![中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 [精品論文] 中藥重樓聯(lián)合奧沙利鉑抗血管生成的實驗研究_第1頁](http://file.renrendoc.com/FileRoot1/2017-12/31/c62d46b4-37d6-4e0e-a757-6adfe0ae3c2d/c62d46b4-37d6-4e0e-a757-6adfe0ae3c2d1.gif)
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![中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 [精品論文] 中藥重樓聯(lián)合奧沙利鉑抗血管生成的實驗研究_第5頁](http://file.renrendoc.com/FileRoot1/2017-12/31/c62d46b4-37d6-4e0e-a757-6adfe0ae3c2d/c62d46b4-37d6-4e0e-a757-6adfe0ae3c2d5.gif)
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中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥重樓聯(lián)合奧沙利鉑抗血管生成的實驗研究關(guān)鍵詞中藥重樓奧沙利鉑抗血管生成協(xié)同增效作用惡性腫瘤化療藥物摘要血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。正文內(nèi)容血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模式,化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞,而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞,這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前,抗血管生成藥物價格昂貴,中國的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān),而中藥是我國的寶庫,尋找具有抗血管生成作用的物美價廉的中藥,顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗,近年來,隨著抗血管生成治療的研究的深入,發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用,并且價格低廉,毒副作用較小,逐漸成為國內(nèi)抗腫瘤研究的熱點。體內(nèi)外實驗中已經(jīng)證實,中藥重樓(RHIZOMAPARIDIS)及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用,需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實驗中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用;采用TRANSWELL模型,觀察藥物對HUVEC的遷移的作用;采用三維新生血管模型,觀察藥物對小管形成的形態(tài)的影響;采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測試劑盒和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測藥物作用對細(xì)胞的凋亡和周期的影響;觀察藥物對于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC503683G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC5026754G/ML),重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,重樓醇提物對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性(IC50352G/ML),對LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性(IC50820G/ML),奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對LOVO細(xì)胞的IC50值,奧沙利鉑對HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性;兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用;中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時對HUVEC的遷移有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012,奧沙利鉑在054G/ML時對HUVEC的遷移也有一定的抑制作用,能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目,05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904,兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用;中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu),兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用;HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后,能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡,兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯,兩者可能存在協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后,可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期,兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高,提示兩者可能有協(xié)同增效作用;中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用,能夠明顯減少新生血管的數(shù)目,兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實驗中可能具有一定抗血管生成的作用,兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成(ANGIOGENESIS)是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長依賴于新生血管的生成的假說,這一假說基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長提供氧和營養(yǎng)物質(zhì),并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移,而通過抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物,在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長受阻,這種特殊的給藥模
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