消除瘧疾技術(shù)方案

1、消除瘧疾技術(shù)方案 （2011年版）為加快我國消除瘧疾工作進程，指導各地科學、規(guī)范地實施消除瘧疾工作，確保到2020年全國實現(xiàn)消除瘧疾的目標，根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法、中國消除瘧疾行動計劃（2010-2020年）、瘧疾診斷標準、瘧疾控制和消除標準和傳染病信息報告管理規(guī)范，特制定本方案。一、基本原則消除瘧疾工作應遵循因地制宜、分類指導、科學防治的原則，以傳染源控制為核心，以監(jiān)測工作為主導，突出重點地區(qū)，有效整合資源，完善工作機制，落實部門職責，加強能力建設(shè)，確保消除瘧疾各項技術(shù)措施的落實。各地要根據(jù)當?shù)丿懠擦餍星闆r及變化趨勢，適時調(diào)整消除瘧疾策略和相關(guān)技術(shù)措施。二、傳染源監(jiān)測與控制（一）病例

2、診斷1診斷依據(jù)（1）流行病學史曾有瘧疾傳播季節(jié)在瘧疾流行區(qū)（包括歷史流行區(qū)）住宿、夜間停留史，或近二周內(nèi)有輸血史；或有既往病史。（2）臨床表現(xiàn) 典型的臨床表現(xiàn)：有周期性發(fā)冷、發(fā)熱、出汗等癥狀，每天或隔天或隔兩天發(fā)作一次。重癥病例可出現(xiàn)意識障礙或昏迷等癥狀，主要并發(fā)癥有腦損害、胃腸損害、休克、溶血、嚴重的肝腎損害、肺水腫、嚴重貧血、異常出血、低血糖、酸中毒等。 不典型的臨床表現(xiàn)：有發(fā)熱、發(fā)冷、出汗等癥狀，但熱型和發(fā)作周期不規(guī)律，有類似感冒癥狀或伴有腹瀉等胃腸道癥狀，也可有頭痛、妄語等中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。根據(jù)患者是否出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥，可將瘧疾患者分為普通型病例和重癥病例；重癥病例以腦型瘧多見。（3）實

3、驗室檢查 病原學檢查：顯微鏡檢查血涂片查見瘧原蟲； 免疫學檢測：瘧原蟲抗原檢測陽性； 基因檢測：瘧原蟲特異性基因片段檢測陽性。2病例診斷分類（1）疑似病例：具有流行病學史，且臨床表現(xiàn)不典型者。（2）臨床診斷病例：具有流行病學史，且臨床表現(xiàn)典型者。（3）確診病例：疑似病例或臨床診斷病例中實驗室檢查結(jié)果陽性的病例。根據(jù)感染人體的瘧原蟲種，確診病例可分為間日瘧、惡性瘧、三日瘧、卵形瘧和混合感染等。（4）無癥狀帶蟲者：無臨床癥狀，血涂片鏡檢查見瘧原蟲者。（二）病例發(fā)現(xiàn)與報告1. 病例發(fā)現(xiàn)（1）村醫(yī)務室（包括社區(qū)衛(wèi)生服務站，下同） 在一類縣，鄉(xiāng)村醫(yī)生（以下簡稱村醫(yī)）對發(fā)現(xiàn)的疑似瘧疾、臨床診斷病例和不明原

4、因發(fā)熱病人，采制血涂片（要求每張血片涂制標準厚薄血膜各1個）送鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院（包括社區(qū)衛(wèi)生服務中心，下同）鏡檢，并填寫“瘧疾病例就診登記表”（附表1）。同時，對疑似病例和臨床診斷病例采制濾紙血樣送鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院備檢。有條件的可采用快速診斷試劑盒（以下簡稱RDT）進行檢測。 在二、三類縣，村醫(yī)對發(fā)現(xiàn)的疑似瘧疾、臨床診斷瘧疾病例和不明原因發(fā)熱病人，應建議其盡快就近到鄉(xiāng)級及以上醫(yī)療機構(gòu)就診。（2）鄉(xiāng)級及以上醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu) 臨床醫(yī)生應根據(jù)患者的流行病學史（和既往病史）及臨床表現(xiàn)進行初步診斷，對所有臨床診斷為瘧疾、疑似瘧疾和不明原因發(fā)熱的病人，及時開具檢驗單進行瘧疾實驗室檢查。 檢驗人員負責采集病人血標本，制作血

5、涂片進行瘧原蟲鏡檢，有條件的地區(qū)也可采用RDT進行檢測；對疑似瘧疾、臨床診斷和確診的瘧疾病例應同時制作濾紙血樣（2滴血）或抗凝血樣（2ml）冷凍保存、備查。一類縣鄉(xiāng)級及以上醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)接到村醫(yī)送檢的血涂片后，應及時進行鏡檢并將鏡檢結(jié)果反饋送檢醫(yī)生。在三類縣中，不具備血涂片鏡檢條件的鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院，檢驗人員負責采集病人血標本制作血涂片及濾紙血樣，由縣級及以上疾病預防控制機構(gòu)進行實驗室檢測，并將檢測結(jié)果及時反饋給送檢單位。2. 病例報告各級各類醫(yī)療機構(gòu)、疾病預防控制機構(gòu)、檢驗檢疫機構(gòu)和采供血機構(gòu)及其執(zhí)行職務的人員和村醫(yī)一旦發(fā)現(xiàn)疑似、臨床診斷和確診的瘧疾病例，應當在24小時內(nèi)填寫傳染病報告卡，通過中國疾

6、病預防控制中心疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)進行網(wǎng)絡直報。暫不具備網(wǎng)絡直報條件的責任報告單位應在診斷后24小時內(nèi)向所在地的縣級疾病預防控制機構(gòu)送（寄）出傳染病報告卡，縣級疾病預防控制機構(gòu)收到傳染病報告卡后，應于2小時內(nèi)進行網(wǎng)絡直報。各地出現(xiàn)瘧疾突發(fā)疫情時，應根據(jù)瘧疾突發(fā)疫情處理預案（衛(wèi)疾控發(fā)200655號）相關(guān)規(guī)定，通過中國疾病預防控制中心突發(fā)公共衛(wèi)生事件管理信息系統(tǒng)報告。（三）病例治療1.治療原則對所有臨床診斷和確診的瘧疾病例及帶蟲者均應進行規(guī)范的抗瘧疾藥物治療。（1） 間日瘧治療首選磷酸氯喹片（以下簡稱氯喹）加磷酸伯氨喹片（以下簡稱伯氨喹）八日療法進行治療（此療法也適用于卵形瘧和三日瘧患者的治療

