癲癇型腦病的基因研究進(jìn)展（干貨分享）

1、2020年癲癇型腦病的基因研究進(jìn)展（課件）癲癇型腦病的基因研究進(jìn)展摘要:癲癇性腦?。╡pilp enchlopthies，EEs）是癲癇性異常導(dǎo)致進(jìn)展性腦部功能障礙，是一種兒童期常見(jiàn)的腦部疾病，以多種嚴(yán)重的癲癇癥候群為特征的神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂性疾病。EES病因尚不明確，多數(shù)研究將病因指向癲癇基因，本文在查閱大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料基礎(chǔ)上綜述癲癇基因的研究進(jìn)展。關(guān)鍵詞:癲癇型腦病;基因;突變ntic rsearchadvnc inepti enphalopyAbsac: epileptic encphalath （pilepi encephalotes, Es) s epilpticdefectin a

2、dced bran ysunctio，s acommon hildhoddiease of he rain, is chaacerizedby rty of sever pilesy ydrome funcion sodr ofthe ervousse。The iology of EES isot lear o studies pointo epilepsy gne。 Ths paper reewst resarc proess feilepsy ees baeo a lage nmber ofdosi and freiglterate。.Kywords：epileps ncephalopy；

3、ee；uaonEs是發(fā)生在嬰兒和兒童的嚴(yán)重痙攣性疾病，首次發(fā)病多見(jiàn)兒童、青年時(shí)期，男性高于女性1，癲癇兒童死亡率是成人的10倍2，然而癲癇型腦病的病因、發(fā)病機(jī)制仍不十分明確,年齡依賴性是EES的共同特征，早發(fā)性癲癇性腦?。╡ary-onset epipicnepaloptes，EOEE）包括早發(fā)性肌陣攣腦?。╡arlymycncepl enephalpaty，EME)、大田原綜合征（Ohthar ydroe,OS）、嬰兒惡性游走性部分性癲癇（mgnt migratg prtial seizuesn nfacy，PSI）、est綜合征及avet綜合征.目前臨床仍局限于對(duì)癥治療，近年來(lái)的研究將癲癇

4、病因指向基因突變和全基因拷貝數(shù)變異,雖然缺乏確切的數(shù)據(jù)和對(duì)應(yīng)的基因型-表型關(guān)系，但是隨著基因檢測(cè)技術(shù)的不斷提高，對(duì)癲癇型腦病基因研究逐漸明朗,目前發(fā)現(xiàn)多種基因變異可導(dǎo)致癲癇型腦病的發(fā)生。.1。癲癇型腦病的基因研究 Es主要是由于癲癇發(fā)作或者癲癇間隙頻繁放電引起，嬰幼兒時(shí)期的癲癇型腦病影響大腦發(fā)育，突觸可塑性形成以及神經(jīng)環(huán)路形成,可導(dǎo)致認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)功能發(fā)育遲緩，智力發(fā)育遲緩、孤獨(dú)癥等嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。有研究顯示0的癲癇病因與遺傳因素有關(guān)4,目前癲癇基因研究進(jìn)展速度較快，有一部分基因篩查已經(jīng)在臨床開展?；蜓芯考夹g(shù)從早期的微陣列技術(shù)發(fā)展到二代基因測(cè)序技術(shù),現(xiàn)代的全外顯子測(cè)序（whleexo seq

5、uenci，ES)與全基因組測(cè)序，加速了癲癇基因的檢出率,對(duì)癲癇基因研究提供有益的幫助，基于目標(biāo)捕獲的WS 技術(shù)將為EES基因研究提供有力證據(jù)5。從遺傳學(xué)的角度來(lái)看,有幾十個(gè)基因與EEs相關(guān),而且到目前為止，很難找到一個(gè)共同機(jī)制來(lái)解釋Es6。.1。 STBP突觸融合蛋白結(jié)合蛋白基因(STX1）位于9q34。1編碼TXP1蛋白，遺傳方式為顯性遺傳，在神經(jīng)元中表達(dá),調(diào)節(jié)神經(jīng)元鈣通道敏感性，負(fù)責(zé)突觸間神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，促進(jìn)突觸囊泡的沉淀與膜融合,參與突觸囊泡循環(huán).TXBP1致EE機(jī)制為該蛋白質(zhì)通過(guò)結(jié)合snan-1A(STX1)調(diào)節(jié)突觸小泡融合和神經(jīng)遞質(zhì)釋放，改變其構(gòu)象并調(diào)節(jié)ARE復(fù)合物【7】。在蛋白質(zhì)

