企業(yè)財務(wù)戰(zhàn)略和規(guī)劃茅寧

1、企業(yè)財務(wù)戰(zhàn)略與規(guī)劃企業(yè)財務(wù)戰(zhàn)略與規(guī)劃 茅寧教授茅寧教授 博士生導(dǎo)師博士生導(dǎo)師 南京大學(xué)管理學(xué)院副院長南京大學(xué)管理學(xué)院副院長 一、問題的提出 “一個企業(yè)所做的每一個決定都有其財務(wù)上的一個企業(yè)所做的每一個決定都有其財務(wù)上的 含義，而任何一個對企業(yè)財務(wù)狀況產(chǎn)生影響的含義，而任何一個對企業(yè)財務(wù)狀況產(chǎn)生影響的 決定就是該企業(yè)的財務(wù)決策。因此，從廣義上決定就是該企業(yè)的財務(wù)決策。因此，從廣義上 講，一個企業(yè)所做的任何事情都屬于公司財務(wù)講，一個企業(yè)所做的任何事情都屬于公司財務(wù) 的范疇的范疇” 達摩達蘭（紐約大學(xué)）達摩達蘭（紐約大學(xué)） 公司財務(wù)的由來公司財務(wù)的由來 n觀看兩部紀錄片得到的啟示 n公司的力量：co

2、rporate n華爾街：finance n公司理財(corporate finance)：直譯是企業(yè)法 人的融資，即公司的融資 n股權(quán)資本 n債務(wù)資本 n本質(zhì)：資源的跨期配置 n企業(yè)未來現(xiàn)金流與出資人當前現(xiàn)金流的交換 問題：如何用好別人的錢問題：如何用好別人的錢 n代理成本 n管理者與股東 n股東（管理者）與債權(quán)人 n它人的錢不是免費（easy money），必須要 有回報 n由此帶來財務(wù)的其它活動 n投資決策 n經(jīng)營決策 n為出資人創(chuàng)造價值（財富） 什么是財: 貨幣? n現(xiàn)金為王? n紙幣難以充當追求永恒與不朽的重任 n現(xiàn)金（紙幣）的理論價值是零:歸零貨幣已經(jīng)有3000 種 n從收益的角度

3、看，現(xiàn)金是最差的資產(chǎn) n培根：金錢猶如糞肥，只有播撒出去才有價值 n通貨膨脹不是價格的上漲，而是貨幣的貶值 發(fā)生在巴布亞新幾內(nèi)亞的一件事 n20世紀初，一群澳大利亞人到巴布亞新幾內(nèi)亞山區(qū)尋 找黃金，發(fā)現(xiàn)那里有近100萬人與世隔絕 n當?shù)厝速x予海貝很高的價值 n遠離大海，非常稀少; 易于儲存，不會腐爛 n澳大利亞人開采黃金，空運海貝支付工人工資 n海貝的價值維持了數(shù)年，當?shù)厝丝縿趧淤嵢　必悮ぁ?n結(jié)局 n貝殼數(shù)量迅速增長后造成貶值 n靠貝殼積累的財富化為烏有 中國貨幣供應(yīng)量全球第一 n2010年m2達到70萬億，而美國m2為8.6萬億美元（人 民幣約58萬億 nm2占gdp比重達到180%，而美

4、國只有60%左右 n過去10年，年均m2增速在18%以上，2009年m2增長 近28% n超過gdp增速加cpi大約6個百分點， n政府控制目標是17%，按此，10年后將達到340萬億 n改革開放30年m2增長近700倍 n居民收入增長近30倍 n居民儲蓄增長近300倍 ngdp增長近90倍 ncpi 增長5倍 n成功理財?shù)臉酥荆簯?zhàn)勝m2的增長 什么是財：利潤？ n利潤是會計核算的結(jié)果 n利潤 = 收入 成本 n利潤不等于現(xiàn)金：體現(xiàn)為凈資產(chǎn)的增加，但不能為你支 付任何帳單 n應(yīng)收帳款：客戶的支付承諾 n資本支出：以折舊形式在以后逐步計入 n為什么最賺錢的企業(yè)最缺錢 n資本成本：只計算債務(wù)資本成

