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最新2019年高二生物4月月考試卷有答案一、選擇題(共60分,1-20每題1.5分,21-35每題2分)1下列生物學(xué)實驗操作,能夠順利達(dá)到實驗?zāi)康牡氖茿在固體培養(yǎng)基上稀釋涂布大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落B在接種酵母菌的新鮮蘋果汁中通入無菌空氣制作果酒C土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選能分解尿素的細(xì)菌D同一菌液涂布的三個平板上菌落數(shù)分別是24、23、25,則其平均值是242下列有關(guān)果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的敘述,正確的是A果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作都是通過微生物無氧呼吸制成的B果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制成果醋C腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與,如毛霉D泡菜泡制的時間越長,亞硝酸鹽含量越高,可用比色法測定其含量3為獲得優(yōu)良的發(fā)酵食品,實驗室在三支試管中培養(yǎng)了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。下圖中甲、乙、丙三支試管的菌種及其發(fā)酵食品,對應(yīng)正確的是A甲試管:酵母菌果酒、乙試管:醋酸菌果醋、丙試管:乳酸菌泡菜B甲試管:醋酸菌泡菜、乙試管:酵母菌果酒、丙試管:乳酸菌果醋C甲試管:乳酸菌果酒、乙試管:酵母菌泡菜、丙試管:醋酸菌果醋D甲試管:醋酸菌果醋、乙試管:乳酸菌泡菜、丙試管:酵母菌果酒4下列有關(guān)果膠酶及與果膠酶實驗探究的有關(guān)敘述正確的是A探究果膠酶的用量時,pH、溫度不影響實驗結(jié)果B果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和葡萄糖異構(gòu)酶等C探究溫度對果膠酶活性影響時,溫度、果膠酶用量及反應(yīng)時間等都是無關(guān)變量D可以用相同時間內(nèi)過濾得到的果汁體積來確定果膠酶的用量5在果酒的制作過程中,下列說法正確的是:A為避免污染,在處理葡萄時應(yīng)先除去枝梗再沖洗B紅葡萄酒中的紅色是紅葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液產(chǎn)生的C果酒制作所需要的酵母菌屬于異養(yǎng)厭氧型微生物D果酒暴露在空氣中容易產(chǎn)生酸味主要是因為產(chǎn)生了乳酸6現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基,已知其配制時所加的成分如下表,用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物,它們適于分離的是()成分 KHSO4 MgSO4 NaCl CaSO4 CaCO3 葡萄糖 淀粉甲培養(yǎng)基含量 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% 0.5% 2%乙培養(yǎng)基含量 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% A甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌;乙培養(yǎng)基適于分離真菌B甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌C甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌D甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生細(xì)菌;乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌7以下有關(guān)生物技術(shù)實踐的敘述中,正確的是A用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數(shù)目時,測定值可能比實際值大B以尿素為唯一氮源并加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基可分離并鑒定土壤中分解尿素的細(xì)菌C制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序;計算、稱量、溶化、調(diào)pH、倒平板、滅菌D制備果酒過程中,每隔一段時間擰松瓶蓋,目的是向瓶中通氣保證發(fā)酵順利8.下列有關(guān)培養(yǎng)微生物的敘述正確的是A可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細(xì)菌的類型B菌落的大小、顏色、有無莢膜、隆起程度等特征都可作為肉眼鑒定菌種的依據(jù)C利用稀釋涂布平板法對細(xì)菌計數(shù)時需借助于顯微鏡D以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基可以用來選擇自生固氮微生物9下列關(guān)于果膠酶的敘述不正確的是A. 果膠酶指分解果膠的一類酶 B. 