7、）。治療無效時，可選用以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的復方或聯(lián)合用藥的口服劑型（以下簡稱ACT）進行治療。（2） 惡性瘧治療采用ACT進行治療。包括青蒿琥酯片加阿莫地喹片 、雙氫青蒿素哌喹片、復方磷酸萘酚喹片、復方青蒿素片等。（3） 重癥瘧疾治療首選青蒿素類藥物的注射劑型進行搶救性治療。包括：蒿甲醚注射劑、青蒿琥酯注射劑等。同時給予對癥治療和支持療法，以減少并發(fā)癥和合并感染。待患者病情緩解并且能夠進食后，可選用任意一種ACT，再進行一個療程的鞏固性治療。（4） 孕婦瘧疾治療孕婦患間日瘧可采用氯喹治療。孕期在3個月以內(nèi)的惡性瘧患者可選用磷酸哌喹片治療，孕期在3個月以上的惡性瘧患者可采用ACT治療。孕婦患重

8、癥瘧疾應選用蒿甲醚或青蒿琥酯注射劑治療。（5）臨床診斷瘧疾病例的治療根據(jù)患者流行病學史和發(fā)病史等相關(guān)信息，判斷其可能的感染地點，確定治療方案。感染地為單一間日瘧流行區(qū)，可采用氯喹加伯氨喹八日療法進行治療。感染地為間日瘧和惡性瘧混合流行區(qū)，特別是由國外輸入的瘧疾病例，可直接采用ACT進行治療；若該病例進一步確診為惡性瘧原蟲和其他瘧原蟲的混合感染，須加服一個療程（八日療法）的伯氨喹。如無法判斷其感染地點，可按照本地感染的瘧疾病例進行治療?？汞懰幨褂迷瓌t和用藥方案見附件1。（6）疑似病例治療對不能及時排除的疑似病例，可按臨床診斷病例治療，但在治療前應采集血涂片和濾紙血或抗凝血送檢。病人明確診斷后，應

9、及時調(diào)整治療方案。2.治療管理各級醫(yī)療機構(gòu)對發(fā)現(xiàn)的所有瘧疾病例進行抗瘧治療時，須規(guī)范開具病人治療處方，并提示患者應全程足量服藥?？h級疾病預防控制機構(gòu)應組織鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員和村醫(yī)對間日瘧治療對象進行督導服藥和登記工作，做好服藥宣傳、送藥上門、看服到口、服后簽名工作，確保全程、足量服藥，并密切觀察病人服藥情況，及時報告和處理可能發(fā)生的副反應。（四）病例核實與確認1病例核實與個案調(diào)查縣級疾病預防控制機構(gòu)應有專人負責每日瀏覽中國疾病預防控制中心疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)本轄區(qū)內(nèi)報告的疑似、臨床診斷和確診瘧疾病例后，應當立即與報告單位聯(lián)系，對報告病例的血涂片進行復核。病例診斷發(fā)生變更后，及時在疾病

10、監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)中進行訂正?？h級疾病預防控制機構(gòu)對發(fā)現(xiàn)的疑似、臨床診斷和確診瘧疾病例，應在3日內(nèi)組織完成流行病學個案調(diào)查，調(diào)查內(nèi)容應包括病例基本情況、流行病學史、治療史以及本次發(fā)病、診斷和治療情況。其中，病例本次治療情況，調(diào)查人員應在病例完成治療后一周內(nèi)，再次訪問病例進行補充調(diào)查。負責開展病例個案調(diào)查的專業(yè)人員包括補充調(diào)查病例本次治療情況的人員，應及時填寫“瘧疾病例流行病學個案調(diào)查表”（附表2）?？h級疾病預防控制中心應及時收集瘧疾病例個案調(diào)查表，并在完成調(diào)查后的2日內(nèi)將病例個案調(diào)查資料錄入寄生蟲病防治信息管理系統(tǒng)（以下簡稱專報系統(tǒng)）。疾控機構(gòu)開展個案調(diào)查時，如需其他地區(qū)疾控機構(gòu)協(xié)助完成個案

11、調(diào)查，其他地區(qū)疾控機構(gòu)應予配合，并及時相互溝通信息。2. 病例確認省級疾病預防控制機構(gòu)應當對轄區(qū)內(nèi)瘧疾發(fā)病率已連續(xù)三年下降到萬分之一以下的縣（市、區(qū)）的所有疑似、臨床診斷和確診的瘧疾病例的血涂片進行鏡檢復核，對血涂片鏡檢復核結(jié)果為陰性的病例進一步進行基因檢測確認。 暫不具備基因檢測條件的省級疾病預防控制機構(gòu)，由中國疾病預防控制中心寄生蟲病所負責指導或幫助該省完成對所有報告瘧疾病例的確認。（五）疫點調(diào)查與處置1. 疫點定義疫點是指出現(xiàn)瘧疾病例的自然村、居民點或施工場所等區(qū)域。2. 疫點類型（1）活動性疫點：指瘧疾病例出現(xiàn)在瘧疾流行區(qū)的傳播季節(jié)，且當時疫點存在有效傳瘧媒介。（2）非活動性疫點： 指

12、瘧疾病例出現(xiàn)在瘧疾流行區(qū)的非傳播季節(jié)；或雖出現(xiàn)在瘧疾流行區(qū)的傳播季節(jié)，但當時疫點不存在有效傳瘧媒介。（3）假疫點：指瘧疾病例出現(xiàn)在非瘧疾流行區(qū)。輸入性惡性瘧病例所在疫點的傳瘧媒介如僅有中華按蚊，可視為非活動性疫點。如經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)傳播證據(jù)，應按活動性疫點處理。3. 疫點調(diào)查在活動性疫點和非活動性疫點，縣級疾病預防控制機構(gòu)負責組織在病例網(wǎng)絡直報后1周內(nèi)完成疫點調(diào)查，評估潛在傳播風險。省、地市級疾控機構(gòu)應加強對疫點調(diào)查指導，尤其是二、三類縣發(fā)現(xiàn)疫點時，省、地市級疾控機構(gòu)應參與調(diào)查。疫點調(diào)查內(nèi)容包括：（1）基本情況。收集疫點所處的地理位置、地形地貌、年平均溫度、年降雨量、戶數(shù)、人口數(shù)、歷史流行情況和本次

13、瘧疾發(fā)病情況等相關(guān)資料。（2）媒介按蚊種群調(diào)查。當病例出現(xiàn)在瘧疾流行區(qū)的傳播季節(jié)時，對近3年本縣范圍內(nèi)沒有媒介調(diào)查資料、且疫點周圍存在媒介孳生環(huán)境的疫點，可在病家及周圍選擇12個調(diào)查場所，每個場所布置1盞誘蚊燈，采用誘蚊燈通宵誘蚊法，進行12個通宵的媒介按蚊種群調(diào)查；或采用人誘半通宵法開展12晚上調(diào)查，并通過形態(tài)學方法對捕獲按蚊種類進行鑒定，以確定疫點是否存在傳瘧媒介。對難以鑒定的按蚊標本，可由省級疾病預防控制機構(gòu)采用分子生物學方法進行鑒定。媒介按蚊種群調(diào)查技術(shù)規(guī)范見附件2。（3）病例篩查。采取逐戶走訪的方式，對2周內(nèi)有發(fā)熱史者采集血標本，進行瘧原蟲鏡檢或RDT檢測，同時了解居民防蚊設(shè)施使用情

