（病原生物學(xué)專業(yè)論文）溫度對(duì)絲光綠蠅幼蟲生長發(fā)育的影響及其法醫(yī)學(xué)意義.pdf

中文摘要 溫度對(duì)絲光綠蠅幼蟲生長發(fā)育的影響 及其法醫(yī)學(xué)意義 摘要 目的 研究絲光綠蠅幼蟲形態(tài)特征變化規(guī)律 積累石家 莊地區(qū)尸食性蠅類幼蟲發(fā)育的生物學(xué)資料 為準(zhǔn)確推斷死后 間隔時(shí)間 p o s t m o r t e mi n t e r v a l p m i 提供科學(xué)依據(jù) 方法 在河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi)誘捕絲光綠蠅成蠅 帶回 實(shí)驗(yàn)室連續(xù)飼養(yǎng)繁衍至第三代 將其移入生化培養(yǎng)箱作為母 代 進(jìn)行各溫度條件下的生長發(fā)育研究 依次設(shè)定溫度為 1 6 2 0 2 4 2 8 3 2 各溫度保持相對(duì)恒定 l 在以上各溫度條件下 濕度為5 0 6 0 光周期為1 2 1 2 小時(shí) 并且保持不變 食物數(shù)量維持在相對(duì)穩(wěn)定的范圍內(nèi) 從幼蟲孵出開始 每1 2 小時(shí) 觀察疊齡期時(shí)每1 小時(shí) 留取一次標(biāo)本 直至化蛹 用鑷子夾起幼蟲投入7 0 8 0 的熱水中燙死后取出放在濾紙上 吸干蟲體表面的水份放入 7 0 的甘油酒精中保存 各溫度條件下做3 個(gè)重復(fù)組 從保存液中取出幼蟲標(biāo)本 置入表面皿 用大頭針在幼 蟲腹部一側(cè)扎數(shù)個(gè)小孔 放入1 0 的k o h 溶液中 消化2 4 小時(shí)后 用鑷子擠壓排除幼蟲體內(nèi)已消化的組織 用蒸餾水 洗去堿液和體內(nèi)殘余組織 在3 0 5 0 7 0 的酒精中逐 級(jí)脫水 每級(jí)1 5 分鐘 再依次放入8 0 9 0 9 5 1 0 0 的酒精中逐級(jí)脫水 每級(jí)3 0 分鐘 在5 0 的酒精和5 0 的 二甲苯混合液中浸泡3 0 分鐘后 放入二甲苯中透明 在載 玻片上滴加加拿大樹膠 解剖鏡下整姿 用蓋玻片封片 置 中文摘要 于陰涼處晾干 用雙目光學(xué)顯微鏡觀察幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)如頭咽骨 前后 氣f l a d 體表棘刺 并用n i k o n 數(shù)碼顯微照像機(jī)拍照 用j d 8 0 1 圖像分析系統(tǒng)測(cè)量幼蟲頭咽骨的長度 口鉤長度 咽骨背 腹角長度 頭咽骨幾丁質(zhì)化程度及后氣門橫徑等 并將一系 列指標(biāo)隨溫度的變化用e x c e l 制成生長曲線進(jìn)行分析研究 結(jié)果 觀察研究表明 在恒定溫度下 絲光綠蠅幼蟲頭 咽骨由開始的近似 人 形逐漸變?yōu)椴灰?guī)則的 h 形 二 齡初期出現(xiàn)點(diǎn)狀的齒骨和細(xì)長的側(cè)口骨 沒有附口骨 其顏 色逐漸加深由淺黃變?yōu)樽睾稚?頭咽骨的長度 口鉤長度 咽骨背 腹角的長度隨時(shí)間延長而增加 其長度的增加呈階 段性 在每個(gè)齡期內(nèi)部變化不大 齡期更替時(shí)增長明顯 尤 其是在二齡到三齡的轉(zhuǎn)變 頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度隨時(shí)間的 延長也明顯增加 但是在齡期更替時(shí)其幾丁質(zhì)化程度略下降 后又上升 當(dāng)頭咽骨各部位達(dá)到最大值基本保持不變時(shí) 背 角與腹角長度比為2 1 此時(shí)頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度隨時(shí)間 延長還在繼續(xù)加大 前氣門從無到有 并具有6 8 個(gè)指狀突 氣門管由細(xì)長 逐漸變?yōu)榇侄?后氣門由一孔兩裂到具有三個(gè)氣門裂 由無 氣門鈕 氣門環(huán)到出現(xiàn)氣門鈕和具有完整的氣門環(huán) 并隨著 幾丁質(zhì)化范圍的增大 程度加深 體表棘刺的顏色也隨著幾 丁質(zhì)化程度的增加而加深 不同溫度對(duì)絲光綠蠅幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征影響不明顯 但在適宜其發(fā)育的溫度范圍內(nèi) 隨溫度的升高 幼蟲的發(fā)育 速率增快 頭咽骨 前后氣門等各部位達(dá)到最大長度的時(shí)間 縮短 中文摘要 對(duì)絲光綠蠅幼蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察過程中發(fā)現(xiàn) 幼 蟲具有疊齡期這一特殊結(jié)構(gòu)時(shí)期 疊齡期是指此時(shí)的幼蟲同 時(shí)具備兩個(gè)齡期的幼蟲頭咽骨和后氣門等結(jié)構(gòu) 且分別呈現(xiàn) 各自的特征 一 二齡更替時(shí) 同時(shí)出現(xiàn)一 二齡兩組幼蟲 頭咽骨和后氣門 成熟的一齡幼蟲頭咽骨顏色較深 新生成 的二齡幼蟲頭咽骨顏色較淺 咽骨背角略長于腹角 二 三 齡更替時(shí) 同時(shí)出現(xiàn)二 三齡兩組幼蟲頭咽骨和前 后氣門 成熟二齡幼蟲頭咽骨顏色較深 新生成的三齡幼蟲頭咽骨顏 色較淺 口鉤鉤部彎曲較平緩 基部寬大 咽骨背角長于腹 角 成熟二齡幼蟲前氣門較小 顏色深 后氣門小 為兩裂 新生成的三齡幼蟲前氣門較大 顏色淺 后氣門大 為三裂 在適宜其發(fā)育的溫度范圍內(nèi) 溫度越高 發(fā)育至對(duì)應(yīng)疊 齡期的時(shí)間越短 幼蟲在1 6 c 2 0 2 4 2 8 3 2 條 件下 一 二齡疊齡期出現(xiàn)的時(shí)間依次為 5 2 l 0 7 7 小時(shí) 3 8 士o 6 3 小時(shí) 2 8 1 0 0 小時(shí) 1 4 士o 7 7 