植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌均能產(chǎn)生果膠酶C果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸 D組成果膠酶的基本單位是氨基酸或核苷酸10在以如圖所示酶的固定方法模式圖中,屬于化學(xué)結(jié)合法的是()A B C D 11下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作,不正確的是 A是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法B洗脫過程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最后流出,小分子因進(jìn)入凝膠內(nèi)部先流出C凝膠內(nèi)部為多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小有相應(yīng)關(guān)系D一般情況下,凝膠對要分離的物質(zhì)沒有吸附作用,所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來12.電泳技術(shù)可分離氨基酸和核苷酸等有機(jī)物,右圖是把含有31個氨基酸的多肽進(jìn)行水解,將氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果。據(jù)圖分析該多肽由幾種氨基酸組成A.3 B.4 C.5 D.613.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗原理與方法的敘述,正確的是 A. 將DNA絲狀物溶解在一定濃度的氯化鈉溶液中,再滴加二苯胺試劑變藍(lán)B. 向菜花研磨液中加入適量的蒸餾水,降低DNA酶的活性C. 用玻璃棒迅速攪拌以使DNA成為絮狀沉淀并纏繞在玻璃棒上D. 用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA以去除蛋白質(zhì)14.紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗來提取和分離血紅蛋白。下列對血紅蛋白提取和分離的敘述,錯誤的是A血紅蛋白提取和分離一般按照“樣品處理粗分離純化純度鑒定”的順序進(jìn)行B粗分離時透析的目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)C純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液D可經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定15如圖為DNA變性和復(fù)性示意圖,下列相關(guān)說法錯誤的是 A向右為變性的過程破壞的是DNA 雙鏈之間的氫鍵B向左的過程是DNA雙鏈緩慢降溫復(fù)性C變性過程與生物體內(nèi)解旋過程的條件、實質(zhì)都相同D圖中DNA片段有2個游離的磷酸基、2個3-OH端16玫瑰油被譽(yù)為“液體黃金”,下面是提取玫瑰精油的實驗流程,相關(guān)分析錯誤的是 A提取玫瑰精油的方法是水蒸氣蒸餾法 B和操作要求分別加入氯化鈉和無水硫酸鈉C該實驗流程也可用于從薄荷葉中提取薄荷油 D操作是萃取,以除去固體硫酸鈉17.如圖為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖。下列有關(guān)的說法中,不正確的是 AA、B、C、D 4點(diǎn)中,屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是A和D,提取樣品的樣點(diǎn)是B和CB點(diǎn)樣的要求是點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致,圓點(diǎn)要小,每次點(diǎn)樣時濾紙都要干燥C.該層析的目的是分離得到?胡蘿卜素D.在圖中的層析譜中,和代表的物質(zhì)分別是?胡蘿卜素、其他色素18下列是提取橘皮精油的實驗流程圖,下列有關(guān)的說法中錯誤的是石灰水浸泡漂洗壓榨過濾靜置再次過濾橘皮油A步之前一般對橘皮進(jìn)行干燥去水處理 B若對橘皮直接進(jìn)行壓榨,出油率會較低 C再次過濾時,用紗布過濾即可D為了使橘皮油與水容易分離,需分別加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉,調(diào)節(jié)pH到78左右19.通過PCR技術(shù),人們可以得到大量的目的基因。下面對該技術(shù)的敘述不正確的是A.遵循的基本原理是DNA半保留復(fù)制和堿基互補(bǔ)配對B.擴(kuò)增儀內(nèi)必須加入引物、原料和熱穩(wěn)定性DNA聚合酶、解旋酶C.擴(kuò)增過程,溫度發(fā)生周期性變化,DNA的空間結(jié)構(gòu)可恢復(fù)D.呈指數(shù)式擴(kuò)增,約為2n(n為擴(kuò)增次數(shù))20.某種微生物合成的蛋白酶與人體消化液中的蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似,只是熱穩(wěn)定性較差,進(jìn)入人體后容易失效?,F(xiàn)要將此酶開發(fā)成一種片劑,臨床治療食物消化不良,最佳方案是A.對此酶中的少數(shù)氨基酸進(jìn)行替換,以改善其功能 B.減少此酶在片劑中的含量C.將控制此酶合成的基因?qū)肴说南偌?xì)胞 D.重新設(shè)計,創(chuàng)造一種全新的蛋白酶21.若想用基因工程并通過土壤農(nóng)桿菌向某種植物中導(dǎo)入抗旱基因,以下分析不合理的是A.若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體,要保證復(fù)制原點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞B.