結(jié)核分枝桿菌屬

1、課件制作 陸曙梅 分枝桿菌屬主要特點(diǎn)分枝桿菌屬主要特點(diǎn) 是一類直或微彎曲、有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)的是一類直或微彎曲、有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)的 桿菌。桿菌。 細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，主要為分枝菌酸。細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，主要為分枝菌酸。 具有抗酸性，革蘭染色不易著色，常用具有抗酸性，革蘭染色不易著色，常用 抗酸染色抗酸染色。 專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求特殊，大多數(shù)生長(zhǎng)緩專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求特殊，大多數(shù)生長(zhǎng)緩 慢。慢。 不產(chǎn)內(nèi)、外毒素和侵襲性酶等致病物質(zhì)，不產(chǎn)內(nèi)、外毒素和侵襲性酶等致病物質(zhì)， 所致疾病呈慢性。所致疾病呈慢性。 課件制作 陸曙梅 分枝桿菌屬種類分枝桿菌屬種類 結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌

2、牛分枝桿菌、牛分枝桿菌、 非洲分枝桿菌非洲分枝桿菌 田鼠分枝桿菌田鼠分枝桿菌 非典型分枝桿菌非典型分枝桿菌 麻風(fēng)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌 光產(chǎn)色分枝桿菌光產(chǎn)色分枝桿菌 暗產(chǎn)色分枝桿菌暗產(chǎn)色分枝桿菌 不產(chǎn)色分枝桿菌不產(chǎn)色分枝桿菌 迅速生長(zhǎng)分枝桿菌迅速生長(zhǎng)分枝桿菌 分枝桿菌屬分枝桿菌屬 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌形態(tài)染色形態(tài)染色 細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝生長(zhǎng)細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝生長(zhǎng) 趨勢(shì)趨勢(shì) 無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，部無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，部 分菌株有莢膜分菌株有莢膜 革蘭染色陽(yáng)性，不易革蘭染色陽(yáng)性，不易 著色著色 抗酸染色陽(yáng)性抗酸染色陽(yáng)性 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 生長(zhǎng)條件：生長(zhǎng)

3、條件： 專性需氧、細(xì)胞內(nèi)寄生菌、最適專性需氧、細(xì)胞內(nèi)寄生菌、最適pH6.56.8、 營(yíng)養(yǎng)要求高、培養(yǎng)基含雞蛋、馬鈴薯粉、甘油、營(yíng)養(yǎng)要求高、培養(yǎng)基含雞蛋、馬鈴薯粉、甘油、 孔雀綠等孔雀綠等 生長(zhǎng)現(xiàn)象：生長(zhǎng)現(xiàn)象： 生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢 改良羅氏培養(yǎng)基改良羅氏培養(yǎng)基菌落菌落特征：干燥、淡黃色、特征：干燥、淡黃色、 質(zhì)地較硬的質(zhì)地較硬的R型菌落型菌落 液體培養(yǎng)基：形成菌膜，有毒株呈索狀生長(zhǎng)液體培養(yǎng)基：形成菌膜，有毒株呈索狀生長(zhǎng) 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌生化反應(yīng)生化反應(yīng) 生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類 與非結(jié)核分枝桿菌鑒別：與非結(jié)核分枝桿菌鑒別： 耐熱觸酶試驗(yàn)；（非結(jié)

4、核分枝桿菌）耐熱觸酶試驗(yàn)；（非結(jié)核分枝桿菌） 與牛分枝桿菌鑒別與牛分枝桿菌鑒別 煙酸試驗(yàn)；（牛分枝桿菌）煙酸試驗(yàn)；（牛分枝桿菌） 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌抵抗力與變異性抵抗力與變異性 抵抗力特點(diǎn)：抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏三耐四敏” 耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1：13000） 對(duì)濕熱、對(duì)濕熱、70乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥 物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性）物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性） 變異性變異性 典型形態(tài)典型形態(tài)多形性多形性 R型菌落型菌落S型菌落型菌落 有毒有毒無(wú)毒（用于制備疫苗）無(wú)毒（用于制備疫苗） 抗結(jié)核藥敏感抗結(jié)核藥敏感耐藥

