細(xì)胞生物學(xué)各章重點和復(fù)習(xí)題_第1頁
細(xì)胞生物學(xué)各章重點和復(fù)習(xí)題_第2頁
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文檔簡介

1、細(xì)胞生物學(xué)重點第五章 細(xì)胞連接和細(xì)胞外基質(zhì)簡述細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)作用1.真核細(xì)胞的細(xì)胞核(E)A. 是細(xì)胞遺傳物質(zhì)的儲存場所B. 是最大的細(xì)胞器C. 是轉(zhuǎn)錄的場所D. 是DNA復(fù)制的場所E. 以上都是第六章細(xì)胞膜及其表面重點:1 掌握細(xì)胞膜的化學(xué)組成2 掌握細(xì)胞膜的特點3 熟悉細(xì)胞膜的分子結(jié)構(gòu)模型4 了解細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)第七章核糖體:1 熟悉核糖體的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)等2 掌握蛋白質(zhì)的合成過程3 了解核酶的作用機理等核糖體:1.原核生物mRNA中與核糖體16S rRNA結(jié)合的序列稱為SD序列(SD sequence) 。2.核酶:將具有酶功能的RNA稱為核酶。 3.N-端規(guī)則(N-end rule)

2、: 每一種蛋白質(zhì)都有壽命特征, 稱為半衰期(half-life)。研究發(fā)現(xiàn)多肽鏈N-端特異的氨基酸與半衰期相關(guān),稱為N-端規(guī)則。4.泛素介導(dǎo)途徑:蛋白酶體對蛋白質(zhì)的降解通過泛素(ubiquitin)介導(dǎo),故稱為泛素降解途徑。蛋白酶體對蛋白質(zhì)的降解作用分為兩個過程:一是對被降解的蛋白質(zhì)進行標(biāo)記,由泛素完成;二是蛋白酶解作用,由蛋白酶體催化。第八章 內(nèi)膜系統(tǒng)內(nèi)膜系統(tǒng):內(nèi)膜系統(tǒng)(endomembrane system)位于細(xì)胞內(nèi),在結(jié)構(gòu)、功能乃至發(fā)生上有一定聯(lián)系的膜性結(jié)構(gòu)的總稱。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、溶酶體、過氧化氫體及核膜等。第九章:線粒體重點1. 掌握線粒體的化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)內(nèi)外膜、DNA、核糖體

3、、膜間隙、F1顆粒、基質(zhì)、嵴蛋白質(zhì) 占線粒體干重的6570%,脂類 線粒體的脂類只占干重的2030%含豐富的心磷脂和較少的膽固醇是線粒體在組成上與細(xì)胞其他膜結(jié)構(gòu)的明顯差別。2. 掌握線粒體的功能,熟悉ATP形成機制3.熟悉線粒體的增殖4.了解線粒體的基因組學(xué)特征5.了解線粒體的起源線粒體:1. 呼吸鏈(電子傳遞鏈)Respiratory chain一系列能夠可逆地接受和釋放H+和e-的化學(xué)物質(zhì)所組成的酶體系在線粒體內(nèi)膜上有序地排列成互相關(guān)聯(lián)的鏈狀。2. 化學(xué)滲透假說(氧化磷酸化偶聯(lián)機制):線粒體內(nèi)膜上的呼吸鏈起質(zhì)子泵的作用,利用高能電子傳遞過程中釋放的能量將H+泵出內(nèi)膜外,造成內(nèi)膜內(nèi)外的一個H

4、+梯度(嚴(yán)格地講是離子的電化學(xué)梯度),ATP合酶再利用這個電化學(xué)梯度來合成ATP。3. 電子載體:在電子傳遞過程中與釋放的電子結(jié)合并將電子傳遞下去的物質(zhì)稱為電子載體。參與傳遞的電子載體有四種黃素蛋白、細(xì)胞色素、鐵硫蛋白和輔酶Q,在這四類電子載體中,除了輔酶Q以外,接受和提供電子的氧化還原中心都是與蛋白相連的輔基。4. 閾值效應(yīng)(threshold effects) 突變所產(chǎn)生的效應(yīng)取決于該細(xì)胞中野生型和突變型線粒體DNA的比例,只有突變型DNA達到一定數(shù)量(閾值)才足以引起細(xì)胞的功能障礙,這種現(xiàn)象稱為閾值效應(yīng)。5. 導(dǎo)向序列targeting sequence:將游離核糖體上合成的蛋白質(zhì)的N-

5、端信號稱為導(dǎo)向信號,或?qū)蛐蛄?,由于這一段序列是氨基酸組成的肽,所以又稱為轉(zhuǎn)運肽。6. 信號序列signal sequence:將膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì)的N-端的序列稱為信號序列,將組成該序列的肽稱為信號肽。7. 共翻譯轉(zhuǎn)運:膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì)通過定位信號,一邊翻譯,一邊進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng),由于這種轉(zhuǎn)運定位是在蛋白質(zhì)翻譯的同時進行的,故稱為共翻譯轉(zhuǎn)運。8. 蛋白質(zhì)分選:在膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì)通過信號肽,經(jīng)過連續(xù)的膜系統(tǒng)轉(zhuǎn)運分選才能到達最終的目的地,這一過程又稱為蛋白質(zhì)分選。第十章細(xì)胞骨架(cytoskeleton)微管1 掌握微管的形態(tài)結(jié)構(gòu),熟悉其分類和分布2 掌握微管蛋白,熟悉微管

6、相關(guān)蛋白3 掌握微管的功能,熟悉微管的組裝微絲1 掌握微絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)2 掌握微絲的化學(xué)組成及功能3 了解微絲的裝配特點,解釋“踏車現(xiàn)象”中間纖維1 掌握中間纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu)和分類2 了解中間纖維的化學(xué)組成和分布3 說出中間纖維在結(jié)構(gòu)上與其他兩種纖維的異同點4 中間纖維與微絲、微管組裝有何區(qū)別5 掌握中間纖維的功能1.有關(guān)細(xì)胞骨架的敘述,錯誤的是(E)A. 具有彌散性、整體性和變動性B. 屬于一類細(xì)胞器C. 狹義的細(xì)胞骨架包括微管、微絲和中間絲D. 廣義的細(xì)胞骨架包括細(xì)胞核骨架、細(xì)胞質(zhì)骨架、細(xì)胞外基質(zhì)E. 局限于細(xì)胞局部2.與細(xì)胞骨架功能無直接關(guān)系的是( D)A. 細(xì)胞運動B. 物質(zhì)運輸C. 支撐