小時(shí) 8 士1 6 7 小時(shí) 平均分別持續(xù)6 t o 6 3 小時(shí) 6 l o 7 7 小時(shí) 4 l o 7 7 小時(shí) 2 i 0 4 4 小時(shí) 2 l o 8 9 小時(shí) 二 三齡疊齡期出現(xiàn)的時(shí)間依次為 1 1 0 t 1 6 7 小時(shí) 9 8 l 0 8 9 小時(shí) 7 4 1 6 7 小時(shí) 3 8 l 0 8 9 小時(shí) 2 6 1 4 1 小時(shí) 平均分別持續(xù)7 0 6 3 小時(shí) 6 i 0 7 7 小時(shí) 4 士0 4 4 小時(shí) 2 i 0 4 4 小時(shí) 2 4 0 6 3 小時(shí) 結(jié)論 本研究結(jié)果表明 在適宜絲光綠蠅幼蟲發(fā)育的溫 度范圍內(nèi) 幼蟲發(fā)育呈現(xiàn)以下規(guī)律 1 頭咽骨各部位長度隨時(shí)間的延長而增加 且增加呈階段 性 即在每個(gè)齡期內(nèi)部增長不明顯 齡期更替前后 增長顯 著 達(dá)到最大值后 基本維持不變 頭咽骨顏色隨幾丁質(zhì)化 程度增強(qiáng)而逐漸變深 口鉤鉤部彎曲逐漸平緩 基部漸寬 中文摘要 咽骨背角長于腹角 側(cè)口骨和齒骨出現(xiàn)在二齡初期 沒有附 口骨出現(xiàn) 2 隨著幼蟲的發(fā)育 前后氣門 體表棘刺幾丁質(zhì)化程度逐漸 增強(qiáng) 顏色逐漸變深 范圍逐漸加大 3 溫度越高 幼蟲發(fā)育速率越快 各結(jié)構(gòu)發(fā)育至最大值所需 時(shí)間越短 4 對(duì)應(yīng)疊齡期的出現(xiàn)隨溫度的升高而提前 疊齡期幼蟲具備 兩個(gè)齡期的特征結(jié)構(gòu) 并且分別呈現(xiàn)各自特點(diǎn) 其存在時(shí)間 隨溫度升高而縮短 在死亡調(diào)查時(shí) 根據(jù)案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)的環(huán)境 溫度 觀察采集 到的絲光綠蠅幼蟲標(biāo)本的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征 參照這種蠅類幼蟲 頭咽骨各部位長度變化及幾丁質(zhì)化程度的規(guī)律 準(zhǔn)確推斷出 幼蟲的發(fā)育歷期 尤其是觀察到疊齡期幼蟲的形態(tài)特點(diǎn)時(shí) 可迅速判斷其發(fā)育歷期 從而推斷死后間隔時(shí)n p m i 為 案件的偵破提供時(shí)間依據(jù) 關(guān)鍵詞 法醫(yī)昆蟲學(xué) 尸食性蠅類 絲光綠蠅 溫度 幼蟲頭咽骨 死后間隔時(shí)間 生長發(fā)育 幾丁質(zhì) 英文摘要 e f f e c to ft e m p e r a t u r eo nt h eg r o w t ha n d d e v e l o p m e n to f t h el a r v a eo fl u c i l i as e r i c a t a d i p t e r a c a i p h o r i d a e a n di t ss i g n i f i c a n c ei n f o r e n s i cm e d i c i n e a b s t r a c t o b j e c t i v e t oc l a r i f yt h em o r p h o l o g yp a t t e r no ft h el a r v a e o fl u c i l i as e n c a t aa n da c c u m u l a t et h eb a s i c a l l yb i o l o g i c a ld a t a o ft l l el a r v a eo fn e c r o p h a g o n sf l i e sf o rt h ef o r e n s i ce n t o m o 1 0 9 y m e t h o d s a d u l tl u c i l i as e r i c a t aw e r ec o l l e c t e df r o mt h e o u t d o o r s t h e y w e r er e a r e d s u c c e s s i v e l y i nab i o c h e m i c a l c u l t u r eb o x t h ee x p e r i m e n tw a sd o n ew i t ht h eo f f s p r i n go ft h e t h i r dg e n e r a t i o n t h el a r v a eo fl u c i l i as e r i c a t aw e r er e a r e da t t e m p e r a t u r er a n g e df r o m1 6 c t o3 2 c t h eh u m i d i t y l i g h t p e r i o da n df o o ds u p p l yw e r ek e p tu n c h a n g e d d u r i n gt h ee n t i r es t u d y t h el a r v a ew e r er e m o v e da t 1 2 h o u r si n t e r v a l w h e ns t u d y i n gt h el a r v a ld o u b l ea g e t h el a r v a l s p e c i m e n sw e r er e m o v e da t 1h o u ri n t e r v a l u n t i l5 0 o ft h e c o h o r t sh a dp u p a t e d f o rm e a s u r e m e n ta n do b s e r v