芳香膠類藥物的分析

1、第七章 芳香胺類藥物的分析,本章藥物的基本結(jié)構(gòu)是芳環(huán)、氨基、烴胺基,概 述,胺,芳胺 芳伯氨基,本章主要涉及三類藥物,2）酰胺類：代表藥物有對乙酰氨基酚（撲熱息痛）、貝諾酯、鹽酸利多卡因等,1）對氨基苯甲酸酯類：代表藥物有鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸丁卡因等,3）苯乙胺類：代表藥物有腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素、鹽酸多巴胺等,一、對氨基苯甲酸酯類藥物 1、基本結(jié)構(gòu)：均具有對氨基苯甲酸酯的母核,第一節(jié) 芳胺類藥物的分析,苯佐卡因,鹽酸丁卡因,鹽酸普魯卡因胺,1）芳伯氨基特性：具有芳伯氨基，顯重氮化-偶合反應(yīng)；可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。 （2）水解特性：具有酯鍵（或酰胺

2、鍵），易水解，尤其受堿或光、熱的影響能促使水解,2、主要化學(xué)性質(zhì),3）弱堿性：除苯佐卡因外，因其脂烴胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，故游離堿多為堿性，能與生物堿沉淀劑發(fā)生反應(yīng)。 （4）其它特性：游離堿多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑，其鹽可溶于水，難溶于有機溶劑,二、酰胺類藥物 1、基本結(jié)構(gòu)：為苯胺的?；苌铮哂蟹减０被?非那西?。▽σ阴０被揭颐?對乙酰氨基酚（撲熱息痛,醋氨苯砜,貝諾酯（撲炎痛,鹽酸利多卡因,鹽酸布比卡因,1）水解后顯芳伯氨基特性：本類藥物均具有芳酰氨基結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中可水解為具芳伯氨基的化合物，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。 水解反應(yīng)的速度與分子結(jié)構(gòu)有關(guān)： 對乙

3、酰氨基酚（對位取代） 貝諾酯（對位取代） 利多卡因、布多卡因（鄰位2個取代基,2、主要化學(xué)性質(zhì),2）水解產(chǎn)物易酯化：如對乙酰氨基酚，其水解產(chǎn)物為醋酸，可與乙醇生成醋酸乙酯。 （3）酚羥基的特性：具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基，與三氯化鐵作用呈色，如對乙酰氨基酚，可與利多卡因和醋氨苯砜區(qū)別,4）弱堿性：如利多卡因和布比卡因具有脂烴胺側(cè)鏈，顯堿性，能與生物堿沉淀劑反應(yīng)，可與對乙酰氨基酚和醋氨苯砜區(qū)別。 (5) 與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)，鹽酸利多卡因可與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色的配位化合物沉淀,三、鑒別試驗,一）重氮化偶合反應(yīng),1、直接：鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺,鹽酸普魯卡因 Ch

4、P（2000） 鑒別 （1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng) 取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀,2、間接：（酰胺類）對乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯,對乙酰氨基酚 ChP（2000） 鑒別 （2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色,3、鹽酸丁卡因 ：無重氮化反應(yīng)，分子中有芳香第二胺結(jié)構(gòu)可與亞硝酸鈉作用，生成 N - 亞硝基化合物,二）三氯化

5、鐵反應(yīng),對乙酰氨基酚的結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與三氯化鐵試液作用，即顯藍(lán)紫色,三）與重金屬離子反應(yīng),1、與銅和鈷離子反應(yīng),1）鹽酸利多卡因在碳酸鈉試液中，與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，溶于氯仿顯黃色，水層顯紫色,2）鹽酸利多卡因在酸性溶液中，與氯化鈷反應(yīng)生成亮綠色細(xì)小沉淀,2、羥肟酸鐵鹽反應(yīng) 鹽酸普魯卡因胺具芳酰胺結(jié)構(gòu)，其水溶液加三氯化鐵試液與30過氧化氫溶液，加熱先被氧化成羥肟酸，再與三氯化鐵反應(yīng)生成羥肟酸鐵而顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?3、與汞離子反應(yīng)：鹽酸利多卡因與對氨基苯甲酸酯類藥物相區(qū)別,1、鹽酸普魯卡因的鑒別試驗,四）水解產(chǎn)物的反應(yīng),鹽酸普魯卡因 ChP（2000,鑒別 （2）

