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文檔簡介

1、實驗一:使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞一、實驗目的:1、學會如何使用顯微鏡觀察細胞;2、了解細胞的結構;3、學會制作臨時裝片。二、實驗材料: (實驗材料可換)松針、動物血液、動物神經(jīng)細胞永久裝片三、實驗用具:載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、 10X、 40X)四、方法步驟:1、制作松針的臨時切片:( 1)取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。( 2)將土豆切成條狀(截面約: 0.5X0.5cm) 取兩條,將一根松針夾在兩個土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時,手腕不動,靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數(shù)次。從中選取較薄的切片,置于載玻片

2、的水滴上。( 3)從一側輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴,即完成臨時切片的制作。2、觀察切片:( 1)取出顯微鏡,置于試驗臺上靠左的位置,打開光源。( 2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上,調整載物臺位置,使蓋玻片對準光源。(3)使用 5X 物鏡觀察切片,使松針切片在視野中心,換成10X 物鏡,觀察松針葉面橫切結構。(4)換成 40X 物鏡觀察,注意細胞及細胞內物質結構,畫圖。3、 動物血液臨時裝片的制作及觀察(除了不用切片,其他類似)4、 動物神經(jīng)細胞永久裝片的觀察。五、考點提示:1、松針的葉面結構是什么樣的?2、動物細胞的結構是什么樣的?與植物細胞又什

3、么不同?3、顯微鏡的物鏡倍數(shù)愈大,視野的亮度如何?物體的大小如何?4、如何調節(jié)焦距?5、如何才能使切片盡量的?。壳衅暮癖︼@微鏡下觀察的效果有什么影響。實驗二:檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質一、實驗目的:嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、 脂肪和蛋白質, 闡明實驗原理顏色反應, 識記和區(qū)分用于可溶性還原糖、 脂肪、蛋白質鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色, 初步掌握鑒定上述化合物的基本方法,學會描述實驗現(xiàn)象,掌握NaOH溶液和 CuSO4溶液的使用方法。二、實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應。1、生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗

4、糖。前三種糖的分子內都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做 還原糖 ;蔗糖分子內沒有,為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖。- 1 -可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。如:葡萄糖 + 2Cu 2+ + 4OH 加熱葡萄糖酸 + Cu 2 O(磚紅色) + H 2 O即 Cu 2+被還原成 Cu 2 O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液變化過程為:淺藍色 棕色 磚紅色沉淀淀粉遇碘變 藍色(直鏈) 或紫(紅)色(支鏈) 。2、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類

5、。它是構成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關的物質。脂類的主要功能是氧化供能。脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內。在病理檢驗中,脂類染色法最常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹,蘇丹,蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。經(jīng)研究認為組織中脂質在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果最好。根據(jù)這一原理,適當提高溫度(37-60 )對組織切片染色效果是有好處的。脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固

6、,如甘油、明膠和阿拉伯糖膠等。脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色或橙紅色(或被蘇丹染液染成紅色),膽脂素呈淡紅色,脂肪酸不著色,細胞核呈藍色。3、蛋白質與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應。(蛋白質分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應。)- 2 -三、實驗材料:1、做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)經(jīng)試驗比較,顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。2、做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蓖麻種子)。3、做蛋白質的鑒定

7、實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。4、淀粉的鑒定:馬鈴薯勻漿。四、實驗用具: 雙面刀片、試管(最好用刻度試管)、試管夾、試管架、大小燒杯、小量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡五、實驗試劑:1斐林試劑 (包括甲液: 質量濃度為 0.1g/ mL NaOH溶液和乙液: 質量濃度為 0.05g/ mL CuSO4 溶液)2 蘇丹或蘇丹染液3 雙縮脲試劑 (包括 A液:質量濃度為 0.1g/ mL NaOH溶液和 B 液:質量濃度為 0.01g/ mL CuSO4溶液)4 體積分數(shù)為50%的酒精溶液5 碘液6 蒸餾水六、方法步驟:一、可溶性糖的鑒定操 作

8、方 法注 意 問 題解 釋1.制備組織樣液。蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,(去皮、切塊、研磨、過濾)組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2. 取 1 支試管, 向試管內注入 2mL組織樣液。3. 向試管內注入 1mL新制的 應將組成斐林試劑的甲液、 乙液 斐林試劑很不穩(wěn)定, 甲、乙斐林試劑,振蕩。分別 配制、儲存,使用前 才將甲、液混合保存時,生成的Cu- 3 -乙液等量混勻成斐林試劑;( OH ) 2 在 70 900C 下分解成黑色 CuO和水;切勿 將甲液、乙液分別加入蘋果甲、乙液分別加入時可能會組織樣液中進行檢測。與組織樣液發(fā)生反應,無Cu OH生成。4.