a t i o n t h e l a r v a ew e r el i l i e di m m e d i a t e l yi n7 0 一8 0 w a t e ra n dt r a n s f e r r e dt o7 0 a l c o h o lt ou s ei nn e x ts t e p s e x p e r i m e n tw a s r e p e a t e dt h r e et i m e sa te v e r yt e m p e r a t u r e t h el a l v a ls p e c i m e n sw e r ec o r r o d e dw i t h1 0 k o hf o r2 4 h o u r sa n dd e l w d r a t e dw i t ha l c o h o lf r o m3 0 t o7 0 f o rf i f t e e n 英文摘要 m i n u t e s t h el a r v a ew e r et h o r o u g h l yd e h y d r a t e dw i t ha l c o h o l f r o m8 0 t o1 0 0 g r a d u a l l yf o rh a l fa nh o u r f i n a l l y t h el a r v a l s p e c i m e n sw e r ee n v e l o p e di nc a n a d ab a l s a ma f t e rt h e yw e r e m a d e t r a n s p a r e n ti nt h ed i m e t h y l b e n z e n e t h el a r v a ls p e c i m e n sw e r eo b s e r v e du n d e rab i nm i e r e s c o p e s u c ha st h es t r u c t u r a lt r a i t so fc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e a n t e r i o rs p i r a c l e p o s t e r i o rs p i r a c l e t h ed o u b l ea g el a r v a e i n a d d i t i o n t h el e n g t ho fc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e t h ep a r to f m o u t hh o o k v e n t r a lc o r n u aa n dd o r s a lc o m u a t h ee x t e n to f c h i t i na n dt h el e n g t ho fp o s t e r i o rs p i r a c l ew e r em e a s u r e d t h r o u g ht h ej d 8 0 1i m a g ea n a l y z es y s t e m f i n a l l y t h ed a t a w e r es t a t i s t i c a l l ye v a l u a t e dw i t he x c e l r e s u l t s 1u n d e rt h es a m et e m p e r a t u r ec o n d i t i o n t h e l e n g t ho fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e t h ep a r to fm o u t h h o o k v e n t r a lc o r o l l aa n dd o r s a lc o m u ag r e wg r a d u a l l y b u tt h e l e n g t ho fe a c hp a r to ft h el a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t ed i d n o tc h a n g ea f t e rr e a c h i n gq u i c k l yt h em a x i m a ll e n g t h 2w i t h t h el a r v a eg r o w i n g t h ec o l o ro fe a c hp a r to ft h el a r v a ec e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e a n t e r i o rs p i r a c l e p o s t e r i o rs p i r a c l eb e c a m e d e e p e rt h a ne v e r t h ee x t e n to fc h i t i ns t r e n g t h e n e dg r a d u a l l y 3 t h es p e e do fl a r v a lg r o w t hw a sf a s t e ra n dt h e f tm a x i m a ll e n g t h w a sr e a c h e de a r l i e ra th i g h o rt e m p e r a t u r e 4t h ed o u b l ea g e l a r v a et u r n e du pf a s t e ra th i g h e rt e m p e r a t u r et h a ni td i di nt h e l o w e rt e m p e r a t u r e c o n c l u s i o n s t h es t u d ys h o w st h a tt h e r ea r er