臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)試題

1、1/ 8臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)試題填空題1.核酸的最大紫外吸收波長(zhǎng)在，蛋白 質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)在。2.雙鏈 DNA 中的堿基對(duì) 有，。3根據(jù)分子和結(jié)構(gòu)不同，RNA可以分 為，。4.核酸變性過程中 ,紫外光吸收達(dá)到最大值50%時(shí)溫度稱為 ,其主要與核酸的最終含量有關(guān) .5. DNA水解后主要產(chǎn)物是 ,。6.核酸（DNA和RNA）分子除含有，四種元素外， 還含有大量的元素。7. PCR技術(shù)是當(dāng)今分子生物學(xué)使用最多的 技術(shù)之一，它一般都有，三 個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。8.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以繼續(xù)水解得到和。9.通用遺傳密碼中代表終止密碼的三種密碼是UAA、和。2/ 810. PCR方法擴(kuò)增DN

2、A片段是，在反應(yīng)中除了用該DNA片段作為模板外，尚需加入、和。11.在DNA分子中還有大量的磷（P），P的含量大約為。二判斷題1.核酸變性時(shí) , 堿基對(duì)之間的氫鍵斷開 ,堆積力也受到破壞 ,共價(jià)鍵斷裂 .（）2.核酸雜交原理就是根據(jù)核酸分子間互補(bǔ).（）3 .在中性或堿性溶液中 ,核酸主要帶正電xx.（）4.核酸分子質(zhì)量很大 ,因此核酸溶液具有很大粘性 .（）5.分子雜交可以發(fā)生在任何只有互補(bǔ)核苷酸順序兩條單股核酸單鏈之間，如 DNA/DNA、DNA/RNA、RNA/RNA等.（）6.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以繼續(xù)水解得到核苷和磷酸（）7.在高分子溶液中一般球形分子比線形分子的具有較大

3、的粘度。（）8核酸的最大吸收波長(zhǎng)在280nm,而蛋白質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)在 260nm（）9酚一氯仿提取法是我們?cè)谔崛?DNA時(shí)所用的經(jīng)典方法，現(xiàn)在仍然被許多實(shí)驗(yàn)室所采用。（）10.組成RNA的四種堿基是腺嘌呤（A）、鳥嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、胸 3/ 8腺嘧啶（T）o（）11. PCR技術(shù)是以DNA或RNA為模板進(jìn)行核酸的體外擴(kuò)增技術(shù)。（）12. PCR技術(shù)是現(xiàn)在常用的一種擴(kuò)增技術(shù)，它的基本步驟的順序是退火、變 性、延伸。（）13.免疫印漬技術(shù)及 SouthernBlotting 是一種印漬技術(shù)和抗原抗體反應(yīng)結(jié)合的 技術(shù)（）14.在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)診斷實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)驗(yàn)操作人員必須經(jīng)過業(yè)務(wù)培訓(xùn)

4、并取得上崗證書（）15.無論是DNA還是RNA,在多核苷酸鏈內(nèi)既有酸性的磷酸基又有堿性的含氮雜環(huán)堿,因此核酸是兩性電解質(zhì)。（）16.在PCR實(shí)驗(yàn)中，退火是指在極端的PH和受熱條件下，核酸分子中的氫 鍵斷裂，DNA雙螺旋解開的一個(gè)過程。（）17.臨床基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置必須遵循一定的原則,而這些基本原則 制定的主要依據(jù)就是使建立的基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的準(zhǔn)確性能夠得到保 證,能忠實(shí)的反映被檢的臨床樣本的真實(shí)情況。（）二選擇題1.核酸在波長(zhǎng)為 260nm 光吸收強(qiáng)度大小排列正確的是（）A.GATCB.ATGCC.CGTAD.GCAT2 .鑒別RNA靶分子的雜交是（）ASouthernBlotB

5、NorthernBlotCWesternBlot D斑點(diǎn)雜交3.在做RNA檢測(cè)時(shí)，我們對(duì)全血抗凝最好用下列哪種抗凝 劑（）A.肝素 B.EDTA-K2C.EDTA-Na2草.酸卡鉀4/ 84一般DNA分子中的堿基數(shù)組成規(guī)律，下列哪一項(xiàng)是錯(cuò)的（）A.A=C,G=TB.A+G=C+T不同DNA中堿基組成不相同D.同一個(gè)不同組織細(xì)胞 中DNA堿基組成相同5.核酸分子儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息是通過（）來進(jìn)行的A.核苷的結(jié)構(gòu)B.磷酸二酯鍵C堿基順序D.核苷酸的結(jié)構(gòu)6 .分子生物學(xué)對(duì)醫(yī)學(xué)的發(fā)展已經(jīng)起到越來越大的作用，許多分子生物學(xué)的發(fā) 現(xiàn)對(duì)分子生物學(xué)的發(fā)展都起到里程碑的作用，基因就是由轉(zhuǎn)化功能的DNA所組成，最

