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固定化酶的制備和應(yīng)用基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)知識(shí)點(diǎn)一固定化酶及其制備1酶的固定方法主要有以下哪些 ()吸附法載體偶聯(lián)法包埋法交聯(lián)法a bc d2制備固定化乳糖酶時(shí)要用緩沖液配制凝膠單體,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是 ()a酶活性不受溫度的影響b酶活性易受酸堿度的影響c緩沖液配制凝膠單體是保持溶液中ph的相對(duì)穩(wěn)定d緩沖液配制凝膠單體可以保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程中酶的活性3下列不屬于固定化酶作用的特點(diǎn)的是 ()a有利于酶與產(chǎn)物分解b可以被反復(fù)利用c能自由出入依附的載體d一種固定化酶一般情況下不能催化一系列酶促反應(yīng)4下列不屬于固定化乳糖酶優(yōu)越性的是 ()a對(duì)酸、堿耐受力增強(qiáng),且熱穩(wěn)定性強(qiáng)b可以一直使用,縮短生產(chǎn)周期c使成本顯著降低d有利于酶的活性知識(shí)點(diǎn)二固定化酶的應(yīng)用5研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸二酯酶固定到尼龍膜上制成制劑,可用于降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥,與微生物降解相比,其作用不需要適宜的 ()a溫度 bph c水分 d營(yíng)養(yǎng)6將鮮牛奶進(jìn)行無(wú)菌操作的正確方法是 ()a將牛奶進(jìn)行高壓蒸汽滅菌b將牛奶進(jìn)行加熱煮沸滅菌c將牛奶在85 90 下巴氏滅菌d以上三種方法均可7乳糖酶是一種二糖酶,它的作用是 ()a能將所有的二糖分解b能將麥芽糖分解成兩分子葡萄糖c能將動(dòng)物體內(nèi)糖原水解成葡萄糖d能將乳糖分解成半乳糖和葡萄糖8下列說(shuō)法中,哪項(xiàng)不是在應(yīng)用酶的過(guò)程中常遇見(jiàn)的問(wèn)題 ()a酶與反應(yīng)物混合,產(chǎn)品難以提純b酶在生物化學(xué)反應(yīng)中往往難以回收c酶遇強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫等條件易失活d酶作為催化劑,絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)能力提升9下列關(guān)于固定化酶中酶的說(shuō)法,正確的是 ()a酶的種類多樣,可催化一系列的酶促反應(yīng)b酶被固定在不溶于水的載體上,可反復(fù)利用c酶作為催化劑,反應(yīng)前后結(jié)構(gòu)不改變,所以固定化酶可永遠(yuǎn)利用下去d固定化酶由于被固定在載體上,所以喪失了酶的高效性和專一性特點(diǎn)10目前,酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域,下列哪項(xiàng)屬于應(yīng)用中面臨的實(shí)際問(wèn)題 ()a酶通常對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫非常敏感,但對(duì)有機(jī)溶劑不敏感b酶的結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定,所以催化功能很高c酶直接用于生產(chǎn)時(shí)可能會(huì)混在產(chǎn)物中,影響產(chǎn)品的質(zhì)量d直接用于生產(chǎn)中的酶可以多次利用11關(guān)于固定化乳糖酶的溶解操作,正確的是 ()a將一定量的乳糖酶溶解在蒸餾水中b將一定量的乳糖酶溶解在56 ml 0.05 mol/l ph 7.3的磷酸緩沖液中c準(zhǔn)確稱取乳糖酶100 mg,然后將其溶解在arc濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%,交聯(lián)劑bis濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的溶液中d準(zhǔn)確稱取乳糖酶100 mg,然后將其溶解在56 ml 0.05 mol/l ph 7.3的磷酸緩沖液中,其中單體arc濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%,交聯(lián)劑bis濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%(其中含arc和bis的磷酸緩沖液要過(guò)濾,除去不溶物)12固定化乳糖酶制備過(guò)程中與漂洗操作的相關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是 ()a聚合反應(yīng)形成的凝膠直接用相應(yīng)的緩沖液洗46次b用磷酸緩沖液沖洗,是為了維持酶的活性c用相應(yīng)的緩沖液沖洗46次,是為了將表面殘余的沒(méi)有固定的酶沖洗干凈d沖洗后的凝膠應(yīng)放在0 4 保存?zhèn)溆?,以保持酶的活?3回答下列有關(guān)固定化乳糖酶的制備和應(yīng)用的問(wèn)題。