e g u l a r si n t h ed e v e l o p m e n tp a t t e r n so fl u c i l i a e r i c a t al a r v a e t h ea g eo f 6 英文摘要 t h el a r v a ec a nb ed e t e r m i n e da c c o r d i n gt ot h e m o r p h o l o g y c h a n g eo ft h e l a r v a e s ot h e p o s t m o r t e m i n t e r v a lc a l lb e d e t e r m i n e da s l o n g a st h e i n v e s t i g a t o r c o u n t sf o rt h e d e v e l o p m e n td a t ao f t h ei n d i c a t o rs p e c i e s k e yw o r d s f o r e n s i ce n t o m o l o g y n e c r o p h a g o u sf l i e s l u c i l i as e r i c a t a t e m p e r a t u r e l a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e p o s t m o r t e mi n t e r v a l g r o w t ha n dd e e l o p m e n t c h i t i n 7 研究論文 溫度對(duì)絲光綠蠅幼蟲生長發(fā)育的影響 及其法醫(yī)學(xué)意義 刖舌 法醫(yī)昆蟲學(xué)是法醫(yī)學(xué)與昆蟲學(xué)相互滲透 結(jié)合而形成的 一門新興交叉學(xué)科 其中死后間隔時(shí)間 p o s t m o r t e mi n t e r v a l p 即死亡發(fā)生至尸體被發(fā)現(xiàn)的時(shí)間間隔推斷是其主要研 究內(nèi)容之一 法醫(yī)昆蟲學(xué)對(duì)p m i 的推斷方法可分為兩類 第 一 根據(jù)尸體上節(jié)肢動(dòng)物的區(qū)系演替規(guī)律 第二 根據(jù)尸體 上尸食性昆蟲 尤其是蠅類 的生長發(fā)育過程 對(duì)于第二類 方法 國內(nèi)開展的研究比較多 以往有關(guān)蠅類幼蟲生長發(fā)育的研究主要在體長 體重和 齡期 傳統(tǒng)上幼蟲期被分為一齡 二齡 三齡或進(jìn)一步將三 齡劃分為取食期和離食期 蠅類各生長階段的體長 體重指 標(biāo)在一定程度上用于死后間隔時(shí)間的推斷是頗為有效的 1 4 1 但是對(duì)蠅類幼蟲的這些階段的劃分在刑事案件偵破中應(yīng)用 太粗糙 尤其是在幼蟲的離食期 約占幼蟲期的1 3 時(shí)間 其體長會(huì)有一定程度的縮短 這樣就可能和正在取食生長中 的三齡幼蟲體長相混淆 r e i t e r t s l 認(rèn)為區(qū)分取食期和離食期的 紅頭麗蠅三齡幼蟲可根據(jù)幼蟲中腸前段空氣的有無 g r e e n b e r g t 6 曾對(duì)絲光綠蠅 緋顏裸金蠅 紅頭麗蠅及伏蠅嗉 囊的變化作過觀察 以期發(fā)現(xiàn)規(guī)律性變化 但是因?yàn)槔鲜煊?蟲的嗉囊并不清晰可見 所以嗉囊長度變化也難以區(qū)分老齡 幼蟲的 年齡 我國的王江峰 胡萃等人曾對(duì)大頭金蠅幼 蟲i7 j 和蛹 8 的發(fā)育形態(tài)學(xué)做過一定研究 把幼蟲和蛹作了進(jìn) 研究論文 一步的劃分 楊惠霞 9 對(duì)巨尾阿麗蠅和肥須亞麻蠅幼蟲的頭 咽骨發(fā)育做過研究 對(duì)兩種蠅類幼蟲的頭咽骨各部位長度變 化進(jìn)行了觀察測(cè)量 丁軍穎i l0 1 也對(duì)大頭金蠅幼蟲的頭咽骨發(fā) 育變化作了一定研究 使尸食性蠅類幼蟲形態(tài)學(xué)資料更加豐 富 但是 目前尚未見到有關(guān)絲光綠蠅幼蟲頭咽骨 前 后 氣門的幾丁質(zhì)化 疊齡期幼蟲出現(xiàn)時(shí)間的詳細(xì)研究 有鑒于 此 本研究選擇了既是尸食性蠅類又是石家莊地區(qū)的優(yōu)勢(shì)蠅 種一絲光綠蠅 對(duì)其幼蟲進(jìn)行了發(fā)育生物學(xué)方面的研究 觀 察了該蠅幼蟲頭咽骨各部位長度變化 幾丁質(zhì)化程度 前后 氣門 體表棘刺和疊齡期幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化規(guī)律 從而較 準(zhǔn)確地判斷絲光綠蠅幼蟲的發(fā)育歷期 為p m i 的推斷提供基 礎(chǔ)資料和科學(xué)依據(jù) 并為推動(dòng)我國法醫(yī)昆蟲學(xué)的發(fā)展做出貢 獻(xiàn) 材料與方法 1 成蠅的采集和飼養(yǎng) 在河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi) 用兔尸體誘捕絲光綠蠅 帶回 實(shí)驗(yàn)室 置于養(yǎng)蠅籠內(nèi) 放入m g c 3 0 0 b 型生化培養(yǎng)箱內(nèi)飼 育 籠內(nèi)放一水槽 內(nèi)放一塊兒大小適宜的海綿 供蒼蠅飲 水時(shí)停落用 每天加換水兩次 使?jié)穸缺３衷? 0 6 0 使用表面皿盛上飼料 奶粉 糖 l 1 為保持新鮮 兩天更 換一次 設(shè)定生化培養(yǎng)箱的光周期為1 2 1 2 d 時(shí) 連續(xù)飼養(yǎng) 至第三代 以第三代成蠅為母代 開始實(shí)驗(yàn) 2 幼蟲的飼養(yǎng) 用新鮮豬肉誘培養(yǎng)箱內(nèi)飼育的第三代絲光綠蠅成蠅產(chǎn) 研究論文 卵 將豬肉切成2 2 x l e m 的小塊 并在其表面切幾條縫 置 于表面皿內(nèi)的濕紗布上 仔細(xì)觀察 