牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方資料

1、精品文檔牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng) 基。它含有牛肉膏、蛋白胨和 NaCl 。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白 胨主要提供氮源， 而 NaCl 提供無機(jī)鹽。 在配制固體培養(yǎng)基時(shí)還要加入一定量瓊脂作凝固劑。 瓊脂在常用濃度下 96時(shí)溶化，一般實(shí)際應(yīng)用時(shí)在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化， 以免瓊脂燒焦。瓊脂在 40 時(shí)凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量 根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于 培養(yǎng)細(xì)菌（葷食） ，因此，要用稀酸或稀堿將其 pH 調(diào)至 中性或微 堿性，以利

2、于細(xì)菌的生長繁殖。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方如下：牛肉膏 3g 、蛋白胨 10g 、 NaCl 5g 、瓊脂 15 20g 、水 1000ml 、pH 7476（7.0 8.0 ） 三、器材 牛肉膏，蛋白胨， NaCl ，瓊脂； 1mol/L NaOH ， 1mol/L HCl ； 試管，三角燒瓶，燒杯，量筒， 玻棒， 培養(yǎng)基分裝器， 扭力天平，牛角匙， 高壓蒸汽滅菌鍋， pH 試紙（ pH 5590），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。四、操作步驟1稱量 按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、 NaCl 放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑 取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯

3、。也可放在稱量紙上，稱量后直接 放入水中， 這時(shí)如稍微加熱，牛肉膏便會(huì)與稱量紙分離， 然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸 潮，在稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。另外，稱藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱 取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯(cuò)。2溶化 在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。 待藥品完全溶解后， 補(bǔ)充水分到所需的總體積。 如果配制固體培養(yǎng)基， 將稱好的瓊脂放入已 溶化的藥品中， 再加熱溶化， 在瓊脂溶化的過程中， 需不斷攪拌， 以防瓊脂糊底使燒杯破裂。 最后補(bǔ)足所失的水分。3調(diào) pH 在未調(diào) pH 前，先用精密 pH 試紙測

4、量培養(yǎng)基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培養(yǎng) 基中逐滴加入 1mol/L NaOH ，邊加邊攪拌， 并隨時(shí)用 pH 試紙測其 pH 值，直至 pH 達(dá) 76。 反之，則用 1mol/L HCl 進(jìn)行調(diào)節(jié)。注意 pH 值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會(huì)影響 培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求 pH 值較精確的微生物，其 pH 的調(diào)節(jié)可用酸度計(jì)進(jìn)行（使用方法，可參考有 關(guān)說明書）。4過濾 趁熱用濾紙或多層紗布過濾， 以利結(jié)果的觀察。 一般無特殊要求的情況下， 這一步可以省去 （本實(shí)驗(yàn)無需過濾）。5分裝 按實(shí)驗(yàn)要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖-1 。分裝過程

5、中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。（1）液體分裝分裝高度以試管高度的 1/4 左右為宜。精品文檔精品文檔（2）固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，如圖 -2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。（3）半固體分裝試管一般以試管高度的 1/3 為宜，滅菌后垂直待凝。6加塞 培養(yǎng)基分裝完畢后， 在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞， 以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而 造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實(shí)驗(yàn)后面）。7包扎加塞后， 將全部試管用麻繩捆扎好， 再在棉塞外包一層牛皮紙， 以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉 塞，其外再用一道麻繩扎好。

6、用記號筆注明 培養(yǎng)基名稱、組別、日期 。三角燒瓶加塞后，外 包牛皮紙， 用麻繩以活結(jié)形式扎好， 使用時(shí)容易解開， 同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、 組別、 日期。8滅菌將上述培養(yǎng)基以 105kg/cm2 （15 磅/英寸 2）， 121 3 ， 20 分鐘高壓蒸汽滅菌。如因 特殊情況不能及時(shí)滅菌，則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。9擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至 50 左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過 試管總長的一半為宜。10 無菌檢查 將滅菌的培養(yǎng)基放入 37 的溫室中培養(yǎng) 24 48 小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。PDA 培養(yǎng)基配方：特點(diǎn)及用途PDA培養(yǎng)基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡

7、稱，即Potato Dextrose Agar（Medium），依次對應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。一種常用的培養(yǎng)基， 宜培養(yǎng)酵母菌、 霉菌、 蘑菇等真菌 （素食） 。酵母菌 PH（ 3.86.0 ）， 霉菌（ 4.05.8 ）等。按物理性狀劃分：固體培養(yǎng)基 ，按培養(yǎng)基成分劃分：半合成培養(yǎng)基配方馬鈴薯 200克 葡萄糖 20 克 瓊脂 1520克 自來水 1000 毫升 自然 PH配制步驟其做法是稱取 200g 馬鈴薯，洗凈去皮切成小塊，加水煮爛（煮沸 2030 分鐘，能被 玻璃棒戳破即 可），用四層紗布過濾，再據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)需要加葡萄糖和瓊脂，繼續(xù)加熱 攪拌混勻，稍冷卻后再補(bǔ)足水分至 1000

8、毫升，分裝試管，加塞、包扎，（ 121 ）滅菌 20 分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存?zhèn)溆谩＞肺臋n精品文檔其他事項(xiàng)1. 培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后，必須放在37C 溫箱培養(yǎng) 24h ，無菌生長者方可使用。2. PDA 培養(yǎng)基一般不需要調(diào) pH 。對于要調(diào)節(jié) pH 的培養(yǎng)基， 一般用 pH 試紙測定其 pH。 如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時(shí)，可用 lmol LNaOH 或 lmol LHCL 溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié) 時(shí)應(yīng)逐滴加入 NaOH 或 HCl 溶液，防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。3. 培養(yǎng)基在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基，用于菌類的震蕩培養(yǎng)。4. 培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為 0.

9、1g/L 培養(yǎng)基，主要是為了抑制細(xì)菌 的生長，減少干擾性高氏 1 號培養(yǎng)及配方：培養(yǎng)放線菌用 ，改良的高氏可溶性淀粉 2g ，KNO3 0.1g ， K2HPO4 0.05g ，MgSO4? 7H2O 0.05g ， NaCl 0.05g ， FeSO4? 7H2O 0.001g （母液），瓊脂2g ，自來水 100mL ，pH 7.2 7.4 ，滅菌1.05kg/cm2 ， 20min配制時(shí)， 先用少量冷水， 將淀粉調(diào)成糊狀， 倒入少于所需水量的沸水中， 在火上加熱， 邊攪拌邊依次逐一溶化其他成分， 溶化后， 補(bǔ)足水分到 100ml ，調(diào) pH，121滅菌 20min 。高溫滅菌后，倒平皿前加入10%酚 2 滴至 100ml 培養(yǎng)基中混勻，將培養(yǎng)基倒入平皿內(nèi)約 15ml/ 皿。高氏 1 號：可溶性淀粉 （20g ），KNO（3 1g ），K2HPO（4 0.5g ），MgSO4?7 H