7、作用D. 蛋白質(zhì)合成E. 細(xì)胞分裂3.沒有微管的是( A)A. 細(xì)菌B. 鼠C. 魚D. 蛇E. 蛙4.微管參與構(gòu)成的結(jié)構(gòu),例外的是(C)A. 紡錘體B. 鞭毛C. 微絨毛D. 中心粒E. 基粒5.關(guān)于微管蛋白的敘述,正確的是( D)A. 組成微管全部B. 球形堿性蛋白C. 進化上保守D. 分兩類:aa、BbE. 單體是微管裝配的基本單位6.微管沒有哪個物質(zhì)的結(jié)合位點( E)A. 秋水仙素B. 長春花堿C. GDP和/或GTPD. 鎂鈣離子E. 青霉素7.最初發(fā)現(xiàn)微絲的細(xì)胞是( B)A. 神經(jīng)細(xì)胞B. 肌細(xì)胞C. 復(fù)層扁平上皮細(xì)胞D. 成纖維細(xì)胞E. 單層柱狀上皮細(xì)胞8.有關(guān)微絲,正確的是(

8、ABCDE)A. 由肌動蛋白組成B. 是實心結(jié)構(gòu)C. 長度不一D. 非肌細(xì)胞中也存在E. 有兩種存在形式9.關(guān)于微絲的敘述,錯誤的是( C)A. 是一種動態(tài)結(jié)構(gòu)B. 具有收縮功能C. 數(shù)量比微管少D. 比微管細(xì)而短,更具彈性E. 對肌動蛋白抗體呈陽性反應(yīng)9.微絲的功能包括( E)A. 支架功能B. 肌肉收縮C. 細(xì)胞運動D. 信息傳遞E. 纖毛運動10.屬于中間絲蛋白的有( E)A. 結(jié)蛋白B. 巢蛋白C. 神經(jīng)絲蛋白D. 堿性角蛋白E. 肌動蛋白11.中間絲的功能包括( ABCD)A. 支持作用B. 運輸作用C. 信息傳遞作用D. 形成細(xì)胞連接作用E. 纖毛運動12.關(guān)于中間絲的敘述,正確的

9、是( A)A. 蛋白來源于同一基因家族B. 相對分子質(zhì)量差別不大C. 形態(tài)結(jié)構(gòu)上差別很大D. 桿狀區(qū)有5個螺旋結(jié)構(gòu)E. 相連區(qū)位置變化大13有關(guān)中間絲正確的是( CDE)A. 無組織特異性B. 由球形蛋白裝配起來C. 由長桿狀的蛋白質(zhì)組裝D. 是空心纖維結(jié)構(gòu)E. 結(jié)構(gòu)極其穩(wěn)定14.微管是由多少根原纖維構(gòu)成的?(A)13(B)9+2(C)9+0(D)32第十一章 細(xì)胞核細(xì)胞核:1. 核內(nèi)膜(inner nuclear membrane)有特有的蛋白成份(如核纖層蛋白B受體),膜的內(nèi)表面有一層網(wǎng)絡(luò)狀纖維蛋白質(zhì),即核纖層(nuclear lamina),可支持核膜。核外膜(outer nuclear

10、 membrane)靠向細(xì)胞質(zhì)的一層,是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的一部分,胞質(zhì)面附有核糖體 核周隙(perinuclear space)內(nèi)、外膜之間有寬2040nm的腔隙,與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔相通核孔復(fù)合體(nuclear pore complex)內(nèi)、外膜融合處,物質(zhì)運輸?shù)耐ǖ篮死w層(nuclear lamina)內(nèi)核膜內(nèi)表面的纖維網(wǎng)絡(luò),支持核膜,并與染色質(zhì)、核骨架相連。2. 核孔復(fù)合體(nuclear pore complex, NPC)是細(xì)胞核內(nèi)外膜融合形成的小孔,直徑約為70 nm,是細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)間物質(zhì)交換的通道。3. fish-trap模型胞由質(zhì)環(huán)(cytoplasmic ring)、核質(zhì)環(huán)(nuclea

11、r ring)、輻(spoke)、中央栓(central plug)或轉(zhuǎn)運子(transporter)組成。4. 核孔蛋白 (nucleoporins, NUP):參與構(gòu)成核孔的蛋白質(zhì),可能在經(jīng)核孔的主動運輸中發(fā)揮作用。 核運輸受體 (nuclear-transport receptors):參與物質(zhì)通過核孔的主動運輸。 核周蛋白 (karypherin): 是一類與核孔選擇性運輸有關(guān)的蛋白家族,相當(dāng)于受體蛋白。5.輸入蛋白 (imporin):核定位信號的受體蛋白, 存在于胞質(zhì)溶膠中, 可與核定位信號結(jié)合, 幫助核蛋白進入細(xì)胞核。 輸出蛋白 (exporin):存在于細(xì)胞核中識別并與輸出信號

12、結(jié)合的蛋白質(zhì), 幫助核內(nèi)物質(zhì)通過核孔復(fù)合物輸出到細(xì)胞質(zhì), 而后快速通過核孔復(fù)合物回到細(xì)胞核。 核輸出信號 (nuclear export signal, NES):作為核內(nèi)物質(zhì)輸出細(xì)胞核的信號,幫助核內(nèi)的某些分子迅速通過核孔進入細(xì)胞質(zhì)。受體為exportin。6.核質(zhì)蛋白 (nucleoplasmin):在細(xì)胞質(zhì)中合成,通過核定位信號運送到細(xì)胞核,如各種組蛋白、DNA合成酶類、RNA轉(zhuǎn)錄和加工的酶類、各種起調(diào)控作用的蛋白因子等。是一種豐富的核蛋白, 在核小體的裝配中起作用。 核定位信號 (nuclear localization signal, NLS):核質(zhì)蛋白的C端有一段信號序列,可引導(dǎo)蛋

