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1、微生物檢驗時的注意事項核心提示:培養(yǎng)基的滅菌及使用1.每次配置時,要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。2.培養(yǎng)基的滅菌及使用1.每次配置時,要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。2.培養(yǎng)基配置時,稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時間放置,更不可隔夜。4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證有效滅菌時間。5.滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過3天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。6.在使用時,要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴
2、鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時調(diào)低水域溫度(先化好的可從水域取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。7.做產(chǎn)品微生物檢測時,傾倒培養(yǎng)基溫度在45左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,不便于觀察結(jié)果。8.每瓶培養(yǎng)基均要做空白。9.盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,增大培養(yǎng)基的污染幾率,出現(xiàn)誤差結(jié)果。10.培養(yǎng)基剩余過少時,可先將其傾倒成空白用板。做樣環(huán)境的維持一、大環(huán)境(房間)1.做樣時,窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,或用酒精對房間進(jìn)行噴霧消毒,避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺內(nèi)部環(huán)境(最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無菌間進(jìn)行操作)。2.如果在原來
3、的原料微生物檢測室進(jìn)行做樣,要定期開啟紫外燈,對房間進(jìn)行殺菌。二、小環(huán)境(超凈臺)1.定期清潔初效過濾器,要及時更換。2.做樣前,將超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清潔,用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,并提前半小時將超凈臺紫外燈打開,對超凈臺內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。3.關(guān)紫外燈,開風(fēng)機(jī),調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,風(fēng)量不可過低。4.每次做樣后,要對超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,并用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。5.紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時更換。6.做樣同時,要做上相應(yīng)菌落檢測的環(huán)境空白。7.做樣區(qū)域的選擇:一般在距離超凈臺外沿的1/3-2/3區(qū)域進(jìn)行無菌操作;要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。工器具的潔凈度1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)
4、行滅菌。2.做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用,不可與其它操作器具混用,使用時,先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進(jìn)行滅菌。3.接種針(環(huán))采用灼燒方式進(jìn)行滅菌,但要注意做樣時要先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻。樣品的采集及檢測一、保證采樣器具的無菌性1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時間足夠(但不可時間過長,導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報廢)。2.取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒3.取樣勺、濃奶取樣提子:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。4.取樣袋:可現(xiàn)用酒精進(jìn)行擦拭消毒,再在超凈臺用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。5.電子稱表面用75%酒精
5、消毒。二、人員操作1.保證手部的清洗、消毒:取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。2.取樣要具有代表性(隨機(jī)樣、目的樣、綜合樣)且要標(biāo)示清楚。3.取樣完畢,不可在車間逗留,要及時將樣品放入超凈臺,對其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。4.在要求的做樣區(qū)域進(jìn)行操作。5.做樣前,要用75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,再開口。6.往鹽水瓶加樣品時,要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。7.樣品計量要準(zhǔn)確,稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確(1mL吸管不允許將管口敲掉),進(jìn)行100倍稀釋時,1mL吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品管壁流下去,同時要避免將管底部捅破。8.鹽水溫度以40左右為宜,不能過熱,將部分微生物燙死,也不能溫度太低,不能將奶粉溶解完全。9.進(jìn)行稀釋時,要搖勻,保證溶液的均一性。10.傾倒平皿時,要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養(yǎng)基要適量,不可以太少,在培養(yǎng)過程中干掉,微生物亦死亡,以15mL左右為宜。11.做大腸菌群樣時,要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好,放入超凈臺對外表面進(jìn)行紫外線滅菌。12.接二步時,要注意先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻,避免出現(xiàn)接不上菌落的情況發(fā)生,導(dǎo)致無法判斷、確認(rèn)。13.做樣完畢,及時放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行
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