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法自然條件下用于將目的基因?qū)腚p子葉植物和裸子植物C.用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞,可以通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出具有抗旱基因的植物D.若能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗旱目的基因,則說明該基因工程項目獲得成功22.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將Ppc基因轉(zhuǎn)入水稻體內(nèi)可以提高水稻的光合效率,下列敘述不正確的是A.此技術(shù)的關(guān)鍵是基因表達(dá)載體的構(gòu)建 B.此技術(shù)將Ppc基因?qū)胨境S没驑尫–.此技術(shù)可用抗原抗體雜交檢測基因是否正常轉(zhuǎn)錄D.此項技術(shù)是否成功必須測定轉(zhuǎn)基因植株與非轉(zhuǎn)基因植株的光合速率并進(jìn)行對照23.科學(xué)家利用現(xiàn)代生物技術(shù)將生長激素基因?qū)胄∈笫芫?得到了體型巨大的“超級小鼠”,采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。關(guān)于以上兩則基因工程應(yīng)用的說法,正確的是A.“超級小鼠”、轉(zhuǎn)基因煙草發(fā)生的變異不可遺傳B.常用顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的體細(xì)胞中C.構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體D.培育轉(zhuǎn)基因植物時,農(nóng)桿菌的作用是使目的基因?qū)胫参锛?xì)胞24隨著生物技術(shù)的發(fā)展,酶在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用越來越廣泛。下列相關(guān)敘述正確的是A加酶洗衣粉中酶制劑可以被重復(fù)利用,提高了酶的利用率B固定化細(xì)胞相比固定化酶,對反應(yīng)底物的分子大小有限制C制備好海藻酸鈉溶液后,要立即將其與酵母細(xì)胞混合以防凝固D固定化酶應(yīng)用時,要控制好pH、溫度和溶解氧25.下列關(guān)于樣品的加入和洗脫的操作,不正確的是A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面下面B.加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)C.等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口D.用吸管小心地將1mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面26右圖為凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)示意圖和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是A在裝填圖甲中凝膠色譜柱時一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在,就需要重裝B圖甲中大分子蛋白質(zhì)因無法進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,路程較短,移動速度較快,所以最先從層析柱中流出來C圖乙中凝膠中加入的SDS可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小D已知凝膠中的SDS帶負(fù)電,則應(yīng)在電泳槽的處接電源正極,處接電源負(fù)極27.近年來,我國內(nèi)地市場食品中多次檢出大腸桿菌超標(biāo)。有關(guān)大腸桿菌知識的敘述中正確的一組是其細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核; 培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中需添加有機(jī)物; 擬核 DNA 因為比真核 DNA 分子小,因此通??勺骰蚬こ讨心康幕虻妮d體; 其遺傳性狀由擬核 DNA和細(xì)胞質(zhì)DNA共同控制 其代謝產(chǎn)物有抗生素、維生素、毒素和激素等; 其生殖是通過有絲分裂完成的A B C D28正常血清蛋白用電泳的方法,可以看到四個主要部分:血清白蛋白和、球蛋白(如下圖)??