13、白質(zhì)入核。(引導(dǎo)蛋白質(zhì)進入細(xì)胞核的一段信號序列。受體為importin。)7. Ran蛋白,一類G蛋白,調(diào)節(jié)貨物復(fù)合體的解體或形成。8. 核纖層蛋白綜合征(laminopathies)由LMNA基因及其編碼蛋白laminA/C異常引起的一組人類遺傳病。如早老癥9. 染色質(zhì)是細(xì)胞核內(nèi)能被堿性染料著色的物質(zhì)。染色體指細(xì)胞在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中,由染色質(zhì)高度折疊、盤曲而凝縮成的條狀或棒狀結(jié)構(gòu)。10. 組蛋白(H1, H2A, H2B, H3, H4): 富含精氨酸和賴氨酸的堿性蛋白,帶正電荷,對維持結(jié)構(gòu)和功能的完整性起關(guān)鍵作用。其與DNA結(jié)合可抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。 非組蛋白:含天冬氨酸、谷氨

14、酸等酸性蛋白,帶負(fù)電荷,促進復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。11. 基因組(genome):一個生物貯存在單倍染色體組中的總遺傳信息,稱為該生物的基因組。12. 自主復(fù)制序列(autonomously replicating DNA sequence, ARS),是DNA復(fù)制的起點,酵母基因組含200-400個ARS,大多數(shù)具有一個11bp富含AT的一致序列(ARS consensus sequence, ACS); 著絲粒序列(centromere DNA sequence,CEN) ,由大量串聯(lián)的重復(fù)序列組成,如衛(wèi)星DNA,其功能是參與形成著絲粒,使細(xì)胞分裂中染色體能夠準(zhǔn)確地分離; 端粒序列(telomere

15、 DNA sequence,TEL) ,不同生物的端粒序列都很相似,由長5-10bp的重復(fù)單位串聯(lián)而成,人的重復(fù)序列為GGGTTA。13. 核小體組蛋白(nucleosomal histone):H2B、H2A、H3和H4,幫助DNA卷曲形成核小體的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。沒有種屬及組織特異性。H1組蛋白:在構(gòu)成核小體時H1起連接作用, 它賦予染色質(zhì)以極性。非組蛋白構(gòu)成的染色體骨架(chromsomal scaffold)有種屬差別,及一定的組織特異性。微帶是染色體高級結(jié)構(gòu)的單位,大約106個微帶沿縱軸構(gòu)建成子染色體。 14. 動粒:由著絲粒結(jié)合蛋白在有絲分裂期間特別裝配起來的、附著于主縊痕外側(cè)的圓盤狀的結(jié)

16、構(gòu)。 控制微管的裝配和染色體的移動。15. 著絲粒指中期染色單體相互聯(lián)系在一起的特殊部位,著絲點指主縊痕處兩個染色單體外側(cè)與紡錘體微管連接的部位。16. 核仁組織區(qū)(nucleolar organizing region, NOR)是細(xì)胞核特定染色體的次縊痕處,含有rRNA基因(5S RNA的基因除外)的一段染色體區(qū)域,與核仁的形成有關(guān),故稱為核仁組織區(qū)。具有核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細(xì)胞種類而異,人有5對染色體即13、14、15、21、22號染色體上有核仁組織區(qū)。17. 隨體是位于染色體末端的、圓形或圓柱形的染色體片段, 通過次縊痕與染色體主要部分相連。它是識別染色體的主要特征之一。有端隨

17、體和中間隨體兩類。18. 端粒染色體末端的特化部位。有極性。由高度重復(fù)的富含鳥苷酸的短序列組成,高度保守。維持染色體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。19. 核型:核型是指染色體組在有絲分裂中期的表型, 是染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和。20. 帶型:用特殊的染色方法, 使染色體產(chǎn)生明顯的色帶(暗帶)和未染色的明帶相間的帶型, 形成不同的染色體個性, 以此作為鑒別單個染色體和染色體組的一種手段。21. 核仁是細(xì)胞核內(nèi)由特定染色體上的核仁組織區(qū)締合形成的結(jié)構(gòu),是細(xì)胞內(nèi)合成rRNA,裝配核糖體亞基的部位。22. 核基質(zhì)或稱核骨架(nuclear skeleton),為真核細(xì)胞間期核內(nèi)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),指除核被膜、染色質(zhì)、核纖

18、層及核仁以外的核內(nèi)網(wǎng)架體系。主要成分:中間纖維哺乳類動物中沒有細(xì)胞核的細(xì)胞是(紅細(xì)胞)、成熟的植物篩管無細(xì)胞核細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)包括哪幾部分?核膜 (核孔、核纖層)、染色質(zhì)、核仁、核基質(zhì)2.核定位信號(B)A. 可引導(dǎo)蛋白質(zhì)出核B. 對其連接的蛋白質(zhì)無特殊要求C. 完成轉(zhuǎn)運后被切除D. 與線粒體基因有關(guān)E. 與染色體的組裝有關(guān)3.以下哪些組件與蛋白入核有關(guān)(ABE)A. Ran-GTPB. ImportinC. ExportinD. NESE. NLS4.關(guān)于蛋白質(zhì)入核運輸機制錯誤的是(B)A. 需要ATP供能的主動運輸過程B. 與膜性細(xì)胞器之間的運輸相同C. 由核膜孔道控制D. 運輸過程不切除核定

19、位信號E. 運輸時保持完全折疊的天然構(gòu)象5. 簡述核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和功能.6. 蛋白質(zhì)入核運輸?shù)臋C制與膜性細(xì)胞器之間的運輸有何不同?7. 舉例說明轉(zhuǎn)錄因子核輸入的調(diào)控。8.異染色質(zhì)是(AB)A. 轉(zhuǎn)錄不活躍的染色質(zhì)B. 螺旋化程度高C. 均勻分布在核內(nèi)D. 有核纖層蛋白支持E. 以袢環(huán)形式伸入核仁內(nèi)9在分子組成上,染色體與染色質(zhì)的區(qū)別是(E)A. 有無組蛋白B. 非組蛋白的種類不一樣C. 是否含有稀有堿基D. 堿基數(shù)量不同E. 沒有區(qū)別10.端粒是(ABCD)A. 能維持染色體的穩(wěn)定性B. 由高度重復(fù)的短序列串聯(lián)而成C. 具有細(xì)胞“分裂計數(shù)器”的作用D. 復(fù)制需要反轉(zhuǎn)錄酶(端粒酶)E. 與細(xì)胞