9、試管放在盛有 50-65 0C 溫最好用試管夾夾住試管上部,使防止試管內的溶液沖出試水的大燒杯中,加熱約2 分試管底部不觸及燒杯底部,試管管,造成燙傷;鐘,觀察到溶液顏色:淺藍口不朝向實驗者。色 棕色 磚紅色 (沉也可用酒精燈對試管直接加熱。淀)縮短實驗時間。二、脂肪的鑒定操 作 方 法花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。注 意 問 題解 釋干種子要浸泡34 小因為浸泡時間短,不易切片;時,新花生的浸泡時浸泡時間過長,組織較軟,切間可縮短。片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴23 滴蘇丹或蘇染色時間不宜過長。丹染液 ,染色1

10、 分鐘。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用酒精用于洗去浮色,不洗去浮50%酒精洗去浮色,吸去酒精。色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)12 滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇薄處,可看到細胞中有染成 橘黃色中?;蚣t色 圓形小顆粒 。三、蛋白質的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋制備組織樣液。黃豆浸泡 1 至 2 天,容易研(浸泡、去皮研磨、過濾。)磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml 于試管A 液和

11、B 液也要分開配制, 儲先加 NaOH溶液,為 Cu2+與蛋中,加入雙縮脲試劑 A,搖勻;存。鑒定時 先加 A 液后加 B白質反應提供一個堿性的環(huán)再加入雙縮脲試劑B 液 34液。境。A、B 液混裝或同時加入,滴,搖勻,溶液變紫色。會導致 Cu2+變成 Cu ( OH ) 2CuSO溶液不能多加 。沉淀,而失效。4否則 CuSO的藍色會遮蓋反4應的真實顏色。可用蛋清代替豆?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁- 4 -上,使反應不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察碘液不要滴太多以免影響顏色觀察用試管取 2ml 待測組織樣液,向

12、試管內滴加2 滴碘液,觀察顏色變化。七、考點提示:1、常見還原性糖與非還原性糖有哪些?答: 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。2、還原性糖植物組織取材條件?答:含糖量較高、 顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。3、研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?答:加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。4、斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用?答:混合后使用; 產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。5、還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為?答: 淺藍色棕色磚紅色

13、。6、花生種子切片為何要???答: 只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。7、轉動細準焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么? 答: 切片的厚薄不均勻。8、脂肪鑒定中乙醇作用?答:洗去浮色。9、雙縮脲試劑A、 B 兩液是否混合后用?先加A 液的目的怎樣通過對比看顏色變化?答:不能混合;先加A 液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。實驗三:觀察DNA和 RNA在細胞中的分布一、實驗原理:1、真核細胞的DNA主要分布在細胞核內,RNA主要分布在細胞質中。2、甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和 RNA的親和力不同, 甲基綠對DNA親和力強, 使

14、 DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強, 使 RNA呈現(xiàn)出紅色。 用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色,可同時顯示DNA和 RNA在細胞中的分布。3、鹽酸的作用 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸; 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質分離,便于DNA與染色劑的結合二、實驗材料: 人的口腔上皮細胞、洋蔥鱗片葉表皮細胞三、實驗用具: 大小燒杯、溫度計、滴管、消毒牙簽、載玻片、蓋玻片、鐵架臺、石棉網(wǎng)、火柴、酒精燈、吸水紙、顯微鏡四、方法步驟:1、取材 滴:在潔凈的載玻片上滴一滴質量分數(shù)為0.9%的 NaCl 溶液; 刮:用消毒牙簽在口腔內側壁上輕輕地刮幾下; 涂:將牙簽上的碎屑涂抹

15、在載玻片的生理鹽水中; 烘:將涂有口腔上皮細胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。2、水解 解:將烘干的載玻片放入裝有30ml 質量分數(shù)為8%的鹽酸的小燒杯中,進行材料的水解;- 5 - 保:將小燒杯放入裝有30溫水的大燒杯中保溫5 分鐘。3、沖洗涂片 沖:用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10 秒鐘; 吸:用吸水紙吸去載玻片上的水分。4、染色 染:用 2 滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5 分鐘; 吸:吸去多余染色劑; 蓋:蓋上蓋玻片。5、觀察 低:在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調節(jié)清晰; 高:轉到高倍物鏡,調節(jié)細準焦螺旋,觀察細胞核和細胞質的染色情況。五、考點提示