14、況。如發(fā)現(xiàn)2例及以上本地感染的瘧疾病例或帶蟲者，可視情況擴大至對疫點內(nèi)所有居民采血進行瘧原蟲鏡檢或RDT檢測。4. 疫點處置縣級疾病預防控制機構(gòu)負責組織在病例網(wǎng)絡直報后1周內(nèi)完成疫點處置工作。疫點處置的內(nèi)容包括：（1）健康教育?？山Y(jié)合對疫點居民的病例篩查一并開展。重點教育群眾如出現(xiàn)發(fā)冷、發(fā)熱等癥狀時，應考慮是否感染瘧疾，及時就醫(yī)，早診早治；在活動性和非活動性疫點還要教育群眾增強自我防護意識，避免露宿，提倡使用蚊帳、紗門紗窗等防蚊設(shè)施，減少蚊蟲叮咬機會。（2）擴大治療。在活動性疫點，如發(fā)現(xiàn)漏報瘧疾病例或帶蟲者，需對發(fā)現(xiàn)病例和帶蟲者的全家以及四鄰居民，采用與病例相同的抗瘧疾治療方案進行擴大治療，以

15、清除可能的傳染源。（3）媒介控制。在活動性疫點，采用擬除蟲菊酯類殺蟲劑室內(nèi)滯留噴灑進行媒介控制，以降低傳瘧媒介密度，阻斷可能的傳播。噴灑范圍為病家和四鄰，如在病例篩查中發(fā)現(xiàn)2例及以上漏報病例或帶蟲者，可酌情擴大到整個疫點。長效蚊帳或藥物浸泡蚊帳覆蓋率已達到85%以上的疫點，可不再實施噴灑措施。5疫點調(diào)查與處置報告縣級疾病預防控制機構(gòu)在疫點調(diào)查與處置工作完成后一周內(nèi)，將疫點調(diào)查與處置情況逐級上報至省級疾病預防控制機構(gòu)，并按要求報中國疾病預防控制中心。（六）休止期治療1. 休止期根治在每年傳播季節(jié)前（或34月份），對上一年內(nèi)本轄區(qū)內(nèi)登記、報告的所有間日瘧病例（包括上一年在疫點調(diào)查處置中發(fā)現(xiàn)的漏報病

16、例和帶蟲者），采用伯氨喹八日療法（詳見附件1）進行1次傳播休止期根治, 以防止病例復發(fā)。2. 休止期擴大治療流行區(qū)每年傳播季節(jié)前，在上一年瘧疾發(fā)病率大于1%的自然村或居民點，對間日瘧病人的家屬和四鄰居民，采用氯喹加伯氨喹八日療法（詳見附件1）進行傳播休止期擴大治療。3. 組織實施（1）各級衛(wèi)生行政部門負責對休止期根治和休止期擴大治療的組織領(lǐng)導。省級疾病預防控制機構(gòu)負責對本省開展休止期治療工作的地市級和縣級專業(yè)人員進行培訓?？h級疾病預防控制機構(gòu)負責組織鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員和村醫(yī)具體實施。（2）縣級衛(wèi)生行政部門負責協(xié)調(diào)財政、廣電、教育等相關(guān)部門和相關(guān)鄉(xiāng)鎮(zhèn)參與休止期治療工作?？h級疾病預防控制機構(gòu)負責制

17、定傳播休止期治療工作方案、服藥不良反應的應急處理預案和健康教育處方；對鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員和村醫(yī)進行培訓，使其掌握藥品性能、用藥劑量、禁忌癥及毒副反應處理等相關(guān)知識。（3）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員和村醫(yī)根據(jù)縣級疾病預防控制機構(gòu)制定的休止期治療工作方案對服藥對象進行摸底調(diào)查，登記造冊；認真做好入戶宣傳教育，發(fā)放健康教育處方，讓群眾了解休止期治療的意義和注意事項，積極配合休止期治療工作。（4）由村醫(yī)擔任送藥員，負責每日送藥上門，服藥前應認真核對服藥對象的年齡和用藥劑量，看服到口，確保全程服藥，規(guī)范治療。（5）服藥過程中發(fā)現(xiàn)有頭暈、惡心、嘔吐、輕度腹瀉等癥狀均為一般性反應，無需停藥，癥狀可自行消失。因服藥過

18、量出現(xiàn)較嚴重的不良反應時，應立即停藥，并送當?shù)蒯t(yī)療機構(gòu)進行救治。本人或家族有溶血史者，禁服伯氨喹。(七)、輸入性瘧疾管理1定義根據(jù)瘧疾控制和消除標準，以縣級行政區(qū)為單位,非當?shù)馗腥镜寞懠膊±?，包括外來流動人口和當?shù)鼐用裨谕獾馗腥?，返回本地后發(fā)病的病例為輸入性瘧疾病例。2判定依據(jù)（1） 境外輸入病例：在近1個月內(nèi)有在國外瘧疾流行區(qū)住宿、夜間停留史或既往病史。（2） 境內(nèi)輸入病例：有在境內(nèi)其他流行縣（市、區(qū)）住宿或夜間停留史，且符合以下條件之一的，方可判斷為輸入病例，發(fā)病地為非瘧疾流行縣（市、區(qū)）；在非惡性瘧流行縣（市、區(qū)）出現(xiàn)惡性瘧病例；發(fā)病時間距進入發(fā)病地2周以內(nèi)，且其感染地當年已有本地感染病

19、例報告；有其他證據(jù)證明為輸入性病例的。當難以區(qū)分病例為本地感染或輸入性病例時，原則上判定為本地感染病例。3輸入性瘧疾管理。（1） 境內(nèi)流動人口瘧疾管理病例發(fā)現(xiàn)地的醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)負責病例的診斷、報告和治療；并告知間日瘧患者于次年34月份到就近的疾病預防控制機構(gòu)進行休止期根治。病例發(fā)現(xiàn)地的縣級疾病預防控制機構(gòu)負責對病例血涂片的鏡檢復核、流行病學個案調(diào)查，根據(jù)調(diào)查結(jié)果判斷其可能的感染地點，并在發(fā)現(xiàn)病例后一周內(nèi)向病例感染地的省級疾病預防控制機構(gòu)通報疫情信息。病例感染地縣級疾病預防控制機構(gòu)接到通報的疫情信息后，應結(jié)合當?shù)丿懠擦餍星闆r，開展疫點調(diào)查，包括基本情況調(diào)查、病例篩查和媒介調(diào)查，并根據(jù)疫點類型和調(diào)查