6、早是由誰(shuí)發(fā)現(xiàn)的（） A.Friderick Griffith B.Alfred Hershey C.Martha Chase D.Oswald Avery7基因擴(kuò)增檢測(cè)方法也有檢測(cè)的靈敏度，一般適時(shí)熒光定量PCR的檢測(cè)下限是（）A.103拷貝 /mlB.104 拷貝/mlC.102 拷貝/mlD.105 拷貝/ml8. RNA和DNA徹底水解后的產(chǎn)物為（）A.核糖相同，部分堿基不同B.核糖不同，堿基相同C.核糖相同，堿基相同D.核糖不同，部分堿基不同9.下列哪種堿基僅存在于 RNA中而不存在于DNA中（）A.鳥嘌呤B尿嘧啶C胸腺嘧啶D腺嘌呤三討論題1.簡(jiǎn)述核酸探針及其應(yīng)用2.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的基

7、本原理及基本反應(yīng)步驟。3.什么叫人類基因組計(jì)劃，它對(duì)醫(yī)學(xué)上的研究具有哪些意義？4.簡(jiǎn)述核酸分子雜交的基本原理、類別和應(yīng)用。5.簡(jiǎn)述基因診斷檢測(cè)的臨床應(yīng)用6.核酸產(chǎn)物主要用哪些方法檢測(cè)，他們分別用在哪些情況下？7簡(jiǎn)述DNA芯片技術(shù)的應(yīng)用。分子生物學(xué)參考答案：5/ 8一填空題：1.260nm280nm2.A二TG二C3.tRNAmRNArRNAhnRNA4鏈溫度 G+C5磷酸脫氧核糖堿基6.CHONP7變性退火延伸8戊糖含氮堿基9.UAAUAGUGA1C耐熱 Taq酶引物 dNTP 11.9%r 10%二.判斷題：1. X 2. V3. X 4. V5. V6. V7. X 8. X 9. V10

8、. X 11. V12. X 13. X14. V15. V16. X 17. V三. 選擇題：1.B 2.B 3.C 4.A 5.C 6.D 7.A 8.D 9.B四. 討論題1.（1）一小段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素、和熒光染料標(biāo)記它的末端或者全鏈，我們就把這一段多聚核苷酸序列稱為探針。（2）可以用于檢測(cè)特異DNA或RNA序列片段，可以用于遺傳病的基因診斷，用于限制性片段 長(zhǎng)度多態(tài)性作疾病的相關(guān)分析，法醫(yī)學(xué)上的性別分析和性別鑒定。2.（1） PCR的基本原理是以需要擴(kuò)增的 DNA為模板，以一對(duì)分別與模板的5,和3,末端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在 DNA聚合酶的作用下，按照半保

9、留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的 DNA 合成，重復(fù)這一過程，即可 使目的 DNA 片段得到擴(kuò)增。(2) PCR的基本步驟包括：變性：將反應(yīng)系統(tǒng)加熱至95C，使模板 DNA全部變性變成單鏈DNA。退火：將溫度下降至適當(dāng)溫度，使引物與模板 DNA退火結(jié)合。延伸：將溫度升至72C, DNA聚合酶以dNTP底物催化DNA 的合成反應(yīng)。上述三個(gè)步驟稱為一個(gè)循環(huán)，這樣的循環(huán)重復(fù) 25-30 次，就可以得到大量的目的 DNA。3.(1) 1991 年，由美國(guó)眾院批準(zhǔn)的一個(gè) 15 年的人類基因組研究計(jì)劃，花費(fèi)金額約為 30 億美元，該項(xiàng)目很快得到各國(guó)科學(xué)家和各國(guó) 政府的所重視， 1994 6/ 8年，

10、我國(guó)也加入到其中 的相關(guān)研究項(xiàng)目，人類基因組分析的主要內(nèi) 容包括：遺傳圖分析，物理圖分析，轉(zhuǎn)錄圖 分析，基因組序列測(cè)定等。( 2)人類基因組 計(jì)劃的實(shí)施大大促進(jìn)了醫(yī)學(xué)的發(fā)展， DNA 的遺傳作圖和物理作圖對(duì)于認(rèn)識(shí)疾病相關(guān) 基因具有巨大的推動(dòng)作用。遺傳性疾病的基 因定位，尤其是對(duì)多基因位點(diǎn)將可以進(jìn)行全 基因組的定位掃描，使得確定致病基因的工 作更為容易。4.( 1)單鏈的核酸分子在合適的溫度和離子強(qiáng)度下，通過堿基互補(bǔ)形成雙鏈雜交體的一 類技術(shù)。（ 2）核酸分子雜交分為液相雜交， 固相雜交，原位雜交，基因芯片技術(shù)。（ 3） 主要應(yīng)用SOUTHERNBLOTTING于未 知 DNA 的檢測(cè)，NORTHERN BLOTTING 用于檢測(cè)未知RNA原位雜交用于組織和 細(xì)胞中的基因定位。5主要應(yīng)用于感染病原的檢測(cè)、遺傳病的 診斷、組織配型及腫瘤的早期診斷等。6.主要的檢測(cè)方法有：（ 1）凝膠電泳分析法： 主要用于PCR產(chǎn)物的檢測(cè)。（2）微孔板夾 心雜交法（PCR-ELIS）本法可避免電泳和 雜交的繁雜步驟，適于常規(guī)的 ELISA計(jì)數(shù)儀 檢測(cè)PCR反應(yīng)的產(chǎn)物。（3）熒光探針標(biāo)記 法：這種方法在PCR的反應(yīng)過程中對(duì)PCR 產(chǎn)物中熒光強(qiáng)度的檢測(cè)，從而對(duì) PC