5、耐藥 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌致病物質(zhì)致病物質(zhì) 脂質(zhì)脂質(zhì) 索狀因子索狀因子:與該菌毒力有密切關(guān)系與該菌毒力有密切關(guān)系 磷脂磷脂: 分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)分枝菌酸：與抗酸性有關(guān) 蠟質(zhì)蠟質(zhì)D:具有佐劑作用具有佐劑作用 硫酸腦苷脂硫酸腦苷脂 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 糖類糖類 結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，不產(chǎn)生侵襲性酶結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，不產(chǎn)生侵襲性酶 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌所致疾病與免疫性所致疾病與免疫性 經(jīng)多途徑感染，引起結(jié)核病，以肺結(jié)核經(jīng)多途徑感染，引起結(jié)核病，以肺結(jié)核 多見多見 類型：原發(fā)感染和繼發(fā)感染類型：原發(fā)感染和繼發(fā)感染 免疫性免疫性 抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫

6、為主抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主 抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫 抗結(jié)核免疫與抗結(jié)核免疫與型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn)型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn) 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn) 原理：用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試原理：用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試 者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反 應(yīng)的試驗(yàn)。應(yīng)的試驗(yàn)。 結(jié)果：根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果結(jié)果：根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果 5mm為陰性為陰性 5mm為陽(yáng)性為陽(yáng)性 15mm為強(qiáng)陽(yáng)性為強(qiáng)陽(yáng)性 應(yīng)用：選擇卡介苗接種對(duì)象；判斷卡介苗接種應(yīng)用：選擇卡介苗接種對(duì)象；判

7、斷卡介苗接種 效果；輔助診斷嬰幼兒結(jié)核?。粶y(cè)定腫瘤患者效果；輔助診斷嬰幼兒結(jié)核??；測(cè)定腫瘤患者 細(xì)胞免疫狀態(tài)細(xì)胞免疫狀態(tài) 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序 標(biāo)本標(biāo)本 核酸核酸 檢測(cè)檢測(cè) 接種固體培養(yǎng)基接種固體培養(yǎng)基 可疑菌落可疑菌落 涂片抗酸涂片抗酸 染色鏡檢染色鏡檢 抗體抗體 檢測(cè)檢測(cè) 慢性生長(zhǎng)菌慢性生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌 菌種鑒定菌種鑒定 標(biāo)本前處理標(biāo)本前處理 接種液體接種液體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 接種小白鼠接種小白鼠 豚鼠豚鼠 臟器涂片臟器涂片 鏡檢鏡檢 抗酸染色抗酸染色鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn) 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌涂片檢查涂片檢查 直接涂片直接涂片

8、 薄涂片薄涂片 厚涂片厚涂片 集菌涂片集菌涂片 沉淀集菌法沉淀集菌法 漂浮集菌法漂浮集菌法 熒光顯微鏡檢查法：熒光顯微鏡檢查法： 金剛胺金剛胺O染色染色熒光顯微鏡下檢查熒光顯微鏡下檢查 課件制作 陸曙梅 抗酸染色抗酸染色報(bào)告方式報(bào)告方式 報(bào)告方式報(bào)告方式鏡檢結(jié)果鏡檢結(jié)果 -仔細(xì)檢查仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌 300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)12條抗酸菌條抗酸菌 100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 210個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 3每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 4每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌條以上抗酸

9、菌 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)分離培養(yǎng) 標(biāo)本前處理：標(biāo)本前處理： 目的：殺死雜菌；液化標(biāo)本目的：殺死雜菌；液化標(biāo)本 方法：方法： 4NaOH法；法； 4H2SO2法；法； 胰酶胰酶-新潔爾滅法等新潔爾滅法等 培養(yǎng)基選擇：羅氏培養(yǎng)基、米氏培養(yǎng)基、小川培養(yǎng)基選擇：羅氏培養(yǎng)基、米氏培養(yǎng)基、小川 培養(yǎng)基等培養(yǎng)基等 接種接種 培養(yǎng)培養(yǎng) 課件制作 陸曙梅 培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法 報(bào)告方式報(bào)告方式培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果 斜面斜面20個(gè)菌落以上，占斜面?zhèn)€菌落以上，占斜面1/4以下以下 2斜面上菌落生長(zhǎng)面積占斜面上菌落生長(zhǎng)面積占1/4以上，以上，1/2以下以下 3斜面上菌