贵w主要屬于A血清白蛋白 B球蛋白C球蛋白 D球蛋白29關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,正確的是A在pH低于7.0的自來水中,堿性蛋白酶依然能起作用B洗衣粉中表面活性劑對堿性蛋白酶活性有一定的促進(jìn)作用C高溫易使酶失活,因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好D洗衣粉中的酶是直接來自生物體的,比一般的酶穩(wěn)定性強(qiáng)30下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法,其中正確的有幾項無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實驗室中所有的微生物 煮沸消毒法中100煮沸5-6分鐘可以殺死微生物細(xì)胞和所有芽孢、孢子 經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅,所以不能在常溫長期保存 高壓蒸汽滅菌時若不將鍋內(nèi)冷空氣排出則達(dá)不到預(yù)期的滅菌效果 將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速徹底地滅菌培養(yǎng)皿、膠頭滴管可用干熱滅菌法滅菌A2項 B3項 C4項 D5項31為了解土壤微生物能否分解農(nóng)藥“敵草隆”(一種除草劑)進(jìn)行的實驗:取等量的土壤分裝于相同的兩容器中,a組高壓滅菌,b組不滅菌,下列有關(guān)選項正確的是A再增加c組作為對照,不噴入“敵草隆”,其他處理與a、b組相同B向a、b中噴入等量敵草隆,再置于同一溫箱中培養(yǎng)相同時間C預(yù)測結(jié)果:a組敵草隆含量不變,b組敵草隆含量下降D實驗的自變量是是否使用敵草隆,土壤中的微生物、培養(yǎng)條件等是無關(guān)變量32將相等數(shù)量的硝化細(xì)菌和大腸桿菌分別接種到含銨鹽的無機(jī)鹽培養(yǎng)液中,在適宜溫度下振蕩培養(yǎng)。若用虛線表示大腸桿菌的生長趨勢,實線表示硝化細(xì)菌的生長趨勢,則下圖中能正確表示兩種菌體生長趨勢的是A B C D 33.具有x個堿基對的一個DNA分子片段含有m個腺嘌呤,該片段利用PCR技術(shù)完成n次循環(huán)需要多少個游離的胞嘧啶脫氧核苷酸? A. 2n(x-m) B. (2n-1)(x-m) C.(2n-1)(x/2-m) D.2n(x/2-m)34關(guān)于泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的敘述,正確的有制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜,原因是它們所含亞硝酸鹽的含量低 泡菜發(fā)酵的微生物主要是乳酸菌,其代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧 亞硝酸鹽經(jīng)一定方式顯色反應(yīng)后呈玫瑰紅色 顯色反應(yīng)后亞硝酸鹽的理化性質(zhì)沒有發(fā)生改變 樣品液顯色后,通過與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液比色,可大致估算出樣品液中亞硝酸鹽的含量 隨發(fā)酵時間的延長,乳酸菌的數(shù)量呈增加趨勢A二項 B五項 C四項 D三項35.甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳病(H對h為顯性)。圖1中兩個家系都有血友病發(fā)病史。 圖1兩個家系的甲型血友病均由凝血因子(簡稱F8,即抗血友病球蛋白)基因堿基對缺失所致。為探明2的病因,對家系的第代成員F8基因的特異片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,其產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2所示,結(jié)合圖1,推斷3的基因型是 圖2A.XHXH B.XHXh C.XHXH或XHXh D.無法判斷二、非選擇題(共40分)36(11分)某研究性學(xué)習(xí)小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發(fā)酵中產(chǎn)生乳酸,還可以降解亞硝酸鹽,該小組利用泡菜液進(jìn)行了相關(guān)的研究。請回答下列問題:(1)乳酸菌和酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是酵母菌_。(2)小組成員用改良的MRS固體培養(yǎng)基分離乳酸菌,該培養(yǎng)基成分如下:蛋白胨 牛肉膏 酵母膏 葡萄糖 CaCO3 瓊脂 其他成分略5g 5g 5g 10g 10g 10g 該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣,從而在菌落周圍形成溶鈣圈,從功能上看該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。小組成員在分離純化乳酸菌時,用 將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后,取0.1ml加入到50左右的培養(yǎng)基中搖勻,待凝固后,再在其上加蓋一層固體培養(yǎng)基。加蓋一層固體培養(yǎng)基的目的是_。在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后,挑取溶鈣圈較大的菌落,接種到_ 上培養(yǎng)后臨時保存。(3)一些乳酸菌能合成亞硝酸鹽還原酶,能夠顯著降低亞硝酸鹽含量。在進(jìn)行高產(chǎn)亞硝酸鹽還原酶菌株篩選時,將臨時保存的各菌種分別接種到含_的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,離心收集上清液,在_酸化條件下,依次加入對氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽進(jìn)行反應(yīng),篩選反應(yīng)顯色較_的菌株。篩選出的乳酸菌在-20的冷凍箱中長期保存時,需要加入一定量的_。利用篩選得到的菌種進(jìn)行泡菜腌制,測定亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg),結(jié)果如下表所示: 據(jù)表分析,亞硝酸鹽含量最高時的腌制條件是 。為避免亞硝酸鹽的危害,泡菜腌制除控制好表中涉及的腌制條件外,還需要控制好_。