16、:1、取口腔上皮細胞之前,應先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質;2、取洋蔥表皮細胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細胞;3、沖洗載玻片時水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗;4、用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中于材料處,而應將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂;5、烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1 分鐘。實驗四:體驗制備細胞膜的方法一、實驗原理: 細胞膜的流動性和半透性二、實驗材料: 豬(或牛、羊、人)的新鮮的紅細胞稀釋液(血液加適量的生理鹽水)三、實驗用具: 蒸餾水、試管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、顯微鏡四、方法步驟:1、用試管吸取少量紅細胞稀釋液

17、,滴一小滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片2、在高倍鏡下觀察,待觀察清晰時,在蓋玻片的一側滴一滴蒸餾水,同時在另一側用吸水紙小心吸引,注意不要把細胞吸跑。上述操作均在載物臺上進行,并持續(xù)觀察細胞的變化。可以看到近水的部分紅細胞發(fā)生變化;凹陷消失, 細胞體積增大, 很快細胞破裂, 內容物流出。五、考點提示:1、選擇動物細胞進行實驗的原因:動物細胞無細胞壁。2、選擇哺乳動物成熟紅細胞進行實驗的原因:人和其他哺乳動物成熟紅細胞無細胞核和眾多的細胞器(膜),可以得到較純凈的細胞膜。3、細胞破裂后,用什么方法獲得較純的細胞膜:將漲破的細胞溶液,經(jīng)過離心分離得到細胞膜。4、如何獲得植物細胞膜:先用纖維

18、素酶和果膠酶將植物細胞壁水解得到原生質體;再將原生質體放入清水中,水自由擴散進入,原生質體漲破;最后經(jīng)過離心分離得到植物細胞膜。5、稀釋及稀釋的時候用生理鹽水的原因:稀釋后,可以減少血液中的血漿蛋白等雜物。用生理鹽水是為了保持滲透壓,防止在稀釋的時候就發(fā)生細胞破裂。實驗五:用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體一、實驗原理:- 6 -1、葉肉細胞中的葉綠體,呈綠色、扁平的橢球形或球形,散布于細胞質中,可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態(tài)。2、線粒體普遍存在于動物細胞和植物細胞中,健那綠染液能使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色。通過染色, 可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)有短棒狀、 圓球狀、線形、

19、啞鈴形等。二、實驗材料: 新鮮的蘚類的葉、人的口腔上皮細胞、新配制的質量分數(shù)為1%的健那綠染液(將 0.5g 健那綠溶解于 50mL 生理鹽水中 , 加溫到 30-40 攝氏度 , 使其充分溶解)三、實驗用具: 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、消毒牙簽四、方法步驟:1、觀察葉綠體低倍鏡下找到葉片細胞低倍鏡下找到葉片細胞高倍鏡下觀察。2、觀察線粒體染色制片低倍鏡下找到口腔上皮細胞高倍鏡下觀察。五、考點提示:1、觀察葉綠體時選擇蘚類葉的原因:蘚類屬于低等植物,葉片是綠色的單層細胞,不需加工即可進行觀察。2、臨時裝片中的材料要隨時保持有水狀態(tài)的原因:保證細胞器的正常形態(tài)并能懸浮在細胞質基質中,否

20、則,細胞失水收縮,將影響細胞器形態(tài)的觀察。實驗六:植物細胞的吸水和失水一、實驗目的:1、學會使用顯微鏡觀察植物細胞質壁分離和復原。(與前面的知識:顯微鏡的使用聯(lián)系)2、觀察不同濃度的溶液對細胞吸水失水的影響,掌握此種方法的具體應用。3、通過觀察植物細胞的吸水和失水,明確滲透系統(tǒng)的組成以及具體應用。二、實驗原理:1、成熟的植物細胞放到一定濃度的溶液中構成一個滲透系統(tǒng)。當細胞大量失水時原生質層與細胞壁的伸縮程度不同,導致原生質層和細胞壁分離。2、當外界溶液濃度大于細胞液濃度時,根據(jù)擴散作用原理,水分會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,