當(dāng)成蠅產(chǎn)卵時(shí)開始計(jì)時(shí) 并把產(chǎn)出時(shí)間相差不超過半小時(shí)的大卵塊移入另一5 0 m l 的 燒杯內(nèi) 將此燒杯放入盛有2 3 土層5 0 0 m l 的大燒杯內(nèi) 用尼 龍紗布封口飼養(yǎng) 預(yù)備留標(biāo)本 設(shè)定生化培養(yǎng)箱的溫度依次 為 1 6 c 2 0 2 4 2 8 3 2 各溫度保持相對(duì)恒定 1 待幼蟲孵出后 每天加兩次肉 保證食物充足 發(fā)現(xiàn)變干時(shí)滴幾滴水 保持肉的柔軟程度適中 利于幼蟲取 食 同時(shí)維持濕度相對(duì)穩(wěn)定 各溫度條件下做3 個(gè)重復(fù)組 3 幼蟲標(biāo)本的留取 3 1 在各個(gè)不同溫度條件下 從幼蟲孵出開始 每1 2 小時(shí)留 一次標(biāo)本 每組每次留取1 0 頭幼蟲 用小燒杯加熱3 0 m l 左 右的水至7 0 8 0 然后用鑷子提起 一般夾蟲體的后半 部 且動(dòng)作要輕 不至于破壞幼蟲的表面結(jié)構(gòu) 幼蟲 使其 自然落入水中燙死后取出 用濾紙吸干幼蟲表面的水份 放 入7 0 的甘油酒精中保存 留取各溫度條件下的幼蟲標(biāo)本直 至5 0 以上的幼蟲入土化蛹為止 化蛹的標(biāo)準(zhǔn)是 當(dāng)用大頭 針刺激幼蟲時(shí) 幼蟲對(duì)刺激沒有伸展或移動(dòng)等反應(yīng) 3 2 疊齡期幼蟲標(biāo)本的留取 是根據(jù)在實(shí)驗(yàn)中觀察到的不同 溫度下絲光綠蠅幼蟲疊齡期出現(xiàn)的時(shí)間范圍 每一小時(shí)留取 一次標(biāo)本 每組每次留取l o 頭幼蟲 具體方法如3 1 所述 4 幼蟲標(biāo)本的封片制作與觀察 測(cè)量 4 1 幼蟲標(biāo)本的封片制作 從7 0 的甘油酒精保存液中取出幼蟲標(biāo)本 放在表面皿 上 用大頭針在幼蟲腹部一側(cè)扎幾個(gè)小孔 孔的個(gè)數(shù)因幼 蟲長短而異 將其放入1 0 的k o h 溶液中消化 2 4 d x 時(shí)后 研究論文 將幼蟲從堿液中提出 放在表面皿上用鑷子輕輕按壓幼蟲 至將體內(nèi)已消化的組織排出 將幼蟲在蒸餾水中洗凈 依次 放入3 0 5 0 7 0 的酒精中逐級(jí)脫水 每級(jí)1 5 分鐘 再 依次在8 0 9 0 9 5 1 0 0 的酒精中逐級(jí)脫水 每級(jí) 3 0 分鐘 用5 0 的酒精與5 0 的二甲苯的混合液浸泡3 0 分鐘 后 放入二甲苯中透明 在載玻片上滴加加拿大樹膠 解剖 鏡下將標(biāo)本整姿 用蓋玻片封片 置于陰涼處晾干 4 2 幼蟲標(biāo)本的觀察與測(cè)量 雙目光學(xué)顯微鏡下觀察不同溫度下絲光綠蠅幼蟲頭咽 骨 前后氣門 體表棘刺 疊齡期等形態(tài)結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)發(fā)育狀 況 用n i k o n 數(shù)碼顯微照像機(jī)進(jìn)行拍照 用j d 8 0 1 圖像分析系 統(tǒng)測(cè)量幼蟲頭咽骨各部位的長度 其幾丁質(zhì)化程度 后氣門 橫徑等 頭咽骨的長度 側(cè)面觀 量其最大長徑 即由口鉤前端 至咽骨體末端 口鉤的長度 側(cè)面觀 量其最大長徑 可分為鉤部和基 部 咽骨背腹角的長度 自缺刻處劃一切線至背角端部平行 線之間的長為背角長 至腹角端部平行線之間的長為腹角 長 幾丁質(zhì)化程度 頭咽骨幾丁質(zhì)化面積與整個(gè)頭咽骨面積 比 后氣門橫徑 后氣門環(huán)的最大橫徑 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 本文測(cè)得的數(shù)據(jù)用均值 標(biāo)準(zhǔn)差 m e a n 舡 形式來表 示 處理數(shù)據(jù)用e x c e l 軟件 處理圖片用p h o t o s h o p 軟件 研究論文 6 實(shí)驗(yàn)儀器 國華牌恒溫光照培養(yǎng)箱 型號(hào)2 0 0 2 1 1 常州國華電器有 限公司生產(chǎn) 智能型光照培養(yǎng)箱 型號(hào)m g c 3 0 0 b 型 上海 一恒科技有限公司 j d 8 0 1 圖像分析系統(tǒng) 江蘇省捷達(dá)科技 發(fā)展有限公司 雙目光學(xué)顯微鏡 解剖鏡 結(jié)果 l 不同溫度下絲光綠蠅幼蟲形態(tài)隨溫度的變化情況 1 1 絲光綠蠅幼蟲頭咽骨的形態(tài)變化 如圖1 4 表示 恒定溫度條件下 絲光綠蠅幼蟲孵出在 一齡時(shí) 頭咽骨較小 顏色淺黃 幾丁質(zhì)化程度低 此時(shí)頭 咽骨近似 人 形 咽骨腹角等于或短于背角 當(dāng)其發(fā)育n 齡時(shí) 頭咽骨明顯增長 呈不規(guī)則的 h 形 顏色加深為棕 黃色 口鉤增大 腹角長度明顯短于背角 此時(shí)頭咽骨幾丁 質(zhì)化程度顯著增大 并可見到細(xì)長的側(cè)口骨 點(diǎn)狀的齒骨 未見附口骨 幼蟲發(fā)育到三齡時(shí) 頭咽骨長度很快接近到最 大值 口鉤鉤部的彎曲變小 基部變寬 側(cè)口骨粗大 齒骨 明顯增大 咽骨背角和腹角的長度也不再增加 并且背角與 腹角的長度比達(dá)n 2 1 但是頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度繼續(xù)增 強(qiáng) 范圍繼續(xù)擴(kuò)大 1 2 絲光綠蠅幼蟲前 后氣門 體表棘刺的形態(tài)變化 如圖5 1 0 所示 隨著幼蟲的發(fā)育 其前氣門由無到有 并具有6 8 個(gè)指狀突 前氣門管由細(xì)長逐漸變?yōu)榇侄?后氣 門由開始的一孔兩裂 無氣門環(huán)變?yōu)閮闪?