6、水平，該突變導(dǎo)致STP1的結(jié)構(gòu)域3b和結(jié)構(gòu)域2的部分完全喪失。STP（mn8 1）突變與各種類型的癲癇有關(guān)，目前已發(fā)現(xiàn)的STBP1基因突變有32個(gè)雜合突變類型，主要發(fā)生在生命早期.il等8對(duì)5位早期癲癇腦病患兒進(jìn)行基因篩查，RI腦皮質(zhì)檢查和陰性代謝篩查，記錄標(biāo)準(zhǔn)腦電圖和視頻腦電圖,5例患兒中包括38例Ohtaaa綜合征，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5種新的STXP突變，所有出現(xiàn)突變的患者都表現(xiàn)出htara綜合征，提示SXP1基因突變是Ohtahaa綜合征的可能病因.aisu0同樣在患有Oahaa綜合征中發(fā)現(xiàn)STXP1突變，另一項(xiàng)研究顯示Ohtahra綜合征患兒在嬰兒晚期癲癇發(fā)作停止、腦電圖表現(xiàn)為陣發(fā)性活動(dòng)繼而出現(xiàn)

7、快節(jié)律，強(qiáng)烈提示STBP1基因突變.然而Depez等1在10例癲癇發(fā)作性腦病患者中發(fā)現(xiàn)了6例SXB1畸變，沒(méi)有一例TXBP1基因突變被診斷為Ohaha綜合征，由此可見(jiàn)TXBP在Ohahara綜合征的特異性并不明確。.1。2 CDK細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶樣5（Cln-deennt kinase ike5，CD5)位于Xp2,其基因異常導(dǎo)致早期癲癇性腦病，主要累及女童，以生命早期難治性驚厥為特點(diǎn)，隨著年齡增加可出現(xiàn)ett樣癥狀，例如咬手指等刻板動(dòng)作、自閉癥、大腦發(fā)育緩慢、睡眠障礙、過(guò)度換氣等，M可見(jiàn)白質(zhì)內(nèi)高強(qiáng)信號(hào)。CDKL5致EES機(jī)制目前尚無(wú)定論,CDL5基因突變?cè)谂栽缙诎d癇腦病患兒中發(fā)病

8、率為9281213。elni14對(duì)6例Es患兒進(jìn)行視頻腦電圖監(jiān)測(cè)和基因檢測(cè),其中2例患有癲癇性痙攣，4例患有固定型復(fù)雜的癲癇發(fā)作模式，5例患兒CDKL5基因異常,CD5異常患兒均為女童.雖然DKL5為X染色體基因，但是在部分男性癲癇腦病患兒中也發(fā)現(xiàn)CDKL基因突變，Lian Johwann15對(duì)125例Es患者進(jìn)行基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)%的男性患者和的癲癇性腦病女性患者有CDKL5改變,BaBuisso12認(rèn)為表型異質(zhì)性與基因突變的性質(zhì)或位置無(wú)關(guān),或與x染色體失活的模式有關(guān),iang aoSw1認(rèn)為女性CKL5基因異常頻率高于男性原因可能為女性有兩個(gè)X染色體。.1.3 TAN1SPA基因位于9q333q

9、341,在調(diào)節(jié)突觸結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、脊髓和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的髓鞘化發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要作用.SPT1異常在st ynre（WS）中被發(fā)現(xiàn)，患兒伴有髓鞘形成減少，不良的視覺(jué)注意力，以及發(fā)育遲緩。el16研究了10位9q34。區(qū)域的DNA拷貝數(shù)丟失的兒童，0位患兒中例為ES,10位兒童都表現(xiàn)出中重度語(yǔ)言障礙,例出現(xiàn)斜視，10例肌張力減退，部分出現(xiàn)張力亢進(jìn)或共濟(jì)失調(diào)，10例患者均出現(xiàn)中至重度自閉傾向，6例MRI示腦部發(fā)育不良，其中1例髓鞘發(fā)育遲緩,2例小垂體,3例Chii一類畸形，腦電圖顯示例多病灶異常放電，7例中度生理缺陷，例小腦患者，1例胃腸道畸形，基因檢測(cè)顯示5位患兒9q34。11區(qū)域STAN1雜合子內(nèi)缺失,

10、提示SPAN突變與早期的頑固性癲癇發(fā)作之間的因果關(guān)系。Saisu1報(bào)道了日本兩例患有早期嚴(yán)重痙攣的兒童,兩名患兒的腦MRI顯示嚴(yán)重的腦血管萎縮，白質(zhì)減少，腦干、腦組織發(fā)育不全,胼胝體減少,在三個(gè)被試者中，1個(gè)PAN1和SBP雜合，臨床表現(xiàn)與SXBP突變的患兒相似,如早期的痙攣,腦電圖抑制-爆發(fā)模式，之后過(guò)渡到t sndroe，嚴(yán)重發(fā)育遲緩，提示SPA1突變導(dǎo)致癲癇型腦病，可能的機(jī)制為病理聚合/血紅蛋白形成和異常軸突起始段完整性受損造成SPTAN1突變。.14 RXAX基因染色體位于Xp22.1,ARX蛋白不僅控制神經(jīng)節(jié)內(nèi)隆起的氨基丁酸能神經(jīng)元的切向遷移，而且還可以誘導(dǎo)從皮層下的腦室區(qū)的徑向遷移

