GB 29690-2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中尼卡巴嗪殘留標(biāo)志物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

G 中華人民共和國 國 家標(biāo)準(zhǔn) 9690 2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中尼卡巴嗪 殘留標(biāo)志物 殘留量的測定 液相色譜 of in 電子版本僅供參考，以標(biāo)準(zhǔn)正式出版物為準(zhǔn)） 2013布 2014施 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會 發(fā)布 I 目 次 目 次 . I 前 言 . 物 性 食品中尼卡巴嗪 殘留標(biāo)志物 殘留 量的測定 液相色譜 . 1 范圍 . 2 規(guī)范性引用文件 . 3 原理 . 4 試劑和材料 . 5 儀器和設(shè)備 . 6 樣品的制備與保存 . 樣品的 制備 . 樣品的保存 . 7 測定步驟 . 取與凈化 . 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 . 測定 . 空白試驗 . 8 結(jié)果計算和表述 . 9 檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度 . 靈敏度 . 準(zhǔn)確 度 . 精密度 . 附錄 A . 言 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A 為資料性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)系國內(nèi)首次發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)。 動物 性 食品中尼卡巴嗪 殘留 標(biāo)志物 殘留 量的測定 液相色譜 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動物 性 食品中尼卡巴嗪殘留 標(biāo)志物 4,4 檢測的制樣和液相色譜 本標(biāo)準(zhǔn)適用于 雞 的肌 肉 組織和 雞蛋 中尼卡巴嗪殘留 標(biāo)志物 4, 4留量的檢測。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版 本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則 6682 分析 實驗室用水規(guī)格和試驗方法 3 原理 試料中 殘留 的 4,4 用乙腈提取，正己烷 除 脂， 75甲醇水溶液 萃取， 液相色譜 標(biāo)法定量。 4 試劑和材料 以下所用的試劑，除特別注明者外均為分析純試劑；水為符合 6682規(guī)定的一級水。 4, 4照品 ： 含量 4, 4 含量 。 乙腈 ： 色譜純。 甲醇 ： 色譜純。 無水硫酸鈉 正己烷 乙酸銨 二甲基甲酰胺 0.1 L 乙酸銨溶液 ： 取乙酸銨 g，用水溶解并稀釋至 250 75甲醇水溶液 ： 取甲醇 75 水 溶解并 稀釋至 100 75甲醇水溶液飽和的正己烷 取 75甲醇水溶液 100 正己烷 100 勻 ， 靜置分層，取上層液 。 1 mg/, 4準(zhǔn) 貯備 液 精密 稱取 4, 4照品 10 于 10 瓶內(nèi)，用 二甲基甲酰胺 溶解并稀釋至刻度， 配制成濃度為 1 mg/ 4, 4準(zhǔn)貯備液 。 2 8 保存，有效期 3 個月。 10 g/4準(zhǔn)工作液 ：精密量取 1 mg/, 4準(zhǔn)貯備液1.0 100 甲醇 溶解并稀釋至刻度，配制成濃度為 10 g/, 4保存，有效期 3個月。 1 mg/4備 液 ：精密 稱取 4, 40 10 瓶內(nèi)，用二甲基甲酰胺溶解并稀釋至刻度， 配制成濃度為 1 mg/ 4, 4 2 8 保存，有效期 3 個月。 10 g/, 4精密量取 1 mg/, 4.0 100 甲醇 溶解并稀釋至刻度，配制成濃度為 10 g/, 4保存，有效期 3個月。 5 儀器和設(shè)備 液相色譜 配電噴霧離子源 。 分析天平 ： 感量 1 g。 天平 ： 感量 g。 渦旋振蕩器 離心機(jī) 氮吹儀 離心管 ： 50 濾膜 ： m。 6 試料 的制備與保存 試料 的制備 雞蛋 取適量新鮮或冷藏的空白或供試雞蛋，去殼 ， 并使均質(zhì) 。 取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試試料。 取均質(zhì)后的空白樣品，作為空白試料。 取均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn) 工作 液，作為空白添加試料 。 雞 肌 肉 取適量新鮮或冷凍的空白或供試組織，絞碎 ， 并使 均 質(zhì)。 取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試試料。 取均質(zhì)后的空白樣品，作為空白試料。 取均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn) 工作 液，作為空白添加試料。 試料 的保存 以下 保存 。 7 測定步驟 取與凈化 稱取 試料 （ 2g， 于 50 添加 10 g/, 4 適量 ，加無水硫酸鈉 2 g， 乙腈 8 旋 0.5 聲 5 5 000 r/0 上清液 ， 于 40氮?dú)獯蹈桑?75甲醇水溶液飽和的正己烷 1 旋 10 s，再加 75甲醇水溶液 1.0 分渦旋混合，于 40 水浴中靜置 5 2 000 r/ 下層清液 ， 濾膜 過濾， 供液相色譜 定。