5、本（財務(wù)費用） n股權(quán)資本：免費午餐？ n面向歷史還是面向未來 n財務(wù)數(shù)字是經(jīng)營活動的滯后反映 n經(jīng)營業(yè)績的不連續(xù)性 利潤是會計核算的結(jié)果 n*st星美(000892) 08年凈利潤12.03億元，eps=2.91 元 n實現(xiàn)營業(yè)收入僅1.1 萬元，營業(yè)利潤為-1.05億元 n依靠債務(wù)重組收益：以前巨額欠債減少部分算成了 收益（3折） n總資產(chǎn)4.69億元、總負債高達17億元 n只有4名員工：董事會秘書、證券事務(wù)代表、兩名 財務(wù)人員 n大商股份（600694）08年凈利潤2.3億元 n債務(wù)重組損益高達3.79億元, 貢獻凈利潤2.84億元 n通過會計估計變更（折舊期從10年變?yōu)?年）增加 折舊

6、及攤銷額3.82億元, 減少凈利潤2.9億元 什么是財: 資產(chǎn)? n資產(chǎn)的定義：基于歷史，聯(lián)系未來 n1992年：企業(yè)擁有或者控制的能以貨幣計量的經(jīng)濟資 源，包括各種財產(chǎn)、債權(quán)和其他權(quán)力 n2000年：過去的交易事項形成并由企業(yè)擁有或者控制 的資源，該資源預(yù)計會給企業(yè)帶來經(jīng)濟利益 n固定資產(chǎn)：錢已經(jīng)花掉、但不愿意打入當期成本的支出 n資產(chǎn)變壞（減損）可能性遠遠大于變好（增值）可能性 n存貨跌價 n應(yīng)收賬款壞賬 n固定資產(chǎn)過時 n長期投資失敗 n負債更容易變好（不用償還），而不是變壞 常熟科弘的例子 n常熟2007年第一利稅大戶，實現(xiàn)銷售113億元，凈利4億 元 n2008年初稱年銷售額將達到1

7、60億至180億元，目標是 2010年達到500萬噸鍍鋅鋼鐵的產(chǎn)能 n加大投資：前后9期，只有1、2期正常運營，其余在建 n帳面總資產(chǎn)74.4億元，負債55.75億元，凈資產(chǎn)近20億 n金融危機的加劇、國內(nèi)同行新生產(chǎn)線的竣工使公司發(fā)展 戰(zhàn)略形成了可怕的資金黑洞 n國內(nèi)銀行決意向科弘催貸、外資銀行拒絕對科弘放貸 n依靠高負債經(jīng)營的科弘資金鏈斷裂 n預(yù)計可回收資產(chǎn)價值尚不足24億元 什么是真正的財 n財=貝+才 n財富=價值創(chuàng)造 n基本因素: 公司理財?shù)亩U n成長性（滾雪球）：速度與時間 n盈利性（資本效率）：投資回報率 n風險性（穩(wěn)健性）：波動 n可持續(xù)增長是第一要素 n資本效率對可持續(xù)增長的支

8、持 公司財務(wù)的內(nèi)涵 n會計會計(account)：基于歷史的簿記與核算活動：基于歷史的簿記與核算活動 n財務(wù)財務(wù)(finance)：基于未來的價值確定與決策分析，是：基于未來的價值確定與決策分析，是 研究應(yīng)該如何進行決策的學(xué)問研究應(yīng)該如何進行決策的學(xué)問 n不僅僅是財務(wù)管理人員才可以涉獵的領(lǐng)域，也是總經(jīng)理不僅僅是財務(wù)管理人員才可以涉獵的領(lǐng)域，也是總經(jīng)理 們應(yīng)關(guān)切的工作們應(yīng)關(guān)切的工作 n分配公司寶貴資源的學(xué)問分配公司寶貴資源的學(xué)問 n我們應(yīng)該怎樣做出投資決策我們應(yīng)該怎樣做出投資決策 n我們應(yīng)該怎樣為投資決策安排融資我們應(yīng)該怎樣為投資決策安排融資 n管理者所做出的決策對于股東及其他利益相關(guān)者（管管理