20、結(jié)果，及時采取相應疫點處置措施。流動人口相對集中的各類工程建設(shè)項目施工單位，必須高度重視瘧疾的預防控制工作。當發(fā)現(xiàn)瘧疾病例時，應及時向當?shù)丶膊☆A防控制機構(gòu)報告，并協(xié)助開展疫點調(diào)查與處置。（2） 境外輸入性瘧疾病例管理省級疾病預防控制機構(gòu)負責轄區(qū)內(nèi)發(fā)現(xiàn)的境外輸入性瘧疾病例的通報、調(diào)查和處置工作。檢驗檢疫機構(gòu)對經(jīng)確診或臨床診斷的境外輸入性瘧疾病例應及時將相關(guān)信息告知屬地疾病預防控制機構(gòu)，并提供同行人員（境外感染地同批返回人員）相關(guān)信息。各級疾控機構(gòu)發(fā)現(xiàn)境外輸入性瘧疾病例時，除按規(guī)定進行疫情網(wǎng)絡直報和專報外，應及時逐級上報省級疾病預防控制機構(gòu)。病例發(fā)現(xiàn)地省級疾病預防控制機構(gòu)負責省際間的通報。病例的目

21、的地省級疾病預防控制機構(gòu)負責對所有輸入性瘧疾病例進行流行病學個案調(diào)查、同行人員的追蹤調(diào)查和健康咨詢，必要時視情況對病例所在地的環(huán)境進行傳播風險評估和疫點處置。（3） 輸入性瘧疾病例的審核省級疾病預防控制機構(gòu)對轄區(qū)內(nèi)報告的境外和境內(nèi)輸入性瘧疾病例應及時進行審核；對存在爭議的跨省輸入性瘧疾病例，由中國疾病預防控制中心寄生蟲病所認定。（八）不明原因發(fā)熱病人血檢一、二、三類縣均應開展不明原因發(fā)熱病人血檢。由縣、鄉(xiāng)醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)抽取部分不明原因發(fā)熱病人，采制血涂片進行鏡檢,或采用RDT進行檢測。在一、二類縣，以鄉(xiāng)為單位，每年抽取不明原因發(fā)熱病人數(shù)不低于轄區(qū)總?cè)丝跀?shù)的1，傳播季節(jié)抽取的不明原因發(fā)熱病人數(shù)不低

22、于血檢總數(shù)的80。在三類縣，以縣為單位，每年抽取不明原因發(fā)熱病人數(shù)不低于轄區(qū)總?cè)丝跀?shù)的0.5，傳播季節(jié)抽取的不明原因發(fā)熱病人數(shù)不低于血檢總數(shù)的80。（九）監(jiān)測資料分析各?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）、地市、縣級疾病預防控制機構(gòu)應定期對本轄區(qū)內(nèi)瘧疾病例報告數(shù)據(jù)、病例個案調(diào)查數(shù)據(jù)和疫點調(diào)查數(shù)據(jù)進行匯總和分析，評估消除措施落實情況，及時反饋數(shù)據(jù)分析結(jié)果，并報上級疾病預防控制機構(gòu)和同級衛(wèi)生行政部門。各級衛(wèi)生行政部門和疾控機構(gòu)要根據(jù)監(jiān)測數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)的防治工作中存在的問題，及時采取針對性措施，確保瘧疾消除各項關(guān)鍵措施的有效落實。中國疾病預防控制中心寄生蟲病所定期對全國瘧疾監(jiān)測信息進行匯總分析，向各?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市

23、）級疾病預防控制機構(gòu)反饋，并報衛(wèi)生部。1.發(fā)病率指標（1）年瘧疾發(fā)病率年瘧疾報告病例數(shù)/年平均人口數(shù)1/10000；（2）發(fā)病專率：根據(jù)病例分類、人群特征等分別計算。2.病例診斷、報告和調(diào)查指標（1）病例報告比例報告瘧疾病例數(shù)/門診登記瘧疾病例數(shù)100；（2）病例發(fā)病到診斷時間的中位數(shù)；（3）病例診斷后24小時內(nèi)報告比例診斷后24小時內(nèi)報告病例數(shù)/報告病例總數(shù)100；（4）實驗室檢測率實驗室檢測病例數(shù)/報告病例總數(shù)100；（5）確診病例比例實驗室診斷病例數(shù)/報告病例總數(shù)100； （6）個案調(diào)查率開展個案調(diào)查的病例數(shù)/報告病例總數(shù)100；（7）治療情況追蹤調(diào)查率治療情況追蹤調(diào)查病例數(shù)/報告病例總

24、數(shù)100；（8）疫點調(diào)查率開展調(diào)查的疫點數(shù)/應開展調(diào)查疫點數(shù)100；（9）疫點篩查比例疫點病例篩查實際走訪人數(shù)/疫點常住人口數(shù)100。3.病例治療指標規(guī)范治療率規(guī)范治療病人數(shù)/應治療人數(shù)100。4.病例鏡檢指標（1）鏡檢復核率實際鏡檢復核病例數(shù)/應復核病例總數(shù)100；（2）血片涂制和染色合格率血片涂制和染色合格數(shù)/復核血片總數(shù)100；（3）復核一致率鏡檢復核一致血片數(shù)/鏡檢復核血片總數(shù)100；（4）疑似病例血檢陽性率初診為疑似病例的血檢陽性數(shù)/初診為疑似病例開展血檢總數(shù)100；（5）臨床診斷病例血檢陽性率初診為臨床診斷病例的血檢陽性數(shù)/初診為臨床診斷病例開展血檢總數(shù)100；（6）不明原因發(fā)熱病

25、人血檢陽性率初診為不明原因發(fā)熱病例的血檢陽性數(shù)/初診為不明原因發(fā)熱病例開展血檢總數(shù)100。三、媒介防制措施（一）殺蟲劑室內(nèi)滯留噴灑1適用范圍對活動性疫點，在疫點范圍內(nèi)采用擬除蟲菊酯類殺蟲劑進行室內(nèi)滯留噴灑。詳見疫點處置部分的媒介控制措施。2組織管理（1）省級疾病預防控制機構(gòu)負責統(tǒng)一采購并配備殺蟲劑、噴灑設(shè)備和防護用品，對縣級疾病預防控制機構(gòu)開展相關(guān)技術(shù)培訓，并對滯留噴灑工作質(zhì)量進行抽查。（2）縣級疾病預防控制機構(gòu)負責組織并指導鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員、村醫(yī)和村民委員會，在病例網(wǎng)絡直報后一周內(nèi)實施。噴灑前要對噴灑人員進行技術(shù)培訓和安全教育，逐戶測量、登記噴灑面積，并做好宣傳教育。噴灑過程中要嚴格按照操