21、而原生質層性較大,從而使二者分開; 反之,外界溶液濃度大于細胞液濃度, 則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質和壁又復原。三、實驗材料: 紫色特別深的洋蔥外表皮、質量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液、清水四、實驗用具: 顯微鏡、鑷子、刀片、載玻片、蓋玻片、滴管、吸水紙五、方法步驟:1、用刀片在洋蔥鱗片葉的外表面劃一個小方塊,用鑷子撕取這一小塊洋蔥表皮,在洋蔥的外表皮上, 用刀片劃一些方塊, 用鑷子輕輕撕取一小塊(撕取的僅僅是外表皮,不要撕得太厚,仍然作為一個問題留給學生) 。在取標本時,可以將洋蔥的內表皮朝外,外表皮朝里進行對折,不要太用力,然后取其外表皮作為材料,將它平展地放在載玻片中央的清水滴中

22、,并蓋上蓋玻片。2、用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質層的位置。3、從蓋玻片的一側滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側用吸水紙吸引。這樣重復幾次,洋蔥表皮細胞就侵潤在蔗糖溶液中。注意重復3-4 次。4、再用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質層的位置。- 7 -5、從蓋玻片的一側滴入清水,在蓋玻片的另一側用吸水紙吸引,這樣重復幾次,洋蔥表皮細胞就侵潤在清水中。6、還用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質層的位置。六、實驗結論:當外界溶液濃度大于細胞液濃度時, 水分會由細胞液中滲出到外界溶液中, 通過滲透作用失水;由于細胞壁和原

23、生質層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質層性較大,從而使二者分開; 反之,當外界溶液濃度低于細胞液濃度時,則細胞通過滲透作用吸水, 分離后的質和細胞壁又復原。實驗七:比較過氧化氫在不同條件下的分解一、實驗目的:通過比較過氧化氫在不同條件下分解的快慢,了解過氧化氫酶的作用和意義二、實驗原理:新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶,根據(jù)酶的專一性,可知其可以催化過氧化氫分解成水和氧。三、實驗材料:質量分數(shù)為20%的豬肝研磨液,新配制的體積分數(shù)為3%的過氧化氫溶液,質量分數(shù)為3.5%的 FeCl 3 溶液四、實驗用具:量筒,試管,滴管,試管夾,試管架,衛(wèi)生香,火柴,酒精燈,大燒杯,石棉網(wǎng),溫度計五、方法步

24、驟:1、取 4 支潔凈試管,分別編號1, 2,3, 4,向試管內分別加入2ml 過氧化氫溶液。2、將 2 號試管放在90左右的水浴中加熱,觀察氣泡情況,并與1 號試管作比較。3、向 3 號試管內滴入 2 滴 FeCl3 溶液,向 4 號試管內滴入 2 滴肝臟研磨液,觀察哪支試管產(chǎn)生的氣泡多。4、 2 至 3min 后,將點燃的衛(wèi)生香分別放在3、4 號試管內液面的上方,觀察哪支試管中的衛(wèi)生香燃燒更猛烈。六、實驗結論:1、加熱能促進H2O2 的分解 , 提高反應速率;2、酶有催化作用,與無機催化劑相比,酶具有高效性。實驗八:影響酶活性的條件一、實驗目的:1、初步學會探索影響酶活性條件的方法。2、探

25、索過氧化氫酶在不同溫度和PH下催化過氧化氫水解的情況。二、實驗原理:淀粉遇碘后,形成紫藍色的復合物。 麥芽糖和葡萄糖遇碘后, 不形成紫藍色的復合物, 但能與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。三、實驗材料:質量分數(shù)為 2%的新配置的淀粉酶溶液,新鮮的質量分數(shù)為 20%的豬肝研磨液,質量分數(shù)為 3%的可溶性淀粉溶液,新配制的體積分數(shù)為 3%的過氧化氫溶液,質量分數(shù)為 5%的鹽酸,質量分數(shù)為 5%的氫氧化鈉溶液,蒸餾水,冰水,熱水,碘液,斐林試劑- 8 -四、實驗用具: 量筒,試管,滴管,試管夾,三腳架,火柴,酒精燈,小燒杯,大燒杯,石棉網(wǎng),溫度計,五、方法步驟:一、溫度對酶活性的

26、影響1、取三支潔凈的試管,編上號1,2, 3,并分別注入2ml 可溶性淀粉液。2、1ml 新鮮的淀粉酶溶液, 搖勻,依次放入沸水, 37分別向 1,2,3 號三支試管中各注入左右的熱水,冰水中,維持各自的溫度5 分鐘。3、分別向 1, 2, 3 號三支試管中各滴入一滴碘液,然后搖勻。觀察并記錄這三只試管中,溶液顏色的變化情況。二、 pH 對酶活性的影響1、取三支潔凈的試管,編上號1,2, 3,并分別注入1ml 的新鮮的淀粉酶溶液。2、依次向 1 號, 2 號, 3 號試管中注入蒸餾水,氫氧化鈉溶液,稀鹽酸各1ml 并搖勻。3、分別向 1 號, 2 號, 3 號試管中各注入 2ml 可溶性淀粉溶

