家兔基礎實驗操作及注意事項總結.doc

基本技能操作經驗總結（一） 家兔的給藥、基本手術及相關儀器的初步使用1. 家兔的捉拿【實驗方法】 先輕輕打開籠門，勿使其受驚，隨后手伸入籠內，從頭前阻攔其跑動，一只手迅速抓住兔的頸背部的皮毛，慢慢提起家兔，然后用另一只手輕輕托住臀部，盡量使兔處在舒適、放松的狀態(tài)。【注意事項】避免抓住耳朵提拿家兔，這樣不但會損傷家兔的耳朵，而且易引起家兔的緊張并激起掙扎和反抗。抓取動物時手法不當，動作過激導致家兔驚嚇， 產生強烈掙扎而長時間處于激動狀態(tài)，大腦皮層細胞興奮閾值增加，腎上腺素的釋放，大腦中樞電位頻率增高，大腦皮層運動區(qū)過度興奮，導致麻醉效果不佳。2. 家兔的稱重與放置【實驗方法】兔籠放置在電子秤上，去皮。將兔子脖子卡住兔籠頭端的凹槽，蓋上兔籠蓋，使兔子呈趴伏狀，記錄數據。壓住兔籠蓋和后座，將兔籠轉移到操作臺準備實驗?！咀⒁馐马棥客没\重量提前去皮；盡量避免頭尾不對應；時刻注意壓住兔籠蓋，避免轉移途中兔子掙脫。3. 耳緣靜脈麻醉【實驗方法】穿刺前準備工作： 穿刺前應拔除待穿刺血管部位的兔毛，輕柔或以手指輕彈待穿刺的血管使其充血擴張，或用酒精棉球涂擦待穿刺的血管使血管擴張。穿刺手法：左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠端，無名指及小指墊在下面，右手持頭皮針盡量從靜脈的遠端刺入。若回抽注射器有暗紅色血液流出或注射時若無阻力、無隆起現象，說明針頭在血管內。移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液緩慢注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。l 注：本實驗所用麻醉藥烏拉坦用藥劑量為1000 mg/Kg?！咀⒁馐马棥?. 進針部位宜選擇在耳緣靜脈遠心端的血管段，若穿刺失敗，可向近心端前移一段再進行穿刺；2.可利用酒精棉球擦拭使耳緣靜脈血管擴張，便于操作；3. 靜脈注射必須緩慢（大概每分鐘推送5ml ），同時觀察家兔肌肉緊張、角膜反射和對皮膚夾捏的反應，當這些活動明顯減弱或消失時，應立即停止注射。在注射麻醉藥物時，可先用麻醉藥物總量的三分之二，密切觀察動物生命體征的變化，若已達到預計麻醉效果剩余藥液可暫不注射，以避免麻醉過深抑制呼吸中樞導致動物死亡；4. 實驗動物的固定【實驗方法】將動物麻醉后，仰臥位固定于手術臺上，頸部伸直，口腔與氣管成一直線，保持氣管暢通。用粗麻繩打類蝴蝶結固定家兔四肢，用棉麻線套住家兔上切牙固定在兔臺頭端，使家兔四肢和頭部伸展并固定。【注意事項】1.打結最好打利于捆縛的結，避免家兔掙脫。2.盡量使頸部抻直，避免扭曲。5.清理兔毛【實驗方法】使用彎頭兔毛剪剪掉實驗部位兔毛?！咀⒁馐马棥?.左手捏住要剪的兔毛，方便剪掉后及時清理。注意不要將兔毛掕起，這樣容易剪到皮膚和皮下神經，引起兔子的強烈掙扎。2.盡量清理干凈，并且避免兔毛亂飛，可在廢物桶中加水防止兔毛亂飄。6. 