(1)制作固定化乳糖酶及檢測(cè)牛奶中乳糖的分解步驟分別為:乳糖酶的溶解_;_固定化酶的回收。(2)在制備固定化乳糖酶的過(guò)程中,乳糖酶溶解時(shí),用磷酸緩沖液的目的是_。(3)檢測(cè)乳糖酶對(duì)牛奶的分解時(shí),為了使實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象更明顯,可以適當(dāng)_。(4)固定化乳糖酶的回收過(guò)程是_。(5)牛奶中乳糖檢測(cè)的原理是_。14固定化酶是從20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來(lái)的一種技術(shù)。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)科研人員利用雙重固定法,即采用戊二醛作交聯(lián)劑(使酶相互連接),海藻酸鈉作為包埋劑來(lái)固定小麥酯酶,研究固定化酶的性質(zhì),并對(duì)其最佳固定條件進(jìn)行了探究。下圖顯示的是部分研究結(jié)果(注:酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率,包括酶活性和酶的數(shù)量),分析回答:(1)從對(duì)溫度變化適應(yīng)性和應(yīng)用范圍的角度分析,甲圖所示結(jié)果可以得出的結(jié)論是_。(2)乙圖曲線表明濃度為_(kāi)的海藻酸鈉包埋效果最好,當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí),酶活力較低的原因是_。(3)固定化酶的活力隨使用次數(shù)的增多而下降,由丙圖可知,固定化酯酶一般可重復(fù)使用_次,以后酶活力明顯下降。(4)固定小麥酯酶不采用海藻酸鈉直接包埋,同時(shí)用戊二醛作交聯(lián)劑,這是因?yàn)開(kāi)。個(gè)性拓展15利用酶生產(chǎn)高果糖漿:用淀粉酶將玉米粉水解生成單糖,再用糖化酶處理產(chǎn)生95%97%的葡萄糖溶液。葡萄糖的甜度比蔗糖低得多,但利用葡萄糖異構(gòu)酶將葡萄糖異構(gòu)化轉(zhuǎn)變成果糖,就可以解決這一問(wèn)題。再通過(guò)淀粉酶、糖化酶和固定化葡萄糖異構(gòu)酶,將玉米粉轉(zhuǎn)化成含葡萄糖50%、果糖42%、其他糖8%的反應(yīng)物,稱為高果糖漿或果葡糖漿。它雖然是一種混合物,但甜度與蔗糖相當(dāng),比葡萄糖高出許多,因此,在飲料、食品生產(chǎn)中大量應(yīng)用。現(xiàn)在,一些發(fā)達(dá)國(guó)家高果糖漿的年產(chǎn)量已達(dá)幾百萬(wàn)噸,高果糖漿在許多飲料的制造中已經(jīng)逐漸代替了蔗糖。(1)在生產(chǎn)高果糖漿的過(guò)程中,為了使葡萄糖異構(gòu)酶反復(fù)使用,采用了什么技術(shù)?_。(2)在上述生產(chǎn)過(guò)程中,若直接用固定化葡萄糖異構(gòu)酶處理單糖,能得到高果糖漿嗎?說(shuō)明理由。_。(3)為使固定化葡萄糖異構(gòu)酶發(fā)揮最大催化效果,在生產(chǎn)過(guò)程中需要注意什么?_。(4)如何測(cè)定葡萄糖異構(gòu)酶的最適ph和最適溫度?寫出大致的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。_。答案1a2a3c4b5d6c7d8d 9b10c11d 12a13(1)聚合漂洗鮮牛奶的處理加酶分解檢測(cè)乳糖的分解(2)酶活性易受溫度和酸堿度的影響,用緩沖液配制凝膠單體是為了保持溶液中ph的相對(duì)穩(wěn)定,從而保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程中酶的活性(3)減少底物牛奶的量或增加固定化酶的含量,或適當(dāng)延長(zhǎng)保溫時(shí)間(4)實(shí)驗(yàn)完成后,用緩沖液反復(fù)洗滌固定化酶,再用體積分?jǐn)?shù)為0.05%的雙氧水洗滌,以防固定化酶被微生物污染,然后于0 4 下保存(5)還原糖是指含有自由醛基或酮基的單糖及某些二糖如乳糖和麥芽糖等。在堿性溶液中還原糖能將二價(jià)銅離子還原,而糖本身可以氧化成各種羥酸14(1)固定化酯酶比游離酯酶對(duì)溫度變化適應(yīng)性更強(qiáng)且應(yīng)用范圍較廣(2)3%海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密,酶分子容易漏出,數(shù)量不足(3)3(4)酶分子很小,很容易從包埋材料中漏出15(1)固定化酶技
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