6、取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀,苯佐卡因 ChP（2000,鑒別 （2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣,2、苯佐卡因的鑒別試驗,五）制備衍生物測熔點 1、測三硝基苯酚衍生物的熔點 鹽酸布比卡因與三硝基苯酚反應(yīng)生成的衍生物，熔點約為194。 2、測硫氰酸鹽衍生物的熔點 鹽酸丁卡因溶于醋酸鈉溶液后，加硫氰酸銨溶液，即析出結(jié)晶性白色沉淀,鹽酸布比卡因 Ch

7、P（2000） 鑒別 （2）取本品，精密稱定，按干燥品計算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄A）測定，在263nm與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.530.58與0.430.48,六）UV,七）IR,鹽酸布比卡因 ChP（2000） 鑒別 （3）本品的紅外光吸收圖譜與對照的圖譜（光譜集324圖）一致,四、特殊雜質(zhì)檢查,一）對乙酰氨基酚的雜質(zhì)檢查,本品是以對硝基氯苯或 酚為原料，得對氨基酚后，再乙?；脤σ阴０被印?Chp規(guī)定除一般雜質(zhì)（酸度、氯化物、硫酸鹽等）外，還需檢查,1、乙醇溶液的澄清度與顏色 本品外觀應(yīng)為白色結(jié)晶或結(jié)晶

8、性粉末，易溶于乙醇,雜質(zhì)來源 中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物,對氯乙酰苯胺 雜質(zhì)對照品法,檢查方法 TLC,其他雜質(zhì) 參比雜質(zhì)對照品法,2、有關(guān)物質(zhì),對氯乙酰苯胺的TLC法檢查，采用硅膠GF254/氯仿-丙酮-甲苯（13：5：2）系統(tǒng)分離進行限度檢查,3、對氨基酚,雜質(zhì)來源 中間體、水解產(chǎn)物,反應(yīng)原理,檢查方法 對照法,取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1m1，搖勻，放置30min；如顯色，與對乙酰氨基酚對照品1.0g加對氨基酚50g用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.005,計算如下：（P29,二）鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查,檢查方法 TL

9、C 雜質(zhì)對照品法,雜質(zhì)來源 水解產(chǎn)生，影響因素如滅菌溫度、時間、溶液pH值、貯藏時間及光線、金屬離子均可加速水解,計算如下：（課本P29,2,1,100,5,2,10,30,100,3,供試品量,允許雜質(zhì)存在的最大量,L,五、含量測定 （一）亞硝酸鈉滴定法 1、原理：具芳伯氨基的藥物。具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定,具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定,2、測定方法 鹽酸普魯卡因 ChP（2000） 取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄A），在1525，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1

10、ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2HCl,1）加入適量KBr加快反應(yīng)速度 KBr為催化劑,NaNO2+HClHNO2+NaCl HNO2+HClNOCl+H2O,在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機理為,3、主要測定條件,1）K1,2）K2,K1 300 K2 加入KBr，可增大被測溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度,2） 溶液的酸度,在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為： HBrHCl H2SO4 HNO3 芳胺：鹽酸 （用量） 1 : 2.56,加入鹽酸的作用： 重氮化反應(yīng)速度加快； 重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定； 防止生成偶氮氨基化合物，影響測定結(jié)果,4

11、）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下2/3處，在攪拌下快速加入滴定液，近終點時方改為慢速滴定,3）室溫條件下滴定：1030,4、指示終點的方法 （1）永停滴定法 ChP（2000）、BP（1998） 原理：用兩個相同的鉑電極，在兩個電極間加一低電壓（約50mv），并串聯(lián)一個微電流計，電極浸在被滴定液中，終點前，線路上無電流或僅有很小的電流流過微電流計，指針為零；到達終點，線路中有電流通過，電流計指針突然偏轉(zhuǎn),2） 外指示劑法 KI淀粉糊劑或試紙 終點變藍(lán) 2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,二）非水溶液滴定法 鹽酸利多卡因結(jié)構(gòu)中酰氨基鄰位有二個甲

