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文檔簡介
1、答案RNA轉(zhuǎn)錄、剪切和加工部分課堂練習(xí)、填空題。1. 大腸桿菌 RNA聚合酶的亞基組成為 22. 轉(zhuǎn)錄的底物是四種 NTP,原核生物 RNA聚合酶 可受 利福霉素 抑制,后者與該酶的 亞基結(jié)合3. 在轉(zhuǎn)錄過程中 RAN聚合酶全酶的 因子負責(zé) 轉(zhuǎn) 錄的起始 核心酶負責(zé) RNA鏈的延伸 。4. 真 核生物主要有三類 RNA 聚合酶 、 ,它們分別催化 rRNA、mRNA 、tRNA 的轉(zhuǎn)錄。5. 大腸桿茵的啟動子序列包含 -10 、 -35 等 信息。6. Pribnow 框一般位于 -10 區(qū), Sextama 框一般 位于 -35 區(qū)。7. 通 常原核生物的終止子在終止點之前均有一個 富含 G
2、C的二重對稱區(qū) ,其產(chǎn)生 RNA可形成 發(fā)夾結(jié)構(gòu) 。8. 大腸桿菌不依賴 因子的轉(zhuǎn)錄終止子的結(jié)構(gòu)特點 是 富含 GC的二重對稱區(qū) 和 4-8 個 A。9. 因子催化 NTP水解和 RNA釋放。10. 真核細胞的 mRNA可結(jié)合于多聚 dT 的親和 層析柱上。11. 真核生物轉(zhuǎn)錄后 mRNA加 工,包括 5 端加 帽 和 3 端加 尾,其結(jié)構(gòu)分別是 m7GpppG 和 poly(A) 。12. 真核生物 mRNA轉(zhuǎn) 錄后的成熟步驟主要包括 加帽 、 加尾、 剪切、 編輯 。13. hnRNA經(jīng)過 RNA拼接后去掉 內(nèi)含子 ,留下 外顯子 。14. DNA結(jié)構(gòu)基團中存在被轉(zhuǎn)錄也被轉(zhuǎn)譯的序列稱 為
3、外顯子 被轉(zhuǎn)錄但不被轉(zhuǎn)譯的序列稱為 內(nèi) 含子。15. 真核生物 rRNA 拼接過程中左端的拼接點順序 為 5-GU,右端為 3-AG,切除 中間結(jié) 構(gòu)結(jié)構(gòu)。16. 真核基因由外顯子和內(nèi)含子相互間隔組成,故 為斷裂基因。17. 從 hnRNA分子去除非編碼序列,形成成熟 mRNA 的過程稱為 剪接 。18. 人的 rRNA前體 45S rRNA 是在 核仁中合成 的,在細胞核 中裝配成核糖體的亞單位, 完整 的核糖體是在 細胞質(zhì) 中形成的。19. RNA成熟酶對于 RNA的自我剪接 是很重要的, 它的作用在于 穩(wěn)定 RNA構(gòu)象 ,而不是 催化作 用。20. RNA 是由核糖核甘酸通過 3,5 _
4、磷酸二酯 _鍵連接而成的一種 _多聚核甘酸 _。幾乎所有的 RNA 都是由 _模板_DNA_轉(zhuǎn)錄_而來。二、單選題。1. mRNA中的遺傳信息可來自()。A :RNA;B:DNA;C:RNA或 DNA;D:蛋白質(zhì)2. 成熟的真核生物 mRNA 5端具有( ) 。 A:Poly(A) ; B:Poly(U) ;C:Poly ( c); D:帽 子結(jié)構(gòu)3. 決 定大腸桿菌 RNA聚合酶識別啟動子特異性的是 )A:RNA聚合酶的 亞基; B :RNA聚合酶的 亞 鑒;C:RNA聚合酶的 亞基; D:因子。4. 關(guān)于大腸桿菌 RNA 聚合酶的敘述不正確的是( ) A:核心酶由 2 組成; B :全酶由
5、核心56.67. A:tRNA; B:5S rRNA; C: mRNA; D: rRNA。8. 下列何種生物形式的基因組中沒有內(nèi)含子() 。A、酵母; B、四膜蟲; C、水稻; D、大腸 桿菌。9. 真核生物的 hnRNA 加工不包括 A、在 5端加帽B、 在 3端加 poly A 尾C、進行內(nèi)含子的剪接 D、 刪除 5UTR 區(qū)。10. 大腸桿菌 RNA 全酶包括核心酶和 ,該因子保證 RNA 聚合酶與啟動子 DNA 的結(jié)合。A、 因子 B、 因子 C、 因子 D、 因子11. 下列哪一項不是大腸桿菌 RNA 聚合酶全酶中的 因子的功能?A、催化中心 ; B、負責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起 始;