20、的衰老無關(guān)11.簡述核小體的結(jié)構(gòu)特點12.簡述染色體的形態(tài)特征13.關(guān)于核仁的描述,錯誤的是(E)A. 一個細(xì)胞有1個或多個核仁B. 核仁的主要成分為蛋白質(zhì)、RNA和少量DNAC. 核仁的形成與核仁組織區(qū)有關(guān)D. 核仁只存在于細(xì)胞核內(nèi)E. 在有絲分裂間期,核仁消失15.核仁(ABCD)A. 見于間期的細(xì)胞核內(nèi)B. 增殖較快的細(xì)胞有較大和數(shù)目較多的核仁C. 功能是組裝核糖體D. rRNA的合成位于纖維中心和致密中心的交界處E. 在染色體的組裝中其主要作用簡述核仁的功能16.細(xì)胞核是下列哪種生理活動的主要場所(C)A.蛋白質(zhì)合成 B.有氧呼吸C.DNA的儲存和復(fù)制 D. DNA的復(fù)制 17.細(xì)胞核

21、與細(xì)胞質(zhì)之間的通道是( C ) A.胞間連絲 B.外連絲 C.核孔 D.核膜18.下列不屬于細(xì)胞核功能的是( B )A遺傳物質(zhì)貯存和復(fù)制的場所 B細(xì)胞物質(zhì)代謝和能量代謝的主要場所C控制細(xì)胞代謝活動中心 D控制生物遺傳的中心4.用動物的受精卵做以下實驗:提取受精卵的細(xì)胞核,將核單獨培養(yǎng),不久核退化消失。把去掉核的細(xì)胞質(zhì)單獨培養(yǎng),細(xì)胞質(zhì)不久也消失了。把去掉核的受精卵的細(xì)胞質(zhì),重新移植上新核進行培養(yǎng),不僅能正常生活,還能進行細(xì)胞繁殖。以上實驗說明了( C )A、細(xì)胞的全能性 B、細(xì)胞核缺少營養(yǎng)供應(yīng) C、細(xì)胞的完整性 D、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)沒有遺傳物質(zhì)第13章 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo):Key contents for s

22、ignal transduction::I. Signaling molecules:Diversity, Receptors, GTPase switch proteins, protein kinases, adaptor proteins, protein phosphatases II. Signaling Pathways:A. Cell-surface receptor pathways (Receptors that are Ion channels, Signaling through G-protein-coupled receptors, Signaling through

23、 Enzyme-linked receptors, Signaling that involved in proteolysis) B. Intracellular receptor pathways (Nitric oxide pathway, Nuclear receptor pathway)III. The regulation of cell signaling:A. The interaction between different signaling pathways (Convergence, Divergence, Crosstalk)B. The adaptation of

24、targeting cells: Receptor sequestration, down-regulation, inactivation, Production of inhibitory protein, Inactivation of signaling proteinSignaling through Enzyme-linked receptors:1.receptor tyrosine kinase pathway 2.Cytokine receptors pathway 3.TGFb receptors pathwaySignaling that involved in prot

25、eolysis: 1.NF-kB (nuclear factor kB ) pathway 2.Notch/Delta signaling pathway 3.Hedgehog (Hh) pathway 4.Wnt pathway第十五章細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期需要掌握的內(nèi)容:1.有絲分裂及減數(shù)分裂的特點及二者的比較2.細(xì)胞周期及細(xì)胞周期室的概念3.細(xì)胞周期各時相的特點4.細(xì)胞周期的調(diào)控( cyclins-CDKs-CKIs系統(tǒng))及研究方法5.細(xì)胞增殖的概念6.聯(lián)會復(fù)合體的概念及特點7.細(xì)胞周期檢驗點細(xì)胞增殖異常與疾病1. Cell proliferation(細(xì)胞增殖):細(xì)胞分裂和再生的過程,細(xì)胞

26、通過分裂進行增殖,把遺傳信息傳給子代,保持物種的延續(xù)和數(shù)量增多。 2. CDKs家族(Cyclin dependent kinase) CDKs是一組絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,CDK1 93. Cell differentiation(細(xì)胞分化):在細(xì)胞增殖時,子代細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上產(chǎn)生差異的過程,演變?yōu)樘囟ǖ募?xì)胞類型。包括胚胎和成年組織干細(xì)胞(Stem cell)分化。apotosis(細(xì)胞凋亡):體內(nèi)外生理或病理因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細(xì)胞主動死亡過程。又稱程序性細(xì)胞死亡(Programmed cell death, PCD)(一)緒 論細(xì)胞(cell)是生物體形態(tài)和功能活

27、動的基本單位。 細(xì)胞生物學(xué)是一門從細(xì)胞整體、亞顯微結(jié)構(gòu)以及分子三個不同的層次上把細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能統(tǒng)一起來研究,觀察細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、研究細(xì)胞的生命活動的基本規(guī)律的學(xué)科。正常菌群(normal flora):人類的生存和生長發(fā)育需要許多微生物的共生關(guān)系.病原微生物(pathogen): 微生物能導(dǎo)致人類或動植物的疾病發(fā)生.條件致病菌: 一些細(xì)菌在機體健康時不致病,而在人體抵抗力低下時才導(dǎo)致疾病.感染(infection): 微生物在宿主體內(nèi)生活中與宿主相互作用并導(dǎo)致不同程度的病理變化。細(xì)菌侵襲力:病原菌突破機體屏障進入機體并定居、繁殖并擴散毒力:細(xì)菌產(chǎn)生的毒素?fù)p害了機體的組織、器官并引起生理功能的