26、作規(guī)程，注意個人防護，確保滯留噴灑效果和人員、家畜的安全。殺蟲劑室內(nèi)滯留噴灑技術(shù)規(guī)范見附件3。（二）殺蟲劑浸泡蚊帳或長效蚊帳1適用范圍對存在大劣按蚊、微小按蚊和嗜人按蚊的一類縣，在瘧疾發(fā)病率較高的自然村，可采用殺蟲劑浸泡蚊帳或使用長效蚊帳作為媒介控制措施，以減少人蚊接觸，降低瘧疾發(fā)病率。使用殺蟲劑浸泡蚊帳或長效蚊帳的人群覆蓋率以自然村為單位不得低于85%。2. 組織實施（1）省級疾病預防控制機構(gòu)負責統(tǒng)一采購并配備殺蟲劑和長效蚊帳，對縣級疾病預防控制機構(gòu)開展相關(guān)技術(shù)培訓，并對浸泡工作質(zhì)量及人群覆蓋率進行抽查。（2）縣級疾病預防控制機構(gòu)負責組織鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員、村醫(yī)和村民委員會等相關(guān)人員，以自然

27、村為單位，在每年傳播季節(jié)到來之前，開展殺蟲劑浸泡蚊帳；在實施殺蟲劑浸泡蚊帳工作前，要對上述人員進行技術(shù)培訓和安全教育；協(xié)助當?shù)丶t十字會等相關(guān)合作伙伴組織發(fā)放長效蚊帳。（3）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員和村醫(yī)要逐戶登記蚊帳數(shù)量，并做好入戶宣傳教育。操作人員在浸泡過程中要嚴格按照操作規(guī)程，并告知用戶晾曬或清洗蚊帳的注意事項，注意個人防護措施，確保浸泡效果和人員、家畜的安全。殺蟲劑浸泡蚊帳技術(shù)規(guī)范見附件4。（三）個體防護在瘧疾流行區(qū)的傳播季節(jié)，提倡當?shù)鼐用袷褂梦脦?、紗門紗窗、驅(qū)避劑、蚊香或電子驅(qū)蚊器等防蚊設(shè)施和防護用品。各類工程建設(shè)項目施工單位應當在當?shù)丶膊☆A防控制機構(gòu)的指導下，為施工區(qū)集體宿舍提供蚊帳、紗門

28、紗窗等防蚊設(shè)施。鼓勵從事夜晚野外作業(yè)人員和執(zhí)勤人員穿長袖衣褲，并使用驅(qū)避劑涂抹在皮膚暴露部位。盡量避免野外露宿，減少人蚊接觸。（四）綜合治理綜合治理在當?shù)卣念I(lǐng)導下，與當?shù)氐纳鐣?jīng)濟發(fā)展、城鄉(xiāng)建設(shè)、環(huán)境保護緊密結(jié)合，和有關(guān)部門因時因地制宜，共同開展間歇灌溉、孳生地改造、稻田養(yǎng)魚、微生物滅蚴等生態(tài)、生物滅蚊措施。四、健康教育措施（一）內(nèi)容應對不同目標人群，制定有針對性的健康教育核心信息。1. 居民和學生應了解瘧疾是通過蚊子傳播的一種傳染??；瘧疾的主要癥狀是反復發(fā)冷、發(fā)熱和出汗；使用蚊帳、不露宿可有效預防感染瘧疾。2. 出入境人員特別是從非洲、東南亞和太平洋島國等瘧疾高度流行區(qū)回國的人員，除了需

29、要了解上述信息外，還應做到回國后盡快到當?shù)蒯t(yī)院或疾病預防控制機構(gòu)進行瘧原蟲檢查；如出現(xiàn)發(fā)冷、發(fā)熱和出汗等癥狀，應該首先想到可能感染瘧疾，做到早診早治；要在醫(yī)生指導下全程服完抗瘧疾治療藥物。3. 病人及其家屬應了解早診早治、全程服藥、規(guī)范治療的重要意義，間日瘧患者還應當了解在第二年春季要接受休止期根治。（二）方法1對居民的健康教育在衛(wèi)生行政部門領(lǐng)導下，結(jié)合每年的“全國瘧疾日”宣傳活動，制作標語、傳單、宣傳畫或宣傳折頁、視聽材料，或采用當?shù)厝罕娤猜剺芬姷膫鹘y(tǒng)民間藝術(shù)形式，對居民開展瘧疾防治知識宣傳；也可協(xié)調(diào)相關(guān)部門，利用報紙、廣播、電視、互聯(lián)網(wǎng)、通訊等大眾傳播媒介開展健康教育。2. 對學生的健康教

30、育各級教育部門按照其職責負責組織在中小學校開展瘧疾健康教育活動。每年在夏季到來之前，在當?shù)丶膊☆A防控制機構(gòu)的指導和幫助下，利用中小學健康教育課或少先隊主題隊會開展一次宣傳教育，也可通過學校廣播站、黑板報、發(fā)放小折頁和宣傳單等形式宣傳防治瘧疾基本知識和核心信息。3. 對出入境人員的健康教育出入境檢驗檢疫部門可在口岸出入境現(xiàn)場或保健中心設(shè)立免費咨詢點和咨詢電話，設(shè)置宣傳欄擺放瘧疾防治宣傳材料，設(shè)置電子顯示屏和觸摸屏，以視頻、廣播、圖片、文字等形式，對出入境人員宣傳瘧疾防治核心信息。旅游和商務部門應要求各旅行社或勞務派出單位對赴非洲、東南亞和太平洋島國等瘧疾高度流行區(qū)旅游、務工等人員發(fā)放瘧疾防治宣傳

31、材料。4. 對病人及其家屬的健康教育流行區(qū)各級醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)應通過門診咨詢、健康教育處方、12320全國公共衛(wèi)生公益熱線等熱線電話和宣傳小折頁等形式，向病人及其家屬宣傳瘧疾防治知識。五、瘧疾診斷實驗室網(wǎng)絡建立和完善全國瘧疾診斷實驗室網(wǎng)絡和質(zhì)量管理體系，為消除瘧疾階段的瘧疾病例確認和病例溯源提供科學依據(jù)。各級瘧疾診斷實驗室的主要職能包括：（一）國家級實驗室 中國疾病預防控制中心在寄生蟲病預防控制所建立國家級實驗室，負責對省級實驗室開展培訓，提供技術(shù)支持和指導；定期對省級實驗室的鏡檢和基因檢測能力進行考核評估；對省級實驗室的檢測結(jié)果有爭議的瘧疾病例的標本進行平行檢測和確認；建立全國瘧疾病例信息數(shù)據(jù)庫

