胎膜早破時母血、羊水、臍血中細胞因子IL-6、IL-8、VCAM-1含量監(jiān)測及其臨床價值.doc

胎膜早破時母血、羊水、臍血中細胞因子IL-6、IL-8、VCAM-1含量監(jiān)測及其臨床價值【關鍵詞】 胎膜 【摘要】 目的 探討母血、羊水、臍血中三種細胞因子白細胞介素-6、8(interleukin-6、8)、血管細胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule, VCAM-1)對胎膜早破、絨毛膜羊膜炎和新生兒預后判斷的臨床意義。方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測58例胎膜早破及38例正常妊娠孕婦(對照組) 母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1水平的動態(tài)變化，同時進行胎膜的病理檢查。結果 胎膜早破組母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量均高于對照組，母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量隨破膜時間的延長而增高，尤其破膜時間超過24h增高更為明顯。絨毛膜羊膜炎患者母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1水平明顯高于非絨毛膜羊膜炎患者，差異具有顯著性（P0.05, P0.01），胎膜早破組產(chǎn)婦所生新生兒Apgar評分7分者，其母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量顯著高于Apgar8分的新生兒（P0.05,P0.01）。結論 IL-6、IL-8、VCAM-1三種細胞因子聯(lián)合檢測可用于胎膜早破并絨毛膜羊膜炎的早期診斷，對新生兒預后判斷也具有一定的臨床價值。 【關鍵詞】 白細胞介素-6；白細胞介素-8；血管細胞黏附分子-1；胎膜早破；絨毛膜羊膜炎 Maternal serum, amniotic fluid,umbilical cord serum cytokine levels in pregnancies complicated by PROM LU Dan,WANG Zhi-xue,WANG Xiao-ling,et al. Department of Obstetrics and Gynecology, Yangzhou University College of Medicine, Yangzhou 225001,China 【Abstract】 Objective To evaluate the maternal serum, umbilical cord plasma and amniotic fluid cytokines levels(IL-6,IL-8 and VCAM-1) in pregnancies complicated by premature rupture of membranes (PROM).Methods The levels of IL-6,IL-8 and VCAM-1 were detected by enzyme linked immunosorbent assay in maternal serum,amniotic fluid,umbilical cord serum of 58 pregnant women with PROM and 38 women with normal pregnancies. Chorioamnionitis was histopathologically confirmed after delivery.Results The levels of IL-6,IL-8 and VCAM-1 were significantly higher in maternal serum,amniotic fluid,umbilical cord serum in patients with PROM group than those of the control group（P0.05,P0.01）.Thelongerthe duration from rupture of membrances to delivery was,the more serious chorioamnionitis was,and the higher the levels of IL-6,IL-8 and VCAM-1 in maternal serum,amniotic fluid,umbilical cord serumwere. The levels of IL-6,IL-8 and VCAM-1were significantly higher in maternal serum,amniotic fluid,umbilical cord serum in patients with chorioamnionitis than those of non-chorioamnionitis（P0.05,P30個為重度。中性粒細胞中重度浸潤者診斷為絨毛膜羊膜炎。 1.3 標本采集及處理 所有胎膜早破孕婦在確診破膜后，常規(guī)消毒外陰、陰道及宮頸，窺器擴張陰道，手壓宮底用無針頭注射器抽取羊水3ml, 剖宮產(chǎn)者在切開子宮肌層、暴露胎膜后用注射器抽取羊水3ml，所得羊水均經(jīng)離心5min(2500r/min)后留取上清待測；胎兒娩出后抽取臍血5ml,分離血清待測。