出現(xiàn)不完整的氣 門環(huán)到最后具有三裂 完整的氣門環(huán) 氣門鈕 氣門環(huán)逐漸 研究論文 變粗 其幾丁質(zhì)化范圍不斷增大 體表棘刺的尖形結(jié)構(gòu)也隨 時(shí)間的延長而逐漸明顯 2 絲光綠蠅幼蟲疊齡期的形態(tài)特征及出現(xiàn)對(duì)應(yīng)疊齡期的時(shí) 間 絲光綠蠅幼蟲發(fā)育過程中會(huì)出現(xiàn)兩次疊齡期 一是幼蟲 在一 二齡更替時(shí) 同時(shí)出現(xiàn)一 二齡兩組幼蟲頭咽骨 如 圖l l 示 成熟的一齡幼蟲頭咽骨顏色較深 但新生成的二齡 幼蟲頭咽骨顏色較淺 咽骨背角略長于腹角 二是幼蟲在二 三齡更替時(shí) 同時(shí)出現(xiàn)二 三齡兩組幼蟲頭咽骨 如圖1 2 示 成熟二齡幼蟲頭咽骨顏色較深 新生成的三齡幼蟲頭咽骨顏 色較淺 口鉤鉤部彎曲較平緩 咽骨背角長于腹角 如圖1 2 示 二 三齡更替時(shí) 同時(shí)出現(xiàn)二 三齡兩組幼蟲前氣門 二齡幼蟲前氣門較小 顏色深 三齡幼蟲前氣門較大 顏色 淺 如圖1 3 示 二 三齡更替時(shí) 也同時(shí)出現(xiàn)二 三齡兩組 幼蟲后氣門 二齡幼蟲后氣門小 為兩裂 三齡幼蟲后氣門 大 為三裂 絲光綠蠅幼蟲的發(fā)育速度隨溫度的升高而加快 同樣 溫度越高幼蟲發(fā)育到相應(yīng)疊齡期的時(shí)間越短 如圖2 0 示 幼 蟲在1 6 c 2 0 2 4 0 2 8 3 2 0 條件下 一 二齡疊齡 期出現(xiàn)的時(shí)間依次為 5 2 0 7 7 4 時(shí) 3 8 0 6 3 4 時(shí) 2 8 t 1 0 0 小時(shí) 1 4 士o 7 7 4 時(shí) 8 4 1 6 7 4 時(shí) 平均分別持續(xù)6 4 0 6 3 4 時(shí) 6 4 0 7 7 d 時(shí) 4 4 0 7 7 d 時(shí) 2 4 0 4 4 4 時(shí) 2 i 0 8 9 4 時(shí) 二 三 齡疊齡期出現(xiàn)的時(shí)間依次為 1 1 0 4 1 6 7 4 時(shí) 9 8 4 0 8 9 b 時(shí) 7 4 4 1 6 7 4 時(shí) 3 8 4 0 8 9 d 時(shí) 2 6 4 1 4 1 小時(shí) 平均分別持續(xù) 7 士o 6 3 4 時(shí) 6 4 0 7 7 4 時(shí) 4 4 0 4 4 小時(shí) 2 l o 4 4 小時(shí) 2 4 0 6 3 小時(shí) 研究論文 3 不同溫度下絲光綠蠅幼蟲頭咽骨各部位長度 幾丁質(zhì)化程 度和后氣門橫徑隨時(shí)間的變化 從圖1 4 1 9 及表1 6 中可以看出 在恒定溫度下 幼蟲頭 咽骨及其鉤部 咽骨的腹角 背角長度均隨時(shí)間延長而增加 且增加呈階段性 即在每個(gè)齡期內(nèi)部變化不大 齡期更替前 后增長明顯 尤以二齡末到三齡初增長迅速 達(dá)到最大長度 后 隨時(shí)間的延長 基本維持不變 如在2 8 條件下 絲光 綠蠅幼蟲在三齡期時(shí) 頭咽骨 口鉤 咽骨背角 咽骨腹角 長度很快達(dá)到最大值分別在1 1 7 1 2 8 r a m 0 3 0 0 3 4 m m 0 4 4 4 3 4 7 m m 0 2 0 0 2 4 m m 之間 各平均為1 2 4 m m 0 3 3 r a m 0 4 6 m m 0 2 2 m m 但是此時(shí)幼蟲頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度卻 在逐漸增大 平均分別為7 6 4 9 4 3 5 2 8 0 3 5 a 2 3 4 8 2 3 8 4 2 6 5 8 4 2 7 4 1 8 2 8 7 3 2 37 0 4 9 0 0 0 1 5 2 9 1 0 3 士1 2 5 后氣門橫徑的生長變化趨勢(shì)與頭咽骨基本相同 幼蟲期 逐漸增長 但在三齡期很快達(dá)到最大值后變化不大 1 4 研究論文 附圖 f i g 1t h el a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo fl u c i l i as e r i c a t a a t2 0 c 1 2h o u r s f i g 2t h el a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a is c l e r i t eo fl u c i l i as e r i c a t a a t2 0 c 4 8h o u r s 研究論文 f i g 3t h el a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo fl u c i l i as e r i c a t a a t2 0 c 6 0h o u r s f i g 4t h el a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo fl u c i l i as e r i c a t a a t2 0 c 1 0 8h o u r s 1 6 研究論文 f i g 5t h e l a r v a lt h o r no f l u c i l i as e r i c a t aa t2 0 c 9 6h o u r s f i g 6t h el a r v a la n t e r i o rs p i r a c l eo f l u c i l i as e r i c a t aa t2 0 c 7 2 h o u r s 1 7 研究論文 f i g 7t h el a r v a la n t e r i o rs p i r a c l eo fl u c i l i as e r i c a t aa t2 0 c 15 6 h o u r s f i g 8t h el a r v a lp o s t e r i o rs p i r a c l eo fl u c i l i as e r i c a t aa t2 0 c 3 6h o u r s 