28、紊亂和病理性的改變 (二) 細(xì)胞膜及其表面結(jié)構(gòu)、核糖體 、線粒體(mitochondrion)細(xì)胞膜的特性1、細(xì)胞膜具有流動性(1)膜脂分子的運動 影響脂雙層流動性的因素: 脂肪酸鏈的長短、飽和度 膽固醇的含量 蛋白質(zhì)的影響 溫度的影響(2)膜蛋白的流動性2、細(xì)胞膜的不對稱性(1)脂質(zhì)雙層的不對稱性:磷脂、膽固醇、糖脂的分布不同 (2)膜蛋白的不對稱性分布:外周蛋白、內(nèi)在蛋白、糖蛋白 細(xì)胞表面是包圍在細(xì)胞質(zhì)外層的一個復(fù)合結(jié)構(gòu)體系和多功能體系。包括細(xì)胞外被、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)溶膠。細(xì)胞外被功能:決定血型、細(xì)胞識別和黏附、抑制增殖、保護液態(tài)鑲嵌模型核糖體:細(xì)胞內(nèi)一種由蛋白質(zhì)與rRNA組成的復(fù)合物顆粒核

29、糖核蛋白顆粒,能按照mRNA的指令由氨基酸高效且精確地合成多肽鏈,是蛋白質(zhì)合成的場所。 大亞基,小亞基 原核的核糖體:70S(30S,50S) 真核的核糖體:80S(40S,60S)*蛋白質(zhì)的合成:原核生物核糖體中有四種與RNA分子結(jié)合的位點,其中一個是與mRNA結(jié)合的位點,另三個是與tRNA結(jié)合的位點。A位點(A site) , P位點(P site), E 位點(exit site ,E site)具體步驟:1、氨基酸的活化和轉(zhuǎn)運(活化的氨基酰tRNA) 2、肽鏈合成的啟動(啟動復(fù)合體) 3、肽鏈的延伸(進位、轉(zhuǎn)肽、脫落、移位) 4、鏈合成的終止(終止因子)。多聚核糖體的意義核酶:某些rR

30、NA具有酶的功能,能夠自我剪接。將具有酶功能的RNA稱為核酶。線粒體(mitochondrion)是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和形成ATP的主要場所。含豐富的心磷脂和較少的膽固醇是線粒體在組成上與細(xì)胞其他膜結(jié)構(gòu)的明顯差別。線粒體內(nèi)、外膜在化學(xué)組成上的主要區(qū)別是脂類和蛋白質(zhì)的比例不同, 內(nèi)膜上的脂類與蛋白質(zhì)的比值低(0.3:1), 外膜中的比值較高(接近1:1)。細(xì)胞呼吸:在線粒體內(nèi),在O2的參與下分解各種大分子物質(zhì),產(chǎn)生CO2;與此同時,分解代謝所釋放的能量儲存在ATP中,這一過程稱為細(xì)胞呼吸,也稱為生物氧化或細(xì)胞氧化。呼吸鏈(電子傳遞鏈):一系列能夠可逆地接受和釋放H+和e-的化學(xué)物質(zhì)所組成的酶體系在

31、線粒體內(nèi)膜上有序地排列成互相關(guān)聯(lián)的鏈狀氧化磷酸化偶聯(lián)機制: 化學(xué)滲透假說(內(nèi)膜上的呼吸鏈起質(zhì)子泵的作用)、ATP的合成(結(jié)合變構(gòu)機制)線粒體半自主性1、 線粒體有獨自的遺傳系統(tǒng)和獨自的蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng),mtDNA 主要編碼線粒體的tRNA、rRNA及一些線粒體蛋白質(zhì)2、 線粒體中大多數(shù)酶和蛋白質(zhì)仍由核編碼3、 與細(xì)胞核的遺傳系統(tǒng)構(gòu)成一個整體。(三)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞核(3個英文選擇)細(xì)胞骨架定義:指真核細(xì)胞中的蛋白纖維交織而成的立體網(wǎng)絡(luò)體系,是細(xì)胞的重要組成部分。 廣義:膜骨架、細(xì)胞質(zhì)骨架、核纖層、核骨架、細(xì)胞外基質(zhì),構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)外的一體化網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。 狹義:指細(xì)胞質(zhì)骨架,位于細(xì)胞質(zhì)中,由微絲、微管、

32、中間纖維構(gòu)成纖維型的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。彌散性、整體性、變動性共同特點:由蛋白質(zhì)亞基構(gòu)成的線性多聚體、動態(tài),可組裝和去組裝、高度保守微管 (中心粒、鞭毛、纖毛、紡錘體)由13根原纖維呈縱向平行排列而成微管蛋白(tubulin):a微管蛋白、b微管蛋白(結(jié)合GTP,可水解為GDP)異二聚體聚合首尾相連原纖維微管(13)微管相關(guān)蛋白是一類可與微管結(jié)合并與微管蛋白共同組成微管系統(tǒng)的蛋白,主要功能是調(diào)節(jié)微管的特異性并將微管連接到特異性的細(xì)胞器上。踏車現(xiàn)象:微管蛋白、GTP濃度達到一定濃度時,在正端結(jié)合上去的微管蛋白與負(fù)端釋放出來的速度相同時,出現(xiàn)的現(xiàn)象。微管組織中心(microtubule organizing

33、 center, MTOC):微管在生理狀態(tài)或?qū)嶒炋幚斫饩酆笾匦卵b配的發(fā)生處。功能(功能控制位點):在細(xì)胞質(zhì)微管裝配過程的成核步驟起重要作用(提供核心,兩種作用)。如中心體、有絲分裂紡錘體極、基體微管的功能:1支架作用 2細(xì)胞內(nèi)運輸 3鞭毛、纖毛運動 4.有絲分裂5. 物質(zhì)運輸微絲 (microvilli、contractile bundle、filopodia、ruffle、contractile ring)由actin蛋白纖維組成的實心纖維細(xì)絲,雙股螺旋結(jié)構(gòu),細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)影響微絲聚合與解聚的特異性藥物與離子:細(xì)胞松弛素cytochalasin(解聚)、鬼筆環(huán)肽phalloidin(穩(wěn)定)、