11、18。ARX基因變異主要累及男孩，至今已有44種不同的突變類型被報(bào)道，常見(jiàn)于Ohthar綜合征或早期嬰兒癲癇性腦?。‥I）抑制破裂,Ohtahr綜合征是最嚴(yán)重和最早的與年齡相關(guān)的癲癇性腦病,該綜合征的特點(diǎn)是早期發(fā)作性痙攣,與嚴(yán)重持續(xù)的突發(fā)活動(dòng)模式有關(guān)，導(dǎo)致了癲癇頑固性發(fā)作和嚴(yán)重的智力遲鈍.ARX致E突變的機(jī)制尚不清楚，Pvon在Ohtahar綜合征患兒中發(fā)現(xiàn)了至少4種基因的特異性突變，其蛋白產(chǎn)物在較低的大腦神經(jīng)元和神經(jīng)元間發(fā)揮必不可少的功能，包括線粒體呼吸鏈在與EIEE無(wú)關(guān)的個(gè)體中被識(shí)別：()X2.1（EIE- 變異）的ARX(與ristalss關(guān)聯(lián)的）meox基因；(2）p2(eiee- 2

12、變種)CDL5(YK）基因;()1p15(eee 3變種)的SC5A22（G1)基因;（)Stxp1(unc18 - 1）基因9q4 （eie 4變種）.hi1研究了一個(gè)X連接無(wú)腦回伴有生殖器異常的嬰兒,發(fā)現(xiàn)該患兒大腦氨基丁酸能神經(jīng)元亞群中出現(xiàn)RX基因突變,同時(shí)在神經(jīng)元細(xì)胞遷移標(biāo)志物化學(xué)反應(yīng)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)含有谷氨酸脫羧酶和鈣蛋白的細(xì)胞在新皮質(zhì)中明顯減少。.1。5 CDH9粘附蛋白9基因（rotocdhein 9,PCDH19，OMI umbe 30460），在神經(jīng)元高度表達(dá)的跨膜蛋白,可能參與調(diào)節(jié)鈣離子依賴細(xì)胞粘附和神經(jīng)元的連接,至今作用機(jī)制不明。CDH19和SNA突變的患者有非常相似的臨床特征，

13、包括早期發(fā)熱或不伴發(fā)熱,發(fā)育緩慢和語(yǔ)言、行為障礙，認(rèn)知退化，可導(dǎo)致多態(tài)性癲癇發(fā)作，特別是罕見(jiàn)的肌陣痙攣，主要累及女性，男性也可發(fā)病。Dpienne Christel2在Davet綜合征(Dravet syndom，DS）患兒中發(fā)現(xiàn)一名男性患兒PCDH1基因的染色體Xq2。1的半合子缺失,同時(shí)在1名女性患者中發(fā)現(xiàn)9個(gè)不同的點(diǎn)CDH9基因突變（4個(gè)錯(cuò)義和5個(gè)剪切突變）,提示PC9在癲癇性腦病中起著重要的作用。.2。其它基因 K和KCNQ3基因突變對(duì)家族性新生癲癇(BFNS)具有一定的影響,Sarah21對(duì)0例不明原因癲癇發(fā)作及相關(guān)精神運(yùn)動(dòng)阻滯患者進(jìn)行KQ和KN突變分析，8例（0，/80）出現(xiàn)異合K

14、NQ2突變。CNA基因是一種最常見(jiàn)的突變的人類癲癇基因，盡管有超過(guò)20種不同的突變報(bào)告，但仍然很難畫出清晰的基因型表型關(guān)系圖.Harkin2在8名患有Dravet綜合征患者中發(fā)現(xiàn)隱源性多灶性癲癇（2）的特殊子組（共5例)中有3例發(fā)生SCN1突變，SC1A突變表現(xiàn)型的特征是早期的多焦點(diǎn)發(fā)作和認(rèn)知能力下降，提示ravet綜合征的診斷增加SNA檢測(cè)。Uslue23等人在土耳其C1基因的突變篩查中發(fā)現(xiàn)兩名不明原因癲癇型腦病患者中存在S1A突變,提示SCNA突變與多種表型之間存在聯(lián)系，SCN1A為建立了一種快速有效的大基因突變檢測(cè)方法提供可能.田小娟2等人對(duì)4例ravt綜合征患兒進(jìn)行進(jìn)行SC1A基因突變

