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.生化考研重點(diǎn)知識(shí)總結(jié)第一章 單糖多糖與碘顯色,至少需要的葡萄糖殘基數(shù):6唾液淀粉酶激活劑:Cl-幾個(gè)典型非還原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成N-糖肽鍵的單糖或衍生物是: 第二章 油脂幾個(gè)非飽和脂肪酸雙鍵數(shù):油酸:1 亞油酸:2 亞麻酸:3人不能自身合成的必須脂肪酸: 亞油酸、亞麻酸四種脂類轉(zhuǎn)運(yùn)脂蛋白:CM:乳糜微粒,轉(zhuǎn)運(yùn)外源性三酰甘油酯 VLDL:極低密度脂蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性三酰甘 油酯 LDL:低密度脂蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性膽固醇 HDL:高密度脂蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)外源性膽固醇 第三章 氨基酸與蛋白質(zhì)幾種主要氨基酸及三字母縮寫兩特殊:Pro、Gly芳香:酪(Tyr)色(Trp/Try,吸光最強(qiáng))苯(Phe)八種必需氨基酸:甲攜來(lái)一本亮色書,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr側(cè)鏈為羥基氨基酸:蘇(Thr)絲(Ser)酪(Tyr)酸性氨基酸:天(Asp)谷(Glu)對(duì)應(yīng)兩酰胺:Asn、Gln堿性氨基酸:賴(Lys)精(Arg)組(His)其它:丙氨酸(Ala)PIPI的計(jì)算:PI=(PK1+PK2)/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2PH的計(jì)算:PH=PK1+Lg(R/R+)=PK2+Lg(R-/R)PH =7的水中溶蛋白,PH=6,則該蛋白PIPI 時(shí)有R-蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)螺旋:Sn=3.613,存在Pro時(shí)不形成螺旋,右手螺旋折疊:同/反向,肽鍵中H與O成氫鍵,軸距0.35nm轉(zhuǎn)角:轉(zhuǎn)角處為Gly超二級(jí)結(jié)構(gòu):無(wú)規(guī)卷曲、結(jié)構(gòu)域三級(jí)結(jié)構(gòu):作用力(二硫鍵、疏水作用力、氫鍵、靜電離子鍵、范德華力)蛋白結(jié)構(gòu)分析N端分析法:FDNB(Sanger)、PITC(Edman)、DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法:羧肽酶法、無(wú)水肼解法 羧肽酶A:不能水解C端為L(zhǎng)ys、Arg、Pro的肽鍵;羧肽酶B:能水解C端為L(zhǎng)ys、Arg的肽鍵;C端倒數(shù)第二位是Pro時(shí),A、B都不能水解打開二硫鍵:還原法(巰基化合物,碘乙酸保護(hù))、氧化法(過(guò)甲酸)專一切斷:胰蛋白酶(Lys、Arg-COOH肽鍵);CNBr(Met-COOH肽鍵);胰凝乳蛋白酶();顯色反應(yīng)Follin酚:藍(lán)色,酚基(Tyr)、吲哚基(Trp),組分(CuSO4+磷鉬酸)Millon:紅色,酚基(Tyr),組分(HgNO3+Hg(NO3)2)坂口反應(yīng):紅色,胍基(Arg),組分(萘酚,NaClO)黃色反應(yīng):黃色,芳香氨基酸,組分(濃HNO3)雙縮脲反應(yīng):紫紅色,肽鍵,多肽,組分(NaOH+CuSO4)乙醛酸反應(yīng):紫色,吲哚基(Trp)幾種重要氨基酸提供活性甲基的:S-腺苷Met形成N-糖肽鍵的:Asp膠原蛋白中含量高的氨基酸:Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys蛋白分離純化技術(shù):透析、超濾;密度梯度離心;凝膠過(guò)濾;PI法、鹽析、有機(jī)溶劑法;電泳、離子交換;吸附層析;親和層析凝膠過(guò)濾大分子先出,凝膠電泳相反:機(jī)理分子運(yùn)動(dòng)速度決定因素:大小、電荷量、形狀蛋白離子交換層析與洗脫:凝膠電泳三效應(yīng):電荷、分子篩、濃度效應(yīng)蛋白含量測(cè)定測(cè)N:凱氏定氮、紫外吸光、雙縮脲吸光、福林酚顯色吸光測(cè)M:沉降離心、凝膠過(guò)濾(凝膠排阻層析)、SDS-PAGE凱氏定氮:HNO2反應(yīng),生成的N2中氨基酸占1/2其它分離二硫基的肽段可用:SDS-PAGE幾個(gè)主要氨基酸的PI值:幾種重要蛋白:鐮刀貧血?。