9、者所做出的決策對于股東及其他利益相關(guān)者（管 理層、員工、供應(yīng)商、顧客、政府、社會）的價值有理層、員工、供應(yīng)商、顧客、政府、社會）的價值有 何影響？何影響？ 財務(wù)管理:歸屬于不同的管理層次 n清晰的 遠景目標 及戰(zhàn)略 n合理的組織 結(jié)構(gòu)及決策 體系 n有效的管理程序 n戰(zhàn)略：以創(chuàng)造價值為導(dǎo)向的財務(wù)戰(zhàn)略思想 n組織：條理清晰的財務(wù)組織模式 n程序 n指導(dǎo)業(yè)務(wù)單元發(fā)展方向的規(guī)劃程序 n指導(dǎo)業(yè)務(wù)單元日常經(jīng)營活動的經(jīng)營預(yù)算計劃程序 n建立業(yè)績至上企業(yè)文化的人才考核激勵程序 n控制 n保證交易安全的客戶資信管理制度 n保證資金安全和被有效利用的資金管理制度 n嚴格的內(nèi)控制度 企業(yè)財務(wù)戰(zhàn)略的內(nèi)涵 n為使企業(yè)

10、在較長時期（如五年以上）內(nèi)的生存 和發(fā)展，在充分預(yù)測、分析、估量影響企業(yè)長 期發(fā)展的內(nèi)外部各種因素的基礎(chǔ)上，對企業(yè)財 務(wù)作出的長遠謀略 n從財務(wù)管理到財富管理 n如何有效地管理公司財務(wù)資源，實現(xiàn)財 務(wù)績效與產(chǎn)品、市場、客戶、競爭與戰(zhàn) 略的持續(xù)互動 資本時代與財務(wù)資本時代與財務(wù) n司馬遷史記.貨殖列傳 n無財作力 n少有斗智 n既饒爭時 n資本時代: 資本的力量經(jīng)過長時間的匯集成長，達到了 一個可以產(chǎn)生本質(zhì)性變化的時代 n不僅僅是以財務(wù)數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，對企業(yè)進行有效的控制， 還要包括充分利用資本市場，實現(xiàn)財富放大效應(yīng) 二、財務(wù)戰(zhàn)略目標：可持續(xù)成長 成長的煩惱成長的煩惱 n增長是企業(yè)永恒的主題增長是企

11、業(yè)永恒的主題 n主營業(yè)務(wù)收入的增長主營業(yè)務(wù)收入的增長 n凈利潤的增長凈利潤的增長 n風險與機遇同在風險與機遇同在 n核心業(yè)務(wù)一旦形成，追求新的增長點導(dǎo)致新的風險核心業(yè)務(wù)一旦形成，追求新的增長點導(dǎo)致新的風險 n能夠?qū)⒂行г鲩L維持數(shù)年的公司平均不到能夠?qū)⒂行г鲩L維持數(shù)年的公司平均不到1/10 n大多數(shù)情況是試圖增長的努力造成整個公司的解體大多數(shù)情況是試圖增長的努力造成整個公司的解體 n增長的陷阱增長的陷阱 n以錯誤的方法尋求增長會比不增長更糟糕以錯誤的方法尋求增長會比不增長更糟糕 系族企業(yè)的教訓(xùn) n系族企業(yè)系族企業(yè): 通過快速擴張控制多個公司并組成關(guān)聯(lián)通過快速擴張控制多個公司并組成關(guān)聯(lián) n德隆系德

12、隆系, 格林柯爾格林柯爾, 華源華源 n企業(yè)快速成長的基本路徑企業(yè)快速成長的基本路徑 n宿命：快速成長宿命：快速成長土崩瓦解土崩瓦解 n郎郎“閑評閑評”的巨大殺傷力何在？的巨大殺傷力何在？ n管理、法律和政治方面的弱點管理、法律和政治方面的弱點 n財務(wù)的根源財務(wù)的根源 n沒有業(yè)績支持的激進擴張：造血能力不足沒有業(yè)績支持的激進擴張：造血能力不足 n借短用長：依賴短期融資和間接融資借短用長：依賴短期融資和間接融資 n多元化沖動：現(xiàn)金并購多元化沖動：現(xiàn)金并購 奶業(yè)生死劫的成因 n為什么十年競爭的勝出者三鹿、蒙牛和伊利同時成 為“問題奶事件”中的焦點，而競爭暫時落敗者(三元) 反而幸免于難 n蒙牛：