27、液,震蕩搖勻。4、將三支試管的下半部浸到37左右的溫水中,保溫5 分鐘。5、向三支試管中各加入2ml 斐林試劑,震蕩搖勻。六、實驗現(xiàn)象:一、溫度對酶活性的影響1 號試管中的液體未變藍,2 號和 3 號試管中的液體變藍,且2 號試管藍色比 3 號試管深。二、 pH 對酶活性的影響2 號和 3 號試管中的液體未變藍, 1 號試管中的液體變藍。七、實驗結論:1、在最適宜的溫度和最適宜的ph 條件下,酶的活性最高。2、溫度和ph 偏高或偏低,酶的活性明顯下降。實驗九:葉綠體中色素的提取和分離一、實驗目的:1、初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。2、探索葉綠體中有幾種色素。二、實驗原理:1、葉綠體中的

28、色素能溶解在丙酮(有機溶劑,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取葉綠體中色素。2、色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得慢,因而可用層析液將不同的色素分離。三、實驗材料:新鮮的綠葉(如菠菜的綠葉),無水乙醇,層析液(由20 份在 6090下分餾出來的石油醚、 2 份乙醇和1 份苯混合而成。93 號汽油也可代用),二氧化硅和碳酸鈣。四、實驗用具:干燥的定性濾紙,試管,棉塞,試管架,研缽,玻璃漏斗,尼龍布,毛細吸管,剪刀,藥勺,量筒( 10ml),天平。五、方法步驟:( 1)稱取 5g 綠色葉片并剪碎提取色素

29、研缽研磨漏斗過濾( 2)加入少量SiO2、CaCO3和 5ml 丙酮收集到試管內并塞緊管口( 1)將干燥的濾紙剪成6cm 長, 1cm 寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時- 9 -到達濾液細線)制濾紙條( 2)在距剪角一端 1cm 處用鉛筆畫線( 1)用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細線濾液劃線( 2)干燥后重復劃 2-3 次( 1)向燒杯中倒入 3ml 層析液(以層析液不沒及濾液細線為準)紙上層析 ( 2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內壁,輕輕插入層析液中( 3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯觀察結果:濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶(如下圖)最寬:葉綠素a;最窄:葉綠素b;相鄰

30、色素帶最近:葉綠素a 和葉綠素b;相鄰色素帶最遠:胡蘿卜素和葉黃素。六、考點提示:1、二氧化硅:為了使研磨充分;碳酸鈣:保護色素免受破壞;丙酮:色素的溶劑。2、擴散最快的是胡蘿卜素(橙黃色),擴散最慢的是葉綠素b(黃綠色)。3、濾紙上有四條色素帶說明了綠葉中的色素有四種,它們在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散的快慢也不一樣。4、裁取定性濾紙時,注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。5、制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角, 這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻, 便于觀察實驗結果。6、根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。7

31、、濾紙上的濾液細線如果觸到層析液,細線上的色素就會溶解到層析液中,就不會在濾紙上擴散開來,實驗就會失敗。8、畫濾液細線時,用力要均勻,速度要適中9、研磨要迅速、充分。 a. 因為丙酮容易揮發(fā) ; b. 為了使葉綠體完全破裂 . 從而能提取較多的色素 ;c. 葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細胞中的葉綠素酶水解而被破壞。實驗十:細胞大小與物質運輸?shù)年P系一、實驗目的:通過探究細胞大小,即細胞的表面積與體積之比(即細胞的相對表面積),與物質運輸效率之間的關系,探討細胞不能無限長大的原因二、實驗原理:三、實驗材料:NaOH和酚酞相遇,呈紫紅色。3cm 3cm 6cm的含酚酞的瓊脂塊,質量分數(shù)為0.1%的 NaO

32、H溶液。四、實驗用具: 塑料餐刀,防護手套,毫米尺,塑料勺,紙巾,燒杯。- 10 -五、方法步驟:1、用塑料餐刀將瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、 2cm、1cm 的正方體2、將三塊瓊脂塊放在燒杯內,加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺不時翻動瓊脂塊。注意:不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面3、戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出,用紙巾把它們擦干,用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。觀察切面,測量每一塊上 NaOH擴散的深度。紀錄測量結果。注意:每兩次操作之間必須把刀擦干4、根據(jù)測量結果進行計算,并填寫下表瓊 脂 塊 的 表面積 體積比值( NaOH擴散的體NaOH擴散的