1 8 研究論文 f i g 9t h el a r v a lp o s t e r i o rs p i r a c l eo fl u c i l i as e r i c a t aa t2 0 2 9 6 h o u r s f i g 1 0t h el a r v a lp o s t e r i o rs p i r a c l eo f l u c e i as e r i c a t aa t2 0 c 1 4 4 h o u r s 1 9 研究論文 f i g 11t h ee e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo ft h el a r v a ld o u b l ea g e o f l u c i l i as e r i c a t aa t2 0 c 3 2 h o u r s f i g 1 2t h ec e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t ea n da n t e r i o rs p i r a c l eo f t h el a r v a ld o u b l ea g eo f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 c 11 2h o u r s 2 0 研究論文 f i g 1 3t h ep o s t e r i o rs p i r a c l eo ft h el a r v a ld o u b l ea g el u c i l i a s e r i c a t aa t1 6 c 1 1 2h o u r s 2 1 研究論文 f i g 1 4t h eg r o w t hc u r v eo fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 2 0 c 2 4 2 8 c a n d3 2 f i g 15 t h eg r o w t hc u r v go fl a r v a lm o m hh o o ko fl u c i l i a s e r i c a t aa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 c a n d3 2 c 研究論文 f i g 1 6t h eg r o w t hc u r v eo fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e v e n t r a lc o r n e ao f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 0a n d 3 2 f i g 1 7t h eg r o w t hc u r v eo fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e d o r s a lc o r n e ao f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 ca n d 3 2 研究論文 f i g 18t h eg r o w t hc u r v eo fl a r v a lp o s t e r i o rs p i r c l ed i a m e t e ro f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 c a n d3 2 c f i g 1 9t h ee x t e n to fc h i t i no fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t e o f l u c i l i as e r i c a t aa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 c a n d3 2 c 2 4 研究論文 1 4 0 1 2 0 一1 0 0 君8 0 專 6 0 一 4 0 2 0 0 1 6 2 0 2 4 2 8 3 2 t e m p e r a t u r e 圜 at i mt i m eo fa p p e a r a n c ea n dc o n t i n u a t i o no ft h el a r v a ld o u b l ea g ef r o mo a g et o t w oa g e bt h et i m eo fa p p c a r a n e ea n dc o n t i n u a t i o no f 山el a r v a ld o u b l ea g ef r o mt w oa g et o t h r e ea g e f i g 2 0t h et i m eo fa p p e a r a n c ea n dc o n t i n u a t i o no ft h el a r v a l d o u b l ea g eo fl u c i l i as e r i c a t oa t1 6 c 2 0 c 2 4 c 2 8 c a n d 3 2 2 5 研究論文 附表 t a b l e lt h el e n g t ho fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t eo f l u c i l i as e r i c a t au n d e rv a r i o u sc o n s t a n tt e m p e r a t u r e s m e a n s d r a m t i m e h 1 6 c 2 0 c 2 4 c2 8 c3 2 c 研究論文 t a b l e 2t h el e n g t ho fl a r v a lm o u t hh o o ko f l u c i l i as e r i c a t a u n