13、2000年至2007年，銷售從2.47億元飆升至 213億元，增長了85倍 n放棄上游、搶占下游的低成本擴張模式 n在奶業(yè)縱向產(chǎn)業(yè)鏈中，奶牛養(yǎng)殖生產(chǎn)、奶品加工、奶 制品銷售三個環(huán)節(jié)的投入比通常為7.5 1.5 1，利 潤比則為1 3.5 5.5 n高速發(fā)展的奶制品行業(yè)與原奶供應(yīng)能力之間的缺口越來 越大 n在奶制品產(chǎn)量增長近28倍的同時，奶牛存欄數(shù)僅從 1998年的439.7萬頭增加到2007年的1387.9萬頭，只 增長了3倍多 為什么雪球滾不大 n失速點（stall points）：）：企業(yè)銷售收入增長出現(xiàn)重大回落的時間 ，即增長的停滯點 n突然到來 n沒有軟著陸 n重獲增長的概率很小 n不

14、可控因素（13%） n政府監(jiān)管、經(jīng)濟不景氣、勞動力市場缺乏靈活性 n可控因素（87%）= 戰(zhàn)略因素（70%）+組織因素（17%） n最重要的可控因素（55%）：前三個都是戰(zhàn)略因素 n高估優(yōu)勢地位（23%） n創(chuàng)新管理失靈（13%） n過早放棄核心業(yè)務(wù)（10%） n人才儲備匱乏（9%） n奧爾森等，為什么雪球滾不大，中國人民大學(xué)出版社，2010年 對公司失敗的一般解釋 n“適者生存”理論：群體生態(tài)學(xué) n有更強大的公司進入市場搶走了生意 n“生生死死”理論：生命周期說 n生與死的循環(huán)是不可避免的 n“自我毀滅”理論 n壞習慣導(dǎo)致，而習慣是后天習得的 n意義：前兩種理論是悲觀的，而第三種理論是積極的

15、 n改正“自我毀滅”的習慣 n設(shè)計預(yù)防措施避免“自我毀滅” 習慣的形成 n領(lǐng)導(dǎo)的作用：ceo一手造成的 壞習慣 n追求卓越（in search of excellence）中被視為世 界級公司典范的企業(yè)的現(xiàn)狀 n不是在困境中掙扎，就是已不復(fù)存在 nsears, at細胞中tfpi-2蛋白表達明顯增強，同時mrna的表達水平也較 處理前明顯提高(p0.05)。結(jié)論食管癌細胞系tfpi-2基因超甲基化可抑 制其mrna表達，當其超甲基化解除后，細胞增殖受到抑制，同時細胞凋 亡率相應(yīng)提高。 【關(guān)鍵詞】食管癌;組織因子途徑抑制物-2;5-氮雜-2-脫氧胞苷;甲基化;免疫 組化;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng);凋亡

16、 abstract：objectivetoexploretheeffectsof5-aza-2-deoxycytidine (5-aza-cdr)interventiononthegrowthandproliferationofeca9706cellline andproteinexpressionoftissuefactorpathwayinhibitor-2(tfpi-2).methods eca9706celllinewastreatedby5-azacdrofdifferentconcentrations;mtt， flowcytometry，immunohistochemistrya

17、ndrt-pcrwereusedtodetermine thecellgrowth，apoptosis，andtheexpressionoftfpi-2geneandits protein.resultseca9706celllinehadhypermethylationoftfpi-2.after demethylationby5-aza-cdrtreatment，theproliferationofeca9706was inhibited，theapoptosisratewasalsoincreasedsignificantlyinthe concentration-dependentma