組織切開【實驗方法】1組織切開的一般原則 (1)根據實驗目的要求確定手術切口的部位和大小。如腎切除取左背部斜切口，腸切除取腹正中切口。 (2)根據不同部位的切口采用不同的執(zhí)刀方法，常用的執(zhí)刀方法有三種，如圖1。【注意事項】 (1)切開前，應先將切口部位的皮膚(或其他組織)拉緊，使其平坦緊張而固定。 (2)刀刃與切開的組織垂直，以一次切開為佳。 (3)組織要逐層切開，并以按皮膚紋理或各組織的纖維方向切開為佳。圖1執(zhí)刀方法和組織切開方法(4)組織的切開處應選擇無重要血管及神經橫貫的地方，以免將其損傷。(5)選擇切口時，應注意選擇易于敷料或導管包扎和固定的部位。避免術后動物活動時被碰撞、磨擦而脫落。7. 組織分離【實驗方法】分離目的在于充分顯露深層的組織或血管，便于手術操作。1組織分離的一般原則 (1)根據不同部位手術的需要采用不同的分離方法。常用的分離方法有兩種：用刀或剪作銳性分離，用剪割的方式將組織分離。該方法常用于致密組織，如皮膚、韌帶、筋膜等的分離。用止血鉗、手指或刀柄等將組織推開或牽拉開的鈍性分離。該法多用于皮下組織、肌肉筋膜間隙等疏松組織的分離。 (2)沿正常組織間隙分離。這樣易于分離，且出血少，視野干凈、清楚?！咀⒁馐马棥?(1)肌肉的分離應順肌纖維方向作鈍性分離。若需要橫行切斷分離，應在切斷處上下端先夾兩把血管鉗，切斷后結扎兩斷端以防止肌肉中血管出血。 (2)神經、血管的分離應順其平行方向分離。要求動作輕，柔，細心操作，不可避暴，切忌橫向過分拉扯，以防斷裂。8. 氣管內插管【實驗操作】氣管插管的目的主要是為了輔助呼吸、測定氣道壓力、通氣量以及描記呼吸曲線等。 氣管的暴露和分離 切開皮膚后，對肌肉、氣管、血管和神經的分離應用止血鉗進行鈍性分離。鈍性分離皮下組織，暴露頸部肌肉，分開頸部正中肌群即可看到氣管。在甲狀腺下11.5cm處，用止血鉗將氣管后的軟組織稍加分離，在氣管下穿二條較粗的結扎線，準備結扎固定氣管插管之用。 氣管插管 在甲狀腺以下約12 cm處，用手術剪將氣管軟骨環(huán)剪一倒 “T”型切口，剪開氣管口徑約一半以上，用棉簽向肺方向擦凈氣管內分泌物，然后再向肺方向插入氣管插管。用已穿好的粗線扎緊后，再在插管的側管上打結，以防插管脫出?！咀⒁馐马棥?.切忌粗暴操作，小心勿傷及甲狀腺及氣管兩側后方的靜脈；2. 不要在軟骨環(huán)之間的氣管組織切開，因此處血管較多，如仍有出血，可用溫濕紗布壓撥迫片刻，同時將兔臺后部抬高，使兔頭位置低下，以防止血液流入氣管造成窒息，出血停止后再做插管；3. 插管前注意檢查氣管內有無內分泌物，有的話先清理氣管后插管；插管后，若氣管內分泌物或血液較多，可用一細塑料管從插管的側管處將液體吸出。4. 用已穿好的粗線扎緊后，再在插管的側管上打結，以防插管脫出；5. 氣管插管的過程中應隨時注意觀察動物的呼吸變化。最好隔一段時間放開被夾閉的Y型管軟管，避免人為性呼衰。9. 頸總動脈的分離及插管【實驗操作】沿胸鎖乳突肌前緣分離胸骨舌骨肌與胸骨甲狀肌之間的結締組織，在肌縫下找到呈粉紅色較粗血管，用手指觸之有搏動感，即為頸總動脈。