34、ATP和Ca2+、低濃度的單價離子(Na+、K+等)溶液(趨向解聚)、Mg2+和高濃度的Na+、K+離子溶液(趨向聚合)微絲的功能 構(gòu)成細(xì)胞的支架,維持細(xì)胞的形態(tài) 作為肌纖維的組成成分,參與肌肉收縮 參與細(xì)胞分裂 參與細(xì)胞運動 參與細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運輸 參與細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中間纖維:具有組織特異性腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移后仍保留源細(xì)胞的中間纖維。中間纖維的功能 1、為細(xì)胞提供機械強度支持(交聯(lián)成束、成網(wǎng)到質(zhì)膜或其他骨架成分上) 2、參與細(xì)胞連接(橋粒、半橋粒) 3、維持細(xì)胞核形態(tài)的穩(wěn)定性 (核纖層) 4、參與細(xì)胞運輸 (神經(jīng)絲) 細(xì)胞核真核細(xì)胞中由雙層單位膜包圍核物質(zhì)形成的多態(tài)性結(jié)構(gòu);細(xì)胞內(nèi)最大、最重要的細(xì)胞器;

35、遺傳信息儲存、DNA復(fù)制和RNA轉(zhuǎn)錄的場所;細(xì)胞代謝、生長、增殖和分化等生命活動的調(diào)控中心。核孔復(fù)合體(nuclear pore complex, NPC)是細(xì)胞核內(nèi)外膜融合形成的小孔,直徑約為70 nm,是細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)間物質(zhì)交換的通道(mRNPs、tRNA和核糖體亞基以及細(xì)胞質(zhì)中所合成的所有細(xì)胞核所需的蛋白質(zhì))。核定位信號(NLS):引導(dǎo)蛋白質(zhì)進入細(xì)胞核的一段信號序列。受體為importin。核纖層(nuclear lamina)是位于核膜的內(nèi)表面的纖維網(wǎng)絡(luò) 作用:1支持核膜,保持核的形態(tài);2參與核膜、染色質(zhì)的破解和組裝;3. 參與基因表達的調(diào)控。染色質(zhì)和染色體是同一種物質(zhì)在不同時期的表現(xiàn)

36、形式主要化學(xué)組成:DNA(貯存遺傳信息的生物大分子,結(jié)構(gòu)性質(zhì)穩(wěn)定、數(shù)量恒定的基本成分)組蛋白(H1, H2A, H2B, H3, H4)(富含精氨酸和賴氨酸的堿性蛋白,帶正電荷,對維持結(jié)構(gòu)和功能的完整性起關(guān)鍵作用。其與DNA結(jié)合可抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。)非組蛋白(含天冬氨酸、谷氨酸等酸性蛋白,帶負(fù)電荷,促進復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。)少量的RNA(新合成的各類RNA前體,與DNA模板有聯(lián)系。)異染色質(zhì)(heterochromatin):著色深,靠近于核膜,從結(jié)構(gòu)上來看,其螺旋化程度高,從功能上看,基本上不進行轉(zhuǎn)錄的功能。常染色質(zhì)(enchromatin):著色淺,位于核的內(nèi)部,從結(jié)構(gòu)上來看,其螺旋化程度低

37、,從功能上看,是具有轉(zhuǎn)錄功能的染色質(zhì)區(qū)域。核仁組織區(qū)(nucleolar organizing region, NOR)是細(xì)胞核特定染色體的次縊痕處,含有rRNA基因的一段染色體區(qū)域,與核仁的形成有關(guān)。 端粒是染色體末端的特化部位。有極性。由高度重復(fù)的短序列組成,高度保守。維持染色體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。核型是指染色體組在有絲分裂中期的表型, 是染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和。nuclear matrix或稱核骨架(nuclear skeleton),為真核細(xì)胞間期核內(nèi)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),指除核被膜、染色質(zhì)、核纖層及核仁以外的核內(nèi)網(wǎng)架體系。(四)細(xì)胞連接與細(xì)胞外基質(zhì) 、細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)細(xì)胞連接的分類細(xì)胞外基質(zhì):細(xì)胞

38、合成并分泌到細(xì)胞外的完整的蛋白質(zhì)分子;由多種大分子成分構(gòu)成高度的有組織的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu);不起結(jié)構(gòu)性作用的成分,都不是細(xì)胞外基質(zhì)成分 作用:1、連接不同類型細(xì)胞,構(gòu)成組織和器官,進而構(gòu)成完整的機體。2、對細(xì)胞起支持、保護和營養(yǎng)作用。3、參與細(xì)胞的生理活動:分裂、分化、通訊、運動等。4、參與病理過程:組織修復(fù)、腫瘤轉(zhuǎn)移、膠原病、老年病等。構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子:膠原非膠原糖蛋白氨基聚糖與蛋白聚糖彈性蛋白細(xì)胞與細(xì)胞外基膜的相互作用一、細(xì)胞外基質(zhì)具有復(fù)雜、多樣的生物學(xué)作用1.影響細(xì)胞的存活與死亡 (上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞脫離ECM會發(fā)生凋亡)2.決定細(xì)胞的形狀(細(xì)胞在ECM上,會發(fā)生鋪展)3.調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖(貼

39、壁依賴性生長:細(xì)胞在ECM粘附和鋪展,細(xì)胞周期運行)4.控制細(xì)胞的分化(乳腺細(xì)胞在適當(dāng)?shù)腅CM,才具有分化表型;腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是異常分化的結(jié)果)5.影響細(xì)胞的遷移(ECM控制細(xì)胞遷移的速度和方向)二、在細(xì)胞表面存在各種細(xì)胞外基質(zhì)成分的特異性受體內(nèi)膜系統(tǒng)(endomembrane system) 位于細(xì)胞內(nèi),在結(jié)構(gòu)、功能乃至發(fā)生上有一定聯(lián)系的膜性結(jié)構(gòu)的總稱。包括:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、溶酶體、過氧化氫體及核膜等。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能(一)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能:1、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與蛋白質(zhì)的合成和轉(zhuǎn)運信號肽假說2、蛋白質(zhì)的加工與修飾(折疊、二硫鍵的形成、糖基化)3、膜質(zhì)的合成(二)滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能1、脂類合成2 糖

40、類代謝:糖原合成和分解3 解毒作用4肌細(xì)胞中是Ca+貯存場所5、與水和電解質(zhì)代謝有關(guān)6、與膽汁生成有關(guān)7、機械支持作用高爾基復(fù)合體是由一層單位膜包圍而成的復(fù)雜的囊泡系統(tǒng),電鏡下由小囊泡、扁平囊和大囊泡組成高爾基復(fù)合體的功能1、高爾體復(fù)合體與細(xì)胞中糖蛋白的合成、加工、分泌有關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化溶酶體酶的磷酸化分泌性蛋白的水解2、蛋白質(zhì)的運輸與分選3、膜的轉(zhuǎn)換(五)Signal Transduction (問答英文)ReceptorsDefinition: Any protein that specifically binds to another molecules to mediate cell-

