樣品、硝酸鹽氮在210 nm 處有最大吸收, 在275 nm 處吸收較弱,選取210 nm、275 nm 為測量波長和參比波長測定土壤中硝態(tài)氮,根據A210 - KA275 =0 的公式進行計算, 求得K的平均值。土壤樣品測定：稱取10.00 g新鮮土樣,分別置于150 mL具塞三角瓶,在三角瓶內加0.2gCaSO4 ,加100 mL二次蒸餾水,于振蕩器上振蕩15 min ,放置30 min后,傾出上清液,用中速或慢速無氮定量濾紙過濾. 吸取濾液50.00 mL (視NO3 - N 的濃度而定) 置于50 mL比色管中, 用水準確稀釋至刻度, 加1.0 mL 1 mol的鹽酸溶液, 測量吸光度. 結果計算:c =c0*V總*D*1000/M*103式中: c 為NO3-