6、C、提高 RNA 聚合酶對啟動子區(qū) DNA 序列的親和 力; D、啟動子識別。三、判斷題。1. 在 DNA與 RNA序列中, A、C、 G的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同。2. 真核生物 mRNA分子兩端都有 3-OH。3. 原核生物轉(zhuǎn)錄啟動子有 3 個重要部位 -10 區(qū)、-35 區(qū)和 SD 序列。 4. 真 核生物的所有 mRNA都含有 poly (A)結(jié)構(gòu)。 5. DNA聚合酶和 RNA聚合酶催化的反應(yīng)都需要引物。6. mRNA內(nèi)部不存在甲基化的核糖核酸。 7. 真核基因的外顯子是指保留在成熟 RNA中的相對 應(yīng)的序列,不管它是否被翻譯。 8. 真 核生物中同一轉(zhuǎn)錄單位可以通過不同的拼接而 產(chǎn)生不同的蛋白
7、質(zhì)合成模板 mRN。A 9. 真核生物 rRNA基因大多是活躍轉(zhuǎn)錄的,沒有核小 體結(jié)構(gòu)。 10. 真核細胞 rRNA轉(zhuǎn)錄加工后被輸送到細胞質(zhì)中與 核糖體蛋白組成核糖體。 11. 真核基因的轉(zhuǎn)錄是從第一個 ATG開始的。 12. 轉(zhuǎn)錄因子是一類具有 RNA聚合酶活性的蛋自質(zhì)。 13. 原核細胞能在轉(zhuǎn)錄過程中進行蛋白質(zhì)的翻譯。14. 逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA時,需要先在 RNA鏈的上游合 成短的 RNA引物。 15. DNA復(fù)制需要 RNA引物,RNA復(fù)制則不需要引物。 16. DNA是遺傳物質(zhì),而 RNA不是遺傳物質(zhì)。 17. DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的共同點在于都是以雙鏈 DNA為 模版,以半保留方式進行
8、, 最后形成鏈狀產(chǎn)物。 18. 決定大腸桿菌 RNA聚合酶識別啟動子特異性的是 RNA聚合酶的核心酶。 19. 真核生物基因的啟動子都位于轉(zhuǎn)錄起始點的上游。( )20. 增強子對依賴或不依賴于 TATA框的轉(zhuǎn)錄啟動子 都有增強效應(yīng)。( )21. 在高等生物的個體發(fā)育或細胞分化時,可以有 選擇性地越過某些外顯子或某個剪切點對 mRNA前 體進行剪切, 產(chǎn)生組織或發(fā)育階段特異性 mRN。A22. RNA聚合酶 I 負責(zé) tRNA和 5sRNA,其啟動子位 于轉(zhuǎn)錄的 DNA序列之內(nèi),稱為下游啟動子。23. 增強子的作用具有細胞或組織的特異性。24. 在原核生物中, -35 序列和 -10 序列對于
9、RNA聚 合酶識別啟動子都是很重要的。25. 因子的專一性表現(xiàn)在不同基因編碼識別不同 啟動子的 因子。四、名詞解釋1. RNA轉(zhuǎn)錄( RNA transcription )2. RNA聚合酶( RNA polymerase):在轉(zhuǎn)錄過程中, 以 DNA為模板催化 RNA合成的起始、延伸和終止的 蛋白質(zhì)。3. 啟 動子 (promoter) :DNA分子上被 RNA聚合酶識別 并結(jié)合形成起始轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的區(qū)域。4. 核心啟動子 (core promoter) :是指足以使 RNA 酶轉(zhuǎn)錄正常起始所必需的最少 DNA序列,包括 CAP位點和 TATA盒。5. 轉(zhuǎn) 錄終止子 (termonator)6