15、篩查，9。3%患兒SNA基因發(fā)生突變，其中.9為新生突變，僅。1位遺傳性突變,提示SCNA基因突變與Drvet綜合征的發(fā)生有密切骨關(guān)系,該基因突變以新生突變?yōu)橹?，在Drv綜合征患兒中應(yīng)進(jìn)行SCN1基因突變檢測(cè)，有助于早期診斷。SCN2基因突變可導(dǎo)致Drave綜合征,嬰兒痙攣癥、新生兒良性家族性驚厥、全面性癲癇伴熱性驚厥附加癥等多種癲癇綜合征。.CNA、ACB4和SC9A被認(rèn)為發(fā)揮調(diào)節(jié)子的作用，這些基因的突變通常和其他癲癇表型相關(guān)，溶質(zhì)載體家族 25 / 22、膜關(guān)聯(lián)鳥苷酸激酶反轉(zhuǎn) 2( MAI2）、叉頭框G基因（FOXG1、肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C(MEF2C）、GI、IN2、TK等編碼的蛋白參與前

16、腦發(fā)育和突觸傳遞功能,與表型存在密切的關(guān)系，但是由于基因突變的多效性及異質(zhì)性,缺乏靈敏度和特異性報(bào)道。.3。全基因組拷貝數(shù)變異（rare opy numbr variants, NVs）NV（刪除和重復(fù))已經(jīng)成為癲癇的重要危險(xiǎn)因素，CNV可導(dǎo)致最具破壞性且往往是病因不明的癲癇。Heathe等5對(duì)1例癲癇病患者進(jìn)行了評(píng)估，并對(duì)其進(jìn)行了高密度、外聚焦、全基因組寡核苷酸陣列的研究發(fā)現(xiàn)25例(79%）攜帶罕見(jiàn)的CNV,可能導(dǎo)致其表型，至少有0明顯或有可能致病性，在q1和例相同重復(fù)的患者中發(fā)現(xiàn)了例有重疊缺失的患者,其重復(fù)部位為1p12，同樣在沒(méi)有患有癲癇性腦病的突變?nèi)巳褐邪l(fā)現(xiàn)罕見(jiàn)的CN，提示罕見(jiàn)的Vs在

17、癲癇性腦病中的重要性。.4基因檢測(cè)技術(shù)是利用序列捕獲技術(shù)將全基因組外顯子區(qū)域N捕捉并富集后進(jìn)行高通量測(cè)序的基因組分析方法，WES徹底改變了診斷癲癇性腦病的方式6，用于確定未分類的EOEs致病基因突變27。ES技術(shù)不僅有利于神經(jīng)發(fā)育疾病的診斷,還有助于發(fā)現(xiàn)癲癇型腦病的發(fā)生機(jī)制,明確致病的突變基因。由于s的臨床分型和基因分型繁多、復(fù)雜，同種基因突變可致多種臨床表型，同樣同一臨床表型可能由多種突變基因?qū)е?。因此E診斷基因檢測(cè)基礎(chǔ)上應(yīng)當(dāng)認(rèn)真篩選臨床分型,臨床上若出現(xiàn)生命早期癲癇性痙攣，肌陣攣性發(fā)作、抗藥性癲癇,不明原因癲癇持續(xù)狀態(tài)、發(fā)育緩慢甚至停止，癲癇伴運(yùn)動(dòng)障礙，生殖器、器官畸形,腦電圖呈爆發(fā)抑制、

18、高度失律,影像檢查無(wú)腦回，胼胝體、髓鞘化異常、腦萎縮應(yīng)考慮基因突變。.5.小結(jié)與展望綜上，Es與多種相關(guān)基因變異存在密切、復(fù)雜的關(guān)系,由于目前技術(shù)局限仍然缺乏對(duì)基因-臨床表型的認(rèn)知，Es在臨床分型和基因檢測(cè)時(shí)存在諸多困難，加之醫(yī)療診斷水平、技術(shù)、設(shè)備的不完善，EEs患兒仍有多數(shù)得不到有效救治.因此,注重對(duì)EEs病因、病機(jī)的研究、加強(qiáng)產(chǎn)前檢查、圍產(chǎn)期檢查、降低Es患兒出生率可有效降低患兒家庭負(fù)擔(dān)和社會(huì)負(fù)擔(dān)，相信隨著基因檢測(cè)技術(shù),如高通量基因檢測(cè)技術(shù)、WS技術(shù)的不斷提高，為Es患兒基因背景提供進(jìn)一步加深了解的可能，基因變異的機(jī)制和種類會(huì)逐漸被發(fā)現(xiàn)。.參考文獻(xiàn):1lln 1,Lstunen ，Hln

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