33、深邊長 /cm /cm2/cm3相對表面積積 / 整個瓊脂塊的體度積)321六、實驗結論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減?。籒aOH擴散的體積與整個瓊脂塊體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小七、考點提示:1、你認為細胞生長到一定程度時 , 采取什么辦法可保證細胞代謝需要呢? 答:細胞生長到一定程度 , 將停止生長 , 轉而進行細胞的分裂 , 這就擺脫了細胞生長帶來相對表面積減小帶來的困境 , 也是細胞增殖的原因之一。2、除此以外 , 限制細胞長大的因素還有?答: 有核質比 ( 細胞核與細胞質的體積比), 外界的溫度和營養(yǎng)物質的供應等條件3、細胞為什么要分裂?或細胞為什么這么小?答: (

34、1) 增大細胞膜表面積與體積比,有利于物質的運輸 ( 營養(yǎng)吸收與廢物排出) 以保證細胞正常生命代謝需要。(2) 保證適宜的核質關系,使細胞質能在細胞核的控制范圍內。4、卵細胞是一種特殊的細胞,因為它含有許多供胚胎發(fā)育的營養(yǎng)物質卵黃,而使細胞體積增大了許多倍。但卵細胞一般與外界交換物質少,故表面積與體積的比例特殊。實驗十一:觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂一、實驗目的:1、制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片。2、觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細胞周期不同時期的時間長短。3、繪制植物細胞有絲分裂簡圖。二、實驗原理:1、高等植物的分生組織有絲分裂較旺盛。2、有絲分裂各個時期細胞內染

35、色體的形態(tài)和行為變化不同,可用高倍顯微鏡根據(jù)各個時期內染色體的變化情況,識別該細胞處于那個時期。- 11 -3、細胞核內的染色體易被堿性染料(如龍膽紫)染成深色。三、實驗材料: 洋蔥(可用蔥 . 蒜代替),質量分數(shù)為15%的鹽酸,體積分數(shù)為95%的酒精,質量濃度為 0.01g/ml 或 0.02g/ml 的龍膽紫溶液(將龍膽紫溶解在質量分數(shù) 2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋紅液,洋蔥根尖細胞有絲分裂固定裝片。四、實驗用具: 顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,剪子,鑷子,滴管。五、方法步驟:1、洋蔥根尖的培養(yǎng)在上實驗課之前的3-4 天,取洋蔥一個,放在廣口瓶上。瓶內裝滿清水,讓洋蔥的底部接觸到瓶

36、內的水面。把這個裝置放在溫暖的地方培養(yǎng)。待根長約5cm,取生長健壯的根尖制成臨時裝片觀察。2、裝片的制作制作流程為:解離漂洗染色制片過程方法時目 的間上午 10 時至下午2 時,剪去洋蔥根尖2-3mm,3-5min用藥液使組織中的細胞解離立即放入盛入有鹽酸和酒精混合液(1: 1)的相互分離開來玻璃皿中,在溫室下解離。漂洗待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛入清水的約洗去藥液,防止解離過度玻璃皿中漂洗。10min染色把 根 尖 放 進 盛 有 質 量 濃 度 為 0.01g/ml 或3-5min染料能使染色體著色。0.02g/ml 的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)的玻璃皿中染色。用鑷子將這段根尖取出來,

37、放在載玻片上,加使細胞分散開來,有利于制片一滴清水,并用鑷子尖把根尖能碎,蓋上蓋玻觀察片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕的按壓載玻片。3、觀察a 低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細胞,其特點是細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂b 高倍鏡觀察:在低倍鏡觀察的基礎上換高倍鏡,直到看清細胞的物象為止c 仔細觀察:先到中期,再找其余各期,注意染色體的特點d 移動觀察:慢慢移動裝片,完整地觀察各個時期(如果自制裝片效果不太理想,可以觀察洋蔥根尖固定裝片)4、繪圖5、記錄六、實驗結論:前期:出現(xiàn)染色體核膜核仁消失紡錘絲出現(xiàn)中期:著絲粒位于赤道面紡錘體明顯后期:染色體分裂成兩組子染色體向相反兩極運動