篏luVal,第6位與烷化劑(碘乙酸)反應(yīng)的氨基酸:Cys(半胱氨酸)第四章 酶學(xué)酶活化中心組成:結(jié)合部位、催化部位計(jì)算:活力單位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、轉(zhuǎn)化數(shù)/轉(zhuǎn)化周期、米氏方程各可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特點(diǎn):Km、Vmax幾個(gè)抑制作用:競(jìng)爭(zhēng)抑制(丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶);有有機(jī)磷(與絲氨酸羥基共價(jià)不可逆);CO、CN(作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金屬、有機(jī)砷、CN化物、硫化物、CO)酶促反應(yīng)初速度與E、T有關(guān)以“三點(diǎn)結(jié)合”模型作用的酶:甘油激酶酶的專一性專一水解葡萄糖形成的二酯鍵的酶:以O(shè)2為直接氫受體的氧化酶:VC氧化酶、細(xì)胞色素氧化酶別構(gòu)酶兩獨(dú)立功能部位:活性中心、變構(gòu)中心動(dòng)力學(xué)曲線:S型,其它為雙曲線具有效應(yīng):協(xié)同效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng)典型代表血紅蛋白:協(xié)同效應(yīng)、波爾效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng)酶分離純化要求:純化倍數(shù)高、回收率高純化倍數(shù)=比活力/純化前總比活力 回收率=活力單位數(shù)/純化前活力單位數(shù)方法:同蛋白質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑:增S可減弱抑制作用患尿黑酸癥的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遺傳缺陷)第五章 核酸反向互補(bǔ)配對(duì):ACG-CGT(U)N-苷鍵:(C1-C5),嘌呤(N9-C1),嘧啶(N1-C1)SnRNA:核仁不均一RNA,功能(促進(jìn)轉(zhuǎn)錄、)核酸分離技術(shù)2 凝膠電泳:三效應(yīng)、分子運(yùn)動(dòng)速度決定因素 見(jiàn)蛋白質(zhì)離子交換層析:陽(yáng)離子交換層析,核苷酸脫下順序:UGCA 陰離子交換層析,核苷酸脫下順序:CAUG3 親和層析:可用親和層析法分離的核酸:mRNA(PolyA尾)DNA測(cè)序三法:加減法(Sanger、1975),化學(xué)斷裂法,雙脫氧終止法(Sanger、1977、原理)不能形成兩性離子的核苷酸是UMP:原因cNMP最重要的cNMP:cAMP、cGMPcAMP:第二信使cAMP分子內(nèi)有:環(huán)化的磷酸二酯鍵cAMP與cGMP:生物作用并不是完全相反第六章 分子生物學(xué)與基因工程基因組學(xué)啟動(dòng)子組成3部分:識(shí)別部位(-35、CG/CAAT),結(jié)合部位(-10、TATA),轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)高度重復(fù)序列:衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA原核生物基因重疊類型:基因家族按特點(diǎn)分三類:簡(jiǎn)單多基因家族、復(fù)雜多基因家族、發(fā)育調(diào)控的復(fù)雜多基因家族 基因家族按組成分三類:DNA復(fù)制DNA復(fù)制方式:線性(眼型),環(huán)狀【(大腸桿菌)、滾環(huán)(病毒質(zhì)粒)、D型(線粒體、葉綠體)】DNA復(fù)制需引物:轉(zhuǎn)錄不需引物原核DNA聚合酶功能:損傷修復(fù)、校正、合成DNA基因工程酶RNase:RNaseA(嘧啶35)、RNaseT1(G的35)、RNaseT2(A的35)DNA連接酶所需能量:原核ATP、真核NAD+轉(zhuǎn)移水解DNA-RNA中的RNA的酶:RNaseH、逆轉(zhuǎn)錄酶(有RNaseH活性)牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得產(chǎn)物:5磷酸切開,產(chǎn)生3單磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得產(chǎn)物:3-OH切開,產(chǎn)生5單磷酸核苷核酸合成酶:DDDP(依賴DNA的DNA聚合酶)、RDDP(依賴RNA的DNA聚合酶)、DDRP(依賴DNA的RNA聚合酶)RNAPol2:RNAPolB,合成hnRNA,分布在核質(zhì)中RNA用強(qiáng)堿水解產(chǎn)生:2 -核苷酸、3-核苷酸混合物限制內(nèi)切酶切割特點(diǎn):4-8bp、6bp主要,成黏性、平齊末端,成回文序列,甲基化難切tRNA結(jié)構(gòu)含稀有堿基最多:D(二氫尿嘧啶)、(假尿嘧啶)、I(次黃嘌呤)四環(huán)四臂五區(qū):D臂、TC臂、氨基酸臂(受體臂)、反密碼子臂二級(jí):三葉草三級(jí):倒L基因表達(dá)DNA重組過(guò)程中DNA連接四方式:粘性末端連接、同聚物加尾法、加銜接物連接法、加DNA接頭連接法轉(zhuǎn)位:三類轉(zhuǎn)位因子【(插入序列IS)、轉(zhuǎn)座子(Tn)、可轉(zhuǎn)座噬菌體】,轉(zhuǎn)位后遺傳效應(yīng)(突變、產(chǎn)生新基因、染色體畸變)轉(zhuǎn)錄:轉(zhuǎn)錄5端常見(jiàn)起始核苷酸是G、A,原核終止子在終止位點(diǎn)前有PolyU翻譯:參與肽鏈延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基轉(zhuǎn)移酶催化組分(23SrRNA),蛋白合成時(shí)生成肽鍵的能量來(lái)自高能酯鍵水解轉(zhuǎn)錄抑制劑:利福平、利迪鏈霉素、放線素D、-鵝膏蕈堿翻譯抑制劑:抗生素(氯霉素、鏈霉素、卡那霉素、新霉素、四環(huán)素、土霉素)機(jī)理 干擾素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽鏈延長(zhǎng))基因工程基因工程載體:必備條件(自主復(fù)制、有標(biāo)志基因便于篩選、易引入受體細(xì)胞、酶切位點(diǎn)少、M大可攜帶大片基因) 常用載體(質(zhì)粒、病毒、噬菌體、人工大染色體改造而來(lái))DNA文庫(kù):含某種生物體全部被轉(zhuǎn)錄成mRNA的所有基因序列密碼子起始密碼子:原核(AUG、GUG、UUG,對(duì)應(yīng)fMet)真核(AUG,對(duì)應(yīng)Met)起始tRNA:tRNAMet、tRNAfMet終止密碼子:UAA、UAG、UGA無(wú)義密碼子:UAA、UAG、UGA線粒體中三種特殊密碼子:UGA-色氨酸原核RF1識(shí)別的密碼子:UAA、UAX RF2識(shí)別的密碼子:UAA、UGA密碼子性質(zhì):不重疊、特殊性、通用性、簡(jiǎn)并性、連續(xù)性、擺動(dòng)性擺動(dòng)性:A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I-A、U、C其它SnRNA功能:RNA成熟加工、與染色質(zhì)結(jié)合、調(diào)節(jié)基因活性多拷貝基因有:組蛋白基因、3種印跡法對(duì)應(yīng)檢測(cè)對(duì)象:S-DNA、N-RNA、W-ProTm的影響三因素:C三G、鹽濃度(Na+)、DNA均一性(均一窄)Tm=(C+G)%0.41+69.3第七章 維生素與激素幾種重要酶的輔酶脫羧酶:酮酸脫羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脫羧酶(磷酸吡哆醛(VB6)磷酸吡哆醛:氨基酸脫羧酶、轉(zhuǎn)氨酶的輔酶以FAD為輔酶的酶:二氫硫辛酰胺脫氫酶、脂酰輔酶A脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、線粒體磷酸甘油脫氫酶羧化酶的輔酶:生物素(VB7)VB12:鈷胺素(參與甲基轉(zhuǎn)移)氧化還原酶的輔酶:NAD+以NADP為輔酶的酶:蘋果酸酶、6-p-G脫氫酶以FAK為輔酶的酶:脂酰輔酶A脫氫酶幾種特定功能的維生素凝血維生素:VK,脂溶抗血維生素:VC,水溶含A的維生素:NAD+、NADP、FAD、CoASHVD:體內(nèi)活性最高的VD是:1,25-二羥基膽鈣化醇1,25-(OH)2D3兩種VD原:VD3(7-脫氫膽固醇),VD2(麥角固醇)VD3的形成:膽固醇7-脫氫膽固醇VD3胰島素等激素的受體是:含N激素受體在激素作用下與腺苷酸環(huán)化酶的耦聯(lián)是由G蛋白介導(dǎo)實(shí)現(xiàn)的蛋白質(zhì)類激素受體位于:細(xì)胞質(zhì)膜上類固醇激素受體位于:細(xì)胞內(nèi)第八章 