32、，實現(xiàn)相關(guān)信息的交流與共享；開展瘧原蟲診斷相關(guān)新技術(shù)及新方法的研究。（二）省級實驗室省級疾病預防控制機構(gòu)建立省級實驗室，對地市級和縣級實驗室開展培訓，提供技術(shù)支持和指導；對地市級和縣級實驗室的鏡檢能力進行考核評估；對地市級和縣級實驗室的檢測結(jié)果進行抽樣復核；有條件的省級實驗室通過評估可作為參比實驗室，對其它省級實驗室的檢測結(jié)果或感染來源有爭議的瘧疾病例的標本進行平行檢測，并將平行檢測結(jié)果上報全國瘧疾基因信息數(shù)據(jù)庫；開展瘧原蟲診斷相關(guān)新技術(shù)及新方法的研究。（三）地市級和縣級實驗室一、二、三類縣的縣級疾病預防控制機構(gòu)及所在地的地市級疾控機構(gòu)均建立實驗室，對轄區(qū)內(nèi)的醫(yī)療機構(gòu)和鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院開展培訓，提供

33、技術(shù)支持和指導；對一、二類縣的鄉(xiāng)鎮(zhèn)及以上醫(yī)院、三類縣縣級及以上醫(yī)療機構(gòu)實驗室的鏡檢能力進行考核評估；并對其檢測結(jié)果進行抽樣復核。六、重點地區(qū)的監(jiān)測與專項調(diào)查中國疾病預防控制中心根據(jù)全國瘧疾疫情形勢和消除瘧疾工作需求，在不同類型瘧疾流行區(qū)選擇68個縣，重點加強主動病例偵查，開展人群抗體水平、帶蟲率調(diào)查，媒介種群、密度、抗性和瘧原蟲抗性調(diào)查，以及消除瘧疾措施評估和研究。具體方案另行制訂。各?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）應根據(jù)當?shù)厍闆r，選擇部分重點地區(qū)，加強消除階段的瘧疾監(jiān)測工作。七、質(zhì)量控制（一）人員培訓按照分級培訓的原則，中國疾病預防控制中心每年組織對省級疾病預防控制機構(gòu)的瘧疾防治專業(yè)人員進行至少1次師資

34、培訓；省級疾病預防控制機構(gòu)每2年對地市級和縣級瘧疾防治專業(yè)人員輪訓1次；縣級疾病預防控制機構(gòu)結(jié)合常規(guī)例會，對鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員及其參與瘧疾防治工作的村醫(yī)每年至少培訓1次?？h級瘧疾防治專業(yè)人員3年內(nèi)接受培訓的比率不低于95%。各級疾病預防控制機構(gòu)要高度重視瘧疾專業(yè)技術(shù)培訓工作，將培訓工作納入每年的工作計劃，針對不同對象編制培訓教材，有針對性地開展培訓工作。鼓勵和提倡有條件的地區(qū)，通過組織開展瘧疾防治技術(shù)練兵和鏡檢技術(shù)競賽等多種形式，不斷改進培訓工作質(zhì)量，切實提高瘧疾防治專業(yè)人員的業(yè)務能力和技術(shù)水平。（二）鏡檢復核1. 縣級疾病預防控制機構(gòu)定期對開展血檢醫(yī)療機構(gòu)的血涂片鏡檢質(zhì)量進行抽查復核。要求每

35、年抽取所有陽性血涂片和不少于10%的陰性血涂片，進行厚、薄血膜制作、染色和鏡檢質(zhì)量復核。2. 地市級疾病預防控制機構(gòu)負責每年抽取每縣的所有陽性血涂片和不少于3%的陰性血涂片進行復核。3省級疾病預防控制機構(gòu)負責每年對每年抽取每縣的所有陽性血涂片和不少于1%的陰性血涂片進行復核。4中國疾病預防控制中心每年組織1次對各省（自治區(qū)、直轄市）血涂片鏡檢質(zhì)量的抽查復核。（三）檢查督導縣級疾病預防控制機構(gòu)對承擔消除瘧疾工作的鄉(xiāng)鎮(zhèn)每年至少開展1次工作質(zhì)量抽查；省級疾病預防控制機構(gòu)負責組織對各縣每年至少進行一次工作督導；中國疾病預防控制中心對每個瘧疾流行省每年至少進行1次工作督導。各級消除瘧疾工作相關(guān)數(shù)據(jù)資料的

36、抽查合格率不低于95%。（四）資料管理各級疾病預防控制機構(gòu)應當建立健全資料管理制度，確定專人承擔資料管理工作。消除瘧疾工作的各類資料收集完整、真實、記錄清晰、準確，按要求及時上報。各項工作完成后及時整理，按檔案管理要求立卷歸檔，妥善保管。電子文檔形式的資料信息應及時備份，確保數(shù)據(jù)安全。 附件 1的基因檢測確認行鏡檢復核，2.抗瘧藥使用原則和用藥方案2.媒介按蚊種群調(diào)查技術(shù)規(guī)范3.殺蟲劑室內(nèi)滯留噴灑技術(shù)規(guī)范4.殺蟲劑浸泡蚊帳技術(shù)規(guī)范附表 1. 瘧疾病例就診登記表2.瘧疾病例流行病學個案調(diào)查表3.瘧疾疑似病例、臨床診斷病例和不明原因發(fā)熱病人瘧原蟲血檢登記表4.瘧原蟲血片鏡檢復核登記表5.瘧原蟲血片

37、制片染色技術(shù)考核評分表6.瘧疾疫點基本情況調(diào)查記錄表7.疫點主動病例偵查記錄表8.疫點發(fā)熱病人檢測結(jié)果記錄表 9.疫點媒介按蚊種群調(diào)查記錄表10.疫點處置室內(nèi)滯留噴灑（IRS）記錄表 附件1抗瘧藥使用原則和用藥方案 根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法、中華人民共和國藥品管理法和瘧疾防治工作的實際需要，參照世界衛(wèi)生組織關(guān)于抗瘧藥使用的有關(guān)政策，制訂本方案。一 、抗瘧藥使用原則抗瘧藥的使用應遵循安全、有效、合理和規(guī)范的原則。根據(jù)流行地區(qū)的瘧原蟲蟲種及其對抗瘧藥物的敏感性和患者的臨床表現(xiàn)，合理選擇藥物，嚴格掌握劑量、療程和給藥途徑，以保證治療效果和延緩抗藥性的產(chǎn)生。（一）間日瘧治療藥物首選磷酸氯喹片（簡

38、稱氯喹）、磷酸伯氨喹片（簡稱伯氨喹）。治療無效時，可選用以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的復方或聯(lián)合用藥的口服劑型進行治療。（二）惡性瘧治療藥物以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的復方或聯(lián)合用藥（ACT），包括：青蒿琥酯片加阿莫地喹片、雙氫青蒿素哌喹片、復方磷酸萘酚喹片、復方青蒿素片等。（三）重癥瘧疾治療藥物1. 青蒿素類藥物注射劑，包括蒿甲醚和青蒿琥酯。2. 磷酸咯萘啶注射劑。二、用藥方案（一）間日瘧的治療氯喹加伯氨喹：氯喹口服總劑量1200mg。第1日600mg頓服，或分2次服，每次300mg；第2、3日各服1次，每次300mg。伯氨喹口服總劑量180mg。從服用氯喹的第1日起，同時服用伯氨喹，每日1次，每次22.

