3.醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法-及醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則

1、醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法發(fā)布部門：衛(wèi)生部發(fā)布文號(hào)：衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)20101194號(hào)第一章總則笫一條 為規(guī)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)増檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理，保障臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)質(zhì)量和 實(shí)驗(yàn)室生物安全，保證臨床診斷和治療科學(xué)性、合理性，根據(jù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例、醫(yī) 療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法和醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法，制定本辦法。笫二條臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室是指通過(guò)擴(kuò)增檢測(cè)特定的dna或rna,進(jìn)行疾病診斷、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后判定等的實(shí)驗(yàn)室，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)集中設(shè)置，統(tǒng)一管理。第三條本辦法適用于開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。第四條衛(wèi)生部負(fù)責(zé)全國(guó)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督管理工作。各省級(jí)衛(wèi)生行政部門負(fù)

2、責(zé)所轄行政區(qū)域醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)増檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督管理工作。第五條以科研為目的的基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目不得向臨床出具檢驗(yàn)報(bào)告，不得向患者收取任何費(fèi)用。第二章實(shí)驗(yàn)室審核和設(shè)置笫六條醫(yī)療機(jī)構(gòu)向省級(jí)衛(wèi)生行政部門提出臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置申請(qǐng)，并提交以下材料：責(zé)驗(yàn)收行政部門執(zhí)業(yè)許可證（一）醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證復(fù)印件；（二）醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本情況，擬設(shè)置的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室平面圖以及擬開(kāi)展的檢驗(yàn) 項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)設(shè)備、設(shè)施條件和有關(guān)技術(shù)人員資料；（三）對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的需求以及臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的預(yù)測(cè)分析。第七條省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定的其他機(jī)構(gòu)（以下簡(jiǎn)稱省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)）負(fù)責(zé)組織醫(yī)

3、療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)審核工作。第八條 省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)制訂醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基 因擴(kuò)増檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)審核辦法，組建各相關(guān)專業(yè)專家?guī)?，按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢 驗(yàn)工作導(dǎo)則對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行技術(shù)審核。技術(shù)審核辦法報(bào)請(qǐng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門同意后實(shí)施。第九條 醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過(guò)省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)組織的技術(shù) 審核的，憑技術(shù)審核報(bào)告至省級(jí)衛(wèi)生行政部門進(jìn)行相應(yīng)診療科目項(xiàng)下的檢驗(yàn)項(xiàng)目登記備案。第十條 省級(jí)衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法和醫(yī)療機(jī)構(gòu) 臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄開(kāi)展醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目登記工作。第十一條 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置應(yīng)符合國(guó)家

4、實(shí)驗(yàn)室生物安全有關(guān)規(guī)定。第三章實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理第十二條醫(yī)療機(jī)構(gòu)經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目登記后，方可開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。第十三條醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作導(dǎo)則，開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。第十四條醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級(jí)以上衛(wèi)生行改部門指定機(jī)構(gòu)技術(shù)培訓(xùn)合格后，方可從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。笫十五條 醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn) 工作導(dǎo)則開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室室質(zhì)量控制，參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心或指定機(jī)構(gòu)組織的實(shí)驗(yàn)室室間 質(zhì)量評(píng)價(jià)。衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心或指定機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)將室間質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果及時(shí)通報(bào)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和相

5、應(yīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門。第四章實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督管理第十六條 省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因 擴(kuò)增檢驗(yàn)工作導(dǎo)則對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并將監(jiān)測(cè)結(jié) 果報(bào)省級(jí)衛(wèi)生行政部門。第十七條 省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門可以委托臨床檢驗(yàn)中心或者其他指定機(jī)構(gòu)對(duì)醫(yī)療 機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢查?，F(xiàn)場(chǎng)檢查工作人員在履行職責(zé)時(shí)應(yīng)當(dāng)出示證明 文件。在進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢查時(shí)，檢查人員有權(quán)調(diào)閱有關(guān)資料，被檢查醫(yī)療機(jī)構(gòu)不得拒絕或隱瞞。笫十八條 省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)對(duì)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)不合格的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室提出警告。對(duì)于連續(xù)2次或者3次中有2次發(fā)現(xiàn)臨床基因擴(kuò)增檢

6、驗(yàn)結(jié)果 不合格的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，省級(jí)衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)責(zé)令其暫停有關(guān)臨床基 因擴(kuò)増檢驗(yàn)項(xiàng)目，限期整改。整改結(jié)束后，經(jīng)指定機(jī)構(gòu)組織的再次技術(shù)審核合格后，方可重 新開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目。第十九條 對(duì)于擅自開(kāi)展臨床基因檢驗(yàn)項(xiàng)目的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，由省級(jí)衛(wèi)生行改部門依據(jù) 醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例第四十七條和醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例實(shí)施細(xì)則第八十條處罰，并予以 公告。公告所需費(fèi)用由被公告醫(yī)療機(jī)構(gòu)支付。笫二十條 醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)以下情形之一的，由省級(jí)衛(wèi)生行政 部門責(zé)令其停止開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目，并予以公告，公告所需費(fèi)用由被公告醫(yī)療機(jī)構(gòu)支付:（一）開(kāi)展的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目超出省級(jí)衛(wèi)生行政部