18、nner.rt-pcrdetectedthatmrnaexpressionof tfpi-2geneineca9706celllinerecoveredsignificantly(p0.05).conclusion 5-aza-cdrcanslowthegrowthofeca9706cell，increasetheapoptosis rate，reactivatethetfpi-2genetranscriptionandproteinexpressionby demethylation. keywords：esophagealcarcinoma;tissuefactorpathwayinhib

19、itor-2; 5-aza-cdr;methylation;immunohistochemistry;rt-pcr;apoptosis 組織因子途徑移植物2(tissuefactorpathwayinhibitor，tfpi-2)是絲氨酸蛋 白酶抑制物，在調(diào)控腫瘤細胞浸潤轉(zhuǎn)移方面起著重要作用。目前，關(guān)于tfpi-2 在食管癌中的基因表達情況的分析研究尚少。本研究旨在探討tfpi-2基因的失 活機制，并尋找食管癌治療的新靶點。 1材料與方法 1.1材料 rpmi-1640培養(yǎng)基購自北京索萊寶生物科技有限公司;標準胎牛血清購自天 津市灝洋生物制品科技有限公司;trizol試劑購自mbi公司;rt-

20、pcr試劑盒購自 mbi公司;5-aza-cdr購自sigma公司;人食管癌細胞株eca9706由鄭州大學(xué)腫瘤 生物學(xué)研究室惠贈。 1.2細胞培養(yǎng)和藥物處理 人食管癌細胞eca9706以含10ml/l胎牛血清的rpmi-1640培養(yǎng)基，37、 50ml/lco2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每23d消化傳代1次。 1.3mtt法檢測干預(yù)前后細胞增長率的變化 取對數(shù)生長期細胞，調(diào)整密度至5104/ml接種于96孔板，按5-aza-cdr濃 度分為6組：0、0.4、1.6、6.4、25.6、102.4mol/l，每組復(fù)設(shè)5個孔。待細 胞貼壁后，分別于24、48、72h后加入mtt液，4h后棄去上清液，每孔加 dms

21、o150l，在490nm波長測定各孔吸光度值(absorbance，a)。細胞增 殖抑制率(cellularproliferationinhibitionrate，cpir)按公式計算：cpir=(1- 實驗組a均值/對照組a均值)100%。 1.4流式細胞儀(fcm)檢測干預(yù)前后細胞凋亡率的變化 取對數(shù)生長期細胞，按5105/ml的密度接種于6孔板內(nèi)，待細胞貼壁后加 藥，分組如下：對照組(0mol/l),1.6mol/l5-aza-cdr組，25.6mol/l5- aza-cdr組，102.4mol/l5-aza-cdr組。每組均于5-aza-cdr作用48h后消 化收集細胞，700ml/l

22、冰乙醇固定，流式細胞儀進行細胞凋亡測定。 1.5rt-pcr技術(shù)檢測tfpi-2基因mrna的表達 分組同fcm，每組細胞均5-aza-cdr作用48h。tfpi-2的上、下游引物分別 為5-gtcgattctgctgttttcc-3和5-atggaattttctttggtgcg-3， 合成產(chǎn)物為440bp;-actin作為內(nèi)參照，上下游引物分別為5- aggcattgtgatggactccg-3和5-agtgatgacctggccgtcag-3，合 成產(chǎn)物為301bp。按照試劑盒說明書，用trizol試劑提取細胞總rna，經(jīng)紫外 分光光度計分析后，按sigma公司revertaidfirst

23、strandcdnasynthesiskit 說明書操作。先逆轉(zhuǎn)錄制備單鏈cdna，再以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板，用上、下游 產(chǎn)物進行pcr反應(yīng)擴增目的基因。反應(yīng)條件為：94預(yù)變性3min，然后94 變性30s,51退火30s,72延伸30s，循環(huán)30次，最后72延伸5min,4 保溫。擴增片段經(jīng)20g/l瓊脂糖凝膠電泳鑒定。 1.6免疫組化方法檢測tfpi-2蛋白的表達 取對數(shù)生長期細胞，按5104/ml的密度接種于經(jīng)預(yù)處理的蓋玻片上，待 細胞貼壁后加藥(分組同rt-pcr)。培養(yǎng)48h后加入40g/l多聚甲醛溶液固定 30min,30ml/lh2o2封閉內(nèi)源性過氧化物酶，室溫下10min,100m