41、cell signaling, adhesion, endocytosis or other cellular process. Mostly commonly denotes a protein located in the plasma membrane or cytoplasm that is activated by binding a specific extracellular signaling molecule (ligand), thereby initiating a cellular response.分膜受體、胞內(nèi)受體 Binding and effector Spec

42、ificity, Saturation, reversibility, and high affinity A protein kinase is an enzyme that modifies other proteins by chemically adding phosphate groups to them (phosphorylation). This usually results in a functional change of the target protein (substrate) by changing enzyme activity, cellular locati

43、on, or association with other proteins.第二信使:是在細(xì)胞內(nèi)的多由胞外信號分子轉(zhuǎn)導(dǎo)的產(chǎn)物,同時又可以介導(dǎo)下一步的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。如cAMP,NOG蛋白偶聯(lián)受體:。The major signaling pathways activated by GPCRs and RTKsSignaling through Enzyme-linked receptors1 receptor tyrosine kinase pathway2 Cytokine receptors pathway3 TGFb receptors pathway還有EPO的轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。(六)細(xì)胞增殖和細(xì)

44、胞周期、細(xì)胞分化 (選擇英文)減數(shù)分裂前期I細(xì)線期(leptotene)偶線期(zygotene)聯(lián)會粗線期(pachytene)重組雙線期(diplotene)交叉端化(terminalization)終變期(diakinesis) 偶線期同源染色體配對的時期,這種配對稱為聯(lián)會(synapsis);這一時期同源染色體間形成聯(lián)會復(fù)合體(synaptonemal complex,SC);聯(lián)會復(fù)合體(SC) 由兩條同源染色體沿縱軸形成,外觀呈梯子狀;能夠幫助交換(DNA重組)的完成;形成于偶線期,成熟于粗線期,消失于雙線期*有絲分裂與減數(shù)分裂的比較 減數(shù)分裂前期有同源染色體配對(聯(lián)會); 減數(shù)分裂

45、遺傳物質(zhì)交換(非姐妹染色單體片段交換); 減數(shù)分裂中期后染色體獨立分離,而有絲分裂則著絲點裂開后均衡分向兩極; 減數(shù)分裂完成后染色體數(shù)減半; 分裂中期著絲點在赤道板排列有差異:減數(shù)分裂中同源染色體的著絲點分別排列于赤道板兩側(cè),而有絲分裂時則整齊地排列在赤道板上細(xì)胞周期由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。分期:G1期(gap1) S期(synthesis phase) G2期(gap2) M期細(xì)胞周期室cell cycle compartment在DNA含量變化的因素及RNA及染色質(zhì)凝集程度等不同條件下,處于G1、S、G2期的細(xì)胞均可以分別處于增殖活性、靜止或分化等狀態(tài);例如RNA及

46、觸發(fā)蛋白的含量可決定G1期細(xì)胞是否能由G1A態(tài)進入G1B態(tài)(增殖活性狀態(tài)),即是否能繼續(xù)進行增殖細(xì)胞周期調(diào)控-cyclins-CDKs-CKIs系統(tǒng)細(xì)胞周期調(diào)控研究方法 免疫組化法:特異性抗體檢測細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白的表達 顯微注射法:將需要研究的物質(zhì)注入周期特定階段的細(xì)胞,了解上述物質(zhì)在周期調(diào)控中的作用 細(xì)胞融合:了解與細(xì)胞周期某一特定活動相關(guān)的調(diào)節(jié)因素,在時間及亞細(xì)胞水平的定位當(dāng)DNA發(fā)生損傷,復(fù)制不完全或紡錘體形成不正常,細(xì)胞將不能通過檢驗點,而使周期被阻斷;檢驗點(check point)1.G1/S檢驗點:在哺乳動物中稱R點(restriction point),控制細(xì)胞由靜止?fàn)顟B(tài)的

47、G1進入DNA合成期,相關(guān)的事件包括:DNA是否損傷?細(xì)胞外環(huán)境是否適宜?細(xì)胞體積是否足夠大? 2. S期檢驗點:DNA復(fù)制是否完成? 3.G2/M檢驗點:是決定細(xì)胞一分為二的控制點,相關(guān)的事件包括:DNA是否損傷?細(xì)胞體積是否足夠大? 4.中-后期檢驗點(紡錘體組裝檢驗點):任何一個著絲點沒有正確連接到紡錘體上,都會抑制后期促進因子 (APC)的活性,引起細(xì)胞周期中斷。細(xì)胞增殖(cell proliferation)細(xì)胞通過生長和分裂使細(xì)胞數(shù)目增加,使子細(xì)胞獲得和母細(xì)胞相同遺傳特性的過程是細(xì)胞生命活動的基本特征之一。細(xì)胞分化(cell differentiation);在個體發(fā)育中,細(xì)胞后代

48、在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程;這種穩(wěn)定性的變化過程是不可逆轉(zhuǎn)的,是一種漸變的、持久的、穩(wěn)定的變化過程。特點:分化狀態(tài)的穩(wěn)定性 ;定向性;條件可逆性;普遍性細(xì)胞決定(cell determination); (定向性的表現(xiàn))1.在許多情況下,一個細(xì)胞分化前,就有了一個預(yù)先保證細(xì)胞怎樣分化的時期,這個時期確定了細(xì)胞分化的方向,這一階段統(tǒng)稱細(xì)胞決定2.也即細(xì)胞從分化命運確定到出現(xiàn)特定形態(tài)的過程. 去分化 (條件可逆性)在特定條件下,分化細(xì)胞的基因活動模式能發(fā)生可逆變化,又回到未分化狀態(tài),稱去分化轉(zhuǎn)決定:果蠅的成蟲盤細(xì)胞通過移植之后未按已決定的命運分化成為一定的器官而分化為成體其他器官的現(xiàn)