39、5mg，連服8日。此療法也可用于卵形瘧和三日瘧的治療。（二）惡性瘧的治療（選用以下一種方案）1. 青蒿琥酯片加阿莫地喹片：口服總劑量青蒿琥酯和阿莫地喹各12片（青蒿琥酯每片50mg，阿莫地喹每片150mg），每日頓服青蒿琥酯片和阿莫地喹片各4片，連服3日。2. 雙氫青蒿素哌喹片：口服總劑量8片（每片含雙氫青蒿素40mg，磷酸哌喹320mg），首劑2片，首劑后68小時、24小時、32小時各服2片。3. 復方磷酸萘酚喹片：口服總劑量8片（每片含萘酚喹50mg，青蒿素125mg），一次服用。4. 復方青蒿素片：口服總劑量4片（每片含青蒿素62.5mg，哌喹375mg），首劑2片，24小時后再服2片。

40、三、重癥瘧疾的治療（選用以下一種方案）。1蒿甲醚注射劑：肌注每日1次，每次80mg，連續(xù)7日，首劑加倍。若病情嚴重時，首劑給藥后46小時可再肌注80mg。2青蒿琥酯注射劑:靜脈注射每日1次，每次60mg，連續(xù)7日，首劑加倍。若病情嚴重時，首劑給藥后46小時，可再靜脈注射60mg。采用上述兩種注射療法治療，患者病情緩解并且能夠進食后，改用ACT口服劑型，再進行一個療程治療。3咯萘啶注射劑:肌注或靜脈滴注，總劑量均為480mg。每日1次，每次160mg，連續(xù)3日。需加大劑量時，總劑量不得超過640mg。 （四）孕婦瘧疾治療孕婦患間日瘧可采用氯喹治療。孕期3個月以內(nèi)的惡性瘧患者可選用磷酸哌喹，孕期3

41、個月以上的惡性瘧患者采用ACT治療。孕婦患重癥瘧疾應選用蒿甲醚或青蒿琥酯注射劑治療。（五）間日瘧休止期根治伯氨喹：口服總劑量180mg，每日1次，每次22.5mg，連服8日。（六）預防服藥（選用以下一種方案）。1磷酸哌喹片：每月1次，每次服600mg，睡前服。2氯喹：每710天服1次，每次服300mg。注：氯喹、磷酸哌喹、伯氨喹和咯萘啶的劑量均以基質(zhì)計。方案中劑量均為成人劑量，兒童劑量按體重或年齡遞減。地喹可引起粒細胞缺乏，萘酚喹可引起血尿, 服用時如出現(xiàn)副反應，應立即停藥。使用青蒿琥酯注射劑做靜脈注射時，需先將5%碳酸氫鈉注射液1ml注入青蒿琥酯粉劑中，反復振搖23分鐘，待溶解澄清后，再注入

42、5ml等滲葡萄糖或生理鹽水，混勻后緩慢靜脈推注（不宜滴注）。配制后的溶液如發(fā)生混濁，則不能使用。使用咯萘啶注射劑做靜脈滴注時，需將160mg咯萘啶藥液注入500ml等滲葡萄糖或生理鹽水中，靜脈滴注速度不超過60滴/分。磷酸哌喹有肝臟積蓄作用，采用磷酸哌喹片進行預防服藥時，連續(xù)服藥時間不宜超過4個月（需要時，應停藥23個月后再次進行預防服藥）。孕婦、1歲以下嬰兒、有溶血史者或其家屬中有溶血史者應禁用伯氨喹；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏地區(qū)的人群，應在醫(yī)務人員的監(jiān)護下服用伯氨喹。 附：兒童抗瘧藥使用劑量參考表 兒童抗瘧藥使用劑量參考表 一、間日瘧病例表1 氯喹加伯氨喹八日療法不同年齡組服

43、藥劑量年齡組（歲）占成人總劑量的比例 11/101/8131/61/4461/37121/213153/4161/1注：根據(jù)成人服藥劑量和不同年齡組的比例折算后給予相應劑量。15歲及以下兒童抗瘧疾治療劑量也可按公斤體重折算后給藥，氯喹口服總劑量按24mg/Kg計算，伯氨喹口服總劑量按3.6mg/Kg計算。二、惡性瘧病例（一）雙氫青蒿素哌喹片表2 雙氫青蒿素哌喹片不同年齡組服藥劑量（單位：片）年齡（歲）首劑68小時24小時48小時16222211151.51.51.51.57101111160.50.50.50.5 （二）青蒿琥酯片加阿莫地喹片表3 青蒿琥酯片加阿莫地喹片不同年齡組服藥劑量（單位

44、：片）年齡（歲）第1天第2天第3天14222613111150.50.50.5（三）復方磷酸萘酚喹片表4 磷酸萘酚喹片不同年齡組服藥劑量（單位：片）年齡（歲）劑量13.588.5-13.563.5-8.541-3.520.5-11（四）復方青蒿素片表5 復方青蒿素片不同年齡組服藥劑量（單位：片）年齡（歲）首劑劑量24小時162 2 11-151.5 1.57-101 1 4-60.750.752-30.50.5 附件2 媒介按蚊種群調(diào)查技術(shù)規(guī)范 一、調(diào)查方法在疫點病例周圍選取12個調(diào)查場所（豬圈或牛舍），每個場所布置1盞誘蚊燈，采用誘蚊燈通宵誘蚊法，進行12個通宵（日落后半小時至次日凌晨）的媒

45、介按蚊種群調(diào)查；或采用人誘半通宵法開展12晚上調(diào)查。二、標本鑒定（一）形態(tài)學鑒定調(diào)查結(jié)束后，將集蚊盒取出，用乙醚麻醉，放入標記的平皿中（標記采集時間、地點、人員等），去除非蚊蟲的標本，于含有變色硅膠干燥劑的干燥器內(nèi)干燥，通過顯微鏡進行形態(tài)學鑒定，對于形態(tài)相近、難以鑒別的按蚊標本（如中華按蚊、嗜人按蚊、八代按蚊等）可進一步應用分子生物學方法鑒定。（二）分子生物學鑒定1. 蚊蟲基因組DNA抽提（1）勻漿液（NaCl 0.467g，EDTA 2.233g，SDS 0.5g，Tris HCl 1.121g，蔗糖5.476g，加H2O至100ml）65預熱。（2）單個蚊蟲置于1.5 ml離心管中，加入1