24、l/l動物 血清封閉，室溫下10min，滴加1 100的稀釋的tfpi-2抗體4過夜，二抗 室溫下1h，滴加辣根酶標記鏈霉卵白素，37孵育30min，dab顯色，蘇 木精復(fù)染，脫水透明封片。另取爬片滴加pbs液代替一抗作為陰性對照。 結(jié)果判定：tfpi-2蛋白陽性信號均呈棕黃色顆粒樣物質(zhì)，位于細胞質(zhì)內(nèi)。光 鏡下隨機選取10個視野(每個視野觀察細胞數(shù)不少于100個)，按陽性細胞所 占百分比進行結(jié)果判定。陽性率=(陽性細胞數(shù)/1000)100%。 1.7統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用spss16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。實驗數(shù)據(jù)采用均數(shù)標準差(x-s) 表示，采用單因素方差分析加lsd兩兩比較法進行分析。檢驗水準

25、=0.05。 2結(jié)果 2.1干預(yù)前后細胞增長率的變化 經(jīng)mtt檢測，結(jié)果顯示，實驗組細胞抑制率明顯高于未加藥組，且隨著作 用時間的延長和濃度的增加而增加(表1)。表1不同濃度的5-aza-cdr對 eca9706細胞增殖的影響 2.2干預(yù)前后細胞凋亡率的變化 流式細胞儀分析可見，經(jīng)不同濃度5-aza-cdr誘導(dǎo)48h后，eca9706細胞 各處理組凋亡率分別為(13.760.47)%、(26.970.39)%、(41.030.19)%， 與5-aza-cdr誘導(dǎo)濃度成正比。與對照組(1.390.27)%比較差異有統(tǒng)計學(xué) 意義(p0.05)，且各濃度組間比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05，圖1)

26、。以 上實驗重復(fù)5次。 2.3干預(yù)前后eca9706細胞mrna的表達情況 擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳顯示，eca9706細胞中tfpi-2mrna表達在 各用藥組和未用藥組之間有明顯差異，tfpi-2mrna在未用藥組細胞中未 見表達。經(jīng)1.6、25.6、102.4mol/l5-aza-cdr處理后可見tfpi-2mrna 表達，表明在一定范圍內(nèi)隨5-aza-cdr藥物濃度的增加tfpi-2mrna表達 逐漸增強(圖2)。圖1各組流式細胞凋亡散點圖a：對照組;b：1.6mol/l5- aza-cdr組;c：25.6mol/l5-aza-cdr組;d：102.4mol/l5-aza-cdr組。

27、圖25-aza-cdr處理前后eca9706細胞tfpi-2mrna的表達m：dna marker;-actin：301bp;tfpi-2：440bp;1：對照組;2：102.4mol/l組;3： 25.6mol/l組;4：1.6mol/l組;5：h2o對照組。,2.4干預(yù)前后tfpi-2蛋 白的表達情況免疫組化結(jié)果顯示，經(jīng)5-aza-cdr作用eca9706細胞48h， tfpi-2蛋白的陽性表達率增加，對照組、1.6mol/l組、25.6mol/l組、 102.4mol/l組tfpi-2蛋白的陽性表達率分別為(2.101.42)%、 (9.312.70)%、(14.723.50)%、(68

28、.203.20)%，不同濃度組之間以 及用藥組與對照組之間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05，圖3)。圖3各 組tfpi-2蛋白的表達情況 3討論 人tfpi-2(htfpi-2)基因定位于7q22區(qū)域，全長由8164個堿基組成，其 cdna全長為1222kb。其mrna的啟動子具有典型的管家基因特征，沒 有典型的tata盒或caat盒，在推定的轉(zhuǎn)錄起始位點區(qū)域gc含量超過 80%1。tfpi-2可在體內(nèi)多種組織廣泛表達，在這些組織內(nèi)一旦出現(xiàn)腫瘤， tfpi-2的表達水平也會隨之顯著下降2。有研究證實，在絨毛膜癌、乳腺 癌、前列腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤、纖維肉瘤和胸部惡性腫瘤組織中，與腫 瘤產(chǎn)生相關(guān)