7、門核定圍的；（二）使用未經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的臨床檢驗(yàn)試劑開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的;（三）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中未開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室室質(zhì)量控制的；（四）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中未參加實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的；（五）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中弄虛作假的；（六）以科研為目的的基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目向患者收取費(fèi)用的；（七）使用未經(jīng)培訓(xùn)合格的專業(yè)技術(shù)人員從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作的。（A）嚴(yán)重違反國(guó)家實(shí)驗(yàn)室生物安全有關(guān)規(guī)定或不具備實(shí)驗(yàn)室生物安全保障條件的。 第五章附則第二十一條本辦法自發(fā)布之日起施行。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法（衛(wèi)醫(yī)發(fā)（2002） 10號(hào)）同時(shí)廢止。附件醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則一、臨床基因

8、擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)（一）臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)計(jì)原則。原則上臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè) 置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這4個(gè)區(qū)域在物 理空間上必須是完全相互獨(dú)立的，各區(qū)域無(wú)論是在空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于完全 的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。例如使用實(shí) 時(shí)熒光per儀，擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)増產(chǎn)物分析區(qū)可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一 體的自動(dòng)化分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。各區(qū)的功能是：1. 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備，以及離 心管、吸頭等消

9、耗品的貯存和準(zhǔn)備。2. 標(biāo)本制備區(qū)：核酸（rna、dna）提取、貯存及其加入至擴(kuò)増反應(yīng)管。對(duì)于涉及臨床樣 本的操作，應(yīng)符合生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)設(shè)備、個(gè)人防護(hù)和操作規(guī)的要求。3. 擴(kuò)增區(qū)：cdna合成、dna擴(kuò)增及檢測(cè)。4. 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測(cè)定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分 析、測(cè)序等。（二）臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向可按 照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)一標(biāo)本制備區(qū)一擴(kuò)增區(qū)一擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣 流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域?？砂凑諒脑噭﹥?chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)一標(biāo)本制備區(qū)一擴(kuò)增區(qū)一擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 方向空氣壓力遞減的方式進(jìn)行?？赏ㄟ^(guò)安裝排風(fēng)扇

10、、負(fù)壓排風(fēng)裝置或其他可行的方式實(shí)現(xiàn)。（三）工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標(biāo)準(zhǔn)。1. 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)。（1）28C和-20乜以下冰箱。（2）混勻器。（3）微量加樣器（覆蓋0. 2-1000p 1）。（4）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。（5）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭。（6）專用工作服和工作鞋（套）。（7）專用辦公用品。2. 標(biāo)本制備區(qū)。（1）2-8C冰箱、-20r或-8CTC冰箱。（2）高速離心機(jī)。（3）混勻器。（4）水浴箱或加熱模塊。（5）微量加樣器（覆蓋0. 2-1000pi 1）。（6）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。（7）生物安全柜。（8）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管

11、和加樣器吸頭（帶濾芯）。（9）專用工作服和工作鞋（套）。（10）專用辦公用品。（11）如需處理大分子dna,應(yīng)當(dāng)具有超聲波水浴儀。3. 擴(kuò)增區(qū)。（1）核酸擴(kuò)增儀。（2）微量加樣器（覆蓋0. 2-1000n 1）,（視情況定）。（3）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。（4）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾芯）。（5）專用工作服和工作鞋。（6）專用辦公.用品。4. 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。視檢驗(yàn)方法不同而定，基本配置如下：（1）微量加樣器（覆蓋0. 2-1000p 1）。（2）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。（3）消耗品：一次性手套、加樣器吸頭（帶濾芯）。（4）專用工作服和工作鞋。（5）專用

12、辦公用品。上述各區(qū)域儀器設(shè)備配備為基本配備，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)根據(jù)自己使用的擴(kuò)増檢測(cè)技術(shù)或試劑 的特點(diǎn)，對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行必要的增減。二、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作基本原則（一）進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，即試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)一標(biāo)本制備區(qū) -擴(kuò)増區(qū)一擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。（二）各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，不同工作區(qū)域的設(shè)備、物品不得混用。（三）不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開(kāi)各工作區(qū) 域時(shí)，不得將工作服帶出。（四）實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)當(dāng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)一標(biāo)本制備區(qū)一擴(kuò)增區(qū)一擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 的方向進(jìn)行。不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。（五）工作結(jié)束后，必須立

13、即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)當(dāng)可耐受諸如 次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。由于紫外照射 的距離和能量對(duì)去污染的效果非常關(guān)鍵，因此可使用可移動(dòng)紫外燈（254nm波長(zhǎng)），在工作 完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺(tái)上6090cm照射。由于擴(kuò)增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對(duì)（bp）,對(duì)紫外線 損傷不敏感，因此紫外照射擴(kuò)增片段必須延長(zhǎng)照射時(shí)間，最好是照射過(guò)夜。（六）實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，所有操作符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通 用要求（gbl9489-2008）。三、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域工作注意事項(xiàng)（一）試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)。貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)

14、送至試 劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)，不能經(jīng)過(guò)擴(kuò)増檢測(cè)區(qū)，試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū), 應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。（二）標(biāo)本制備區(qū)。由于在樣本混合、核酸純化過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染， 可通過(guò)在本區(qū)設(shè)立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污 染，加入待測(cè)核酸后，必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在傳染危險(xiǎn)性的材料，必 須在生物安全柜開(kāi)蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。（三）擴(kuò)增區(qū)。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)的走動(dòng)。必須注意的是, 所有經(jīng)過(guò)檢測(cè)的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開(kāi)。（四）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片 上探針雜交方法（放射性核素標(biāo)記或非放射性核素標(biāo)記）、直樓或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、 聚丙烯酰胺凝膠電泳、southern轉(zhuǎn)移、核酸測(cè)序方法、質(zhì)譜分析等。本區(qū)是最