生物氧化肌肉或神經(jīng)細(xì)胞儲(chǔ)存能量的高能化合物是:磷酸肌酸(IP3)高能化合物有:磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、生物合成中主要的還原劑;NADPH,來(lái)源于HMS(磷酸戊糖途徑/磷酸己糖旁路)生物氧化過(guò)程中,ATP生成方式:底物水平磷酸化、氧化磷酸化線粒體的嵴:外表面與基質(zhì)接觸,含有氧化磷酸化組分ATP合成酶F0F1-ATPase是:催化ATP合成的酶形式,一種膜結(jié)合復(fù)合物,單獨(dú)存在時(shí)沒(méi)ATP酶活性F0:含H+通道ATP合成機(jī)理細(xì)胞質(zhì)脫下的一對(duì)氫進(jìn)入線粒體的三方式:異檸檬酸穿梭、蘋果酸穿梭、甘油磷酸穿梭丙氨酸脫氫酶系的輔因子:TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+ 丙氨酸脫氫酶系的酶:丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶醛縮酶的底物是:F-1,6-2P在TCA、有氧呼吸鏈中產(chǎn)生的ATP最多的是:-酮戊二酸琥珀酸第九章 糖代謝糖酵解部位:胞液過(guò)程:葡萄糖、糖元轉(zhuǎn)變?yōu)楸崛P(guān)鍵酶:己糖激酶:包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP的調(diào)節(jié)磷酸果糖激酶:限速,主要激活劑(2,6-二磷酸果糖),抑制劑(ATP、檸檬酸)丙酮酸激酶:受ATP/AMP的抑制產(chǎn)能:2ATP醛縮酶的底物:F-1,6-P2(1,6-二磷酸果糖)糖代謝中既催化脫氫又催化脫羧的兩種酶:異檸檬酸脫氫酶、6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶糖的有氧氧化丙酮酸乙酰輔酶A:部位:線粒體內(nèi)膜丙酮酸脫氫酶系:3酶(丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶)5輔(TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+)TCA循環(huán):檸檬酸循環(huán)、Krebs循環(huán)調(diào)節(jié)TCA循環(huán)運(yùn)轉(zhuǎn)最主要的酶:異檸檬酸脫氫酶(限速)、-酮戊二酸脫氫酶系部位:線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜酶:檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶(限速)、-酮戊二酸脫氫酶系1分子葡萄糖有氧氧化產(chǎn)生ATP數(shù):36(38)=2+6(4)+6+24草酰乙酸來(lái)源三途徑:蘋果酸酶和蘋果酸脫氫酶、丙酮酸脫羧酶、磷酸丙酮酸脫羧酶磷酸戊糖途徑、磷酸己糖旁路HMS核糖的分解途徑是:HMS生物合成中除ATP供能外合成糖還需:UTP合成脂肪還需:GTP生物合成的還原力是NADPH,來(lái)源是HMS反應(yīng)部位總結(jié)糖酵解(EMP):胞質(zhì)TCA:線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜氧化磷酸化:線粒體內(nèi)膜糖元代謝合成糖元時(shí),葡萄糖先活化成:UDPG植物合成淀粉時(shí)需:ADPG合成蔗糖需:UDPG、6-P-G糖異生第十章 脂代謝三酰甘油代謝分解代謝-氧化:反應(yīng)部位:線粒體基質(zhì)產(chǎn)物:偶數(shù)碳(乙酰CoA)、奇數(shù)碳(幾個(gè)乙酰CoA+1個(gè)丙酰CoA)反應(yīng)過(guò)程:二步脫氫(生成1FADH2+1NADH)、產(chǎn)ATP(5個(gè))飽和脂肪酸分解酮體生成部位:肝內(nèi)成分:乙酰乙酸、-羥丁酸、丙酮利用部位:肝外,腦、肌不飽和脂肪酸氧化分解:兩特殊酶:順-反烯酯酰CoA異構(gòu)酶、順-反-羥酯酰CoA異構(gòu)酶1分子軟脂酸(16C)徹底氧化分解成CO2、H2O生成ATP數(shù):脂肪酸合成脂肪酸合成代謝還原力是NADPH,來(lái)源是HMS催化胞液脂肪酸合成的限速反應(yīng)由乙酰CoA羧化酶催化?;d體為ACP,-氧化中?;d體是乙酰CoA磷脂代謝合成磷脂所需能量來(lái)自:CTP膽固醇代謝在體內(nèi)可直接合成膽固醇的化合物是:脂酰CoA第十一章 氨基酸與蛋白質(zhì)代謝幾種氨基酸生酮氨基酸:Leu、Lys生糖氨基酸:除Leu、Ly

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