10、. 外 顯子 (extron) :在真核生物的基因中,成熟 mRNA中編碼區(qū)的相應(yīng)序列。7. 內(nèi)含子(intron) :在真核生物的基因中 (或提到斷 裂基因),在 mRNA前體分子中被剪切掉的非編碼 區(qū)的相應(yīng)序列。8. 有義鏈( sense strand )9. 編 碼鏈 (coding strand)10. 轉(zhuǎn)錄后加工 (post-transcription processing)11. RNA拼接(RNA Splicing)12. 順式剪接、反式剪接13. 組成型剪接、可變剪接10):RNA病毒的遺14. RNA編輯(RNA editing): 是指轉(zhuǎn)錄后的 RNA在 編碼區(qū)發(fā)生堿基的加
11、入,丟失或轉(zhuǎn)換等現(xiàn)象。15. RNA復(fù)制( RNA replication傳物質(zhì)復(fù)制16. 斷裂基因:編碼蛋白質(zhì)的基因在 DNA序列上是不連 續(xù)的,被不編碼的序列隔開。17. GT-AG規(guī)則:真核生物 mRNA內(nèi)含子的 5剪切 位點一般為 GT,而 3位點為 AG。18. 多順反子:在原核生物中,密切相關(guān)的基因組 成操縱子,操縱子中的結(jié)構(gòu)基因在一個啟動子的調(diào) 控下作為一個單位進行轉(zhuǎn)錄, 這個單位成為多順反 子。五、問答題。1. 試比較 DNA 復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的異同點。相同點:都以 DNA 鏈作為模板, 合成的方向 均為 53,聚合反應(yīng)均遵從堿基配對原則,核 苷酸之間形成磷酸二酯鍵使核苷酸鏈延伸。不
12、同 點:復(fù)制轉(zhuǎn)錄模板 兩股鏈均復(fù)制, 全部信息模板鏈,部分信息11原料dNTPNTP酶DNA 聚合酶RNA 聚合酶產(chǎn)物子代雙鏈 DNAmRNA ,tRNA ,(半保留復(fù)制)rRNA引物RNA 引物無配對G-C; T-AA-U; T-A; C-G2. 簡述真核與原核基因轉(zhuǎn)錄方面存在的差異原核生物真核生物RNA 聚合酶只有 1 種。3 種,分別轉(zhuǎn)錄不同的 RNAmRNA 結(jié)構(gòu)通常 5帽子和 3尾巴順反子功能相近的基因通常形成一個操縱子, 由共同的 調(diào)控區(qū)進行轉(zhuǎn)錄調(diào)控。轉(zhuǎn)錄起始不同的聚合酶有不同的啟動子調(diào)控轉(zhuǎn)錄終止在 RNA 水平發(fā)生作用:不依賴 因子的終止子3類 RNA 聚合酶的轉(zhuǎn)錄因子都需在柄部
13、富含 GC 堿基對,而且連接一串富含 U 的莖環(huán)結(jié)構(gòu); 依賴于 因子的終止子通過 因子 與亞基的作用促使轉(zhuǎn)錄終止。要富含 AT 的序列。3. 簡述 RNA 的種類及其生物學(xué)作用。4. 比較真核生物和原核生物 mRNA 的異同原核生物和真核生物 mRNA 的差別在于可 翻譯順反子的數(shù)目,真核生物的 mRNA 是單順 反子。而且真核生物的 mRNA 在其 3末端有多 聚腺苷酸尾巴( polyA),而 5末端有 7甲基 鳥嘌呤帽子。真核生物的 mRNA 尾部區(qū)域有時 會攜帶特定的去穩(wěn)定因子。5. 簡述真核生物 mRNA 基因的轉(zhuǎn)錄過程121) 模板識別: RNA 聚合酶與雙鏈 DNA 的啟動 子開始