38、末期:紡錘體出現(xiàn)核膜核仁出現(xiàn)實驗十二:性狀分離的模擬一、實驗目的:1、理解等位基因在形成配子時發(fā)生分離、受精時雌、雄配子隨機結合的過程。2、認識和理解基因的分離和隨機結合與生物性狀之間的數(shù)量關系。- 12 -二、實驗原理:進行有性生殖的生物,等位基因在減數(shù)分裂形成配子時會彼此分離,形成兩種比例相等的配子。受精作用時,比例相等的兩種雌配子與比例相等的兩種雄配子隨機結合,機會均等。隨機結合的結果是后代的基因型有三種;其比為1:2:1,表現(xiàn)型有兩種,其比為3:1。由于此實驗直接用研究對象進行不可能,就用模型代替研究對象進行實驗,模擬研究對象的實際情況,獲得對研究對象的認識(此實驗方法稱模擬實驗)。

39、3實驗材料小塑料桶2 個, 2 種色彩的小球各 20 個(球的大小要一致,質地要統(tǒng)一,手感要相同,并要有一定重量)。三、實驗用具: 小桶 2 個,分別標記甲、乙;兩種不同顏色的彩球各20 個,一種彩球標記 D,另一種彩球標記d;記錄用的筆和紙。四、方法步驟:1、分裝、標記小球取甲、乙兩個小桶,每個小桶內放有兩種色彩的小球各10 個,并在不同色彩的球上分別標有字母D 和 d。甲桶上標記雌配子,乙桶上標記雄配子,甲桶中的D 小球與 d 小球,就分別代表含基因 D 和含基因 d 的雌配子; 乙桶中的 D 小球與 d 小球,就分別代表含基因 D和含基因 d 的雄配子。2、混合小球分別搖動甲、乙小桶,使

40、桶內小球充分混合。3、隨機取球找三個學生:一個記錄,兩個分別從兩個小桶內隨機抓取一個小球,組合在一起,記錄下兩個小球的字母組合,這表示雌配子與雄配子隨機結合成合子的過程。4、重復實驗將抓取的小球放回原來的小桶,搖動小桶中的彩球,使小球充分混合后,再按上述方法重復做50 100 次(重復次數(shù)越多,模擬效果越好)。記錄時,可將三種基因型寫好,以后每抓一次, 在不同基因型后以“正”字形式記錄(如下表):基因型次數(shù)總計百分比 DDDddd5、統(tǒng)計小球組合統(tǒng)計小球組合為DD、 Dd 和 dd 的數(shù)量分別是多少,并記錄下來。( 6)計算小球組合計算小球組合為DD、 Dd和 dd 之間的數(shù)量比值是多少,計算

41、小球組合為DD和組合為 dd 的數(shù)量比值是多少,并記錄下來。 ( 7)實驗結論分析實驗結果,在實驗誤差允許的范圍內,得出合理的 結論(可將全班每一小組結果綜合統(tǒng)計,進行對比) 。五、考點提示:1、選擇小球大小要一致、質地要統(tǒng)一、抓摸時手感要相同,以避免人為誤差。2、選擇盛放小球的容器最好采用小桶或圓柱形容器,而不要采用方形容器,以便搖動小球時能充分混勻。3、桶內小球的數(shù)量必須相等,D、d 基因的小球必須1:1,且每次抓出的兩個小球必須統(tǒng)計后各自放回各自的小桶,以保證機率的準確。4、不要看著桶內的小球抓,要隨機去摸,且順便攪拌一下,以增大其隨機性,用雙手同時去兩個桶內各抓一個。5、記錄時,可先將

42、DD、Dd、 dd 三種基因型按豎排先寫好,然后每抓一次在不同基因型后以“正”字形式記錄。6、每做完一次模擬實驗,小球放回后要搖勻小球,然后再做下次模擬實驗十三:觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片一、實驗目的:通過觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目,加深對減數(shù)分裂過程的理解。二、實驗用具:- 13 -蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,顯微鏡。三、方法步驟:1、在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞。2、先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細胞,再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態(tài)

43、、位置和數(shù)目。3、根據(jù)觀察結果,盡可能多地繪制減數(shù)分裂不同時期的細胞簡圖實驗十四:低溫誘導植物染色體數(shù)目的變化一、實驗目的:1、學習低溫誘導植物染色體數(shù)目變化的方法2、理解低溫誘導植物細胞染色體數(shù)目變化的作用機制二、實驗原理:1、進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞,在有絲分裂后期,染色體的著絲點分裂,子染色體在紡綞絲的作用下分別移向兩極,最終被平均分配到兩個子細胞中去。2、用低溫處理植物組織細胞,使紡綞體的形成受到抑制,以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。三、實驗材料:洋蔥或大蔥、蒜、卡諾氏固定液,鹽酸酒精解離液,質量濃度為10mg mL的龍