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取 10 g/, 4準(zhǔn)工作 液 和 10 g/, 4量 ，用 75%甲醇水溶液 稀釋 ，配制 成 4, 4 為 100 ng/及 4, 4度為 2、 10、 20、 50、 200和 500 ng/液相色譜 以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。 測定 液相色譜條件 色譜柱： 150 .1 徑 5 m），或相當(dāng)者； 流動相：甲醇 0.1 乙酸銨溶液（ 75 25， v/v）； 流速： 0.2 mL/ 柱溫： 30 ； 進(jìn)樣量： 20 L。 譜條件 離子源：電噴霧離子源； 掃描方式：負(fù)離子掃描； 檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測； 電離電壓： 3.0 源溫： 110 ； 霧化溫度： 350 。 錐孔氣流速： 50 L/h； 霧化氣流速： 450 L/h； 定性、定量離子對和錐孔電壓及碰撞能量見表 1。 表 1 量離子對及錐孔電壓、碰撞能量 藥物 定性離子對 m/z 定量離子對 m/z 錐孔電壓 V 碰撞能量 0 18 2 20 18 測定法 取試 樣 溶液和對照溶液，作單點或多點校準(zhǔn)，按內(nèi)標(biāo)法 ， 以峰面積比計算。試料溶液及對照溶液中 4, 4 4, 4試 樣 溶液中的離子相對豐度與空白添加標(biāo)準(zhǔn)溶液中的離子相對豐度相比，符合表 2的要求。 對照溶液和 空白添加試樣 溶液中各特征離子質(zhì)量色譜圖 見附錄 A。 表 2 試料溶 液中離子相對豐度的允許偏差范圍 相對豐度 % 允許偏差 % 50 20 20 50 25 10 20 30 10 50 空白試驗 除不加試料外，采用完全相同的步驟進(jìn)行平行操作。 8 結(jié)果計算和表述 單點校準(zhǔn) : 或標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)：由 求得 a 和 b ，則 )試料中 g/ 按下式計算： 式中 : X 供試 試料 中 4, 4殘留量， g/ C 試樣 溶液中 4, 4濃度， ng/ 試樣 溶液中 4, 4ng/ 對照溶液中 4, 4濃度， ng/ C 對照溶液中 4, 4ng/ A 試樣 溶液 中 4, 4峰面積； 試樣 溶液中 4, 4 對照溶液中 4, 4峰面積； A 對照溶液中 4, 4 V 溶解殘余物所用 75甲醇水溶液 的 體積 ， m 供試 試料 質(zhì)量 ， g。 注：計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。 9 檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度 靈敏度 本方法 的檢測限為 g/ 量限為 1 g/ 準(zhǔn)確度 本方法雞蛋 試料 在 1 10 g/加濃度、雞 肌肉試料 在 1 300 g/加濃度 水平上的回收率為 80% 120%。 精密度 本方法的批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 20%，批間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 20%。 附錄 A （資料性附錄） 4n g / D N C 1-F 2008T i m 0 0 4 6 8 1 0 %01002 4 6 8 1 0 %01002 4 6 8 1 0 %010008 0 2 2 1 _ 0 5 M o f 3 Ch a n n e l s 0 9 1 4 11 e 44 08 0 2 2 1 _ 0 5 M o f 3 Ch a n n e l s 0 0 1 3 6 1 7 e 34 08 0 2 2 1 _ 0 5 M o f 3 Ch a n n e l s 0 0 1 0 6 6 2321圖 4, 4內(nèi)標(biāo) 物 標(biāo)準(zhǔn)溶液 特征離子質(zhì)量色譜圖 （ 4 ng/ mu e b l an kT i m 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 %01000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 %01000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 %010008 0 2 2 1 _ 0 4 M o f 3 Ch a n n e l s 0 9 1 4 110708 0 2 2 1 _ 0 4 M o f 3 Ch a n n e l s 0 0 1 3 6 08 0 2 2 1 _ 0 4 M o f 3 Ch a n n e l s 0 0 1 0 6 2 雞肌肉組織 空白 試樣特征離子質(zhì)量色譜圖 2n g / g D N C sp i 1-F 2008T i m 0 0 4 6 8 1 0 %01002 4 6 8 1 0 %01002 4 6 8 1 0 %01002 4 6 8 1 0 %010008 0 2 2 1 _ 0 7 M o f 3 Ch a n n e l s 4 93 1 0 3 2 6 5 5 7 8 8 9 08 0 2 2 1 _ 0 8 M o f 3 Ch a n n e l s 0 9 1 4 11 e 44 08 0 2 2 1