49、象。轉(zhuǎn)決定為去分化的一種方式。(干細(xì)胞的普遍性)特定條件下,可以發(fā)生橫向分化(trans-differentiation) 一種組織的細(xì)胞可分化為其他組織的功能細(xì)胞(造血干細(xì)胞肝細(xì)胞)受精的四個過程 精子的獲能(capacitation)精子頭的外表糖蛋白被降解,受體暴露,頂體酶原轉(zhuǎn)化為有活性的頂體酶 頂體反應(yīng)(acrosome reaction)精子通過頭前部(頂體區(qū))質(zhì)膜表面的ZP結(jié)合蛋白(配體-卵結(jié)合蛋白 )與卵母細(xì)胞透明帶上的精子受體-ZP發(fā)生識別,完成結(jié)合過程,誘發(fā)頂體反應(yīng);即頂體以外排的方式釋放出水解酶,將卵子的透明帶和卵黃膜溶解,形成精子穿過的通道; 過程: 1、頂體破開,釋放水

50、解酶; 2、精子前端與受體結(jié)合;3、入卵 皮層反應(yīng)(cortical reaction)去極化使精子受體失活;卵細(xì)胞膜下的皮層顆粒外排,引起透明帶“硬化”,形成受精膜。 原核形成和融合 細(xì)胞分化的實質(zhì)是細(xì)胞基因的差別表達(differential expression)細(xì)胞分化的機制 自發(fā)機制:胚胎發(fā)育中的早期細(xì)胞分離由受精卵中的細(xì)胞質(zhì)控制誘導(dǎo)機制:細(xì)胞之間通過信號系統(tǒng)協(xié)調(diào)分裂、分化和細(xì)胞的行為主要機制 一、細(xì)胞的不對稱分裂(高度的異質(zhì)性) 二、誘導(dǎo)機制 (一部分細(xì)胞誘導(dǎo)其它細(xì)胞向特定方向分化的現(xiàn)象)級聯(lián)信號、梯度信號、拮抗信號、組合信號、側(cè)向信號 三、細(xì)胞數(shù)量控制 (受外界信號的調(diào)節(jié)、細(xì)胞凋

51、亡) 四、細(xì)胞行為 細(xì)胞行為分類:(9)定向分裂(directed mitosis)、差別生長(differential growth)、細(xì)胞凋亡(apoptosis)、細(xì)胞遷移(migration)、區(qū)別粘附(differential adhesion)、細(xì)胞收縮(contraction)、基質(zhì)膨脹(Matrix swelling)、細(xì)胞連接(gap junction)、細(xì)胞融合(fusion) 五、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化 細(xì)胞分化與細(xì)胞增殖的關(guān)系1、增殖信號和分化信號同時作用于干細(xì)胞,表現(xiàn)為邊分化邊增殖(反之亦然);2、增殖和分化分別獨立進行,一部分干細(xì)胞只增殖不分化,另一部分同類干細(xì)胞則進入終末

52、分化3、細(xì)胞分化與分裂平行進行:如許多干細(xì)胞都進行不對稱分裂,產(chǎn)生的子細(xì)胞一個保持原有干細(xì)胞特性,一個則進入終末分化。 細(xì)胞的分化潛能- 全能性(totipotency)在一定條件下,細(xì)胞表達其全部遺傳信息,并進而發(fā)育成完整的充分分化的機體的能力。 多能性(pluripotency)當(dāng)胚胎進一步發(fā)育,有的細(xì)胞具有分化出多種組織的潛能,但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力 單能性(monopotency)在成體中,有的干細(xì)胞只能分化出一種細(xì)胞(七)干細(xì)胞和組織工程 、細(xì)胞工程干細(xì)胞是機體內(nèi)一類能夠進行自我更新和分化的細(xì)胞的統(tǒng)稱。1、具有長期的分裂能力和自我更新能力,2、不具有特定的形態(tài)和功能,3、在一

53、定條件下能分化成特定形態(tài)和功能的成熟細(xì)胞 分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。干細(xì)胞的增殖對稱分裂(增殖分裂、分化分裂)、不對稱分裂(更新分裂)細(xì)胞工程是指應(yīng)用現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的理論與方法,按照人們的需要和設(shè)計,在細(xì)胞水平上的遺傳操作,重組細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和內(nèi)含物,以改變生物的結(jié)構(gòu)和功能。即通過細(xì)胞融合、核質(zhì)移植、染色體或基因移植以及組織和細(xì)胞培養(yǎng)等方法,快速繁殖和培養(yǎng)出人們所需要的新物種的生物工程技術(shù) 。包括基因工程、染色體工程、染色體組工程、細(xì)胞融合工程、細(xì)胞拆合工程、細(xì)胞培養(yǎng)基因工程(DNA重組技術(shù)或分子克?。┗虿僮鞯幕具^程 涉及的過程可用分/合成、切、連、轉(zhuǎn)、選、鑒

54、六個字表示* 體外DNA重組技術(shù)得主要步驟: 獲取目的基因(從生物基因組中分離、逆轉(zhuǎn)錄合成 、人工合成、從基因組文庫及cDNA文庫中篩選獲得、PCR擴增) 將目的基因進行必要得改造 選擇和修飾克隆載體 將目的基因與載體連接獲得含有目的基因得重組載體 重組載體導(dǎo)入相應(yīng)宿主細(xì)胞(在原核細(xì)胞的導(dǎo)入轉(zhuǎn)化(transformation) 在真核細(xì)胞的導(dǎo)入轉(zhuǎn)染(transfection) 篩選出含有重組DNA得細(xì)胞(遺傳學(xué)表型如抗藥性、核苷酸序列分析) 表達產(chǎn)物的后續(xù)處理(分離蛋白質(zhì))2. 用于基因工程的載體:指可以攜帶目的基因進入宿主細(xì)胞的工具。 特點:具有自我復(fù)制能力和較多的拷貝數(shù),易于宿主細(xì)胞的染色體DNA分開,分子相對較小,具有足夠的接納目的基因的容量,有較多的單一限制性核酸內(nèi)切酶位點,有篩選標(biāo)記,具有較高的遺傳穩(wěn)定性。 種類:質(zhì)粒、 噬菌體、噬菌粒、粘粒、病毒和 人工染色體基因工程常用的酶:限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、DNA聚合酶、反轉(zhuǎn)錄酶基因工程有兩個基本的特點分子水平上的操作和細(xì)胞水平上的表達。(八) cell senescence and cell dea

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