29、的tfpi-2表達水平減少可能與其啟動子的甲基化密切相關(guān)1,3- 5。啟動子區(qū)cpg島高甲基化在腫瘤形成機制中的確切作用尚不清楚，然 而眾多證據(jù)表明，腫瘤抑癌基因cpg島異常的甲基化導(dǎo)致基因失活和轉(zhuǎn)錄 抑制是腫瘤發(fā)生的重要機制之一6-8。 目前，有體外實驗表明，dna甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-aza-cdr通過去甲 基化作用可使多種含有cpg島的高甲基化抑癌基因重新表達，從而恢復(fù) 抑癌功能9。本實驗rt-pcr結(jié)果顯示，tfpi-2在eca9706細胞中無表 達，經(jīng)過不同濃度的5-aza-cdr處理eca9706細胞后，tfpi-2亦重新出 現(xiàn)表達，且在一定范圍內(nèi)隨藥物誘導(dǎo)濃度的增大表達逐漸增強。

30、mizuno等10研究表明，腫瘤細胞中dnmt的表達較正常的高412倍， 也證實dnmt上調(diào)參與腫瘤發(fā)生。這與我們的實驗結(jié)果一致。根據(jù)mtt 實驗可知，經(jīng)過5-aza-cdr干預(yù)處理過的eca9706細胞增殖明顯受抑制， 且隨著藥物濃度的增加，抑制作用越明顯。從本實驗結(jié)果分析，dna啟 動子區(qū)去甲基化能較明顯地抑制食管癌細胞增殖，并與其誘導(dǎo)劑量呈正 相關(guān)，推測這種抑制作用與去甲基化后重新激活tfpi-2基因的轉(zhuǎn)錄和表 達有著直接關(guān)系;此外可能與去甲基化后誘導(dǎo)細胞凋亡有關(guān)。進而通過流 式細胞儀分析，結(jié)果顯示，經(jīng)不同濃度5-aza-cdr干預(yù)的eca9706的細 胞中，用藥組與對照組相比細胞凋亡率

31、凋亡率有所增加，并且與5-aza- cdr誘導(dǎo)劑量有依賴性關(guān)系。bender等11在同等條件下用5-aza- cdr處理惡性腫瘤細胞系和正常纖維細胞系時，發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞增殖均被 抑制，而纖維細胞增殖不被抑制。因此，5-aza-cdr對eca9706細胞增 殖的抑制及凋亡的增加不是藥物的毒性影響，可能是因為使tfpi-2重新 表達的結(jié)果。 目前，國外以tfpi-2為藥物研究靶點，就tfpi-2在腫瘤治療、腫瘤臨床診斷、 促進傷口愈合和動脈粥樣硬化治療等領(lǐng)域中的應(yīng)用，也正在進行廣泛深入的研 究。本研究用甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-aza-cdr處理人食管癌eca9706細胞株，檢 測tfpi-2基因表達的變

32、化及其對細胞增殖和凋亡的影響，以期尋找治療腫瘤的 新靶點。 【參考文獻】 1hubef，reberdiaup，iochmanns，etal.characterization andfunctionalanalysisoftfpi-2genepromoterinahumanchoriocarcinoma celllinej.thrombres，203，109(4)：207-215. 2miyagiiy，koshikawan，yasumitsuh，etal.cdnacloning andmrnaexpressionofaserineprotein5andtissuefactorpathway in

33、hibitor-2j.jbiochem，1994，116(5)：939-942. 3raocn，segawat，navarijr，etal.methylationoftfpi-2 geneisnotthesolecauseofitssilencingj.intjoncol，2003，22(4)： 843-848. 4kondurisd，srivenugopalks，yanamandran，etal. promotermethylandsilencingofthetissuefactorpathwayinhibitor-2(tfpi-2)， ageneencodinganinhibitorofmatrixmetall