37(9分)愛玉是臺灣特有的一種植物,愛玉子經(jīng)搓洗于水中后可制成好吃的愛玉凍,愛玉凍的主要成分為果膠。愛玉子也含有淀粉。請回答下列有關(guān)問題:(1)愛玉子制愛玉凍后的剩余物可制作果汁。將汁液用蛋白酶和纖維素酶處理后,發(fā)現(xiàn)汁液仍渾濁,同時還含有少量沉淀,此時可添加_使果膠分解成可溶性的_,再使用_,使愛玉子中的淀粉分解,使果汁更加澄清。在生產(chǎn)過程中,須嚴(yán)格控制好_(答出2點(diǎn)即可)等條件。(2)在生產(chǎn)中通過一種專門技術(shù),能使-淀粉酶被反復(fù)多次利用。已知-淀粉酶的最適溫度為50。某同學(xué)為探究使用這種專門技術(shù)后,-淀粉酶的最適溫度是否發(fā)生了改變,進(jìn)行了如下實驗。實驗原理:海藻酸鈉在CaCl2溶液中可以交聯(lián)為網(wǎng)狀大分子,使酶被包埋于微格內(nèi)形成凝膠珠(可回收的酶)。-淀粉酶活性的測定:直鏈淀粉遇I-KI溶液后會呈現(xiàn)藍(lán)色,可以采取比色法(比色法是利用被測溶液本身的顏色,或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色,比較溶液顏色深度)定量測定_,以表示酶活性大小。比較凝膠珠與游離酶活性時,將二者在_條件下進(jìn)行。實驗步驟:將-淀粉酶制成凝膠珠并初步檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)制成的凝膠珠并未改變游離酶的活性。取試管若干分為兩組,每組再取若干試管分別放在30、35、40、45、50、55、60、65、70溫度條件下。向同一溫度條件下的試管中分別加入等量的_進(jìn)行水浴保溫5min。把凝膠珠倒入相應(yīng)溫度的淀粉溶液中,充分混勻,在相應(yīng)的溫度下反應(yīng)5min。取出凝膠珠終止反應(yīng)并在4冰箱中儲存,以備下次使用。用比色法測定淀粉酶的活性。并以 代替凝膠珠作為空白對照組,重復(fù)實驗。實驗結(jié)果:以50時反應(yīng)測得的顏色為標(biāo)準(zhǔn),測定各溫度條件下凝膠珠中酶的相對活性,結(jié)果如下圖。 實驗結(jié)論:_38.(7分)我國的柑橘栽種面積居世界之首,橘皮精油的提取具有廣闊的開發(fā)前景。根據(jù)所學(xué)知識,請回答下列問題。(1)柑橘和檸檬不適用于水中蒸餾提取橘皮精油,原因是 。橘皮精油的主要成分是_,主要通過 法提取。(2)研究發(fā)現(xiàn)采用有機(jī)溶劑萃取的方法提取橘皮精油的出油率更高,應(yīng)選擇_(填“乙醇”或“石油醚”)作為萃取劑,理由是_。提取時要注意萃取劑的_和使用量,以提高萃取效率。若萃取劑的用量與橘皮精油的出油率的關(guān)系如圖所示,則該萃取劑的最佳用量為_ml。39.(13分)CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是近年來頗受關(guān)注的一項新技術(shù)。該基因表達(dá)系統(tǒng)主要包含引導(dǎo)RNA和Cas9蛋白兩個部分,引導(dǎo)RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列,從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA,最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。研究人員試圖用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對水稻產(chǎn)量基因D基因進(jìn)行編輯,請回答下列問題:(1)研究發(fā)現(xiàn),CRISPR/Cas9僅存在于原核生物,故需借助_技術(shù)才能在水稻細(xì)胞中發(fā)揮作用。向?qū)NA的合成所需酶的識別和結(jié)合位點(diǎn)是 ,Cas9蛋白與_酶的功能相似。首先依據(jù)水稻產(chǎn)量基因D基因的部分序列設(shè)計DNA片段A(負(fù)責(zé)編碼相應(yīng)引導(dǎo)RNA),圖1表示該DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,再將其與含有Cas9基因的質(zhì)粒B連接,以構(gòu)建編輯水稻D基因的CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因表達(dá)載體(如圖所示)。圖2表示質(zhì)粒B的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?,F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4 種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請回答下列問題。(2)圖1中的兩條脫氧核苷酸鏈上的堿基通過連接;一條脫氧核苷酸鏈中的兩個脫氧核苷酸之間通過連接。 (3)若用限制酶Sma完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是末端,其產(chǎn)物長度為。若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的Sma酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 (填“高”或“低”) (4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過

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