46、00 l預熱的勻漿液,用塑料研磨棒研磨至勻漿狀。65孵育30 min。（3）加5M(25l)乙酸鉀至終濃度1M，混勻。4置30 min。（4）4，13200轉(zhuǎn)/分(rpm)冷凍離心10 min。取上清液，可抽取大約100 l-110 l上清液，注意不要抽到沉淀。（5） 加2-2.5倍體積100%冰乙醇(-20)沉淀核酸。4靜置30 min-3 h。（6） 4，13200 rpm冷凍離心10 min。棄上清液，加75%乙醇200 l-300 l(-4)。（7） 13200 rpm冷凍離心10 min，棄上清液，37恒溫箱烘干。（8） 加50l-100l雙蒸滅菌水(ddH2O)溶解， 0冰箱待用。

47、2. PCR分子鑒別（1）PCR鑒別引物引物序列見下表：PCR鑒別所用引物引物 序列（5?3?） PCR產(chǎn)物長度共用引物UP CCATGACGTACACATACTTG 中華按蚊種特異性SP GTTGTCCAGCCCGCTAACAT 425 bp嗜人按蚊種特異性AP GCTCCATCTACACACAGCGT 253 bp八代按蚊種特異性YP GCTTAACACCGCGTTTCTTCA 141 bp（2）PCR反應體系反應體系中含10 mmol/L Tris (pH 8.3)，50 mmol/L KCl，1.9 mmol/L MgCl2，0.1 mg/mL BSA，dNTPs各0.1 mmol/L

48、，DNA Taq聚合酶2 U，引物各0.1 mol/L，以及模板1.5 L。PCR反應條件為：94 2 min；94 30 s、45 30 s、72 30 s，共30個循環(huán)；72 8 min。（3）凝膠電泳采用0.5 TBE緩沖電泳液，取8 l PCR產(chǎn)物，混合6加樣緩沖液1 l，1%瓊脂糖凝膠(含0.5 g/ml溴化乙錠) 電泳，100V電壓20-35 min，紫外燈下觀察，記錄數(shù)據(jù)。擴增產(chǎn)物的凝膠電泳圖如下。 中華按蚊、嗜人按蚊和八代按蚊種PCR鑒別結(jié)果泳道1、2：中華按蚊，泳道3、4：嗜人按蚊，泳道5、6：八代按蚊，泳道7：DNA Marker三、注意事項（一）調(diào)查前，可在不同自然村進行

49、預觀察，根據(jù)結(jié)果選擇按蚊密度較高和種類較多的自然村進行調(diào)查。（二）如遇大風降雨等異常天氣，可順延12天開展媒介調(diào)查。（三）每次調(diào)查應將可疑或難以鑒定的按蚊標本有效保存。 附件3殺蟲劑室內(nèi)滯留噴灑技術(shù)規(guī)范 一、噴灑范圍在具備傳播條件的疫點，對病家、四鄰或整個疫點（主動病例偵查發(fā)現(xiàn)2例及以上病例或帶蟲者）的所有人房和畜舍。二、噴灑時間和頻次病例報告一周內(nèi)完成室內(nèi)滯留噴灑。根據(jù)殺蟲劑在不同墻面的持效時間，決定噴灑的間隔時間，通常1年12次。三、常用殺蟲劑擬除蟲菊酯類殺蟲劑。四、噴灑前準備（一）測定不同墻面吸水率將噴霧器內(nèi)裝入一定量的水，均勻地噴灑在預先劃好的一定面積內(nèi)的墻面，達到濕而不流的程度。將噴

50、霧器內(nèi)剩余水倒出計量，用原水量減去余水量，再除以噴灑面積，即得出該墻面單位面積的吸水率。一般瓷磚、玻璃表面的吸水率為2550 ml/m2，油漆、涂料表面的吸水率為5075 ml/m2，石灰面75100 ml/m2，水泥面100150 ml/m2。計算公式：吸水率（ml/m2）(原水量余水量)噴灑面積（二）計算殺蟲劑使用濃度計算公式：殺蟲劑使用濃度（%）=使用劑量（g/m2）墻面吸水率（ml/m2）100%例如：采用氯氰菊酯進行滯留噴灑，每m2使用劑量為0.03g，測得墻面的吸水率為100 ml/m2，則殺蟲劑使用濃度（%）= 0.03100100%= 0.03%。計算公式：所需殺蟲劑量（g）=

51、使用濃度（%）原藥濃度（%）配制的噴灑液量。例如：用氯氰菊酯進行噴灑，原藥濃度5%，殺蟲劑使用濃度0.03%，配制的噴灑液量為10 000 ml，則：所需殺蟲劑量= 0.03510 000=640（g或ml）。五、噴灑程序（一）在噴灑范圍內(nèi)，逐戶登記需噴灑房間，并測量噴灑面積。（二）將噴灑房間內(nèi)靠墻物品移開，清掃墻面。（三）依據(jù)不同墻面的吸水率，在較大容器內(nèi)配制不同類型墻面相應殺蟲劑濃度的噴灑液。（四）選用扇形噴頭的壓縮式噴霧器。 （五）不同墻壁在噴霧器中裝入相應墻壁殺蟲劑濃度的噴灑液，逐戶、逐房間噴灑，并做好記錄。（六）自上而下對墻壁均勻噴灑，墻面全部覆蓋且濕而不流。六、注意事項（一）噴灑時

52、室內(nèi)能夠移動的物品，特別是食物、衣被、炊具和玩具等應盡可能搬至室外，不能移動的物品應以紙張覆蓋，以免污染；豬、雞等家畜、禽要圈好，以防食用污染的食物或被殺蟲劑殺死的昆蟲而中毒。（二）櫥柜等表面，原則上應噴灑，但應征得戶主同意。（三）全部操作過程應避免對地面、水源等的污染。（四）噴灑液配置地點要遠離水塘、水井等水源，以免因操作不當污染地面后，經(jīng)雨水沖刷流入水源，造成人、畜、禽、魚等中毒。（五）所有配制的噴灑液及清洗器械的水均應噴灑到墻面上（包括室外），切勿傾入水源或地面。（六）噴灑時，噴灑人員應穿長袖上衣和長褲，戴手套、帽和口罩，避免藥液接觸皮膚；作業(yè)結(jié)束后應及時清洗手、臉部等。 附件4殺蟲劑浸泡蚊帳技術(shù)規(guī)范 一、浸泡范圍存在大劣按蚊、微小按蚊或嗜人按蚊等傳播能量較強傳瘧媒介的一類縣，且瘧疾發(fā)病率較高的自然村。二、浸帳時間與頻次一般在當?shù)丿懠矀鞑ゼ竟?jié)前實施，每年一