d e rv a r i o u sc o n s t a n tt e m p e r a t u r e s 1 m e a n 士 s d m m t m i h 1 6 2 0 2 4 2 8 3 2 1 2 2 4 3 6 4 8 6 0 7 2 8 4 9 6 1 0 8 1 2 0 1 3 2 1 4 4 1 5 6 1 6 8 1 8 0 1 9 2 2 0 4 2 1 6 2 2 8 2 4 0 2 5 2 2 2 7 6 00 3 士0 0 1 00 4 士 0 0 1 o 0 3 士0 0 1 00 5 t 00 3 00 9 a 0 0 4 0 1 2 士o0 3 0 1 0 士o0 2 o 1i l 0 0 3 o 1 0 b 0 0 4 o 2 l 士o 0 4 0 2 5 士00 2 0 2 4 l 00 2 0 2 b 士o 0 4 0 3 1 1 00 3 0 3 1 t 0 0 3 0 3 2 士o0 3 o3 2 士o 0 3 o 3 0 士o 0 3 03 i l 0 0 2 03 0 士 0 0 2 0 3 2 士o 0 3 03 0 x 0 0 4 0 1 3 0 士0 0 4 00 4 士 0 0 1 0 0 4 00 2 0 0 6 k 0 0 3 0 1 2 士0 0 4 0 1 l t 00 3 0 1 3 k 00 3 01 1 l 0 0 2 o 1 2 0 o l o 1 3 士00 2 02 6 士 0 0 3 03 0 士0 0 3 o3 2 0 0 2 0 3 0 0 0 3 0 2 8 士o 0 3 0 3 l 士o 0 2 0 3 0 士o0 2 o 3 2 士o 0 2 0 3 2 1 0 0 3 0 0 41 0 0 2 0 0 6 士 0 0 2 0 1 l l o 0 3 01 4 1 0 0 2 o 1 2 士o 0 3 o1 2 0 0 4 02 9 x 0 0 3 o 3 l t o0 3 0 3 3 t 0 0 2 o 3 l t 0 0 2 o3 3 士0 0 3 o3 3 l 0 0 2 0 0 4 e 0 0 2 o 1 2 士0 0 4 0 1 4 o 0 2 03 0 士 0 0 3 0 3 2 士o 0 2 0 3 4 1 0 0 3 0 3 2 士0 0 2 0 3 4 士 00 2 0 3 4 1 0 0 3 0 3 3 1 0 0 2 0 0 5 l 9 o l 0 1 4 1 0 0 4 0 3 3 士o 0 5 03 5 士o 0 3 0 3 4 e 0 0 2 o 3 6 士0 0 2 0 3 4 主 0 0 3 0 3 4 l 0 0 2 2 8 803 l 士o0 3 2 7 研究論文 t a b l e 3t h el e n g t ho fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e f i t ed o r s a l c o r n e ao f l u c i l i as e r i c a t au n d e rv a r i o u sc o n s t a n tt e m p e r a t u r e s m e a n s d r a m 研究論文 t a b l e 4t h el e n g t ho fl a r v a lc e p h a l o p h a r y n g e a ls c l e r i t ev e n t r a l g o f i l e ao f l u c i l i as e r i c a t au n d e rv a i l o i l sc o n s t a n t t e m p e r a t u r e s m e a n s d r a m b m e i i 1 6 2 0 2 4 2 8 3 2 1 2 0 0 4 0 0 l 00 4 0 0 1 0 0 4 i 00 2 0 0 4 b 0 0 20 0 5 士o 0 2 2 400 3 士0 0 20 0 4 士o0 2 0 0 5 1 00 3 0 1 2 4 0 0 50 1 4 1 0 0 2 3 60 0 4 t 0 0 20 0 5 1 0 0 30 1 1 1 0 0 2 0 1 4 r o 0 40 2 0 o 0 3 4 8 0 0 5 士0 0 30 1 0 士0 0 30 1 4 1 0 0 4 0 2 1 1 0 0 30 2 2 a 00 2 6 00 1 l t o 0 301 3 士o0 20 1 3 1 00 3 0 2 3 1 0 0 20 2 壯o 0 4 7 2 0 1 0 i 0 0 40 1 4 t 0 0 30 1 4 00 4 0 2 4 t 0 0 30 2 3 1 0 0 3 8 4 0 1 2 a o 0 301 2 1 0 0 40 2 0 士00 2 0 2 2 i 0 0 30 2 3 1 0 0 4 9 6 01 3 00 20 1 3 士 00 30 18 t 00 5 0 2 0 i 0 0 202 4 1 0 0 3 1 0 80 1 9 士o 0 40 1 8 1 0 0 30 2 2 1 0 0 4 0 2 2 1 0 0 3 1 2 00 1 7 l o 0 20 1 8 士 0 0 2 0 2 4 1 0 0 30 2 0 2 0 0 2 1 3 20 2 0 士 0 0 102 0 a o 0 30 2 7 00 2 1 4 40 1 9 士0 0 20 2 l l 0 0 3 1 5 60 2 1 1 0 0 30 2 0 士00 2 1 6 80 2 3 00 4 0 2 2 i 0 0 3 1 8 002 2 士0 0 40 2 4 0 0 3 1 9 20 2 3 0 0 3 0 2 2 l 0 0 4 2 0 4 0 2 2 士 0 0 30 2 3 1 0 0 3 2 1 60 2 2 土00 20 2 2 0 0 3 2 2 80 2 3 1 0 0 3 2 4 0 0 2 3 t o 0 3 2 5 20 2 2 0 0 2 2 6 4 0 2 3 1 0 0 3 2 7 602 2 士00 4 2 8 8 0