兩組孕婦均于分娩前抽取肘靜脈血3ml，離心處理后留取血清，所有標本均在-70保存，集中測定；兩組孕婦均在產(chǎn)后取胎膜2cm2cm，10%甲醛固定送病檢。 1.4 實驗試劑 IL-6、IL-8、VCAM-1是由上海森雄科技實業(yè)有限公司提供，采用雙抗體夾心ABC-ELISA方法，按說明書操作。 1.5 統(tǒng)計學方法 所有資料用SPSS統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計處理，t檢驗。 2 結果 2.1 胎膜早破孕婦血清、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1水平變化 胎膜早破母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量均高于對照組，與對照組比較差異具有顯著性（P0.05,P0.01）。見表1。 2.2 破膜時間與母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的關系 母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量隨破膜時間的延長而增高,尤其破膜時間超過24h增高更為明顯。與對照組比較差異具有顯著性（P0.05,P0.01）。見表2。 2.3 母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的水平與絨毛膜羊膜炎的關系對兩組96例孕婦進行胎膜病理檢查，發(fā)現(xiàn)絨毛膜羊膜炎患者15 例，胎膜早破組占13例，感染率22.4%，而正常妊娠組僅占2例，感染率5.3%。測定結果顯示，絨毛膜羊膜炎患者母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1水平明顯高于非絨毛膜羊膜炎患者，差異有顯著性(P0.05,P0.01)。見表3。 2.4 Apgar評分不同的母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量比較胎膜早破組產(chǎn)婦所生新生兒Apgar評分7分者，其母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量顯著高于Apgar8分的新生兒（P0.05,P0.01）。見表4。 表1胎膜早破孕婦血清、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1水平變化 (略) 表2破膜時間與母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的關系 (略) 表3母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的水平與絨毛膜羊膜炎的關系 ( 略) 表4Apgar評分不同的母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量比較 (略) 3 討論 3.1 IL-6、IL-8、VCAM-1的生物學效應與妊娠結局 細胞因子是妊娠過程中重要的輔助因子，參與妊娠的過程，但當其含量異常增高或降低時均表現(xiàn)為病理妊娠。細胞因子的釋放與產(chǎn)程發(fā)動有關。IL-6、8為炎性細胞因子，主要來自中性粒細胞、絨毛膜細胞、羊膜細胞和滋養(yǎng)層細胞，參與人體的免疫和炎癥反應。IL-6、8對中性粒細胞和免疫細胞具有激活和活化作用，調節(jié)白細胞與內皮細胞的黏附過程，可以客觀地反映宮內感染的狀況。當妊娠合并絨毛膜羊膜炎時，機體對細菌及其代謝產(chǎn)物產(chǎn)生應答，分泌IL-6、8直接釋放入血、臍血和羊水中。羊水中的IL-6、8則通過在宮內激活中性粒細胞和彈性蛋白酶破壞絨毛膜-蛻膜細胞外基質接觸面而導致胎膜早破。胎膜早破則進一步加重宮腔內感染而產(chǎn)生一系列病理生理過程，并發(fā)絨毛膜羊膜炎或產(chǎn)程延長的孕產(chǎn)婦，其胎兒、新生兒感染率明顯增加2。 在妊娠過程中，妊娠組織的各種細胞和細胞外基質均有不同種類、不同程度的表達，對妊娠細胞的分化、發(fā)育、功能等起一定的作用，以確保胎兒在母體正常的免疫微環(huán)境中存活，是維持妊娠順利的一個重要機制。血管細胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule，VCAM-1)是細胞黏附分子家族的重要成員，跨膜表達于血管內皮細胞上。多種細胞因子和炎性介質(IL-1、IL-4、TNF-)均可刺激血管內皮細胞產(chǎn)生VCAM-1并轉運到內皮細胞膜表面，與白細胞上的VLA-4相連致白細胞活化，從而釋放多種顆粒物質，包括彈性蛋白酶、自由基和白三烯。由于VCAM-1的存在，白細胞還通過內皮細胞間的連接處進入組織，引起炎癥反應，可吸引更多的白細胞到內皮細胞上，造成嚴重的損傷，進而導致一系列的病理生理反應，造成胎膜早破。 3.2 胎膜早破及胎膜早破并絨毛膜羊膜炎與IL-6、IL-8、VCAM-1的相關性在臨床工作中，對于胎膜早破孕產(chǎn)婦什么時候并發(fā)羊膜腔感染，是否應該給予預防性使用抗生素尚存在一定的盲目性。Pfeiffer 等3研究表明，母血IL-6的變化可以作為羊膜腔感染和新生兒感染的早期預測指標。