12、基，受空間位阻影響，水解較慢，不適宜用重氮化法測定；但其結(jié)構(gòu)中有脂肪胺基-N（C2H5）2，具有弱堿性，可采用非水溶液滴定法,三）分光光度法 對乙酰氨基酚在稀堿性（ 0.4氫氧化鈉）溶液中，在2571nm波長處有最大吸收，可用于定量,按下式計算： 1、原料藥,2、制劑,A,E1,1cm,1,100,稀釋倍數(shù)（D,W樣,100,四）比色法 采用重氮化偶合反應(yīng)進行測定（略） （五）鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定 （略） （六）高效液相色譜法 用高效液相色譜法，以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時測定鹽酸普魯卡因注射中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸（PABA），不需分離提取，方法準(zhǔn)確簡便。 （七）體內(nèi)藥物分析

13、 應(yīng)用示例 對乙酰氨基酚急性中毒的血藥濃度檢測分析 （略,一、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) （一）基本結(jié)構(gòu)：苯乙胺或兒茶酚胺類,第二節(jié) 苯乙胺類藥物的分析,鹽酸克侖特羅,1）弱堿性：具有脂烴胺側(cè)鏈，其氮為仲胺氮。 （2）酚羥基特性：具有鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，酚易氧化，多元酚更易氧化顯色。 （3）光學(xué)活性：本類藥物大多具手性碳原子，具有旋光性。 （4）芳伯氨基特性：如鹽酸克侖特羅的芳伯氨基,二）化學(xué)性質(zhì),本章三類藥物結(jié)構(gòu)與分析方法關(guān)系比較,一）三氯化鐵反應(yīng),苯乙胺類藥物的結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與三氯化鐵試液作用，即顯藍(lán)紫色,三、鑒別試驗,二）甲醛-硫酸反應(yīng),苯乙胺類藥物與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物,

14、三）氧化反應(yīng) 苯乙胺類藥物多數(shù)含有酚羥基，更易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀等氧化劑氧化而呈現(xiàn)不同的顏色,四）UV和IR,脂肪族伯胺的專屬反應(yīng),五）與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng),六）雙縮脲反應(yīng),一）酮體檢查,三、特殊雜質(zhì)檢查,檢查原理：利用酮體在310nm波長處有最大吸收，而藥物本身在此波長處幾乎沒有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長處的吸收度限制酮體的量,二）有關(guān)物質(zhì)檢查 檢查方法：TLC法（高低濃度對比法） （三）鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍檢查 檢查方法：紙色譜下行展開法,四、含量測定 （一）非水溶液滴定法 利用本類藥物分子中的芳伯氨基和側(cè)鏈脂烴胺的堿性，在冰醋酸溶液中，用高氯酸液的滴定，以結(jié)晶紫為指

15、示劑，也可用電位法指示終點,二）溴量法,測定原理：藥物分子中具有苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基的鄰、對位活潑氫能與過量的溴定量地發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法測定剩余的溴，根據(jù)消耗的Na2S2O3滴定液的量，即可計算含量,3 Br2 = + 3 HBr,H,O,C,H,O,H,C,H,2,N,H,C,H,3,去氧腎上腺素,H,O,C,H,O,H,C,H,2,N,H,C,H,3,Br,Br,Br,三）比色法 1.利用本類藥物分子結(jié)構(gòu)中的酚羥基可與亞鐵離子絡(luò)合呈色，可測定鹽酸異丙腎上腺素注射液和鹽酸多巴胺注射液的含量。 2.鹽酸克侖特羅栓劑可采用重氮化偶合反應(yīng)呈色后進行測定,四）提取酸堿滴定法 （五）熒光分光光度法 如腎上腺素含測 （六）高效液相色譜法 廣泛應(yīng)用 （七）衍生化氣相色譜法 如鹽酸芬氟拉明片含測,本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有芳氧丙醇胺基本骨架，主要是一類用于心腦血管疾病的新藥，現(xiàn)也歸入芳香胺類藥物進行討論。典型藥物有氧烯洛爾（心得平、烯丙氧心胺）和鹽酸卡替洛爾（ Ch.P 2000均收載,第三節(jié) 芳氧丙醇胺類藥物,二、鑒 別 試 驗 （一）化學(xué)鑒別反應(yīng) （二）紫外吸收峰特征,一、藥物結(jié)構(gòu)與主要理化性質(zhì) 典型藥物的結(jié)構(gòu),氧烯洛爾 鹽酸卡替洛爾,HCl,三、鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)檢查 采用TLC法的高低濃度對比法進行檢查,四、含