44、膽紫溶液。四、實驗用具:冰箱、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、剪刀、鑷子、吸水紙、滴管、小燒杯。五、方法步驟:1、把洋蔥放在盛滿水的廣口瓶上,讓它的底部接觸瓶內的水面。待洋蔥根長到lcm 時,放入冰箱內4低溫下培養(yǎng),誘導培養(yǎng)36 小時2、剪取根尖約0.5 1cm,放人卡諾氏固定液中固定30min,然后用體積分數(shù)95酒精洗兩次,用體積分數(shù)70酒精保存于低溫處,貼好標簽。3、取固定好的根尖,進行解離、漂洗、染色和制片4 個步驟,具體操作方法與實驗“觀察植物細胞的有絲分裂”相同。4、先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相,再換上高倍鏡并調節(jié)細準焦螺旋和反光鏡,使物像清晰,仔細觀察,辨認哪些細胞發(fā)生染色

45、體數(shù)目變化,找出處于細胞分裂中期的細胞,進行染色體計數(shù)。實驗十五:生物體維持PH 穩(wěn)定的機制一、目的要求:通過比較自來水、緩沖液(如Na2HPO4、 NaH 2PO4 等的溶液,在加入酸或堿后,能使PH- 14 -的變化減弱)和生物材料在加入酸或堿后PH 的變化,推測生物體是如何維持PH 穩(wěn)定的。二、實驗原理:細胞代謝會產(chǎn)生許多酸性物質,如碳酸等, 人和動物吃的食物消化吸收后經(jīng)代謝會產(chǎn)生一些酸性或堿性物質,這些酸性或堿性物質進入內環(huán)境,常使PH 發(fā)生偏移。但一般情況下,機體能通過緩沖物質使PH 穩(wěn)定在一定范圍內。三、實驗材料 :生物材料(肝勻漿、馬鈴薯勻漿、用水5:1 稀釋的雞蛋清、黃瓜勻漿)

46、,PH=7 的磷酸緩沖液, 0.1mol/L HCl (盛于滴瓶中) 、 0.1mol/L NaOH(盛于滴瓶中) 。四、實驗用具 : 4 副防護手套、 50ml 燒杯 1 個、 50ml 量筒 1 個,彩色鉛筆、 PH 計或萬能PH 試紙、鑷子、自來水。五、方法步驟:1、將 2.5ml 自來水倒入50ml 燒杯中2、用 PH 計成 PH 試紙測試起始pH,并作記錄3、一次加一滴0.1mol/L HCl ,然后輕輕搖動,加入5 滴后再測PH,重復這一步驟直到加入了 30 滴為止。將PH 測定結果記入表中。4、充分沖燒杯,并向其中倒入 25ml 自來水。測定并記錄起始 PH,再如步驟 3,一滴一

47、滴地加入 0.1mol/L 的 NaOH ,測定并記錄 PH。5、充分沖洗燒杯,用緩沖液代替自來水,重復步驟1 至步驟 4,記錄結果6、充分沖洗燒杯,選兩種生物材料分別代替自來水,重復步驟1 至 4 記錄結果。六、實驗結論 :PH加酸10.5水加堿7緩沖液或生物材料緩沖液或生物材料3.5水051015202530加入酸堿滴數(shù)自來水中加入酸堿物質后,PH 逐漸偏小或偏大,而緩沖液和生物材料中加入酸堿后PH 幾乎不變或變化不大。七、考點提示:1、實驗過程中,出現(xiàn)了很多次的“充分沖洗燒杯”請你分析目的是什么?答:第一次“充分沖洗燒杯”是為了避免酸性物質 HCl 與堿性物質 NaOH 發(fā)生中和發(fā)應,使實驗現(xiàn)象不明顯,減少誤差。第二次和第三次“充分沖洗燒杯”是為了防止不同的生物材料混合,影響實驗效果。2、實驗過程中腐蝕性物質使用注意事項及解決措施。答:HCl 和 NaOH 都有腐蝕性,應避免它與皮膚和眼睛接觸,也不要入口。若有灑落或濺出,要立即用水沖洗15min 。實驗十六:探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度- 15 -一、目的要求:1、進一步學會探究性實驗的一般方法和步驟,培養(yǎng)科學探究能力,提高創(chuàng)新思維能力。2、學會用探究的實驗方法來研究生長素類似物促進插條生根

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