14、結(jié)合; DNA 雙鏈被分開;形成轉(zhuǎn)錄泡。2) 轉(zhuǎn)錄的起始: RNA 中第一個核苷酸鍵合成; 合成前 9 個核苷酸鍵時,酶仍舊位于啟動子上; 聚合酶成功地完成了 RNA 鏈的延伸并離開啟動 子。3) 延伸階段:延伸階段包括 DNA 結(jié)構(gòu)的改變帶 來的轉(zhuǎn)錄泡前移。在轉(zhuǎn)錄泡中,模板鏈的瞬間解 旋區(qū)與新生的 RNA 鏈在延伸點發(fā)生配對。 RNA 聚合酶沿 DNA 移動, RNA 鏈逐漸延長, 酶一邊移動一邊將 DNA 解螺旋,使一段新的模 板以單鏈形式暴露出來。 核苷酸以共價鍵形式被 添加到 RNA 鏈的 3末端,在解旋區(qū)形成一個 RNA-DNA 雜交鏈。解旋區(qū)之后的 DNA 模板鏈 又與另一條單鏈
15、DNA 配對并形成雙螺旋。 RNA 形成游離的單鏈。4) 轉(zhuǎn)錄的終止: 包括對那些不再被加到 RNA 上 的堿基位點進行識別。磷酸二酯鍵停止形成,轉(zhuǎn) 錄復(fù)合體分離,轉(zhuǎn)錄終止。當(dāng)最后一個堿基加入 到 RNA 鏈上,轉(zhuǎn)錄泡崩解, RNA-DNA 雜交被 破壞, DNA 重新形成雙螺旋,聚合酶和 RNA 都 釋放下來。136. 簡要說明真核生物 mRNA 的結(jié)構(gòu)特點。7. 真核生物轉(zhuǎn)錄的前體 RNA 如何加工為成熟的 mRNA ?1) 5端加帽子。 5加帽是一個多步加工過 程,第一步是鳥苷轉(zhuǎn)移酶將一個鳥苷酸加在 5 RNA 的前端,產(chǎn)生 5-5對接的磷酸二酯鍵。 第二步由鳥嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶將一個甲基基
16、團加 到嘌呤環(huán)的 7 位氮原子使 5帽子鳥嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)?7-甲基鳥嘌呤。2) 3端加 poly(A)尾巴。在切除前體 mRNA 3末端的一段序列后,在 poly (A) 多聚酶作用下, 合成再加上多聚腺苷酸,約 250 個腺嘌呤核苷酸 尾巴。3) 內(nèi)含子的剪接。核 mRNA 前體含有邊界 順序、分枝點序列及其內(nèi)含子 5端保守序列, 本身不能形成二級結(jié)構(gòu),必需依賴于 snRNP(U1,U2,U4,U5 和 U6)的幫助才能形成剪接 體,進行自我剪接,將內(nèi)含子( intron)去除, 而把外顯子( exon)連接起來。4) 化學(xué)修飾。某些堿基進行甲基化等修飾8. 真核生物細胞的 RNA 內(nèi)含子剪接的主要方式。9. 簡述轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特點及其作用。轉(zhuǎn)錄因子也稱轉(zhuǎn)錄激活因子,它們可對轉(zhuǎn)錄 起始復(fù)合物的組裝及轉(zhuǎn)錄速率施加影響, 決定某一 基因是否表達,通常有一個標(biāo)準(zhǔn)結(jié)構(gòu),存在 DNA14結(jié)合域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域DNA 識別或結(jié)合域能和特定的基因的啟動 子區(qū)結(jié)合,但不能激活基因的轉(zhuǎn)錄;轉(zhuǎn)錄激活結(jié) 構(gòu)域可以在適當(dāng)?shù)目臻g激活轉(zhuǎn)錄。10. 概括典型原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)和功能。 啟動子是與 RNA 聚合酶結(jié)合和轉(zhuǎn)錄起始的 特殊序列。典型的原核生物啟動子大約 40 個核 甘酸并有 2 個重要的序列。35 區(qū):位于復(fù)制起始位點上游 35 個核甘 酸的 6 個核甘酸序列,能
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