Poniedzialek-Czajkowska 等4則認為母血IL-8對胎膜早破以及羊膜腔感染有預測價值。Witczak 等5指出產(chǎn)前并發(fā)胎膜早破患者，其羊水以及母血中IL-6、IL-8水平明顯高于正常產(chǎn)婦，在病理情況下，如羊膜腔發(fā)生感染時，除蛻膜和絨毛以外，大量的炎性細胞將產(chǎn)生更多的IL-6、IL-8，并且隨著破膜時間延長，病原體入侵的機會增加，感染加重，其含量也會逐漸增加。有關VCAM-1的含量變化是否能預測胎膜早破或絨毛膜羊膜炎的發(fā)生，國內外尚未見文獻報道。本實驗對羊水、血清，臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量進行了監(jiān)測，結果發(fā)現(xiàn)胎膜早破組孕產(chǎn)婦羊水、血清，新生兒臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1含量顯著高于正常對照組，其中并發(fā)羊膜腔感染者IL-6、IL-8、VCAM-1的含量顯著高于未并發(fā)羊膜腔感染者，分析可能與胎膜早破并發(fā)感染后，炎性介質大量釋放有關。研究表明，羊水、血清、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量對羊膜腔感染確有預測價值，且可以在亞臨床水平對其進行診斷，因此建議臨床上對母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1明顯升高的孕婦應及早使用抗生素預防感染，而對于處于正常范圍者可不必使用抗生素，以避免盲目使用給母兒造成不必要的副作用。 3.3 胎膜早破時間及新生兒預后與VCAM-1、IL-6、IL-8的相關性當胎膜早破并發(fā)羊膜腔感染時，除正常的蛻膜和絨毛以外，入侵的炎性細胞將產(chǎn)生大量的IL1和IL-6、IL-8。本實驗對羊水、血清、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量進行了監(jiān)測，結果發(fā)現(xiàn)隨著破膜時間延長，其含量逐漸增加。Matsuda等6、Athayde等7的研究表明，IL-6的含量變化不但可預測胎膜早破的發(fā)生，同時對預測新生兒腦病及新生兒感染發(fā)病率的增長均有一定的意義。我們對胎膜早破組新生兒評分Apgar7分和Apgar評分8分的羊水、血清、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1含量進行檢測，結果表明, Apgar評分7分者，其羊水、血清、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量顯著高于Apgar評分8分者，表明羊水、血清、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1的含量對預測新生兒的發(fā)病率和死亡率有重要意義，其含量變化可用于指導新生兒抗感染治療及輔助判斷新生兒結局。對母血、羊水、臍血中IL-6、IL-8、VCAM-1明顯升高者，應持續(xù)NST監(jiān)護，及時發(fā)現(xiàn)胎兒宮內窘迫，做好新生兒復蘇準備，加速產(chǎn)程進展或必要時剖宮產(chǎn)，最大限度降低新生兒窒息及感染的發(fā)生。 我們認為，細胞因子IL-6、IL-8、VCAM-1在母血、羊水、臍血中的含量變化以及聯(lián)合檢測對胎膜早破和絨毛膜羊膜炎，特別是處于亞臨床感染狀態(tài)孕產(chǎn)婦具有重要診斷價值，對確定終止妊娠的最佳時機和新生兒感染發(fā)病率、死亡率的預測也具有一定的臨床意義，為降低胎膜早破、宮內感染、有效預防新生兒感染的發(fā)病和改善新生兒預后提供了有價值的實驗依據(jù)，使實驗與臨床結合得更為緊密。 【參考文獻】 1 張志誠. 臨床產(chǎn)科學.天津:天津科學技術出版社,1994，222-224. 2 Khashoggi TY.Outcome of pregnancies with preterm premature rupture of membranes.Saudi Med J， 2004，25(12):1957-1961. 3 Pfeiffer KA, Reinsberg J, Rahmun A, et al.Clinical application of maternal serum cytokine determination in premature rupture of membranes-interleukin-6, an early predictor of neonatal infection?Acta Obstet Gynecol Scand， 1999，78(9):774-778. 4 Poniedzialek-Czajkowska E, Leszczynska-Gorzelak B, Oleszczuk J.Maternal serum cytokine levels in pregnancies complicated by PROM.Ginekol Pol，2000，71(8):746-751. 5 Witczak M, Torbe A, Czajka R. 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