分離頸總動脈時應選在距甲狀腺以下較遠地方開始，防止將甲狀腺前動脈切斷，用玻璃分針輕輕分離該動脈與神經之間結締組織，切勿損傷血管和神經。在分離好的頸總動脈下面穿過兩根結扎線，先結扎遠心端，再用動脈夾夾閉血管近心端。于遠心端結扎線前用眼科剪呈45角做V型切口，剪開血管管徑的1/31/2。將準備就緒的動脈導管插入血管2cm3cm，用備用線將導管與血管牢固結扎并與遠心端結扎線連接扎緊，以防導管滑脫出血管。取下動脈夾，可見導管中有動脈回血，并隨心跳而搏動。用少許肝素將回血推回血管內，實時觀察血壓?！咀⒁馐马棥?. 分離頸總動脈時應選在距甲狀腺以下較遠地方開始，防止將甲狀腺前動脈切斷，并且切勿損傷血管和神經。伴行血管的一束神經包括：迷走神經最粗且明亮；交感神經次之，光澤較暗；最細的是減壓神經；2. 為了便于動脈插管，頸總動脈應盡量分離得長一些。一般家兔4cm5cm，豚鼠和大鼠2c m3cm；3. 結締組織盡量分離干凈，否則插管時容易插到膜內；4. 兩根結扎線可通過一根線對折穿過動脈下后剪斷獲得。遠心端結扎線和備用結扎線一定要結扎緊，避免出血；5. 動脈夾操作時一定要小心避免磨破動脈，最好將動脈夾深入頸總動脈下于動脈夾中段夾閉血管，以防夾閉不完全；6. 插入血管內插管盡量長，此時易于固定。但是一定不要插到動脈夾夾閉處，因為插管和動脈夾都是硬性材料，兩廂觸碰易使動脈管破裂；7.噴血時，應迅速找到出血口，并及時夾閉近心端血管，并用棉球清理創(chuàng)面；若還是出血不止，則考慮是否是遠心端結扎線未扎緊，這時夾閉遠心端；若各種措施都不起效，則可以考慮完全結扎實驗側頸總動脈；8.若是少量出血，則可能只是毛細血管受到損傷，這是可用棉球輕輕壓迫創(chuàng)面即可止血。10. 輸尿管插管【實驗方法】下腹部剪毛，普魯卡因局麻，在恥骨聯(lián)合向上沿中線做長約4cm的切口，沿腹白線切開腹膜，暴露出膀胱，并將膀胱翻向體外，在膀胱底部找到并分離兩側輸尿管，在輸尿管靠近膀胱處用線結扎，略等片刻，待輸尿管略充盈后，用眼科剪剪一小口，向腎臟方向插入一根細塑料管，結扎，收集尿液?！咀⒁馐马棥?.家兔膀胱十分脆弱，分離時應用鑷子探查，避免直接用手術刀或剪刀粗暴分離；2.輸尿管位置較深，分離和插管時需一人協(xié)助撥開腸子和拉扯膀胱，此時需注意用力大小，用力過大時膀胱會因尿液排出而迅速縮?。ú⒉挥绊憣嶒灒?.如果可以，分離輸尿管時避免損傷伴行血管，否則會大出血影響視線；4.輸尿管近膀胱處結扎后，可略等片刻，待輸尿管略充盈后在剪口插管，會容易很多；5.插管的管子剪口需有一定銳度，但銳度過高易損傷輸尿管；插管時，可轉動插管，使斜面向下，否則易撕裂輸尿管。11.處死【實驗方法】空氣栓塞法【注意事項】判斷家兔死亡的標準可以是呼吸停止，這是可能生物電還存在波動，可能原因是心臟自律細胞還在活動，但此時心臟功能細胞其實已經停止工作，故可以判定為死亡。12.其他注意事項1.創(chuàng)面長時間開放時，可撒些生理鹽水或用生理鹽水浸潤的紗布覆蓋，以防組織風干；2