10、落面積占斜面斜面上菌落面積占斜面1/2以上，以上，3/4以下以下 4斜面上菌落生長(zhǎng)密集，成菌苔斜面上菌落生長(zhǎng)密集，成菌苔 課件制作 陸曙梅 非典型分枝桿菌非典型分枝桿菌 是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外 的分枝桿菌。的分枝桿菌。 大多為環(huán)境中的腐生菌大多為環(huán)境中的腐生菌 對(duì)酸堿比較敏感對(duì)酸堿比較敏感 對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受 為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù)為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù) 合分枝桿菌合分枝桿菌 課件制作 陸曙梅 麻風(fēng)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀 為抗酸桿菌為抗酸桿菌 細(xì)胞內(nèi)寄生細(xì)胞內(nèi)寄生 有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡

11、沫狀，稱為有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱為 麻風(fēng)細(xì)胞麻風(fēng)細(xì)胞 體外人工培養(yǎng)尚未成功體外人工培養(yǎng)尚未成功 犰狳犰狳是動(dòng)物感染模型是動(dòng)物感染模型 課件制作 陸曙梅 麻風(fēng)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌臨床意義與微檢臨床意義與微檢 經(jīng)呼吸道、接觸感染經(jīng)呼吸道、接觸感染 引起引起麻風(fēng)病麻風(fēng)病 瘤型麻風(fēng)（開放型）：傳染性強(qiáng)瘤型麻風(fēng)（開放型）：傳染性強(qiáng) 結(jié)核樣型（閉鎖性）：傳染性弱結(jié)核樣型（閉鎖性）：傳染性弱 微檢：標(biāo)本涂片抗酸染色是診斷麻風(fēng)的微檢：標(biāo)本涂片抗酸染色是診斷麻風(fēng)的 主要依據(jù)主要依據(jù) 課件制作 陸曙梅 麻風(fēng)桿菌麻風(fēng)桿菌 課件制作 陸曙梅 犰狳犰狳 課件制作 陸曙梅 抗酸染色抗酸染色 染液組成：染液組成：

12、 石炭酸復(fù)紅、石炭酸復(fù)紅、3鹽酸酒精、美蘭鹽酸酒精、美蘭 染色步驟染色步驟 石炭酸加溫染石炭酸加溫染5分鐘，水洗分鐘，水洗 3鹽酸酒精脫色致無(wú)紅色脫下為止，水洗鹽酸酒精脫色致無(wú)紅色脫下為止，水洗 美藍(lán)染美藍(lán)染1分鐘，水洗，干后鏡檢分鐘，水洗，干后鏡檢 染色結(jié)果染色結(jié)果 抗酸菌：紅色抗酸菌：紅色 非抗酸菌：藍(lán)色非抗酸菌：藍(lán)色 染色意義：區(qū)別抗酸菌與非抗酸菌染色意義：區(qū)別抗酸菌與非抗酸菌 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌菌落結(jié)核分枝桿菌菌落 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌（抗酸染色）（抗酸染色） 課件制作 陸曙梅 麻風(fēng)病人麻風(fēng)病人 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌抵抗力與變異性

13、抵抗力與變異性 抵抗力特點(diǎn)：抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏三耐四敏” 耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1：13000） 對(duì)濕熱、對(duì)濕熱、70乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥 物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性）物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性） 變異性變異性 典型形態(tài)典型形態(tài)多形性多形性 R型菌落型菌落S型菌落型菌落 有毒有毒無(wú)毒（用于制備疫苗）無(wú)毒（用于制備疫苗） 抗結(jié)核藥敏感抗結(jié)核藥敏感耐藥耐藥 課件制作 陸曙梅 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌涂片檢查涂片檢查 直接涂片直接涂片 薄涂片薄涂片 厚涂片厚涂片 集菌涂片集菌涂片 沉淀集菌法沉淀集菌法 漂浮集菌法漂浮集菌法 熒光顯微鏡檢查法：熒光顯微鏡檢查法： 金剛胺金剛胺O染色染色熒光顯微鏡下檢查熒光顯微鏡下檢查 課件制作 陸曙梅 抗酸染色抗酸染色報(bào)告方式報(bào)告方式 報(bào)告方式報(bào)告方式鏡檢結(jié)果鏡檢結(jié)果 -仔細(xì)檢查仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌 300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)12條抗酸菌條抗酸菌 100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 210個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 3每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)19條抗酸菌條抗酸菌 4每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌條以上抗酸菌